專利名稱：用于治療和預(yù)防癌癥的稠合嘧啶酮類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)化合物、它們的制備方法、它們的藥物組合物和使用方法。此外，本發(fā)明涉及用于治療和預(yù)防癌癥的治療方法，以及這些化學(xué)化合物在制備用于治療和預(yù)防癌癥的藥物中的用途。
現(xiàn)在臨床上廣泛使用的抗癌藥物一個(gè)亞類(紫杉烷類、長春堿類)是涉及微管的，通過干擾有絲分裂紡錘體正常的組裝或拆卸來阻斷細(xì)胞分裂周期(參見Chabner，B.A.、Ryan，D.P.，Paz-Ares，1.，Garcia-Carbonero、R.，和Calabresi，P抗腫瘤劑(Antineoplastic agents)In Hardman，J.G.，Limbird，L.E.，和Gil man，A.G.，編輯Good man和Gil man′sThe Pharmacological Basis of Therapeutics，第10版，2001，TheMacGraw-Hill Companies，Inc)。Taxol(紫杉醇)，這類中最有效的藥物之一，是微管穩(wěn)定劑。它干擾微管的正常的生長和收縮，因此在有絲分裂中期阻斷細(xì)胞。有絲分裂的阻斷經(jīng)常隨后是滑移到下一個(gè)沒有正常分裂的細(xì)胞周期，最終導(dǎo)致這些異常細(xì)胞的凋亡(Blagosklonny，M.V.和Fojo，T.Molecular effects of paclitaxelmyths and reality(a criticalreview).Int J Cancer 1999，83151-156.)。
用紫杉醇治療的一些副作用是嗜中性白血球減少癥和外周神經(jīng)病變。已知紫杉醇在間期細(xì)胞中導(dǎo)致微管異常集束。此外，一些腫瘤類型用紫杉醇治療是難治愈的，并且其它腫瘤在治療期間變得不敏感。紫杉醇還是多-藥物耐受泵，P-糖蛋白的底物(參見Chabner等，2001)。
因此，對有效的抗有絲分裂劑存在需求，其比抗抗微管藥物副作用更少，其還是對抗紫杉烷抗藥腫瘤的有效藥劑。
驅(qū)動蛋白是分子動力蛋白的大家族，其使用腺苷5′-三磷酸(ATP)水解的能量以逐步的方式沿著微管移動。綜述可參見Sablin，E.P.Kinesins and microtubulestheir struetures and motor mechanisms.Curr Opin Cell Biol 2000，1235-41和Schief，W.R.和Howard，J.Conformational changes during kinesin motility.Curr Opin Cell Biol2001，1319-28。
該家族一些成員沿著微管轉(zhuǎn)運(yùn)分子載體至在分子中需要它們的位點(diǎn)。例如，一些驅(qū)動蛋白與囊泡結(jié)合，在軸突中沿著微管轉(zhuǎn)運(yùn)它們。幾種家族成員是有絲分裂的驅(qū)動蛋白，它們在微管的重組織中發(fā)揮作用，即建立雙極有絲分裂紡錘體。微管的負(fù)端在中心體或或紡錘體極產(chǎn)生，同時(shí)正端與每個(gè)染色體著絲粒的區(qū)域的著絲點(diǎn)結(jié)合。有絲分裂紡錘體在有絲分裂中期沿染色體排成一行，分別與它們的移動相配，在后期和末期(胞質(zhì)分裂)成為單個(gè)的子細(xì)胞。參見Alberts，B.，Bray，D.，Lewis，J.、Raff，M.、Roberts，K.，和Watson，J.D.，Molecular Biology ofthe Cell，第三版，第18章，The Mechanics of Cell Division，1994，Garland Publishing，Inc.New York。
HsEg5(homo sapiens Eg5)(登記號X85137；參見Blangy，A.，Lane H.A.，d′Heron，P.，Harper，M.，Kress，M.和Nigg，E.A.Phosphorylation byp34cdc2 regulates spindle association of human Eg5，a kinesin-relatedmotor essential for bipolar spindleformation in vivo.Cell 1995，83(7)1159-1169)或KSP(驅(qū)動蛋白紡錘體蛋白)是有絲分裂的驅(qū)動蛋白，已表明在許多器官中它的同族體是有絲分裂早期中心體分離和雙極有絲分裂紡錘體的組裝所必須的。綜述參見Kashina，A.S.、Rogers，G.C.，和Scholey，J.M.The bimC family of kinesinsessential bipolar mitoticmotors driving centrosome separation.Biochem Biophys Acta1997，1357257-271。Eg5形成一個(gè)四聚體傳動器，被認(rèn)為是同微管交聯(lián)的，并參與在它們的集束中(Walczak，C.E.，Vemos，1，Mitchison，T.J.，Karsenti，E.，和Heald，R.A model for the proposed roles of differentmicrotubule-based motor proteins in establishing spindle bipolarity.CurrBiol1998，8903-913)。幾種報(bào)導(dǎo)指出Eg5功能抑制導(dǎo)致中期阻斷，在中期細(xì)胞顯示monastrol紡錘體。最近被稱作monastrol的Eg5抑制劑在基于細(xì)胞的有絲分裂阻滯劑篩選中被分離出來(Mayer，T.U.，Kapoor，T.M.，Haggarty，S.J.，King，R.w.，Schreiber，S.L.，和Mitchison，T.J.Small molecule inhibitor of mitotic spindle bipolarity identified inaphenotype-based screen.Science 1999，286971-974)。
Monastrol處理顯示出對Eg5的專一性超過驅(qū)動蛋白重鏈，驅(qū)動蛋白重鏈?zhǔn)橇硪粋€(gè)密切相關(guān)的具有不同功能的傳動器(Mayer等，1999)。monastrol阻斷ADP(腺苷5′-二磷酸)從Eg5傳動器的釋放(Maliga，Z.，Kapoor，T.M.，和Mitchison，TJ.Evidence that monastrol is anallosteric inhibitor of the mitotic kinesin Eg5.Chem & Biol 2002，9989-996和DeBonis，S.，Simorre，J.-P.，Creve1，1，Lebeau，L，Skoufias，D.A.，Blangy，A.，Ebe1，C，Gans，P.，Cross、R.，Hackney，D.D.，Wade、R.H.，和Kozielski，F(xiàn).Interaction of the mitotic inhibitor monastrol withhuman kinesin Eg5.Biochemistry 2003，42338-349)，是驅(qū)動蛋白動力蛋白催化周期的重要步驟(綜述參見Sablin，2000；Schief和Howard，2001)。用monastrol處理顯示是可逆的，活化有絲分裂紡錘體的檢驗(yàn)點(diǎn)，停止細(xì)胞分裂周期直至所有的DNA處于適合分裂發(fā)生的狀態(tài)(Kapoor，T.M.，Mayer，T.U.，Coughlin，M.L.，和Mitchison，TJ.Probing spindle assembly mechanisms with monastrol，a small moleculeinhibitor of the mitotic kinesin，Eg5.J Cell Biol 2000，150(5)975-988)。最近的報(bào)導(dǎo)還顯示Eg5抑制劑導(dǎo)致被處理細(xì)胞的凋亡，可有效對抗幾種腫瘤細(xì)胞系和腫瘤模型(Mayer等，1999)。
盡管Eg5被認(rèn)為是所有細(xì)胞有絲分裂必需的，一個(gè)報(bào)導(dǎo)顯示其在腫瘤細(xì)胞中是過量表達(dá)的(國際專利申請WO 01/31335)，提示它們可能對其抑制是特別敏感的。Eg5不存在于間期細(xì)胞的微管中，其在有絲分裂早期通過磷酸化靶向微管(Blangy等，1995.還參見；Sawin，K.E.和Mitchison，TJ.Mutations in the kinesin-like protein Eg5 disruptinglocalization to the mitotic spindle.Proc Natl Acad Sci USA1995，92(10)4289-4293)，因此monastrol在間期細(xì)胞中對微管沒有可檢測的影響(Mayer等，1999)。另一個(gè)報(bào)導(dǎo)提示Eg5牽涉到小鼠神經(jīng)元的發(fā)育，但是在在出生后它很快從神經(jīng)元消失，因此Eg5抑制可能不導(dǎo)致與用紫杉醇和其它抗微管藥物治療相關(guān)的外周神經(jīng)病變(Ferhat，L.，Expression of the mitotic motor protein Eg5 in postmitotic neuronsimplications for neuronal development.J Neurosci 1998，18(19)7822-7835)。在本文中我們描述了一類專一性和有效的Eg5抑制劑的分離，預(yù)期用于腫瘤疾病的治療。
某些嘧啶酮類最近被描述作為KSP的抑制劑(WO 03/094839、WO03/050122、WO 03/050064、WO 03/049679、WO 03/049527、WO04/078758、WO 04/106492、WO 04/111058和WO 03/099211)。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)擁有Eg5抑制劑活性的新化學(xué)化合物，因此由于它們的抗細(xì)胞增生(例如抗癌)活性是有用的，并因此可用于治療人或動物身體的方法中。
因此本發(fā)明提供式(I)的化合物 其中R1為氟；m為0-5；R2為氫或甲基；R3為含有碳連接-NR4的雜環(huán)或R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基；其中R3可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代；X為-C(O)-或-CH2-；環(huán)A為碳環(huán)或雜環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；并且其中如果所述的雜環(huán)含有另外的NH，該氮可以被R9任選取代；環(huán)B與式(I)所示的嘧啶酮環(huán)稠合，為5或6元稠合的碳環(huán)或5或6元稠合的雜環(huán)；其中環(huán)B可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R10任選取代；其中如果所述的5或6元稠合的雜環(huán)含有另外的NH，該氮可以被R11任選取代；R4選自氫、C1-6烷基、C1-6烷?；?、C1-6烷基磺?；?、C1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、芐基、芐氧羰基、苯甲?；捅交酋；?；R5和R6獨(dú)立為氫或C1-6烷基；或R5和R6與它們所連的氮一起形成含氮雜環(huán)；其中所述的C1-6烷基或所述的含氮雜環(huán)可以獨(dú)立在碳上被一個(gè)或多個(gè)R12任選取代；以及其中如果所述的含氮雜環(huán)含有另外的NH，該氮可以被R13任選取代；R8、R10和R12獨(dú)立選自鹵素、硝基、氰基、羥基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；?、巰基、氨基磺?；?、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷?；?、C1-6烷?；趸?、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷酰基氨基、N-(C1-6烷基)氨基甲?；?、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲?；?、其中為0至2的C1-6烷基S(O)a、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨基磺?；，N-(C1-6烷基)2氨基磺?；?、C1-6烷基磺?；被?；其中R8、R10和R12可以獨(dú)立被R14任選取代；R9、R11和R13獨(dú)立選自C1-6烷基、C1-6烷?；?、C1-6烷基磺?；?、C1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-6烷基)氨基甲?；，N-(C1-6烷基)氨基甲?；?、芐基、芐氧羰基、苯甲?；捅交酋；?；R7和R14獨(dú)立選自鹵素、硝基、氰基、羥基、三氟甲氧基、三氟甲基、氨基、羧基、氨基甲?；€基、氨基磺?；?、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、乙?；⒁阴Ｑ趸?、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、N-甲基-N-乙基氨基、乙酰基氨基、N-甲基氨基甲?；-乙基氨基甲?；，N-二甲基氨基甲酰基、N，N-二乙基氨基甲?；?、N-甲基-N-乙基氨基甲?；?、甲硫基、乙硫基、甲基亞磺?；⒁一鶃喕酋；⒓谆酋；?、乙基磺?；?、甲氧基羰基、乙氧基羰基、N-甲基氨基磺?；?、N-乙基氨基磺?；?、N，N-二甲基氨基磺酰基、N，N-二乙基氨基磺?；騈-甲基-N-乙基氨基磺?；?；或其可藥用鹽。
