專利名稱：作為nr2b受體拮抗劑的犬尿烯酸酰胺衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及為NMDA受體拮抗劑或制備NMDA受體拮抗劑中間體的新犬尿烯酸酰胺衍生物。
背景技術(shù)：
N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體是嵌入在神經(jīng)元細(xì)胞膜上的配體門控的陽(yáng)離子通道。由谷氨酸，NMDA受體的天然配體過(guò)度活化NMDA受體可以引起細(xì)胞的鈣超載。這觸發(fā)了改變細(xì)胞功能并最終可導(dǎo)致神經(jīng)元死亡的級(jí)聯(lián)細(xì)胞內(nèi)事件[TINS，10，299-302(1987)]。NMDA受體拮抗劑可用于治療許多伴隨中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的主要興奮神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸過(guò)度釋放的疾病。
NMDA受體是由至少7種已知的亞單位基因構(gòu)成的異數(shù)集群。NR1亞單位是功能性NMDA受體通道的必需部分。有四種基因編碼NR2亞單位(NR2A-D)。由不同的NR2亞單位構(gòu)成的NMDA受體在CNS中的空間分布和藥理學(xué)敏感性是不同的。近來(lái)，報(bào)道了NR3A和NR3B。由于其限制性分布(在前腦和脊髓的膠狀質(zhì)中密度最高)這些亞單位中特別令人感興趣的是的NR2B亞單位。這種亞型的選擇性化合物是可得的并且已經(jīng)證明在中風(fēng)[stroke，28，2244-2251(1997)]，創(chuàng)傷性腦損傷[BrainRes.，792，291-298(1998)]，帕金森病[Exp.Neurol.，163，239-243(2000)]，神經(jīng)性和炎性疼痛[Neuropharmacology，38，611-623(1999)]的動(dòng)物模型中是有效的。而且，預(yù)期NMDA受體的NR2B亞型選擇性拮抗劑幾乎不具有或不具有通常由非選擇性NMDA受體拮抗劑所引起的不利副反應(yīng)，即擬精神病作用例如眩暈，頭痛，幻覺，煩躁不安和認(rèn)知和運(yùn)動(dòng)功能障礙。
NR2B亞型的選擇性NMDA拮抗作用可以使用特異性結(jié)合并且作用于含有NR2B亞單位受體的變構(gòu)調(diào)節(jié)部位的化合物來(lái)實(shí)現(xiàn)?？梢酝ㄟ^(guò)使用特定的放射性配體例如[125I]-艾芬地爾[J.Neurochem.，61，120-126(1993)]或[3H]-Ro25，6981[J.Neurochem.，70，2147-2155(1998)]進(jìn)行置換(結(jié)合)研究來(lái)描述此結(jié)合部位的特性。雖然不是很特異，但由于艾芬地爾是該受體第一個(gè)已知的配體，它仍被稱為艾芬地爾結(jié)合部位。
式(I)的羧酸酰胺衍生物的相近結(jié)構(gòu)的類似物根據(jù)文獻(xiàn)是未知的。
發(fā)明概述令人驚奇的是，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明式(I)的新的犬尿烯酸酰胺衍生物是含有NR2B亞單位的NMDA受體的功能性拮抗劑，同時(shí)其對(duì)含有NR2A亞單位的NMDA受體無(wú)效。因此，它們被認(rèn)為是NR2B亞型的特異性NMDA拮抗劑。某些化合物口服施用后在小鼠體內(nèi)疼痛模型中證明是有效的。
發(fā)明詳述因此本發(fā)明首先涉及式(I)的新的犬尿烯酸酰胺衍生物 -其中含義為X和Y獨(dú)立地為氫原子，羥基，氨基，任選由一個(gè)鹵素原子或多個(gè)鹵素原子取代的C1-C4烷基亞磺酰氨基，任選由一個(gè)鹵素原子或多個(gè)鹵素原子取代的C1-C4烷酰基酰氨基，C1-C4烷氧基，C1-C4烷氧羰基或在特定的情況下，相鄰的X和Y基團(tuán)可與一個(gè)或多個(gè)相同或不同的另外的雜原子和-CH＝和/或-CH2-基形成任選取代的4-7元的同素環(huán)-或雜環(huán)，優(yōu)選嗎啉，吡咯，吡咯烷，氧代-或硫代-吡咯烷，吡唑，吡唑烷，咪唑，咪唑烷，氧代-或硫代-咪唑或咪唑烷，1，4-噁嗪，噁唑，噁唑烷，氧代-或硫代-噁唑烷，或3-氧代-1，4-噁嗪環(huán)，W是氧原子，以及C1-C4亞烷基，C2-C4亞烯基，氨羰基，-NH-，-N(烷基)-，-CH2O-，-CH2S-，-CH(OH)-，-OCH2-基，-其中烷基的含義是C1-C4烷基-，當(dāng)虛線鍵 表示C-C單鍵時(shí)，V的含義是羥基或氫原子或當(dāng)W是C1-C4亞烷基或C3-C4亞烯基時(shí)，虛線鍵 之一可以表示另外的C-C雙鍵并且在這種情況下V表示參與雙鍵的電子對(duì)，Z是氫原子或鹵素原子，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，三氟甲基，羥基或羧基，以及其旋光對(duì)映體，外消旋物及鹽。
本發(fā)明的進(jìn)一步的目的是生產(chǎn)式(I)犬尿烯酸酰胺衍生物和制造含這些化合物的藥劑的方法，以及使用這些化合物治療的方法，即給要治療的哺乳動(dòng)物-包括人-施用有效量的本發(fā)明式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物本身或藥劑。
本發(fā)明的式(I)的新犬尿烯酸酰胺衍生物是高效的和選擇性的NMDA受體拮抗劑，而且大部分化合物是NMDA受體NR2B亞型的選擇性的拮抗劑。
根據(jù)本發(fā)明式(I)的新犬尿烯酸酰胺衍生物可由式(II)的羧酸 -其中X和Y的含義如前式(I)所述-或其活性衍生物與式(III)的胺
