專利名稱：扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海洋生物化妝品領(lǐng)域，特別是涉及一種扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體及其 制備方法。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體自1962年發(fā)現(xiàn)以來(lái)，以其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和功能在化妝品、醫(yī)藥領(lǐng)域逐漸推 廣。在化妝品領(lǐng)域中，脂質(zhì)體作為活性成分的載體，利用磷脂雙層膜與皮膚細(xì)胞的親和性， 可以將一些有效營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)傳遞至皮膚深層，從而促進(jìn)了吸收，減少了刺激性。繼1986年 Dior首次開發(fā)了商品名為Capture的脂質(zhì)體化妝品以來(lái)，國(guó)外對(duì)脂質(zhì)體在皮膚學(xué)和化妝品 學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)行了大量的研究將保濕劑、維生素制成脂質(zhì)體，可以利用其緩釋特點(diǎn)，延長(zhǎng) 功效時(shí)間；將防曬劑制成脂質(zhì)體，可以增加滲透性，還具有防水效果。美國(guó)開發(fā)的GAI脂質(zhì) 體產(chǎn)品，貯藏12個(gè)月后仍然保持有90 %的標(biāo)準(zhǔn)活性，85 %的脂質(zhì)體保持穩(wěn)定。在日本，神經(jīng) 酰胺及其脂質(zhì)體技術(shù)的研究和應(yīng)用成果申請(qǐng)了大批的專利。在國(guó)內(nèi)，北京同仁堂公司引進(jìn) 德國(guó)專利技術(shù)，成功制備了質(zhì)量穩(wěn)定的納米脂質(zhì)體化妝品，為脂質(zhì)體的大規(guī)模市場(chǎng)化邁出 了堅(jiān)實(shí)的一步?？寡趸脑谧o(hù)膚品中的應(yīng)用也被認(rèn)為是最有開拓希望的新領(lǐng)域，抗氧化肽的共同 特性是具有俘獲各種反應(yīng)所產(chǎn)生的活性高的自由基，使之成為惰性化合物。因此，抗氧化肽 應(yīng)用于體外可抵抗紫外線對(duì)皮膚造成的老損，從而保護(hù)其結(jié)構(gòu)功能；尤其作為特效添加劑 應(yīng)用于各種高檔日化產(chǎn)品中而風(fēng)靡全球，堪稱發(fā)展最快、效益最好的新興產(chǎn)業(yè)，受到國(guó)內(nèi)外 研究機(jī)構(gòu)、制造廠商的重視。前期研究表明扇貝抗氧化肽是海洋活性多肽的一種，不僅具有 清除羥自由基和超氧陰離子的能力，還能延緩自然衰老動(dòng)物皮膚老化。應(yīng)用研究還表明，該 扇貝抗氧化肽能對(duì)抗紫外線和60Co-「射線對(duì)淋巴細(xì)胞的輻射損傷，有免疫增強(qiáng)作用等，美 容防曬效果顯著。由于多肽對(duì)皮膚的修復(fù)和美白效果需要深入皮膚深層，才能被真皮層吸 收，對(duì)皮膚黑色素形成的關(guān)鍵酶才能起到抑制性作用。因此，選擇合理有效的方法，對(duì)多肽 進(jìn)行保護(hù)，使其達(dá)到作用的關(guān)鍵部位，成為最大限度的發(fā)揮其活性的關(guān)鍵。脂質(zhì)體的發(fā)現(xiàn)， 為扇貝抗氧化肽的深入開發(fā)提供了思路。如果利用脂質(zhì)體技術(shù)將多肽包裹起來(lái)，能夠滲入 皮膚表層達(dá)到相應(yīng)作用部位并維持一定時(shí)間，就能最大限度的發(fā)揮其活性，提高其利用率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)有在不足，提供一種脂質(zhì)體形態(tài)均一，粒徑 200nm以下，包封率高，滲透率低，符合化妝品的透皮吸收要求的扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體 (或稱PCF納米脂質(zhì)體)及其制備方法。本發(fā)明提供的扇貝抗氧化肽的納米脂質(zhì)體，其特征在于由下列PH梯度法制備扇 貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體為球形單室脂質(zhì)體，形態(tài)均一，包封率高達(dá)97. 29%，粒子直徑平均 分布在200nm以下，總含量在85%以上，平均Zeta電位為-21. 3mV，穩(wěn)定性較強(qiáng)，包封率在 4°C下一個(gè)月內(nèi)基本保持穩(wěn)定；