在本說明書中，術(shù)語“烷基”包括直鏈和支鏈烷基兩者。例如，“C1-6烷基”包括C1-4烷基、C1-3烷基、甲基、乙基、丙基、異丙基和叔丁基。但是提及單個(gè)的烷基例如“丙基”僅僅特指直鏈的情況，提及單個(gè)的支鏈烷基例如“異丙基” 僅僅特指支鏈情況。類似的慣例應(yīng)用于其它基團(tuán)，例如“苯基C1-6烷基”包括苯基C1-4烷基、芐基、1-苯基乙基和2-苯基乙基。術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。
其中任選的取代基選自“一個(gè)或多個(gè)”基團(tuán)，應(yīng)當(dāng)被理解為該定義包括選自指定組中之一的所有取代基，或者為選自一個(gè)或多個(gè)組中的取代基。
“碳連接的含-NR4-雜環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有3-12個(gè)原子的單或雙環(huán)，其中至少一個(gè)原子選自被R4取代的氮，其中其它原子選自碳和任選1-3個(gè)另外選自氮、硫或氧原子的雜原子，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換，環(huán)氮原子或環(huán)硫原子可以任選被氧化形成N-和/或S-氧化物?！疤歼B接的含-NR4-雜環(huán)”的合適的實(shí)例包括哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、氮丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、吲哚基、吡唑啉基和咪唑基。
與式(I)嘧啶酮環(huán)稠合的“5或6元稠合的碳環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有5或6個(gè)碳原子的單環(huán)，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換。與式(I)嘧啶酮環(huán)稠合的“5或6元稠合的碳環(huán)”的實(shí)例為6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮、4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮。吡咯并[1，2-a]嘧啶-4(6H)-酮和7，8-二氫吡咯并[1，2-a]嘧啶-4(6H)-酮。為避免疑惑，應(yīng)當(dāng)理解為一旦與式(I)嘧啶酮環(huán)稠合，“5或6元稠合的碳環(huán)”將含有嘧啶酮環(huán)的氮。
與式(I)嘧啶酮環(huán)稠合的“5或6元稠合的雜環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有5或6個(gè)原子的單環(huán)，其中至少一個(gè)原子選自氮、硫或氧，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換，環(huán)氮原子或環(huán)硫原子可以任選被氧化形成N-和/或S-氧化物。與式(I)嘧啶酮環(huán)稠合的“5或6元稠合的雜環(huán)”的實(shí)例為2，3-二氫-5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶、3，4-二氫-6-氧代-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪和5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶。
“碳環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有4-12個(gè)碳原子的單或雙環(huán)，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換。特別地“碳環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有5或6個(gè)原子的單環(huán)或含有9或10個(gè)原子的雙環(huán)，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換。術(shù)語“碳環(huán)”的實(shí)例和合適的值為環(huán)丙基、環(huán)己基、苯基和萘基。
“雜環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有4-12個(gè)原子的單或雙環(huán)，其中至少一個(gè)原子選自氮、硫或氧，除非另外指定，否則其可以被碳或氮連接，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換，環(huán)氮原子或環(huán)硫原子可以任選被氧化形成N-和/或S-氧化物。特別地“雜環(huán)”為飽和的、部分飽和的或不飽和的，含有5或6個(gè)原子的單環(huán)或含有9或10個(gè)原子的雙環(huán)，其中至少一個(gè)原子選自氮、硫或氧，除非另外指定，否則其可以被碳或氮連接，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換，環(huán)硫原子可以任選被氧化形成S-氧化物。術(shù)語“雜環(huán)”的實(shí)例和合適的值為嗎啉代、哌啶基、吡啶基、吡喃基、吡咯基、異噻唑基、吲哚基、喹啉基、噻吩基、1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯-2-基、噻二唑基、哌嗪基、噻唑烷基、吡咯烷基、硫代嗎啉代、吡咯啉基、高哌嗪基、3，5-二氧雜哌啶基、四氫吡喃基、咪唑基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、異唑基、4-吡啶酮、1-異喹諾酮、2-吡咯烷酮和4-噻唑烷酮。
其中“R5和R6與它們所連的氮一起形成含氮雜環(huán)”，所述的“含氮雜環(huán)”為飽和的、部分飽和的或完全不飽和的，含有4-12個(gè)原子的單或雙環(huán)，其中一個(gè)原子為R5和R6連接的氮原子，其它原子全部為碳原子或它們是碳原子和1-3個(gè)選自氮、硫或氧的雜原子，其中-CH2-基團(tuán)可以任選被-C(O)-替換，環(huán)氮原子或環(huán)硫原子可以任選被氧化形成N-和/或S-氧化物。應(yīng)當(dāng)理解其中“R5和R6與它們所連的氮一起形成含氮雜環(huán)”，這個(gè)氮原子不是四價(jià)的，即形成中性化合物。術(shù)語“含氮雜環(huán)”的實(shí)例和合適的值為氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉代、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、硫代嗎啉代、吡咯啉基、高哌嗪基、吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑烷基和三唑基。
“C1-6烷?；趸钡膶?shí)例為乙酰氧基?！癈1-6烷氧基羰基”的實(shí)例包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丁氧羰基和叔丁氧基羰基?！癈1-6烷氧基”的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基和丙氧基。“C1-6烷酰基氨基”的實(shí)例包括甲酰氨基、乙酰氨基和丙酰氨基。“其中a為0至2的C1-6烷基S(O)a”的實(shí)例包括甲硫基、乙硫基、甲基亞磺?；?、乙基亞磺?；⒓谆酋；鸵一酋；！癈1-6烷?；钡膶?shí)例包括丙?；鸵阴；??！癗-(C1-6烷基)氨基”的實(shí)例包括甲基氨基和乙基氨基?！癗，N-(C1-6烷基)2氨基”的實(shí)例包括二-N-甲基氨基、二-(N-乙基)氨基和N-乙基-N-甲基氨基?！癈2-6烯基”的實(shí)例為乙烯基、烯丙基和1-丙烯基?！癈2-6炔基”的實(shí)例為乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基?！癗-(C1-6烷基)氨基磺酰基”的實(shí)例為N-(甲基)氨基磺?；鵑-(乙基)氨基磺?；??！癗-(C1-6烷基)2氨基磺酰基”的實(shí)例為N，N-(二甲基)氨基磺酰基和N-(甲基)-N-(乙基)氨基磺?；??！癗-(C1-6烷基)氨基甲酰基”的實(shí)例為甲基氨基羰基和乙基氨基羰基?！癗，N-(C1-6烷基)2氨基甲?；钡膶?shí)例是二甲基氨基羰基和甲基乙基氨基羰基?！癈1-6烷基磺酰基”的實(shí)例包括甲磺?；?、乙基磺酰基和叔丁基磺酰基。“C1-6烷基磺?；被钡膶?shí)例包括甲磺?；被?、乙基磺?；被褪宥』酋；?。C1-3亞烷基”的實(shí)例是亞甲基、亞乙基和亞丙基。
本文中所用的“可藥用鹽”意指公開化合物的衍生物，其中母體化合物通過制備成其酸或堿鹽而被修飾?？伤幱名}的實(shí)例包括但不限于堿性基團(tuán)例如胺的無機(jī)或有機(jī)的酸鹽；酸性基團(tuán)例如羧酸的堿或有機(jī)的鹽等?？伤幱名}包括母體化合物例如從無毒的無機(jī)或有機(jī)酸形成的常規(guī)無毒鹽或季銨鹽。例如，這樣的常規(guī)無毒鹽包括那些來自無機(jī)酸的，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；和從有機(jī)酸制備的鹽，有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、丁二酸、羥基乙酸、硬脂酸、乳酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、棕櫚酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙磺酸等。
酸加成鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、膽堿、檸檬酸鹽、環(huán)己基氨基磺酸鹽、二亞乙基二胺、乙烷磺酸鹽、富馬酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酸鹽、半硫酸鹽、2-羥基乙基磺酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基馬來酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、葡甲胺、2-萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、過硫酸鹽、苯基乙酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、奎尼酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、氨基磺酸鹽、對氨基苯磺酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽(對甲苯磺酸鹽)、三氟乙酸鹽和正十一烷酸鹽。堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽例如鈉，鋰和鉀鹽，堿土金屬鹽例如鋁、鈣和鎂鹽，與有機(jī)堿例如二環(huán)己基胺、N-甲基-D-葡糖胺的鹽，與氨基酸例如精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸等的鹽等。而且，含有堿性氮的基團(tuán)可以被這樣的試劑季銨化低級烷基鹵代物例如甲基、乙基、丙基、和丁基鹵代物；二烷基硫酸酯例如二甲基、二乙基、二丁基；二戊基硫酸酯；長鏈鹵代物例如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基鹵代物；芳烷基鹵代物例如芐基溴化物和其它。無毒的生理學(xué)可接受的鹽是優(yōu)選的，盡管其它鹽也是有用的，例如在分離或純化產(chǎn)物中。本發(fā)明可藥用鹽還包括與下列酸之一制備的鹽苯磺酸、富馬酸、甲烷磺酸、萘-1，5-二磺酸、萘-2-磺酸或L-酒石酸。