-其中Z，V，W和虛線鍵 的含義如前式(I)所給出-反應(yīng)來(lái)合成，然后在特定的情況下，將獲得的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，Z和虛線鍵 如式(I)所述-通過(guò)已知的方法通過(guò)引入新的取代基和/或修飾或除去存在的基團(tuán)，和/或成鹽和/或通過(guò)將化合物從鹽中游離，和/或使用光學(xué)活性的酸或堿將所得的外消旋物拆分而轉(zhuǎn)變成另外的式(I)化合物。
式(II)的羧酸和式(III)的胺反應(yīng)，即形成酰胺鍵優(yōu)選通過(guò)由式(II)的羧酸制備活性衍生物并且優(yōu)選在堿存在下與式(III)的胺反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。
在適當(dāng)溶劑(例如二甲基甲酰胺，乙腈，氯代烴或烴)中在形成酰胺鍵期間羧酸轉(zhuǎn)換成活性衍生物在原位進(jìn)行。活性的衍生物可以是?；?例如由羧酸與亞硫酰氯制備)，混合酸酐(例如在堿，例如三乙胺存在下由羧酸與氯甲酸異丁酯制備)，活性酯(例如在堿，如三乙胺存在下由羧酸和羥基苯并三唑和二環(huán)己基-碳二亞胺或O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸脲(HBTU)制備)。活性衍生物在室溫和0℃之間制備。將式(III)適當(dāng)?shù)陌纷鳛閴A或與無(wú)機(jī)酸形成的鹽加至所得的溶液或混懸液中以便使胺釋放所需的堿，例如三乙胺，被單獨(dú)加至反應(yīng)混合物中。隨后將濃縮的反應(yīng)物通過(guò)薄層色譜法。必需的反應(yīng)時(shí)間是6-20h。反應(yīng)混合物的后處理可以通過(guò)不同的方法進(jìn)行。
當(dāng)反應(yīng)混合物是混懸液時(shí)，濾出沉淀并在適宜的溶劑中重結(jié)晶得到純化產(chǎn)物。如果結(jié)晶不能得到純化產(chǎn)物，則可使用柱色譜法進(jìn)行純化。使用Kieselgel 60作為吸附劑和不同的溶劑系統(tǒng)，例如甲苯/甲醇，氯仿/甲醇或甲苯/丙酮作為洗脫劑進(jìn)行柱色譜法。如果反應(yīng)混合物在?；┢谑侨芤?，則將其濃縮，然后將殘留物結(jié)晶或通過(guò)如上所述的柱色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)通過(guò)IR，NMR和質(zhì)譜測(cè)定。
在特定情況下，將獲得的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-與制備方法無(wú)關(guān)-通過(guò)引入另外的取代基和/或修飾或除去存在的基團(tuán)，和/或與酸成鹽和/或通過(guò)使用堿進(jìn)行處理而由獲得的酸加成鹽釋放式(I)的羧酸酰胺衍生物和/或通過(guò)使用堿處理將游離的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物轉(zhuǎn)化為鹽而轉(zhuǎn)變成另外的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物。
例如使甲基和苯甲基從代表X，Y和Z的甲氧基和苯甲氧基基團(tuán)裂解，可得到苯酚衍生物。苯甲基的除去例如可以在乙酸溶液中通過(guò)催化氫化或使用溴化氫來(lái)進(jìn)行，甲基的裂解可以在二氯甲烷溶液中使用三溴化硼來(lái)進(jìn)行?？梢允褂貌煌孽；瘎⒑杏坞x酚羥基的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物轉(zhuǎn)化為酰氧基。該反應(yīng)在堿(例如三乙胺或碳酸鈉)存在的情況下使用?；然蛩狒鳛轷；瘎┰谑覝叵略诼然療N中進(jìn)行?？梢允褂藐P(guān)于酰化酚羥基所述的不同的?；蚧酋；瘎⒑邪被氖?I)的犬尿烯酸酰胺衍生物轉(zhuǎn)變?yōu)轷０被蚧酋０被苌?。在堿存在的情況下可通過(guò)酸酐或酸鹵將游離的羥基酯化。
式(II)的羧酸和式(III)的仲胺是可商購(gòu)獲得的或可以通過(guò)已知的不同方法合成。在實(shí)施例中描述了某些無(wú)法商購(gòu)獲得的式(II)羧酸和式(III)仲胺的合成。
試驗(yàn)方案重組NMDA受體的表達(dá)為了證明我們化合物的NR2B選擇性，我們?cè)诜€(wěn)定表達(dá)具有NR1/NR2A或NR1/NR2B亞單位組成的重組NMDA受體的細(xì)胞系上對(duì)它們進(jìn)行測(cè)試。使用陽(yáng)離子脂質(zhì)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法將亞克隆至可誘導(dǎo)的哺乳動(dòng)物表達(dá)載體的人NR1-3和NR2A或大鼠NR1a和NR2B亞單位的cDNAs引入缺乏NMDA受體的HEK293細(xì)胞中[Biotechniques，1997 May；22(5)，982-7；Neurochemistry International，43，19-29.(2003)]。使用對(duì)新霉素和潮霉素的耐藥性來(lái)篩選具有載體和單克隆細(xì)胞系的克隆，由對(duì)NMDA暴露產(chǎn)生最高應(yīng)答的克隆來(lái)建立。在熒光鈣測(cè)量中測(cè)試了化合物對(duì)NMDA誘發(fā)的細(xì)胞溶質(zhì)鈣濃度升高的抑制作用。在加入誘導(dǎo)劑后48-72h進(jìn)行研究。在誘導(dǎo)過(guò)程中還存在氯胺酮(500μM)以防止細(xì)胞毒性。
基于使用熒光計(jì)平板讀數(shù)器測(cè)量細(xì)胞內(nèi)鈣濃度，評(píng)價(jià)化合物對(duì)表達(dá)重組NMDA受體的HEK293細(xì)胞的功能性NMDA拮抗劑效力。