所述pH梯度法制備扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體，包括下列步驟①空白脂質(zhì)體的制備。取大豆卵磷脂(卵磷脂)、膽固醇和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯(吐溫80)溶解 于乙醚溶劑中，大豆卵磷脂重量配比為150-250份，優(yōu)選為200份，膽固醇重量配比為30-90 份，優(yōu)選為50份，吐溫80重量配比為20-100份，優(yōu)選為60份，恒溫50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有 機(jī)溶劑，使大豆卵磷脂在蒸發(fā)溶器底形成一層薄膜后，加入適量0. 3mol/L檸檬酸-檸檬酸 鈉緩沖液，其中乙醚溶劑與0.3mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液體積比1 1到5 1，優(yōu)選 為3 1，調(diào)節(jié)pHl-4，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合20-40分鐘，優(yōu)選為30分鐘后，用0.45微米濾膜 過(guò)濾后得到空白脂質(zhì)體溶液；②扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的制備在步驟①的空白脂質(zhì)體溶液中加入扇貝抗氧化肽干粉(見中國(guó)專利公開號(hào) CN1660892制)，添加重量配比為5_40份，優(yōu)選為20份，混合均勻后，再使用飽和Na2HPO4溶 液將PH調(diào)高3，pH梯度3-6后進(jìn)行超聲5-10分鐘，得扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體，4°C放置保存。按照本發(fā)明提供的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體(簡(jiǎn)稱脂質(zhì)體)的制備方法中，所述扇貝 抗氧化肽脂質(zhì)體的包封率按下列方法測(cè)定。取空白脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子量超濾膜截留脂質(zhì) 體，濾出液中檢測(cè)不到磷含量，說(shuō)明超濾膜對(duì)脂質(zhì)體能夠完全截留。取制備好的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體5ml至Mi 11 ipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子 量超濾膜截留脂質(zhì)體，收集一定體積的濾出液，測(cè)定其中游離的扇貝抗氧化肽(PCF)總量， 計(jì)算包封率。包封率的計(jì)算將脂質(zhì)體與游離PCF分離，測(cè)定游離的PCF量，根據(jù)下式計(jì)算脂質(zhì) 體包埋率(EE) =EE = (Ct-Cf) X 100% /Ct0其中Cf是游離PCF含量，Ct是總PCF含量。本發(fā)明提供的PCF納米脂質(zhì)體及其制備方法中，多種因素對(duì)脂質(zhì)體包埋效果都具