因此在一方面本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物，特別是本文實(shí)施例描述的，作為可藥用鹽特別是苯磺酸、富馬酸、甲烷磺酸、萘-1，5-二磺酸、萘-2-磺酸或L-酒石酸的鹽。
所述鹽可以通過常規(guī)的方法形成，例如通過將產(chǎn)物的游離堿形式與一個(gè)或多個(gè)當(dāng)量適當(dāng)?shù)乃嵩邴}不溶的溶劑或介質(zhì)中，或在溶劑例如水中反應(yīng)，溶劑或介質(zhì)在真空下或通過冷凍干燥被除去，或者通過在合適的離子交換樹脂上將現(xiàn)存鹽中的陰離子與另一種陰離子交換。或者，這樣的鹽可以通過將這些化合物的游離酸或堿形式與化學(xué)計(jì)量的適當(dāng)?shù)膲A或酸在水或有機(jī)溶劑中，或兩者的混合物中反應(yīng)制備；一般說來，非水溶液介質(zhì)例如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈是優(yōu)選的。合適鹽的列表在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第1 7版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1985，1418頁中查找，其內(nèi)容在此引入作為參考。
本發(fā)明的各種化合物可以存在特定的幾何或立體異構(gòu)體形式。本發(fā)明考慮所有這樣的化合物，包括順式-和反式異構(gòu)體，R-和S-對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體，(D)-異構(gòu)體，(L)-異構(gòu)體，及其外消旋混合物，以及其其它混合物，均覆蓋在本發(fā)明范圍之內(nèi)。另外的不對稱碳原子可以存在在取代基中，例如烷基。所有這樣的異構(gòu)體及其混合物目的在于包括在本發(fā)明中。本文描述的化合物可以含有不對稱中心。含有不對稱取代原子的本發(fā)明化合物可以被以光學(xué)活性或外消旋的形式被分離。在本領(lǐng)域眾所周知如何制備光學(xué)活性形式，例如通過拆分外消旋形式，或從光學(xué)活性原料合成。當(dāng)需要時(shí)，可以通過本領(lǐng)域已知的方法實(shí)現(xiàn)外消旋物質(zhì)的分離。烯烴、C＝N雙鍵等的許多幾何異構(gòu)體也存在于本文描述的化合物中，所有這樣穩(wěn)定的異構(gòu)體都是本發(fā)明預(yù)期的。描述了本發(fā)明化合物的順式和反式幾何異構(gòu)體，其可以以異構(gòu)體混合物或分離異構(gòu)體形式被分離。結(jié)構(gòu)的手性、非對映異構(gòu)體、外消旋形式和所有的幾何異構(gòu)體形式都是目的所在，除非具體的立體化學(xué)或異構(gòu)體形式被具體指定。
可變基團(tuán)的特定值如下。在與上文或下文中定義的任何定義、權(quán)利要求或?qū)嵤┓桨高m合之處可以使用這樣的值。
m為0。
R2為氫。
R2為甲基。
R3為含有碳連接-NR4的雜環(huán)；其中R3可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代。
R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基；其中R3可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代。
R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基。
R3為被-NR5R6取代的甲基或乙基；其中R5和R6獨(dú)立為氫或甲基。
R3為被-NR5R6取代的甲基或乙基；其中R5和R6兩者都為氫或R5和R6兩者都為甲基。
R5和R6獨(dú)立為氫或C1-6烷基。
R5和R6獨(dú)立為氫或甲基。
R5和R6兩者都為氫或R5和R6兩者都為甲基。
X為-C(O)-。
X為-CH2-。
環(huán)A為碳環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代。
環(huán)A為苯基或萘基；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代。
環(huán)A為雜環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；并且其中如果所述的雜環(huán)含有另外的NH，則氮可以被R9任選取代。
環(huán)A為碳環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；其中R8為鹵素、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
環(huán)A為苯基、萘基或苯并噻吩基；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；其中R8為氟、氯、溴、甲基或甲氧基。
環(huán)A為苯基或萘基；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；其中R8為氟、氯、甲基或甲氧基。
環(huán)A為4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、萘-2-基、4-氯苯基、2，3-二氯苯基或4-溴苯基。
環(huán)A為4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、萘-2-基或4-氯苯基。
環(huán)B為5或6元稠合的碳環(huán)；其中環(huán)B可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R10任選取代。
環(huán)B為5或6元稠合的雜環(huán)；其中環(huán)B可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R10任選取代；并且其中如果所述的5或6元稠合雜環(huán)含有另外的NH，則氮可以被R11任選取代。
環(huán)B為5或6元稠合的碳環(huán)或5或6元稠合的雜環(huán)。
環(huán)B和稠合的嘧啶酮形成2，3-二氫-5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶、3，4-二氫-6-氧代-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪、5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶或4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基。
因此在本發(fā)明另一方面，提供如上所述的式(I)化合物，其中m為0；R2為氫；R2為甲基；R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基；X為-C(O)-或-CH2-；環(huán)A為碳環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；環(huán)B為5或6元稠合的碳環(huán)或5或6元稠合的雜環(huán)；R5和R6獨(dú)立為氫或C1-6烷基；R8為鹵素、C1-6烷基或C1-6烷氧基；或其可藥用鹽。
因此，在本發(fā)明另一方面，提供如上所述的式(I)化合物，其中m為0；R2為氫；R3為被-NR5R6取代的甲基或乙基；X為-C(O)-或-CH2-；環(huán)A為4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、萘-2-基或4-氯苯基；環(huán)B和其稠合的嘧啶酮形成2，3-二氫-5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶、3，4-二氫-6-氧代-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪、5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶或4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基；R5和R6獨(dú)立為氫或甲基；或其可藥用鹽。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明優(yōu)選的化合物為實(shí)施例的任何一個(gè)或其可藥用鹽。
本發(fā)明另一個(gè)方面提供制備式(I)化合物或其可藥用鹽的方法，其中方法(除非另外指定，否則其中可變基團(tuán)如式(I)所定義的)包含方法a)當(dāng)X為-C(O)-時(shí)；將式(II)的喹唑啉酮 與式(III)的酸或其活化的酸衍生物反應(yīng)； 方法b)，其中X為-CH2-；將式(II)的化合物與式(V)化合物反應(yīng)，其中L為可替換的基團(tuán)；
方法c)，對于其中R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基和在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代的式(I)化合物；將式(VI)的化合物 其中Ra為在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代的C1-3亞烷基；并且其中L為可替換的基團(tuán)；與式(VII)化合物反應(yīng)HNR5R6(VII)方法d)將式(VIII)的胺
與式(IX)的化合物反應(yīng) 其中L為可替換的基團(tuán)；此后如果需要i)轉(zhuǎn)化式(I)化合物為另一個(gè)式(I)化合物；ii)除去任何保護(hù)基；iii)形成可藥用鹽。
L為可替換的基團(tuán)，L合適的值為例如鹵素，例如氯或溴。
上述反應(yīng)的具體反應(yīng)條件如下。
方法a)在合適的偶合試劑存在下可以將式(II)的胺和式(III)的酸偶合在一起?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)肽偶合試劑作為合適的偶合試劑，或例如羰基二咪唑和二環(huán)己基碳二亞胺，任選在催化劑例如二甲基氨基吡啶或4-吡咯烷并吡啶存在下，任選在堿例如三乙胺、吡啶或2，6-二-烷基-吡啶例如2，6-二甲基吡啶或2，6-二-叔丁基吡啶的存在下。合適的溶劑包括二甲基乙酰胺、二氯甲烷、苯、四氫呋喃和二甲基甲酰胺。偶合反應(yīng)可以方便地在-40至40℃溫度范圍完成。
合適的活化酸衍生物包括酰鹵，例如酰氯，和活性酯例如五氟苯基酯。這些類型化合物與胺的反應(yīng)在本領(lǐng)域是眾所周知的，例如它們可以在堿例如那些如上描述的堿存在下，和在合適的溶劑例如那些如上描述的溶劑中反應(yīng)。反應(yīng)可以方便地在-40至40℃溫度范圍完成。
式(II)的胺可以根據(jù)方案1制備
方案1式(IIa)、(IIb)和(III)的化合物為可商購獲得的化合物，或它們在文獻(xiàn)中是已知的，或它們通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
方法b)式(II)和(V)的化合物可以在適當(dāng)?shù)娜軇┲信c堿例如碳酸鉀反應(yīng)。例如，式(II)和(V)的化合物可以在二甲基甲酰胺或乙腈作為溶劑中和碳酸鉀一起加熱得到式(I)的化合物。
式(V)的化合物是可商購獲得的，或它們在文獻(xiàn)中是已知的，或它們通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
方法c)式(VI)和(VII)的化合物可以在適當(dāng)?shù)娜軇┲性趬A的存在下一起反應(yīng)。例如，式(VI)和(VII)的化合物可以在碳酸鉀存在下在二甲基甲酰胺中在升高的溫度下反應(yīng)。
