吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(1H)-酮衍生物類PDE9A抑制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明設(shè)及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及一類憐酸二醋酶9A(Phosphodiesterase 9A， PDE9A)抑制劑，更具體地，設(shè)及化咯并[2，1-f ] [ 1，2，4]S嗦-4(1H)-酬衍生物，運(yùn)類化合物 對PDE9A具有高效的抑制作用，可W應(yīng)用于降低或抑制細(xì)胞中PDE9A的活性。
【背景技術(shù)】
[0002] 近幾年的研究表明，抑制PDE9A是一種新穎的治療方向，可W用來治療由于中樞神 經(jīng)系統(tǒng)素亂導(dǎo)致的認(rèn)知損害方面的疾病，比如老年癡呆癥和精神分裂癥，也可W用來治療 大腦的神經(jīng)變性過程。
[0003] PDE9A是廣泛的憐酸二醋酶家族中的一員，運(yùn)些酶調(diào)控體內(nèi)cAMP和CGMP的水平，運(yùn) 兩種核巧酸是重要的第二信使，在細(xì)胞信號傳導(dǎo)過程中起著核屯、作用；它們主要活化蛋白 激酶：由cAMP激活的稱作蛋白激酶A(PKA)，由cGMP激活的稱作蛋白激酶G(PKG)。被激活的 PKA和PKG可W憐酸化許多細(xì)胞效應(yīng)蛋白，比如離子通道、G-蛋白禪聯(lián)受體、結(jié)構(gòu)蛋白、傳導(dǎo) 因子。因此，cAMP和CGMP通過運(yùn)種方式可能控制許多器官中的大多數(shù)生理過程。同時，cAMP 和CGMP也可W直接作用于效應(yīng)蛋白，從而起到上述相同的作用。眾所周知，CGMP可W直接作 用于離子受體，從而影響細(xì)胞中的離子濃度。憐酸二醋酶(PDE)水解環(huán)狀單憐酸醋CAMP和 cGMP，將其轉(zhuǎn)化為失活的單憐酸醋AMP和GMP。目前，PDE家族被分為11個成員，分類的依據(jù)是 它們基因的序列同源性。
[0004] 人類的PDE9A最早在1998年被克隆和測序。PDE9A選擇性地和CGMP結(jié)合，結(jié)合常數(shù) 為170nM，而對cAMP的結(jié)合常數(shù)只用230000nM。研究表明，PDE9A廣泛表達(dá)于人類的睪丸、大 腦、小腸、骨肌、屯、臟、肺、胸腺和膜臟。和PDE2A比較，PDE9A的催化活性并不會被CGMP增強(qiáng)， 因為PDE9A沒有CGMP的結(jié)合區(qū)域。所WPDE9A抑制劑可能提高基線CGMP濃度。
[0005] 傳統(tǒng)的抑巧巧制劑不能抑制人類PDE9A，因此，藥物IBMX、dipyridamole、SKF94120、 rolipram和vinpocetine對PDE9A沒有抑制活性或者很低。目前市場上沒有PDE9A抑制劑藥 物，只有一些正在處于臨床研發(fā)階段的抑制劑。分別是由Pfizer公司的PF-04447943和BI公 司的BI-409306兩類PDE9A抑制劑，結(jié)構(gòu)式分別如下：
[0006]
[0007]目前正處于一期和二期臨床階段。盡管由兩家不同公司研發(fā)，運(yùn)兩類PDE9A抑制劑 都是基于母核4-?基化挫并[3，4-d]喀晚。

【發(fā)明內(nèi)容】

[000引本發(fā)明公開了一類PDE9A抑制劑，設(shè)及化咯并[2，1-門[1，2,4];嗦-4(1^-酬衍生 物，藥效學(xué)實驗表明本發(fā)明化合物具有良好的PDE9A激酶抑制活性。
[0009] 本發(fā)明的化合物結(jié)構(gòu)式如下：
[0010]