由于已知興奮時(shí)NMDA受體對(duì)于鈣離子是可滲透的，因此在將激動(dòng)劑(NMDA)施于細(xì)胞后通過(guò)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的升高可表征NMDA受體的活化程度，以及被功能性拮抗劑抑制的程度。由于大鼠和人體NMDA受體具有很高的序列同源性(對(duì)于NR1，NR2A，和NR2B亞單位，分別為99，95，97％)，因此人們相信它們的藥理學(xué)敏感性即使有差異也會(huì)很小。因此，由大鼠NMDA受體(克隆的或原生的)獲得的結(jié)果可很好地外推至人NMDA受體。
細(xì)胞內(nèi)鈣的測(cè)量在表達(dá)NR1a和NR2B或NR2A NMDA受體亞單位的HEK293細(xì)胞上進(jìn)行。將細(xì)胞加到標(biāo)準(zhǔn)的96-孔微量培養(yǎng)板上，在37℃95％空氣-5％CO2氣氛中保持培養(yǎng)物直到進(jìn)行測(cè)試。
在測(cè)試前使細(xì)胞裝載熒光Ca2+-敏感染料，F(xiàn)luo-4/AM(2-2.5μM)。還可通過(guò)用在測(cè)量過(guò)程中使用的溶液(140mM NaCl，5mM KC1，2mMCaCl2，5mM HEPES[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙烷-磺酸]，5mM HEPES-Na，20mM葡萄糖，10μM甘氨酸，pH＝7.4]洗滌兩次來(lái)停止裝載。然后加入溶解在上述溶液(90μl/孔)中的測(cè)試化合物。使用平板讀數(shù)器熒光計(jì)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鈣的測(cè)量。通過(guò)施用200μM NMDA誘導(dǎo)了反映細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的Fluo-4-熒光的升高。在不同濃度的化合物存在下通過(guò)測(cè)量鈣升高的減少來(lái)評(píng)價(jià)測(cè)試化合物的抑制效力。
化合物在單一濃度點(diǎn)的抑制效力表示為對(duì)照NMDA反應(yīng)的抑制百分?jǐn)?shù)。對(duì)于表達(dá)NR1a/NR2B的細(xì)胞制備了濃度-抑制曲線。S形的濃度-抑制曲線與數(shù)據(jù)相吻合，將IC50值定義為產(chǎn)生使用化合物能夠獲得的半數(shù)最大抑制作用的濃度。平均IC50值由至少三個(gè)獨(dú)立的試驗(yàn)獲得。對(duì)于表達(dá)NR1-3/NR2A的細(xì)胞，分別在10和15微摩濃度測(cè)試了本發(fā)明化合物和參照化合物對(duì)NMDA誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的升高的拮抗作用。
化合物的生物活性表1中列出了所選擇的實(shí)施例的本發(fā)明化合物在NR1a/NR2B轉(zhuǎn)染細(xì)胞中測(cè)定的IC50值和在NR1a/NR2A轉(zhuǎn)染細(xì)胞中15μM濃度時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)。為了進(jìn)行比較，還測(cè)定了最有效的已知參考化合物的數(shù)據(jù)并在表2中列出。
在NR1-3/NR2A轉(zhuǎn)染細(xì)胞的功能性NMDA拮抗作用試驗(yàn)中本發(fā)明的化合物所顯示的IC50值小于15μM，并且在此濃度對(duì)NR1/NR1A轉(zhuǎn)染細(xì)胞是無(wú)活性的。因此本發(fā)明的化合物和藥物組合物是NR2B亞型特異性的NMDA拮抗劑。與已知的參考化合物相比一些化合物具有更高的效力(見表1)。
表1通過(guò)熒光法在表達(dá)NR1a/NR2B或NR1-3/NR2A亞單位的細(xì)胞上測(cè)定的化合物的NMDA拮抗劑活性
表2通過(guò)熒光法在表達(dá)NR1a/NR2B或NR1-3/NR2A亞單位的細(xì)胞上測(cè)定的參照化合物的NMDA拮抗劑活性
參照化合物如下CI-10416-{2-[4-(4-氟-苯甲基)-哌啶-1-基]-乙烷亞磺?；鶀-3H-苯并噁唑-2-酮，Co 1012441-[2-(4-羥苯氧基)乙基]-4-羥基-4-(4-甲苯甲基)哌啶，EMD 958856-[3-(4-氟苯甲基)哌啶-1-基]丙酰]-2，3-二氫-苯并噁唑-2-酮，CP-101，606(1S，2S)-1-(4-羥苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇，Co-1111031-[2-(4-羥苯氧基)乙基]-4-(4-氟苯甲基)哌啶，Ro 256981R-(R*，S*)-1-(4-羥苯基)-2-甲基-3-[4-(苯甲基)哌啶-1-基]-1-丙醇，艾芬地爾赤-2-(4-苯甲基哌啶子基)-1-(4-羥苯基)-1-丙醇，MK-801(+)-5-甲基-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-5，10-亞胺。