式(VI)的胺可以根據(jù)方案2制備 方案2
式(VII)的化合物是可商購獲得的化合物，或它們在文獻(xiàn)中是已知的，或它們通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
方法d)式(VIII)和(IX)的化合物可以在適當(dāng)?shù)娜軇┲信c堿例如叔丁醇鋰反應(yīng)。例如，式(II)和(V)的化合物可以在作為溶劑的四氫呋喃中與叔丁醇鋰在-40℃反應(yīng)得到式(I)的化合物。
式(VIII)的酰胺可以根據(jù)方案3制備 方案3式(VIIIa)和(IX)的化合物是可商購獲得的化合物，或它們在文獻(xiàn)中是已知的，或它們通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
應(yīng)當(dāng)理解在本發(fā)明化合物中各種環(huán)取代基的中的某些可以通過標(biāo)準(zhǔn)芳香取代反應(yīng)被引入，或在上面提及的方法之前或之后立刻通過常規(guī)的官能團(tuán)修飾產(chǎn)生，并且這樣的修飾包括在本發(fā)明方法中。這樣的反應(yīng)和修飾包括例如通過芳香取代反應(yīng)、取代基的還原、取代基的烷基化和取代基的氧化引入取代基。對于這樣方法的試劑和反應(yīng)條件在化學(xué)領(lǐng)域中是眾所周知的。
還應(yīng)當(dāng)理解在本文提及的一些反應(yīng)中，可能必需/希望保護(hù)在化合物中的任何敏感的基團(tuán)。在其中保護(hù)是必需或希望的情況下，合適的保護(hù)方法對于本領(lǐng)域那些技術(shù)人員是已知的。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作可以使用常規(guī)的保護(hù)基(實(shí)例參見T.W.Green，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley and Sons，1991)。因此，如果反應(yīng)物包括基團(tuán)例如氨基、羧基或羥基，在一些本文提及的反應(yīng)中其可以為希望保護(hù)的基團(tuán)。
對于氨基或烷基氨基合適的保護(hù)基為例如?；?，例如烷?；缫阴；?，烷氧基羰基例如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基，芳基甲氧基羰基例如芐氧羰基，或芳?；绫郊柞；?。對上述保護(hù)基的脫保護(hù)條件必須隨著保護(hù)基的選擇而變化。因此，例如?；缤轷；蛲檠趸驶蚍减；梢岳缤ㄟ^用合適的堿例如堿金屬氫氧化物例如氫氧化鋰或氫氧化鈉水解除去?；蛘啧；缡宥⊙趸驶梢岳缤ㄟ^用合適的酸例如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸處理被除去，芳基甲氧基羰基例如芐氧羰基可以例如通過在催化劑例如披鈀碳上氫化除去，或用路易斯酸例如用三(三氟乙酸)硼處理除去。對于伯氨基合適可選的保護(hù)基例如為鄰苯二甲?；?，其可以通過用烷基胺例如二甲基氨基丙基胺或肼處理除去。
對于羥基合適的保護(hù)基例如為?；?，例如烷?；缫阴；减；绫郊柞；?，或芳基甲基如芐基。上述保護(hù)基的脫保護(hù)條件必須隨著保護(hù)基的選擇而變化。因此，例如?；?，如烷酰基或芳?；梢岳缤ㄟ^用合適的堿例如堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰或氫氧化鈉水解除去?；蛘叻蓟谆缙S基可以例如通過在催化劑如披鈀碳上氫化除去。
對于羧基合適的保護(hù)基例如為酯化基團(tuán)，如甲基或乙基，可以例如通過用堿例如氫氧化鈉水解除去，或例如叔丁基可以例如通過用酸如有機(jī)酸如三氟乙酸處理除去，或例如芐基可以例如通過在催化劑如披鈀碳上氫化除去。
使用化學(xué)領(lǐng)域眾所周知的常規(guī)技術(shù)，保護(hù)基可以在合成的任何方便階段除去。
測定法孔雀綠測定法使用孔雀綠測定法測量Eg5傳動器的酶活性和抑制劑的效果，其測定從ATP中釋放的磷酸鹽，以前曾用于驅(qū)動蛋白傳動器活性的測定(Hackney DD，和Jiang W，Assays for kinesin microtubule-stimulatedATPase activity；Methods in Molecular Biology 164卷65-71(2001))。酶為重組HsEg5傳動器結(jié)構(gòu)功能域(氨基酸1-369-8His)和以最終濃度6nM加入到100μl反應(yīng)液中。緩沖液包括25mM PIPES(哌嗪-1，4-雙(2-乙烷-磺酸)/KOH，pH 6.8，2mM MgCl2，1mM EGTA(乙二醇-雙(2-氨基乙基醚)-N，N，N′N′-四乙酸)，1mM DTT(dithiotheitol)，0.01％Triton X-100和5μM紫杉醇?？兹妇G/鉬酸銨試劑制備如下對于800ml最終體積，在聚丙烯瓶中將0.27g孔雀綠(J.T.Baker)溶解在600ml H2O中。將8.4g鉬酸銨(Sigma)溶解在200ml 4N HCl中。將溶液混合20min，通過0.02μm過濾器直接過濾到聚丙烯容器中。
將5μl在12％DMSO中稀釋的化合物加入到96孔板的孔中。向每孔中加入80μl在如上的緩沖液中稀釋的酶溶液，與化合物一起培養(yǎng)20min。在這步預(yù)先培養(yǎng)后，接著將在15μl緩沖液中的含有2mM ATP(腺苷5′-三磷酸)(最終濃度300μM)和6.053μM聚合的微管蛋白(最終濃度908nM)的底物溶液加入到每個(gè)孔開始反應(yīng)。將反應(yīng)物混合，在室溫下再培養(yǎng)20min。然后通過加入150μl孔雀綠/鉬酸銨試劑淬滅反應(yīng)，使用Spectramax Plus板讀數(shù)器(Molecular Devices)準(zhǔn)確地在淬滅5min后在650納米讀取吸光度。將數(shù)據(jù)作圖，使用ExCel Fit(Microsoft)計(jì)算IC50。
本發(fā)明化合物在上述測定中記錄的IC50為1nM-9μM范圍。具體得到下列結(jié)果。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其中包含與可藥用的稀釋劑或載體混合的上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明化合物可以通過口服、腸胃外、口腔、陰道、直腸、吸入、吹入、舌下、肌肉內(nèi)、皮下、局部、鼻內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸腔內(nèi)、靜脈內(nèi)、硬腦膜外、鞘內(nèi)、腦室內(nèi)和向關(guān)節(jié)注射被給藥。
劑量將取決于給藥途徑、疾病的嚴(yán)重性、患者的年齡和體重以及臨床主治醫(yī)師正?？紤]的其它因素，確定最適合特定患者的個(gè)體方案和劑量水平。
用于感染治療的本發(fā)明化合物有效量為足以使溫血動物特別是人的感染癥狀減輕的量，以減緩感染的進(jìn)展或減小患者有惡化危險(xiǎn)的感染癥狀。
由本發(fā)明化合物、惰性的可藥用載體制備的藥物組合物可以為固體或液體。固體形式的制劑包括散劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊、扁囊劑和栓劑。
固體載體可以為一種或多種物質(zhì)，其還可以作為稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑或片劑崩解劑；其還可以為包囊材料。
在散劑中，載體為精細(xì)分散的固體，其與精細(xì)分散的活性成分混合。在片劑中，將活性成分與合適比例的具有必需結(jié)合性質(zhì)的載體混合，壓縮成所需的形狀和大小。
為制備栓劑組合物，首先將低熔點(diǎn)的蠟例如脂肪酸甘油酯和可可油的混合物熔化，隨后將活性成分通過例如攪拌分散于其中。然后將熔化的均勻混合物傾入到合適大小的模具中，使其冷卻和固化。
合適的載體包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、乳糖、糖、果膠、糊精、淀粉、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可脂等。
為了使用式(I)化合物或其可藥用鹽用于治療性治療(包括預(yù)防性治療)哺乳動物包括人，通常是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥物操作將其配制成藥物組合物。
除本發(fā)明化合物外，在治療本文提及的一種或多種疾病中，本發(fā)明藥物組合物還可以含有一種或多種有藥理學(xué)價(jià)值的藥劑，或與其共同給藥(同時(shí)或相繼)。
術(shù)語組合物目的在于包括活性成分或可藥用鹽與可藥用載體的劑型。例如本發(fā)明可以通過本領(lǐng)域已知的方法配制成藥劑形式例如片劑、膠囊、水溶液或油性溶液、混懸劑、乳劑、霜劑、軟膏劑、凝膠、鼻腔噴霧劑、栓劑、精細(xì)分散的散劑或氣霧劑或吸入噴霧劑和腸胃外使用(包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或輸注)的滅菌水溶液或油性溶液或混懸劑或滅菌乳劑。
液體形式的組合物包括溶液、混懸劑和乳劑?；钚曰衔锏臏缇蛩?丙二醇溶液可以被提及作為適合腸胃外給藥的液體制劑實(shí)例。液體組合物還可以在含水聚乙二醇溶液中以溶液配制。用于口服給藥的水溶液可以通過將活性成分在水中溶解，如果需要并添加合適的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑。用于口服用途的水溶液混懸劑可以通過將精細(xì)分散的活性成分在水以及與之一起的粘稠物質(zhì)例如天然合成膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其它藥物制劑領(lǐng)域已知的懸浮劑中分散制備。
藥物組合物可以為單位劑型。在這樣的形式中，組合物被分成含有適當(dāng)量的活性成分的單位劑量。單位劑型可以為包裝的制劑，包裝含有離散量的制劑，例如包裝的片劑、膠囊和在小瓶或安瓿中的散劑。單位劑型還可以為膠囊、扁囊劑或片劑本身，或其可以為適當(dāng)?shù)臄?shù)量的任何這些包裝形式。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于治療人或動物身體的方法中。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明中定義的化合物或其可藥用鹽是有效的抗癌劑，其性質(zhì)被認(rèn)為是源自它們的Eg5抑制性質(zhì)。因此本發(fā)明化合物預(yù)期用于治療單獨(dú)或部分由Eg5介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥，即所述化合物可以用于在需要這樣治療的溫血動物中產(chǎn)生Eg5抑制作用。
因此本發(fā)明化合物提供通過抑制Eg5為特征治療癌癥的方法，即所述化合物可以用于對單獨(dú)或部分由Eg5介導(dǎo)的癌癥產(chǎn)生抗癌作用。
本發(fā)明化合物用于通過抑制微管的動力蛋白HsEg5治療腫瘤疾病。處理靶標(biāo)Eg5活性的方法，其必須形成有絲分裂紡錘體，因此用于細(xì)胞分裂。因此，Eg5抑制劑已經(jīng)表現(xiàn)出在有絲分裂中期阻斷細(xì)胞，導(dǎo)致被影響細(xì)胞的凋亡，因此具有抗-增生作用。因此Eg5抑制劑作為細(xì)胞分裂的調(diào)節(jié)劑，預(yù)期對于下述腫瘤疾病是有活性的例如乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌或其它組織癌，以及多發(fā)性骨髓瘤白血病，例如髓細(xì)胞性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病和淋巴瘤，例如霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤，中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，和其它腫瘤類型，例如黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤。Eg5抑制劑還預(yù)期用于治療其它增生疾病包括但不限于自身免疫性疾病、炎癥性疾病、神經(jīng)疾病和心血管疾病。
因此根據(jù)本發(fā)明的這方面提供用作藥物的如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生Eg5抑制作用。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增生作用。