LUU-IJJ 化選h列仕一結(jié)例的化巧倒現(xiàn)具約芋上nn安雙的猛： 「00141
[0015] 本發(fā)明的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、其醋、其溶劑化物或者它們的立體異構(gòu)體 具有與化合物同樣的功效，可用于治療或者預(yù)防由PDE9A激酶介導(dǎo)的相關(guān)疾病。
[0016] 本發(fā)明還公開了一種藥物組合物，其包括藥物有效劑量的本發(fā)明的化合物或其鹽 和藥學(xué)上可接受的載體。
[0017] 本發(fā)明所述的化合物可W添加藥學(xué)上可接受的載體制成常見的藥用制劑，如片 劑、膠囊、粉劑、糖漿、液劑、懸浮劑、針劑，可W加入香料、甜味劑、液體或固體填料或稀釋劑 等常用藥用輔料。
[0018] 本發(fā)明所述的化合物在臨床上的給藥方式可W采用口服、注射等方式。
[0019] 一般地，本發(fā)明的化合物用于治療時，人用劑量范圍為Img~1000 mg/天。也可根據(jù) 劑型的不同和疾病嚴(yán)重程度，使用劑量超出該范圍。
[0020] 本發(fā)明化合物的制備方法，包括：
[00211
[0022] 其中Ri的定義同前。
[0023] 下面是本發(fā)明化合物的體外酶學(xué)活性實驗：
[0024] 實驗方法:采用時間分辨巧光共振能量轉(zhuǎn)移的方法進(jìn)行PDE9A激酶的抑制活性測 定?；衔锞幪枌?yīng)的結(jié)構(gòu)式如下：
[0025]
[0026]
[002-
[002引測試結(jié)果如表1所示：
[0029] 表1:本發(fā)明化合物和對照藥的體外酶學(xué)抑制活性（ICso)
[0030]
[0031]
[0032] 其中，+表示活性小于lOnM，++表示活性介于IO-IOOnM之間，+++表示活性介于100-1000 nM之間，++++表示活性大于lOOOnM。
[0033] 由表1可見，本發(fā)明的化合物具有良好的PDE9A抑制活性，可用于治療由于中樞神 經(jīng)系統(tǒng)素亂導(dǎo)致的認(rèn)知損害方面的疾病，比如老年癡呆癥和精神分裂癥，也可W用來治療 大腦的神經(jīng)變性過程。
【具體實施方式】
[0034] 實施例1
[0035] 中間體1-5的制備
[0036]
[0037] 在 250mL 單口瓶中加入化合物 1-4(6.63g，25.4mmol，l. Oeq)，THF(SOmL) ,MeCN (50mL)，DIPEA(6.57g，50.8mmol，2.0eq)，HATU(10.61g，27.9mmol，l.leq)，室溫攬拌化，加 入化合物SM5(3.18g，25.4mmo 1，1. Oeq)，室溫攬拌化，濃縮干，加入EA(200mL)，飽和化Cl洗 (150mL巧），EA相無水硫酸儀干燥，過濾，濃縮制砂，DCM:Me0H = 50:l到DCM:Me0H = 30:l到 DCM: MeOH=20:1柱層析，得淡黃色粉末6.61 g，收率:70.5 %。中間體I-6的制備
[00；3 引
[0039]在 IOOmL 單口瓶中加入化合物 1-5(1. OOg, 2.7mmol，l. Oeq), EtOH(ISmL),攬拌溶 解，加入K0H(0.15g，2.7mmo 1，1. Oeq)水溶液，加熱至劇烈回流反應(yīng)20h。濃縮干，加入冰水 (30mL)，DCM萃取（30mL巧），合并DCM相，無水硫酸儀干燥，過濾，濃縮制砂，DCM:MeOH = 50:1 柱層析，收集產(chǎn)品點濃縮干，得淡黃色油狀物0.58g，收率:60.8%。中間體1-7的制備
[0040]
[0041 ]在IOOmL單口瓶中加入化合物I-6(0.44g，l .3mmol，l .Oeq)，DCM(20mL)，TFA (IOmL),加干燥管，冰浴降溫至0度，分批加入NBS(0.21g，1.17mmol，0.9eq)，保溫化，升至室 溫反應(yīng)化，LCMS檢測無原料剩余。濃縮干，DCM溶解，飽和Na2C〇3 (100血)洗，DCM相無水硫酸儀 干燥過濾，濃縮，DCM:Me0H=30:l柱層析，收集產(chǎn)品點濃縮干得淡黃色固體0.56g，收率： 100%。
[0042] 中間體1-8的制備
[0043 I-/ SlVl日
I-B
[0044] 在100血單口瓶中加入化合物 1-7(0.56g，1.3mmol，1. Oeq)，二氧六環(huán)（16mL)，K2C03 水溶液，化合物516(0.33肖，1.6111111〇1，1.26〇)，置換氮氣^次，加熱至回流反應(yīng)化。濃縮干， DCM溶