測(cè)定體內(nèi)效能的小鼠福爾馬林試驗(yàn)已知將稀釋的福爾馬林注射入大鼠或小鼠的后爪可引起兩階段的用舔/咬其損傷爪所用的時(shí)間測(cè)量的疼痛相關(guān)行為。第二階段通常定義為福爾馬林注射后在15-60min時(shí)間間隔內(nèi)檢測(cè)出的疼痛相關(guān)事件。已知NMDA受體參與對(duì)福爾馬林注射反應(yīng)的第二階段并且這種行為反應(yīng)對(duì)于NMDA受體的阻斷敏感[Dickenson，A.and BessonJ.-M.(Editors)Chapter 1，pp.6-7Animal models of Analgesia；and Chapter 8，pp.180-183Mechanism of Central HypersensitivityExcitatory Amino Acid Mechanisms and Their Control-InPharmacology of pain.Springer-Verlag(Berlin)1997.]因此，我們使用福爾馬林試驗(yàn)的第二階段來(lái)表征化合物的體內(nèi)效能。認(rèn)為抑制第二階段的反應(yīng)表明了抵抗化學(xué)誘導(dǎo)的持續(xù)性疼痛的止痛作用[Hunskaar，S.，等f(wàn)ormalin test in mice，a Useful Technique forEvaluating Mild Analgesics，Journal of Neuroscience Methods，14(1985)69-76.]使用雄性albino NMRI小鼠(20-25g)。試驗(yàn)前禁食任何固體食物大約16小時(shí)但動(dòng)物可自由攝入20％的葡萄糖溶液。使動(dòng)物在玻璃圓筒(cc.直徑15cm)中適應(yīng)1個(gè)小時(shí)，然后移至后部有鏡子的相同圓筒中以便于觀察。試驗(yàn)物質(zhì)混懸于5％的吐溫-80中(每kg體重10ml)。在注射福爾馬林前15min通過(guò)管飼法口服施用(將在0.9％鹽水中的20μl1％福爾馬林通過(guò)皮下注入右后爪的背側(cè)面)。測(cè)量從注射福爾馬林后20至25分舔和咬注射的爪子所用的時(shí)間。為確定ED50值，將不同劑量(至少五個(gè)劑量)的試驗(yàn)物質(zhì)給予5只小鼠的組并將結(jié)果表示為同一天觀察的相對(duì)于載體對(duì)照組舔所花費(fèi)時(shí)間的抑制百分?jǐn)?shù)。通過(guò)Boltzman′s S形曲線擬合計(jì)算ED50值(即，產(chǎn)生50％抑制作用的劑量)。
表3選定化合物在小鼠福爾馬林試驗(yàn)中的ED50值
*具有60％最大效果的部分抑制可以使用在NR2B部位作用的NMDA拮抗劑有利地治療的疾病，如Loftis最近綜述的[Pharmacology & Therapeutics 2003，9755-85]，包括精神分裂癥，帕金森氏病，亨廷頓舞蹈病，由缺氧和局部缺血引起的興奮性中毒，癲癇發(fā)作，藥物濫用，和疼痛，特別是任何原因的神經(jīng)性，炎性和內(nèi)臟的疼痛[Eur.J.Pharmacol.2001，42971-78]。
由于與非選擇性NMDA拮抗劑相比它們具有減少副作用的傾向，NR2B選擇性拮抗劑可用于NMDA拮抗劑可以有效的疾病，例如肌萎縮性側(cè)索硬化[Neurol.Res.，21，309-12(1999)]，例如酒精，阿片樣物質(zhì)或可卡因戒斷綜合征[Drug and Alcohol depend.，59，1-15(2000)]，肌痙攣[Neurosci.Lett.，73，143-148(1987)]，不同起因的癡呆[Expert Opin.Investig.Drugs，9，1397-406(2000)]，焦慮，抑郁，偏頭疼，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病(例如CMV視網(wǎng)膜炎)，青光眼，哮喘，耳鳴，聽力損失[Drug News Perspect，11，523-569(1998)和WO00/00197國(guó)際專利申請(qǐng)]。
因此，有效量的本發(fā)明的化合物可有利地用于治療大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，耐受性的發(fā)展，濫用潛力的減少和濫用藥物例如乙醇，阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷頓舞蹈病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛。
本發(fā)明的化合物以及它們藥學(xué)上可接受的鹽可以以其本身或適宜以藥物組合物形式使用。這些組合物(藥物)可以是固體，液體或半液體形式并且可加入實(shí)踐中通常使用的藥物助劑和輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤(rùn)濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑，或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑。
在每個(gè)特定情形下起到治療作用所需要的劑量可以在大范圍內(nèi)改變并滿足個(gè)體需要，這取決于疾病的階段，所治療患者的狀況和體重，以及患者對(duì)活性成分的敏感性，施用途徑和每天治療次數(shù)?；钚猿煞值膶?shí)際使用劑量可以由熟悉治療的患者的本領(lǐng)域中熟練的主治醫(yī)生來(lái)安全地確定。
包含根據(jù)本發(fā)明活性成分的藥物組合物在一個(gè)劑量單元通常包含0.01至100mg的活性成分，當(dāng)然在一些組合物中活性成分的量可以超過(guò)上文定義的上限或下限。
藥物組合物的固體形式可以是例如片劑，糖衣片，膠囊，丸劑或用于注射劑制備的凍干粉末安瓿劑。液體組合物是可注射和可輸注的組合物，液體藥物，充填液和滴劑。半液體組合物可以是軟膏，香脂，乳膏，振搖混合物和栓劑。
為了施用簡(jiǎn)單，如果藥物組合物所包括的劑量單元含施用一次或幾次或施用其二分之一或三分之一或四分之一的量的活性成分，是適合的。這樣的劑量單元是例如片劑，該片劑能夠用其促進(jìn)對(duì)分或四分的凹槽來(lái)粉碎以利于準(zhǔn)確施用需要量的活性成分。
片劑可以用酸溶層包衣以確保在離開胃之后釋放活性成分內(nèi)容物。這樣的片劑包腸溶衣。通過(guò)將活性成分裝入膠囊也能得到類似的效果。