根據(jù)本發(fā)明這方面提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗癌作用。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌或前列腺癌、白血病和淋巴瘤，中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，例如黑素瘤、纖維肉瘤和骨肉瘤。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供如上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供在需要這樣治療的溫血動物例如人中產(chǎn)生Eg5抑制作用的方法，包含給所述動物給藥有效量的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供在需要這樣治療的溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增生作用的方法，包含給所述動物給藥有效量的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供在需要這樣治療的溫血動物例如人中產(chǎn)生抗癌作用的方法，包含給所述動物給藥有效量的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明這方面另外的特征提供在需要這樣治療的溫血動物例如人中治療乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌或前列腺癌、白血病和淋巴瘤，中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤和骨肉瘤的方法，包含給所述動物給藥有效量的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明這方面另外的特征提供在需要這樣治療的溫血動物例如人中治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤的方法，包含給所述動物給藥有效量的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
在本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其包含與可藥用稀釋劑或載體混合的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生Eg5抑制作用。
在本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其包含與可藥用稀釋劑或載體混合的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增生作用。
在本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其包含與可藥用稀釋劑或載體混合的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗癌作用。
在本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其包含與可藥用稀釋劑或載體混合的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于治療乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌或前列腺癌、白血病和淋巴瘤，中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤和骨肉瘤。
在本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供藥物組合物，其包含與可藥用稀釋劑或載體混合的如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在溫血動物例如人中產(chǎn)生Eg5抑制作用的用途。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗增生作用的用途。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面提供如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗癌作用的用途。
根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的特征提供如上文所定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤中的用途。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物或其可藥用鹽在治療或預(yù)防與癌癥相關(guān)的病癥中的用途。
本文定義的抗癌治療可以應(yīng)用為單獨(dú)治療，或可以包括除本發(fā)明化合物外的常規(guī)的外科手術(shù)或放射療法或化療。這樣的化療可以包括一種或多種下述抗腫瘤藥物(i)用于醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)的抗增生/抗腫瘤藥物及其組合，例如烷化劑(例如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、替莫唑胺和亞硝基脲)；抗代謝物(例如吉西他濱，和抗葉酸劑例如氟嘧啶，如5-氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、甲氨喋呤、阿糖胞苷和羥基脲)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)類抗生素，如阿霉素、博來霉素、阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、去甲氧基柔紅霉素、絲裂霉素C、放線菌素D和普卡霉素)；抗有絲分裂劑(例如長春堿類，如長春新堿、長春堿、長春酰胺和長春瑞濱，和紫杉烷類，如紫杉醇和紫杉特爾)polokinase抑制劑；和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如鬼臼乙叉苷，如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、拓?fù)涮婵岛拖矘鋲A)；(ii)細(xì)胞生長抑制劑例如抗雌激素藥(例如他莫西芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene)，雌激素受體向下調(diào)節(jié)劑(例如氟維司群)，抗雄激素藥(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和醋酸環(huán)丙孕酮)，LHRH拮抗劑或LHRH激動劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素(例如醋酸甲地孕酮)，芳構(gòu)酶抑制劑(例如阿納托司唑、來曲唑、vorazole和依西美坦)和5α-還原酶抑制劑例如非那雄胺；(iii)癌細(xì)胞侵入抑制藥(例如金屬蛋白酶抑制劑如馬馬司他，尿激酶血纖蛋白溶解酶原活化受體功能抑制劑或SRC激酶抑制劑(如4-(6-氯-2，3-亞甲二氧基苯氨基)-7-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基]-5-四氫吡喃-4-基氧基qyuinazoline(AZD0530；國際專利申請WO 01/94341)和N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-{6-[4-(2-羥基乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基嘧啶-4-基氨基}噻唑-5-羧酰胺(dasatinib，BMS-354825；J.Med.Chem.，2004，47，6658-6661))或類肝素酶抗體)；(iv)生長因子功能抑制劑，例如這樣的抑制劑包括生長因子抗體、生長因子受體抗體(例如抗-erbb2抗體曲妥單抗[HerceptinTM]和抗-erbbl抗體西妥昔單抗[Erbitux，C225])、Ras/Raf信號抑制劑例如法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(例如sorafenib(BAY 43-9006)和tipifa rnib)、酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑，例如表皮生長因子家族抑制劑(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制劑例如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(gefitinib，AZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-雙(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(erlotinib，OSI-774)和6-丙烯基酰胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033)和erbB2酪氨酸激酶抑制劑例如lapatinib)，例如血小板衍生的生長因子家族抑制劑例如imatinib，和例如肝細(xì)胞生長因子家族抑制劑、c-kit抑制劑、abl激酶抑制劑、IGF受體(類胰島素生長因子)激酶抑制劑和通過MEK，AKT和/或PI3K激酶的細(xì)胞信號抑制劑；(v)抗血管生成藥物例如抑制血管表皮生長因子作用的那些(例如抗血管表皮細(xì)胞生長因子抗體貝伐單抗[AvastinTM]，和VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑例如在國際專利申請WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856、WO 98/13354中公開的那些，4-(4-溴-2-氟苯氨基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(ZD6474；在WO 01/32651中的實(shí)施例2)、4-(4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基)-6-甲氧基-7-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)喹唑啉(AZD2171；在WO 00/47212中的實(shí)施例240)、vatalanib(PTK787；WO 98/35985)和SU11248(sunitinib；WO 01/60814))和通過其它機(jī)制起作用的化合物(例如利諾胺、integrinαvβ3功能抑制劑和血管生長抑素)，ang1和2抑制劑；(vi)血管損傷藥物例如考布他汀A4和國際專利申請WO99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO 02/08213中公開的化合物，抗bcl2；(vii)反義療法，例如指向上述列表靶標(biāo)的那些，例如ISIS 2503、抗-ras反義；(viii)基因療法，包括例如替代異?；虻姆椒?，例如異常p53或異常BRCA1或BRCA2，GDEPT(基因指向的酶前藥療法)，例如那些使用胞嘧啶脫氨酶、胸腺嘧啶脫氧核苷激酶或細(xì)菌硝基還原酶的方法，增加患者對化療或放療耐受性的方法例如多-藥物耐受癥基因治療；(ix)免疫治療方法，包括例如離體和體內(nèi)方法以增加患者腫瘤細(xì)胞的免疫原性，例如用細(xì)胞因子例如白介素2、白介素4或粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子轉(zhuǎn)染，降低T-細(xì)胞能量的方法，使用轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞例如細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的樹狀突細(xì)胞的方法，使用細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞系的方法和使用抗獨(dú)特型抗體的方法；x)細(xì)胞周期藥物例如aurora激酶抑制劑(例如PH739358、VX-680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528、AX39459，和在WO02/00649、WO03/055491、WO2004/058752、WO2004/058781、WO2004/058782、WO2004/094410、WO2004/105764、WO2004/113324中提及的具體實(shí)施例，將其引入本文作為參考)，細(xì)胞周期蛋白依賴的激酶抑制劑例如CDK2和/或CDK4抑制劑(例如WO01/14375、WO01/72717、WO02/04429、WO02/20512、WO02/66481、WO02/096887、WO03/076435、WO03/076436、WO03/076434、WO03/076433、WO04/101549和WO04/101564中具體的實(shí)施例，將其引入本文作為參考)；以及xi)細(xì)胞毒藥物例如吉西他濱(gemcitibine)、拓?fù)洚悩?gòu)酶1抑制劑(阿霉素、依托泊苷)和拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑。
