同時檢測聚維酮k30中2-吡咯烷酮和甲酸方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及同時檢測2-吡咯烷酮和甲酸的方法，尤其是同時檢測聚維酮K30中2-吡咯烷酮和甲酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 根據(jù)《中華人民共和國藥典》2015年版四部可知，聚維酮K30的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只有對N-乙烯基吡咯烷酮的限度進(jìn)行滴定檢測，滴定檢測法所受主觀因素影響太大，使精確度受到 很大的影響。另外標(biāo)準(zhǔn)中缺乏2-吡咯烷酮含量限定的檢測項目，導(dǎo)致其對聚維酮K30的質(zhì)量 控制不夠全面和準(zhǔn)確，從而成隱患。
[0003] 根據(jù)美國藥典，聚維酮K30的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要求檢測的雜質(zhì)有、N-乙烯基吡咯烷酮、 2_吡咯烷酮、甲酸，醛，過氧化物，前三種雜質(zhì)要求使用液相來檢測，檢測項目繁多，不利于 進(jìn)行大量樣品檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了克服現(xiàn)有檢測技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種同時檢測聚維酮K30 中2-吡咯烷酮和甲酸，該方法能準(zhǔn)確有效的控制聚維酮K30的質(zhì)量，從而確保用藥安全性。
[0005] 為了實現(xiàn)上述的發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0006] 同時檢測聚維酮K30中2-吡咯烷酮和甲酸，該方法是利用液相色譜法對2-吡咯烷 酮和甲酸的含量進(jìn)行測定，操作步驟如下：
[0007] 色譜條件：
[0008] a、十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱；
[0009] b、以體積比95:5的磷酸氫二鉀溶液-乙腈為流動相，所述磷酸氫二鉀溶液濃度為 0.01mol/L，所述pH值為3.0;
[0010]c、檢測波長為210nm;
[0011] 對照品溶液制備：取2-吡咯烷酮對照品加水制成第一對照品溶液，取甲酸對照品 加水制成第二對照品，將第一對照液和第二對照液混合，制得對照品溶液；
[0012] 供試品溶液的制備:取聚維酮K30加水制成供試品溶液；
[0013] 測定法:分別吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀進(jìn)行測定。
[0014] 優(yōu)選的是:所述對照品溶液及供試品溶液制備的具體過程如下：
[0015] 對照品溶液制備:取2-吡咯烷酮對照品加水制成25ug/ml的溶液，作為第一對照品 溶液，取甲酸對照品加水制成25ug/ml的溶液作為第二對照品，將第一對照液和第二對照液 按1:1體積比混合，制得對照品溶液；
[0016] 供試品溶液的制備:取聚維酮K30加水制成5mg/ml的溶液作為供試品溶液。
[0017]優(yōu)選的是:所述測定法中對照品溶液和供試品溶液進(jìn)樣量均為20μ1。
[0018]本發(fā)明利用液相色譜法對2-吡咯烷酮和甲酸進(jìn)行檢測，該檢測方法準(zhǔn)確度高、線 性范圍廣、專屬性強、精密度與重復(fù)性均良好、靈敏度高，可以作為同時檢測2-吡咯烷酮和 甲酸含量限度控制依據(jù)?？梢愿玫目刂凭劬S酮K30質(zhì)量，可以有效的監(jiān)督生產(chǎn)，保證產(chǎn)品 質(zhì)量的穩(wěn)定，患者用藥的安全性。
【附圖說明】
[0019]圖l:2.576、6.44、12.88、25.76、64.4、128.8、193.2、257.6ug/ml的2-吡咯烷酮溶 液系列濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制的線性回歸圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面進(jìn)一步描述本發(fā)明的技術(shù)方案，但要求保護的范圍并不局限于所述。下面結(jié) 合具體實施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的闡述，但本發(fā)明的實施方式并不局限于實施例表 示的范圍。這些實施例僅用于說明本發(fā)明，而非用于限制本發(fā)明的范圍。此外，在閱讀本發(fā) 明的內(nèi)容后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種修改，這些等價變化同樣落于本發(fā)明 所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