口服施用的藥物組合物可以包括例如作為賦形劑的乳糖或淀粉，作為粘合劑或?；瘎┑聂燃谆w維素鈉，甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮或淀粉糊。加入作為崩解劑的馬鈴薯淀粉或微晶纖維素，但也可使用超支鏈淀粉或甲醛酪蛋白?；?、膠體硅酸、硬脂精、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂可用作抗粘著劑或滑潤(rùn)劑。
片劑可以例如通過(guò)濕法制粒后壓制來(lái)制備。在適當(dāng)?shù)脑O(shè)備中用粘合劑水溶液、醇溶液或醇水溶液將混合的活性成分和賦形劑以及在特定情況下部分崩解劑制粒，然后將顆粒干燥。將其他崩解劑、潤(rùn)滑劑和抗粘著劑加入在干燥的顆粒中，并將混合物壓制成片劑。在特定情況下，制備的片劑具有等分槽以便于施用。
片劑可由活性成分和適當(dāng)?shù)闹鷦┑幕旌衔锿ㄟ^(guò)壓制直接制備。在特定情況下，片劑可用通常在制藥實(shí)踐中使用的添加劑例如穩(wěn)定劑、調(diào)味劑、著色劑，例如糖、纖維素衍生物(甲基纖維素或乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉等)、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸鈣、碳酸鈣、食用著色劑、食用酒精(food lace)、芳香劑、氧化鐵顏料等涂敷。在膠囊劑情況中，將活性成分和適當(dāng)?shù)闹鷦┑幕旌衔镅b在膠囊中。
液體口服組合物，例如懸浮液、糖漿劑、酏劑，可通過(guò)用水、二醇、油、醇、著色劑和調(diào)味劑進(jìn)行制備。
為直腸施用，將組合物配制成栓劑或灌腸劑。栓劑除活性成分外可含稱為前栓動(dòng)物脂的載體。載體可以是植物油，例如氫化植物油、C12-C18脂肪酸甘油三酯(優(yōu)選商品名為Witepsol的載體)。將活性成分與熔化的前栓動(dòng)物脂均勻混合并模制成栓劑。
為胃腸外施用，將組合物配制成注射液。為制備注射液，將活性成分溶解在蒸餾水和/或不同的有機(jī)溶劑中，例如乙二醇醚，在特定條件下，存在增溶劑例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯、單油酸酯或單硬脂酸酯(吐溫20，吐溫60，吐溫80)。注射液還可包括不同的助劑，例如保存劑例如乙二胺四乙酸鹽，以及pH調(diào)節(jié)劑和緩沖液和特定條件下局部麻醉藥如利多卡因。在裝入安瓿前將含本發(fā)明活性成分的注射液過(guò)濾，在裝入后將其滅菌。
如果活性成分吸濕，那么通過(guò)凍干可使其穩(wěn)定。
以下實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明但不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例12-[4-(4-氟-苯甲基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮0.5g(2.4mmol)6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸[J.Med.Chem.，17，685-690.(1974)]，0.75ml(5.4mmol)三乙胺，0.6g(2.6mmol)4-(4-氟-苯甲基)-哌啶鹽酸鹽[J.Med.Chem.，35，4903.(1992)]，1.0g(2.6mmol)HBTU
-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-(4-甲基苯甲基)-哌啶[JOrg.Chem.，64，3763.(1999)]制備。Mp.152(乙醚)。
實(shí)施例42-[4-(4-氯-苯甲基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-(4-氯-苯甲基)-哌啶制備(C.A.77，34266w)。Mp.194℃(乙醚)。
實(shí)施例52-(4-苯甲氧基-哌啶-1-羰基)-6-羥基-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-苯甲氧基-哌啶制備[TetrahedronLett.，36，3465.(1995)]。Mp.103℃(乙醚)。
實(shí)施例66-羥基-2-(4-苯氧甲基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-苯氧基-甲基-哌啶制備[DE 254 999(1977)]。Mp.130℃(乙醚)。
實(shí)施例72-[4-(4-氯-苯氧基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮a)4-(4-氯-苯氧基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯在氬氣下，將3.0g(60％，75mmol)的氫化鈉加至攪拌的10.0g(49.7mmol)4-羥基-哌啶-1-羧酸叔丁基酯[Bioorg.Med.Chem.Lett.10，2815.(2000)]在80ml二甲基甲酰胺的溶液中。反應(yīng)混合物在40℃攪拌1h，然后在20℃逐滴加入在20ml二甲基甲酰胺中的5.3ml(49.7mmol)1-氯-4-氟-苯(Aldrich)的溶液。反應(yīng)混合物在80℃攪拌4h，冷卻至20℃，逐滴加入1ml乙醇，傾入100ml水并使用乙酸乙酯進(jìn)行萃取。有機(jī)層經(jīng)過(guò)硫酸鈉干燥并濃縮。殘留物通過(guò)柱色譜法使用Kieselgel 60(Merck)作為吸附劑和乙酸乙酯作為洗脫劑進(jìn)行純化得到11.07g(75.5％)的標(biāo)題化合物。Mp.油。