這樣的聯(lián)合治療可以通過單個(gè)成分治療同時(shí)、相繼或分開給藥的方式獲得。這樣的組合產(chǎn)物采用本發(fā)明在上文描述的劑量范圍之內(nèi)的化合物和在批準(zhǔn)的劑量范圍之內(nèi)的其它藥用活性藥劑。
本發(fā)明在另一方面提供與選自上述列表的抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯。
在本發(fā)明另一方面提供通過將式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯與選自上述列表的抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥于人，用于治療癌癥的用途。
在本發(fā)明另一方面提供選自上述列表的抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯的用途，用于制備治療癌癥的藥物。
本文定義的抗癌治療還可以包括一種或多種下列類別的藥物i)用于治療貧血癥的藥物，例如連續(xù)紅細(xì)胞生成(erythropoiesis)受體活化劑(例如重組體人紅細(xì)胞生成素tepoetin alfa)；ii)用于治療嗜中性白血球減少癥的藥物，例如造血生長因子，其調(diào)節(jié)嗜中性粒細(xì)胞的產(chǎn)生和功能，例如人粒細(xì)胞集落刺激因子、(G-CSF)、例如非格司亭；和iii)治療惡心或嘔吐的止吐藥，包括急性的、延遲的、晚期的和預(yù)期的嘔吐，其可能是單獨(dú)或與放療一起使用本發(fā)明化合物導(dǎo)致的，這樣止吐藥合適的實(shí)例包括神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5H13受體拮抗劑，例如昂丹司瓊、格拉司瓊、托烷司瓊和扎托司瓊、GABAB受體激動劑，例如巴氯芬，皮質(zhì)甾體例如地卡特隆(地塞米松)、康寧樂(Kenalog)、去炎松、鼻松、Preferid或Benecorten，抗多巴胺劑例如吩噻嗪(例如丙氯拉嗪、氟奮乃靜、甲硫達(dá)嗪和美索達(dá)嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚。
這樣的聯(lián)合治療可以通過單個(gè)治療成分的同時(shí)、相繼或分開給藥而獲得。這樣的聯(lián)合治療采用采用上文描述劑量范圍之內(nèi)的本發(fā)明化合物和在批準(zhǔn)劑量范圍之內(nèi)的其它藥用活性藥物。
在本發(fā)明另一方面提供與選自上述列表的另一種抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯。
因此，本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案提供治療癌癥的方法，通過給人給藥與選自上述列表的另一種抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯。
在另一方面本發(fā)明提供與選自上述列表的另一種抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯的用途，用于制備治療癌癥的藥物。
在另一方面本發(fā)明提供與選自上述列表的另一種抗腫瘤藥物或類別同時(shí)、相繼或分開聯(lián)合給藥的，式(I)化合物或其可藥用鹽或其體內(nèi)可水解酯用于治療癌癥的用途。
除它們治療藥物的用途外，式(I)的化合物和它們的可藥用鹽還可用作藥理學(xué)工具，用于在實(shí)驗(yàn)室動物例如貓、狗、兔子、猴、大鼠和小鼠中評價(jià)Eg5抑制作用的體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的開發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化，作為尋找新的治療藥物的一部分。
在上述其它藥物組合物、操作、方法、用途和藥物制備特征中，本文描述的本發(fā)明化合物可選的和優(yōu)選的實(shí)施方案還適用。
實(shí)施例現(xiàn)在通過下列非限制性實(shí)施例舉例說明本發(fā)明，除非另外指明(i)溫度以攝氏度給出(℃)；操作在室溫或環(huán)境溫度下完成，即在18-30℃溫度范圍下；(ii)有機(jī)溶液經(jīng)無水硫酸鈉干燥；溶劑蒸發(fā)在減壓下(600-4000Pascals；4.5-30mmHg)浴溫最高60℃下使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器完成；(iii)通常，反應(yīng)過程用TLC或MS跟蹤，反應(yīng)時(shí)間僅僅是舉例說明；(iv)最終產(chǎn)物有符合要求的質(zhì)子核磁共振(NMR)譜和/或質(zhì)譜數(shù)據(jù)；(v)給出的產(chǎn)率僅僅是舉例說明，不一定是經(jīng)費(fèi)力地開發(fā)而能達(dá)到的；如果需要更多的物質(zhì)，制備是重復(fù)的；
(vii)當(dāng)給出NMR數(shù)據(jù)時(shí)，數(shù)據(jù)為主要診斷質(zhì)子的δ值，給出相對于四甲基甲硅烷(TMS)作為內(nèi)標(biāo)的百萬分之一的份數(shù)(ppm)，除非另外指明，否則使用氯仿(CDCl3)作為溶劑在400MHz測定；(vii)化學(xué)符號具有它們通常的含義；使用SI單位和符號；(viii)溶劑比率以體積體積(v/v)方式；和(ix)質(zhì)譜使用直接暴露探針化學(xué)離子化(CI)模式用70電子伏特能量運(yùn)行；其中指明的離子化受電子轟擊(EI)、快速原子轟擊(FAB)；電噴霧(ESP)；或大氣壓化學(xué)電離(APCI)的影響；給出了m/z值；一般說來只報(bào)告了顯示母體質(zhì)量的離子；除非另外指明，否則質(zhì)量離子以(MH)+提供；(x)在合成被描述為與以前實(shí)施例的描述類似時(shí)，使用的量為在以前實(shí)施例中使用的毫摩爾比率當(dāng)量；和(xi)使用下列縮寫THF 四氫呋喃；DMF N，N-二甲基甲酰胺；EtOAc乙酸乙酯；DCM二氯甲烷；和DMSO二甲亞砜。
實(shí)施例12，3-二氫-5-氧代-6-芐基-7-{1-[N-(4-甲基苯甲酰基)-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶將4N HCl在二烷(1ml)中的溶液加入到2，3-二氫-5-氧代-6-芐基-7-[1-{N-(4-甲基苯甲?；?-N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙基]氨基}丙基)-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶(方法22；103mg，0.18mmol)中，攪拌30min。當(dāng)脫保護(hù)完成時(shí)，將溶液在真空下濃縮。然后將殘余物從水/乙腈中冷凍干燥得到92mg標(biāo)題化合物。NMR(500MHz，DMSO-d6；100℃)7.69(br s，3H)7.25-7.32(m，2 H)7.09-7.22(m，5H)6.87(br s，2H)5.06(br s，1H)4.39-4.49(m，2 H)3.65-3.82(m，4H)3.45-3.58(m，2H)2.62-2.74(m，2H)2.39(s，3H)1.57-1.93(m，4H)0.57(t，3H)；m/z477(M+)。
實(shí)施例2-6通過實(shí)施例1的方法制備下列化合物。
實(shí)施例72-{1-[N-(4-氯苯甲?；?-N-(2-二甲基氨基乙基)氨基]丙基)-3-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶向3-芐基-2-[1-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-丙基]-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(方法30；2 mg，5.43μmol)在DCM(1ml)中的溶液中，加入碳酸鉀(10mg/lml)和4-氯苯甲酰氯(1.2eq.，6.5μmol，1μL)的水溶液。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)，分離各層，Mg2SO4干燥，過濾并真空濃縮?；衔镉梅聪嗌V法(0.1％TFA/水-0.1％TFA/CH3CN)純化得到3mg(91％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。NM R(300MHz，MeOD)7.75(m，2H)7.40-6.90(m，7H)，4.65-4.50(m，2H)，4.40-4.30(m，1H)，3.75(m，2H，)3.60-3.35(m，4H)，3.00(被H2O峰掩蓋，2H)、3.00-2.85(m，6H)，2.30(s，6H)，1.30(m，3H)；m/z 508(M+)。
原料的制備方法14，4-二甲氧基-3-氧代丁酸乙酯向二甲氧基甲基乙酸酯(25g，0.19mol)在EtOAc(75ml)中的溶液中，分批加入氫化鈉(8.5g，0.21mol)。在所有的氫化鈉加入后，將混合物回流10小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入到冷卻的水中，隨后使用3N HCl溶液調(diào)節(jié)pH至3-4。分離各層，將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮得到34g(96％粗品回收率)標(biāo)題化合物，無須進(jìn)一步純化就可使用。
方法22-芐基-4，4-二甲氧基-3-氧代丁酸乙酯將4，4-二甲氧基-3-氧代丁酸乙酯(方法1；20g，0.105mol)、芐基氯(12.2ml，0.106mol)和乙醇鈉(7g，0.105mol)在乙醇中的溶液回流10小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，在真空下濃縮。然后在EtOAc中稀釋殘余物，用水分配。分離各層，將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮得到24.2g(82％粗品回收率)的標(biāo)題化合物，無須進(jìn)一步純化就可使用。
方法35-芐基-6-(二甲氧基甲基)-2-硫代-2，3-二氫嘧啶-4(1H)-酮向2-芐基-4，4-二甲氧基-3-氧代丁酸乙酯3(方法2；10g，35.7mmol)在乙醇(100ml)中的溶液中加入硫脲(2.58g，33.9mmol)，隨后加入乙醇鈉(2.43g，35.7mmol)。將反應(yīng)混合物回流5小時(shí)。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)，將混合物傾入到冷卻的水上，用3N HCl溶液調(diào)節(jié)pH至3。然后將溶液用EtOAc分配，分離各層。將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮。殘余物從己烷中研磨得到4.16g(42％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。NMR(300MHz)7.10-7.39(m，5H)，5.26(s，1H)，3.82(s，2H)，3.31(s，6H)；m/z293(M+)。