[0021] 以下實施例及考察性試驗中對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供。
[0022]所述的液相色譜法按照中國藥典2010年版一部附錄液相色譜法進(jìn)行。
[0023] 實施例
[0024]對照品溶液制備:取2-吡咯烷酮對照品加水制成25ug/ml的溶液，作為第一對照品 溶液，取甲酸對照品加水制成25ug/ml的溶液作為第二對照品，將第一對照液和第二對照液 按1:1體積比混合，制得對照品溶液；
[0025]供試品溶液的制備:取聚維酮K30加水制成5mg/ml的溶液作為供試品溶液。
[0026] 色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱，以體積比95:5的磷酸氫二鉀 溶液-乙腈為流動相，所述磷酸氫二鉀溶液濃度為0.01m〇l/L，所述pH用磷酸調(diào)節(jié)至3.0,設(shè) 定檢測波長為210nm。分別吸取對照品溶液和供試品溶液20μ1，注入液相色譜儀進(jìn)行測定。
[0027]利用液相色譜法同時檢測聚維酮Κ30中2-吡咯烷酮和甲酸的方法可行性考察試驗 如下：
[0028]根據(jù)美國藥典，2-吡咯烷酮檢測方法為：
[0029]取2-吡咯烷酮對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋為25ug/ml的溶液，作為對 照溶液。取本品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋為5mg/ml的溶液，作為供試品溶液。照高效 液相色譜法(通則0512)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-乙腈-甲醇為流動 相(90:5:5)，檢測波長為205nm。
[0030] 系統(tǒng)適用性試驗:精密量取對照溶液25ul，注入液相色譜儀，六次峰面積的相對標(biāo) 準(zhǔn)偏差不得過2.0%。
[0031] 檢測法:精密量取對照品溶液和供試品溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，記錄色 譜圖，按外標(biāo)法峰面積計算，不得過〇. 5%。
[0032]甲酸檢測方法為：
[0033]取甲酸對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋為25ug/ml的溶液作為對照溶液； 稱取本品〇 . 50g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶 液。照高效液相色譜法(通則0512)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以磷酸氫二鉀 溶液(0.01m〇l/L)-乙腈(95:5.用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)為流動相，檢測波長為210nm。精密量 取對照品溶液和供試品溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積 計算，不得過0.5%。
[0034] -、根據(jù)美國藥典對2-吡咯烷酮和甲酸檢測方法，進(jìn)行如下專屬性和耐用性試驗。
[0035] 1、專屬性
[0036]精密量取25 · 76ug/ml的2-吡咯烷酮對照液、27 · 34ug/ml的甲酸對照液、25 · 76ug/ ml 2-吡咯烷酮供和27.34ug/ml甲酸的混合供試品溶液20ul在甲酸的液相條件下進(jìn)樣，保 留時間、峰面積、分離度、理論塔板數(shù)、拖尾因子分析結(jié)果見表1。
[0037]表1對照品及供試品色譜峰分析
[0038]
[0039]結(jié)果表明2-吡咯烷酮能夠在甲酸的液相條件下出峰，并且與甲酸的分離度R>1.5。 故此方法專屬性好。
[0040] 2、線性和范圍
[0041 ]精密量取2.576、6.44、12.88、25.76、64.4、128.8、193.2、257.6ug/ml系列濃度的 2_吡咯烷酮溶液20ul，在甲酸的液相條件下分別進(jìn)樣，記錄色譜圖；以濃度和峰面積進(jìn)行線 性回歸，峰面積結(jié)果見表2。
[0042]表2峰面積「00431

[0044]以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為:y=18.91x+32.562 (R2=0.99956;縱坐標(biāo)y為峰面積，橫