b)4-(4-氯-苯氧基)-哌啶鹽酸鹽將11.07g(37.5mmol)的4-(4-氯-苯氧基)-哌啶-1-羧酸叔丁基酯加入150ml2.5M鹽酸的乙酸乙酯溶液中。反應(yīng)混合物在20℃攪拌3h，然后濃縮至50ml。濾出沉淀的結(jié)晶，使用乙酸乙酯洗滌得到7.0g(75.2％)的標(biāo)題化合物。Mp.194-196℃。
c)2-[4-(4-氯-苯氧基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮(45本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-(4-氯-苯氧基)-哌啶制備。Mp.91℃(乙醚)。
實(shí)施例86-羥基-2-(4-對(duì)-甲苯氧基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-對(duì)-甲苯氧基-哌啶制備[JMed.Chem.，21，309.(1978)]。Mp.258-260℃(乙醚)。
實(shí)施例96-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-1，5-二氫-噁唑并[4.5-g]喹啉-2，8-二酮a)2-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基氨基)-丁-2-烯二酸二甲酯1.0g(6.66mmol)6-氨基-3H-苯并噁唑-2-酮[US2806853]，0.9ml(7.3mmol)乙炔二羧酸二甲酯(Aldrich)和15ml甲醇的混合物回流2h。反應(yīng)混合物冷卻至20℃，濾出沉淀的結(jié)晶，使用甲醇洗滌得到1.7g(87％)的標(biāo)題化合物。Mp.172℃。
b)2，8-二氧代-1，2，5，8-四氫-噁唑并[4，5-g]喹啉-6-羧酸甲酯將1.7g(5.8mmol)2-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基氨基)-丁-2-烯二酸二甲酯按小分加入10ml煮沸的Dowtherm(Fluka)的攪拌溶液中。加入完成后將反應(yīng)混合物回流10min，然后冷卻至室溫，濾出沉淀產(chǎn)物并使用己烷洗滌得到1.16g(76％)的標(biāo)題化合物。Mp.297℃。
c)2，8-二氧代-1，2，5，8-四氫-噁唑并[4，5-g]喹啉-6-羧酸
1.16g(4.4mmol)2，8-二氧代-1，2，5，8-四氫-噁唑并[4，5-g]喹啉-6-羧酸甲酯，40ml甲醇，10ml水和1.25g(31.2mmol)氫氧化鈉的混合物在20℃攪拌1h。將甲醇減壓蒸餾。使用2M的鹽酸將反應(yīng)混合物酸化并濾出沉淀的結(jié)晶，使用水洗滌得到0.9g(82％)的標(biāo)題化合物。Mp.＞300℃。
d)6-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-1，5-二氫-噁唑并[4，5-g]喹啉-2，8-二酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由2，8-二氧代-1，2，5，8-四氫-噁唑并[4，5-g]喹啉-6-羧酸和4-苯甲基-哌啶制備。Mp.215℃(乙醚)。
實(shí)施例106-羥基-2-(4-苯氧基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-苯氧基-哌啶[J Med.Chem.，17，1000-1003.(1974)]制備。Mp.270℃(乙醚)。
實(shí)施例112-(4-苯甲基-4-羥基-哌啶-1-羰基)-6-羥基-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由6-羥基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸和4-苯甲基-哌啶-4-醇制備[JMed.Chem.，42，2087-2104.(1999)]。Mp.178℃(乙醚)。
實(shí)施例122-(4-苯甲基-4-羥基-哌啶-1-羰基)-7-羥基-IH-喹啉-4-酮a)2-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-7-苯甲氧基-1H-喹啉-4-酮本標(biāo)題化合物按照實(shí)施例1所述方法由7-苯甲氧基-4-氧代-1，4-二氫-喹啉-2-羧酸[J Med.Chem.，34，1243-1252.(1991)]和4-苯甲基-哌啶制備。Mp.228℃(異丙醇)。
b)2-(4-苯甲基-4-羥基-哌啶-1-羰基)-7-羥基-1H-喹啉-4-酮將0.5g(1.1mmol)2-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-7-苯甲氧基-1H-喹啉-4-酮，20ml四氫呋喃，20ml甲醇，0.2g 10％Pd/C催化劑的混合物氫化2h。濾出催化劑，使用四氫呋喃洗滌并濃縮濾液。殘留物通過(guò)柱色譜法使用Kieselgel 60作為吸收劑(Merck)和甲苯∶甲醇＝4∶1作為洗脫劑進(jìn)行純化得到0.32g(80.7％)的標(biāo)題化合物。Mp.174℃(乙醚)。
實(shí)施例13藥物組合物的制備a)片劑將0.01-50％的式I的活性成分，15-50％的乳糖，15-50％的馬鈴薯淀粉，5-15％的聚乙烯吡咯烷酮，1-5％的滑石粉，0.01-3％的硬脂酸鎂，1-3％的膠體二氧化硅和2-7％的過(guò)支鏈淀粉混合，然后通過(guò)濕法制粒并壓制成片劑。
b)糖衣片，薄膜包衣片將按照上述方法制備的片劑用由腸或胃溶薄膜組成的，或由糖和滑石粉組成的層包衣。糖衣片用蜂蠟和carnuba臘的混合物拋光。
c)膠囊將0.01-50％的式I活性成分，1-5％的十二烷基硫酸鈉，15-50％的淀粉，15-50％的乳糖，1-3％的膠體二氧化硅和0.01-3％的硬脂酸鎂充分混合，將混合物過(guò)篩并填充至硬明膠膠囊中。