方法46-芐基-7-(二甲氧基甲基)-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮向5-芐基-6-(二甲氧基甲基)-2-硫代-2，3-二氫嘧啶-4(1H)-酮(方法3；2.14g，7.33mmol)在DMF(20ml)中的溶液中加入K2CO3(5.5g，40mmol)和1，2-二溴乙烷(0.76ml，8.79mmol)。將混合物加熱至85℃持續(xù)10小時(shí)。通過加入水淬滅反應(yīng)混合物，用EtOAc分配。分離各層，將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮。殘余物在硅膠上純化，使用80-90％EtOAc/己烷洗脫得到0.91g(39％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物和0.83g(35％分離產(chǎn)率)的6-芐基-5-(二甲氧基甲基)-2，3-二氫-7H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-酮6。NMR(300MHz)7.07-7.45(m，5H)5.22-5.34(m，1H)4.41-4.55(m，J＝7.72，7.72 Hz，2H)4.00(s，2H)3.36-3.53(m，8H)；m/z319(M+)。
方法5-6使用給出的烷化劑，通過方法4的方法制備下列化合物。
方法76-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-甲醛將6-芐基-7-(二甲氧基甲基)-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮(方法4；1.5g)在30ml硫酸水溶液(10％v/v)中的混合物在80℃加熱15-30min。通過原料的消耗監(jiān)測反應(yīng)。當(dāng)完成時(shí)，將反應(yīng)混合物用DCM分配，分離各層。將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮得到1.17g(91％回收產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。無須進(jìn)一步純化即可使用該混合物。
NMR(300MHz)9.96(s，1H)7.02-7.37(m，5H)4.33-4.48(m，2H)4.19(s，2H)3.37-3.46(m，2H)。
方法8-9使用指定的原料，通過方法7的方法制備下列化合物。
方法106-芐基-7-(1-羥基丙基)-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮向6-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-甲醛(方法7；1.17g，4.3mmol)在四氫呋喃(15ml)中的-40℃冷卻溶液中，加入乙基溴化鎂(1M在THF中；5.1ml，5.1mmol)。將反應(yīng)混合物在-40℃攪拌幾小時(shí)，隨后用1M NH4Cl溶液淬滅。反應(yīng)混合物用EtOAc分配，分離各層。將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮，在硅膠純化后(10％EtOAc/DCM)得到450mg(33％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。NMR 7.06-7.24(m，5H)4.55(s，1H)4.40(t，J＝7.34Hz，2H)3.77(d，J＝5.87Hz，2H)3.39(t，J＝7.83Hz，2H)3.04(d，J＝8.80Hz，1H)1.31-1.60(m，2H)0.86(t，J＝7.34 Hz，3H)；m/z 303(M+)。
方法11-12使用指定的原料，通過方法10的方法制備下列化合物。
方法132-[1-(6-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)二酮向6-芐基-7-(1-羥基丙基)-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮(方法10；413mg，1.37mmol)在THF(13.7ml)中的溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺(221mg，1.5mmol)和三苯基膦(393mg，1.5mmol)。當(dāng)溶液冷卻至0℃時(shí)，加入偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD)(0.3ml，1.5mmol)，將溶液在冷卻的溫度下攪拌30min。除去冷卻浴，使反應(yīng)達(dá)到環(huán)境溫度。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)，用水淬滅混合物，用EtOAc分配。分離各層，將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮，在硅膠純化后(1∶1己烷/EtOAc)得到450mg標(biāo)題化合物.M/z 432(M+)。
方法14-15使用指定的原料，通過方法1 3的方法制備下列化合物。
方法167-(1-氨基丙基)-6-芐基-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮將2-[1-(6-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(方法13；450mg)在乙醇(10ml)中的溶液用肼水合物(0.2ml，4.18mmol)處理，攪拌過夜。將得到的混合物通過硅藻土層過濾，隨后用乙醇洗滌幾次。將濾液在真空下濃縮得到256mg(對于2步總產(chǎn)率62％)的標(biāo)題化合物，無須進(jìn)一步純化就可使用。M/z 302(M+)。
方法17-18使用指定的原料，通過方法16的方法制備下列化合物。
方法19
(3-{[1-(6-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-基)丙基]氨基}丙基)氨基甲酸叔丁酯向7-(1-氨基丙基)-6-芐基-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮(方法16；256mg，0.85mmol)和(3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(162mg，0.93mmol)在二氯乙烷(4ml)中的混合物中加入Na(OAc)3BH(198mg，0.93mmol)。將得到的混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。用水和飽和的碳酸氫鈉溶液淬滅反應(yīng)混合物，用DCM分配。分離各層，將有機(jī)層干燥、過濾和在真空下濃縮。殘余物用硅膠(5％MeOH/DCM)純化得到150mg(38％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。M/z459(M+)。
方法20-21使用指定的原料，通過方法19的方法制備下列化合物。
方法222，3-二氫-5-氧代-6-芐基-7-[1-{N-(4-甲基苯甲酰基)-N-[3-叔丁氧基羰基氨基)丙基]氨基}丙基)-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶向(3-{[1-(6-芐基-5-氧代-2，3-二氫-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶-7-基)丙基]氨基}丙基)氨基甲酸叔丁酯(方法19；142mg，0.31mmol)在DCM(1.6ml)中的溶液中加入三乙胺(0.047ml，0.34mmol)和4-甲基苯甲酰氯(0.045ml，0.34mmol)。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)，將混合物在真空下濃縮，在硅膠(20％EtOAc/DCM)上純化得到103mg(58％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。M/z 577(M+)。
方法23-26使用指定的原料和?；瘎?烷化劑，通過方法22的方法制備下列化合物。
方法273-芐基-2-二甲氧基甲基-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮向2-芐基-4，4-二甲氧基-3-氧代丁酸乙酯(方法2；5g，17.85mmol)在乙醇(50ml)中的溶液中加入2-亞氨基哌啶鹽酸鹽(1.5eq.，3.60g，26.7mmol)，隨后加入乙醇鈉(1.21g，17.85mmol)。將反應(yīng)混合物在微波中在120℃反應(yīng)1小時(shí)。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)，蒸發(fā)溶液至干燥，溶解在EtOAc中。將化合物通過快速色譜法純化(6％MeOH/EtOAc)以72％的產(chǎn)率僅僅得到標(biāo)題化合物(4.03g，12.8mmol)。NMR(300MHz)7.35-7.15(m，5H)5.40(s，1H)4.10(s，2H)4.00-3.90(t，2H)，3.40(s，6H)，3.20(t，2H)2.10-1.90(m，4H)；m/z 315(M+)。
方法283-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲醛將3-芐基-2-二甲氧基甲基-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(方法27；0.40g，1.27mmol)在30ml硫酸水溶液(10％v/v，50ml)中的混合物在80℃加熱50min。通過原料的消耗監(jiān)測反應(yīng)。當(dāng)完成時(shí)，用DCM分配反應(yīng)混合物，分離各層。將有機(jī)層用Mg2SO4干燥、過濾和在真空下濃縮得到0.302g(89％回收產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。使用該化合物沒有進(jìn)一步純化。M/z 269(M+)。
方法293-芐基-2-(1-羥基-丙基)-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮向3-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-甲醛(方法28；0.302g，1.13mmol)在THF(30ml)中的在-78℃冷卻的溶液中，加入乙基溴化鎂(1M在THF中；1.48ml，1.48mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)，隨后用1M NH4Cl溶液淬滅。用EtOAc分配反應(yīng)混合物，分離各層。將有機(jī)層用Mg2SO4干燥、過濾和在真空下濃縮，在硅膠純化(4％MeOH/EtOAc)后得到264mg(從兩個(gè)步驟中得到的分離產(chǎn)率68％)的標(biāo)題化合物。M/z 299(M+)。
方法303-芐基-2-[1-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-丙基]-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮將3-芐基-2-(1-羥基-丙基)-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(方法29；40mg，0.134mmol)溶解在無水DCM(3.5ml)中，向其中加入2，6-二甲基吡啶(2eq.，0.268mmol，31μl)和三氟乙酸酐(1.2eq.，0.161mmol，23μl)。將得到的混合物在微波條件下在110℃反應(yīng)30min。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，再溶解在無水DCM(3ml)中。向其中加入N*l*，N*l*-二甲基-乙烷-1，2-二胺(1.2eq.，0.161mmol，1.3mg)和二異丙基乙基胺(1.2eq.，0.161mmol，28μl)。將得到的混合物在微波條件下在80℃反應(yīng)30min。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，殘余物在硅膠(10％MeOH/EtOAc)上純化得到2mg(4％分離產(chǎn)率)的標(biāo)題化合物。M/z 369(M+)。