d)混懸液成分0.01-15％的式I活性成分，0.1-2％的氫氧化鈉，0.1-3％的檸檬酸，0.05-0.2％的尼泊金(4-羥基苯甲酸甲酯鈉)，0.005-0.02％的對(duì)羥基苯甲酸丙酯，0.01-0.5％的卡波普(聚丙烯酸)，0.1-5％的96％乙醇，0.1-1％的矯味劑，20-70％的山梨醇(70％水溶液)和30-50％的蒸餾水。
在劇烈攪拌下，按小份將卡波普加至在20ml蒸餾水中的尼泊金和枸櫞酸溶液中，并將溶液放置10-12h。然后在攪拌下加入在1ml蒸餾水中的氫氧化鈉，山梨醇水溶液并最終加入乙醇覆盆子香精。往載體中按小份加入活性成分并使用浸漬勻漿機(jī)懸浮。最后用蒸餾水將該懸浮劑加至所需最終體積，且將該懸浮糖漿過(guò)膠體研磨設(shè)備。
e)栓劑對(duì)每種栓劑，將0.01-15％的式I活性成分和1-20％的乳糖充分混合，然后將50-95％的栓劑前動(dòng)物脂肪(例如Witepsol 4)熔化并冷卻至35℃，用勻化器將活性成分和乳糖的混合物在其中混合。將所得混合物冷卻塑模。
f)凍干粉安瓿組合物以注射用雙蒸水制成5％的甘露醇或乳糖水溶液，將該溶液過(guò)濾以獲得滅菌溶液。0.01-5％式I活性成分的溶液也以注射用雙蒸水制成，并將此溶液過(guò)濾以獲得滅菌溶液。在無(wú)菌條件下將這兩種溶液混合，在安瓿中裝入1ml，將安瓿內(nèi)容物凍干，且將安瓿在氮?dú)庀旅芊?。在施用前，將安瓿?nèi)容物溶解在滅菌水或0.9％(生理的)滅菌氯化鈉水溶液中。
權(quán)利要求
1.式(I)新的犬尿烯酸酰胺衍生物 -其中含義為X和Y立地為氫原子，羥基，氨基，任選由一個(gè)鹵素原子或多個(gè)鹵素原子取代的C1-C4烷基亞磺酰氨基，任選由一個(gè)鹵素原子或多個(gè)鹵素原子取代的C1-C4烷酰基酰氨基，C1-C4烷氧基，C1-C4烷氧羰基，或在特定的情況下，相鄰的X和Y基團(tuán)可與一個(gè)或多個(gè)相同或不同的另外的雜原子和-CH＝和/或-CH2-基形成任選取代的4-7元的同素環(huán)-或雜環(huán)，優(yōu)選嗎啉，吡咯，吡咯烷，氧代-或硫代-吡咯烷，吡唑，吡唑烷，咪唑，咪唑烷，氧代-或硫代-咪唑或咪唑烷，1，4-噁嗪，噁唑，噁唑烷，氧代-或硫代-噁唑烷，或3-氧代-1，4-噁嗪環(huán)，W是氧原子，以及C1-C4亞烷基，C2-C4亞烯基，氨羰基，-NH-，-N(烷基)-，-CH2O-，-CH2S-，-CH(OH)-，-OCH2-基，-其中烷基的含義是C1-C4烷基-，當(dāng)虛線鍵 表示C-C單鍵時(shí)，V的含義是羥基或氫原子或當(dāng)W是C1-C4亞烷基或C3-C4亞烯基時(shí)，虛線鍵 之一可以表示另外的C-C雙鍵并且在這種情況下V表示參與雙鍵的電子對(duì)，Z是氫原子或鹵素原子，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，三氟甲基，羥基或羧基，以及其旋光對(duì)映體，外消旋物及鹽。
2.如權(quán)利要求1所定義的式(I)的化合物，-其中含義為X為氫原子，Y為羥基或苯甲氧基或相鄰的X和Y基團(tuán)形成-NH-CO-O-鏈，W是氧原子以及C1-C4亞烷基、-CH2O-，或-OCH2-基，V是羥基或氫原子，Z是氫或鹵素原子、或C1-C4烷基，并且虛線鍵 表示C-C單鍵。
3.屬于權(quán)利要求1的范圍的下組的犬尿烯酸酰胺衍生物的一種化合物2-[4-(4-氟-苯甲基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，2-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，6-羥基-2-[4-(4-甲基-苯甲基)-哌啶-1-羰基]-1H-喹啉-4-酮，2-[4-(4-氯-苯甲基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，2-(4-苯甲氧基-哌啶-1-羰基)-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，6-羥基-2-(4-苯氧基甲基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮，2-[4-(4-氯-苯氧基)-哌啶-1-羰基]-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，6-羥基-2-(4-對(duì)-甲苯氧基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮，6-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-1，5-二氫-噁唑并[4，5-g]-喹啉-2，8-二酮，6-羥基-2-(4-苯氧基-哌啶-1-羰基)-1H-喹啉-4-酮，2-(4-苯甲基-4-羥基-哌啶-1-羰基)-6-羥基-1H-喹啉-4-酮，和2-(4-苯甲基-4-羥基-哌啶-1-羰基)-7-羥基-1H-喹啉-4-酮。
4.含有有效量的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，V，Z和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-或其旋光對(duì)映體，外消旋物或鹽作為活性成分和實(shí)踐中通常使用的輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤(rùn)濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑，或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑的藥物組合物。
5.制備式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物的方法，-其中X，W，V，Z，Y和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-，其特征在于式(II)的羧酸 -其中X和Y的含義如權(quán)利要求1所給出-或其活性衍生物與式(III)的胺 -其中Z，V，W和虛線鍵 的含義如權(quán)利要求1所給出-反應(yīng)，然后在特定的情況下，任選將獲得的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，V，Z和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-通過(guò)已知的方法通過(guò)引入新的取代基和/或修飾或除去存在的基團(tuán)，和/或成鹽和/或通過(guò)將式(I)化合物從鹽中游離，和/或使用光學(xué)活性的酸或堿將所得的外消旋物拆分而轉(zhuǎn)變成另外的式(I)化合物。
6.如權(quán)利要求5的方法，其特征在于優(yōu)選在堿存在的情況下使式(II)的羧酸的活性衍生物-其中X和Y的含義如權(quán)利要求1所給出-和式(III)的胺-其中Z，V，W和虛線鍵 的含義如權(quán)利要求1所給出-反應(yīng)。
7.如權(quán)利要求5的方法，其特征在于使式(II)的羧酸-其中X和Y的含義如權(quán)利要求1所給出-和式(III)的胺-其中Z，V，W和虛線鍵 的含義如權(quán)利要求1所給出-在二甲基甲酰胺中在三乙胺和O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸脲(HBTU)存在的情況下反應(yīng)。
8.制備具有NR2B選擇性NMDA受體拮抗劑作用的藥物組合物的方法，其特征在于將式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，V，Z和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-或其旋光對(duì)映體或外消旋物或藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分和實(shí)踐中通常使用的輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤(rùn)濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑，或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑混合。
9.治療和緩解哺乳動(dòng)物-包括人-的以下疾病-大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，與人免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)的神經(jīng)元損傷，肌萎縮性側(cè)索硬化，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，濫用藥物例如乙醇，阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷頓舞蹈病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛或癌癥相關(guān)疼痛，癲癇，焦慮，抑郁，偏頭疼，精神病，肌肉痙攣，不同原因的癡呆，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病，青光眼，哮喘，耳鳴，氨基糖苷抗生素誘發(fā)的聽力損失的癥狀的方法，其特征在于給要治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，V，Z和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-或其旋光對(duì)映體或外消旋物或藥學(xué)上可接受的鹽或?qū)⑵渑c在藥學(xué)上通常應(yīng)用的載體，填充劑等組合使用。
10.式(I)的犬尿烯酸酰胺衍生物-其中X，Y，W，V，Z和虛線鍵 含義如權(quán)利要求1所給出-或其旋光對(duì)映體或外消旋物或藥學(xué)上可接受的鹽制備用于治療和緩解哺乳動(dòng)物，包括人的以下疾病癥狀的藥物的用途，疾病包括大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，與人免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)的神經(jīng)元損傷，肌萎縮性側(cè)索硬化，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，濫用藥物例如乙醇，阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病，帕金森氏病，亨廷頓舞蹈病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛或癌癥相關(guān)疼痛，癲癇，焦慮，抑郁，偏頭疼，精神病，肌肉痙攣，不同原因的癡呆，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病，青光眼，哮喘，耳鳴，氨基糖苷抗生素誘發(fā)的聽力損失。
全文摘要
式(I)的新的犬尿烯酸酰胺衍生物，及其旋光對(duì)映體，外消旋物及鹽為高效的和選擇性的NMDA受體拮抗劑，而且大部分化合物是選擇性的NMDA受體NR2B亞型的拮抗劑。
文檔編號(hào)C07D491/04GK1989127SQ200580024758
公開日2007年6月27日 申請(qǐng)日期2005年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月29日
發(fā)明者I·博爾扎, C·霍瓦特, S·福爾考什, J·納吉, S·科洛科 申請(qǐng)人:匈牙利吉瑞大藥廠