方法31使用3-芐基-2-(1-羥基-丙基)-6，7，8，9-四氫-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(方法29)和指定的烷化劑，通過方法30的方法制備下列化合物。
方法32使用{2-[1-(3-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基)-丙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(方法31)和指定的酰化劑，通過實(shí)施例7的方法制備下列化合物。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 R1為氟；m為0-5；R2為氫或甲基；R3為含有碳連接-NR4的雜環(huán)或R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基；其中R3可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代；X為-C(O)-或-CH2-；環(huán)A為碳環(huán)或雜環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；并且其中如果所述的雜環(huán)含有另外的NH，氮可以被R9任選取代；環(huán)B與式(I)所示的嘧啶酮環(huán)稠合，為5或6元稠合的碳環(huán)或5或6元稠合的雜環(huán)；其中環(huán)B可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R10任選取代；其中如果所述的5或6元稠合的雜環(huán)含有另外的NH，氮可以被R11任選取代；R4選自氫、C1-6烷基、C1-6烷?；1-6烷基磺?；?、C1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、芐基、芐氧羰基、苯甲?；捅交酋；?；R5和R6獨(dú)立為氫或C1-6烷基；或R5和R6與它們所連的氮一起形成含氮雜環(huán)；其中所述的C1-6烷基或所述的含氮雜環(huán)可以獨(dú)立在碳上被一個(gè)或多個(gè)R12任選取代；以及其中如果所述的含氮雜環(huán)含有另外的NH，該氮可以被R13任選取代；R8、R10和R12獨(dú)立選自鹵素、硝基、氰基、羥基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；?、巰基、氨基磺?；1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基、C1-6烷?；?、C1-6烷?；趸?、N-(C1-6烷基)氨基、N，N-(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷?；被?、N-(C1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲?；?、其中a為0至2的C1-6烷基S(O)a、C1-6烷氧基羰基、N-(C1-6烷基)氨基磺?；?、N，N-(C1-6烷基)2氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰基氨基；其中R8、R10和R12可以獨(dú)立被R14任選取代；R9、R11和R13獨(dú)立選自C1-6烷基、C1-6烷酰基、C1-6烷基磺?；?、C1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-6烷基)氨基甲?；?、N，N-(C1-6烷基)氨基甲?；⑵S基、芐氧羰基、苯甲?；捅交酋；?；R7和R14獨(dú)立選自鹵素、硝基、氰基、羥基、三氟甲氧基、三氟甲基、氨基、羧基、氨基甲?；€基、氨基磺?；?、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、乙?；?、乙酰氧基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、N-甲基-N-乙基氨基、乙?；被?、N-甲基氨基甲酰基、N-乙基氨基甲酰基、N，N-二甲基氨基甲?；，N-二乙基氨基甲酰基、N-甲基-N-乙基氨基甲酰基、甲硫基、乙硫基、甲基亞磺?；?、乙基亞磺酰基、甲磺酰基、乙基磺酰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、N-甲基氨基磺?；?、N-乙基氨基磺?；?、N，N-二甲基氨基磺?；，N-二乙基氨基磺酰基或N-甲基-N-乙基氨基磺?；?；或其可藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中m為0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中R2為氫。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中X為-C(O)-。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中X為-CH2-。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任何一項(xiàng)的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中環(huán)A為碳環(huán)；其中環(huán)A可以在碳上被一個(gè)或多個(gè)R8任選取代；其中R8為鹵素、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任何一項(xiàng)的式(I)化合物或其可藥用鹽，其中環(huán)B為5或6元稠合的碳環(huán)或5或6元稠合的雜環(huán)。
9.式(I)的化合物 其中m為0；R2為氫；R3為被-NR5R6取代的甲基或乙基；X為-C(O)-或-CH2-；環(huán)A為4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-4-甲基苯基、萘-2-基或4-氯苯基；環(huán)B和其相連的嘧啶酮形成2，3-二氫-5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶、3，4-二氫-6-氧代-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪、5-氧代-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶或4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基；R5和R6獨(dú)立為氫或甲基；或其可藥用鹽。
10.式(I)的化合物 選自2，3-二氫-5-氧代-6-芐基-7-{1-[N-(4-甲基苯甲?；?-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶；3，4-二氫-6-氧代-7-芐基-8-{1-[N-(4-甲基苯甲?；?-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪；3，4-二氫-6-氧代-7-芐基-8-{1-[N-(4-甲基芐基)-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-2H，6H-嘧啶并[2，1_b][1，3]噻嗪；3，4-二氫-6-氧代-7-芐基-8-{1-[N-(4-甲氧基苯甲?；?-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-2H，6H-嘧啶并[2，1-b][1，3]噻嗪；5-氧代-6-芐基-7-{1-[N-(3-氟-4-甲基苯甲?；?-N-(3-氨基丙基)氨基]丙基}-5H-[1，3]噻唑并[3，2-a]嘧啶；2-{1-[N-(萘-2-基羰基)-N-(2-氨基乙基)氨基]丙基}-3-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶；和2-{1-[N-(4-氯苯甲?；?-N-(2-二甲基氨基乙基)氨基]丙基}-3-芐基-4-氧代-6，7，8，9-四氫-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶；或其可藥用鹽。
11.制備式(I)化合物或其可藥用鹽的方法，除非另外指定，否則其中可變基團(tuán)如權(quán)利要求1所定義的，包含方法a)當(dāng)X為-C(O)-時(shí)；將式(II)的喹唑啉酮 與式(III)的酸或其活化的酸衍生物反應(yīng)； 方法b)其中X為-CH2-；將式(II)的化合物與式(V)化合物反應(yīng)， 其中L為可替換的基團(tuán)；方法c)對于其中R3為被-NR5R6取代的C1-3烷基和在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代的式(I)的化合物；將式(VI)的化合物 其中Ra為在碳上被一個(gè)或多個(gè)R7任選取代的C1-3亞烷基；并且其中L為可替換的基團(tuán)；與式(VII)化合物反應(yīng)HNR5R6(VII)方法d)將式(VIII)的胺 與式(IX)的化合物反應(yīng) 其中L為可替換的基團(tuán)；此后如果需要i)轉(zhuǎn)化式(I)化合物為另一個(gè)式(I)化合物；ii)除去任何保護(hù)基；iii)形成可藥用鹽。
12.藥物組合物，其中包含與可藥用的稀釋劑或載體混合的上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽。
13.上文定義的用作藥物的式(I)化合物或其可藥用鹽。
14.上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物在溫血動物例如人中產(chǎn)生Eg5抑制作用。
15.上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物在溫血動物例如人中產(chǎn)生抗癌作用。
16.上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤。
17.對需要這樣治療的溫血動物例如人產(chǎn)生Eg5抑制作用的方法，其中包含給所述動物給藥如上文所定義的有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
18.對需要這樣治療的溫血動物例如人產(chǎn)生抗癌作用的方法，其中包含給所述動物給藥如上文所定義的有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
19.對需要這樣治療的溫血動物例如人治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤的方法，其中包含給所述動物給藥如上文所定義的有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
20.藥物組合物，其中包含與可藥用的稀釋劑或載體混合的上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于對溫血動物例如人產(chǎn)生Eg5抑制作用。
21.藥物組合物，其中包含與可藥用的稀釋劑或載體混合的上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于對溫血動物例如人產(chǎn)生抗癌作用。
22.在本發(fā)明另一方面提供藥物組合物，其包含與可藥用的稀釋劑或載體混合的上文定義的式(I)化合物或其可藥用鹽，用于治療腦癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、結(jié)腸癌和前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤白血病、淋巴瘤、中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，黑素瘤、纖維肉瘤、尤因肉瘤和骨肉瘤。
全文摘要
描述了式(I)化合物其具有Eg5抑制劑活性，用于它們的抗細(xì)胞增生(例如抗癌癥)活性，因此用于治療人或動物身體的方法中。
文檔編號C07D513/04GK101023082SQ200580024785
公開日2007年8月22日 申請日期2005年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月22日
發(fā)明者M·H·布洛克, A·戴維斯, D·J·魯塞爾, M·－E·塞奧克利托 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司