有一定影響。PCF載量對(duì)脂質(zhì)體包埋效果的影響。從圖1中可以看出，隨著PCF載量的提高，PCF納米脂質(zhì)體的包封率出現(xiàn)了下降的 趨勢(shì)。當(dāng)多肽添加重量配比小于20份時(shí)，包封率維持在一個(gè)很高的水平(超過(guò)90%)，但 多肽添加重量配比大于20份時(shí)，包封率便出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)，包封率隨著載量的增加反而 會(huì)下降，PCF納米脂質(zhì)體的多肽添加重量配比為5-40份，優(yōu)選為20份。膽固醇對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包埋效果的影響PCF納米脂質(zhì)體雙分子層一般是由卵磷脂和膽固醇分子相互間隔、定向排列的雙 分子層所組成。當(dāng)膽固醇嵌在脂雙層中時(shí)，疏水部分夾在脂雙層的“柵欄”之間，頭部卻在 極性區(qū)，可以調(diào)節(jié)雙分子層的流動(dòng)性和通透性。膽固醇具有調(diào)節(jié)膜流動(dòng)性及穩(wěn)定卵磷脂雙 分子膜的功能，能夠適當(dāng)提高的包封率和穩(wěn)定性。固定卵磷脂的加量為200份，改變膽固醇 添加量可以影響脂質(zhì)體的包封率，結(jié)果如圖2所示。PCF納米脂質(zhì)體的包封率隨著膽固醇的 量的增加出現(xiàn)了先增加后減少的趨勢(shì)，膽固醇嵌入到脂質(zhì)膜中增強(qiáng)了膜的剛性和致密度， 水合過(guò)程中提高了 PCF納米脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性，使得PCF納米脂質(zhì)體的包封率增加。但當(dāng) 膽固醇的嵌入量超過(guò)一定范圍后，膽固醇會(huì)干擾脂雙分子層結(jié)構(gòu)，使膠液的相變溫度降低，使囊泡內(nèi)容物快速滲出，降低了包封率。當(dāng)膽固醇添加重量配比為30-90份，優(yōu)選為50份， 卵磷脂重量配比為200份時(shí)，PCF納米脂質(zhì)體的包封率最高，達(dá)到了 91. 9%。吐溫80對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包埋效果的影響表面活性劑能使PCF納米脂質(zhì)體混懸液中存在膠團(tuán)和乳劑，其疏水端插入雙分子 膜，親水端使PCF納米脂質(zhì)體高度親水，防止PCF納米脂質(zhì)體間相互聚集融合和沉淀，它還 改變了 PCF納米脂質(zhì)體卵磷脂分子的排列方式和運(yùn)動(dòng)方式，導(dǎo)致膜縱向有序性(卵磷脂分 子碳?xì)滏滈g的緊密情況)增大，流動(dòng)性降低，穩(wěn)定性提高。結(jié)果如圖3所示。在一定范圍內(nèi) 提高吐溫80的含量可以提高PCF納米脂質(zhì)體的包封率，但當(dāng)吐溫80的濃度達(dá)到一定值時(shí)， 卵磷脂將被逐漸增溶成混合膠束，PCF納米脂質(zhì)體的雙分子層結(jié)構(gòu)遭到破壞。考慮到吐溫 80在工業(yè)中添加有一定的限制，如果膽固醇添加重量配比為30-90份，優(yōu)選為50份，卵磷脂 重量配比為200份時(shí)，吐溫80的添加量為20-100份，優(yōu)選為60份。乙醚與檸檬酸_檸檬酸鈉緩沖液體積比對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包埋效果的影響有機(jī)溶劑可以溶解卵磷脂和膽固醇，使其易于成膜，但有機(jī)溶劑的用量會(huì)影響PCF 納米脂質(zhì)膜的形成以及PCF納米脂質(zhì)體貯藏過(guò)程的穩(wěn)定性，乙醚與檸檬酸_檸檬酸鈉緩沖 液體積比對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包封率的影響結(jié)果如圖4所示。乙醚的用量在一定范圍內(nèi)時(shí)， 乙醚能夠溶解卵磷脂以及膽固醇，促進(jìn)脂質(zhì)膜的形成，提高膜的通透性，使PCF易于進(jìn)入膜 內(nèi)，對(duì)包封率的提高具有促進(jìn)作用。但乙醚用量大，體系中殘留的乙醚就會(huì)多，殘留的乙醚 會(huì)破壞脂質(zhì)體膜，使得包容物容易泄露，而且乙醚用量過(guò)多對(duì)人體也會(huì)造成傷害。乙醚與檸 檬酸-檸檬酸鈉緩沖液體積比從1 1到5 1，優(yōu)選為3 1。pH梯度對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包埋效果的影響根據(jù)Henderson-Hasselbalch理論，每個(gè)pH單位的變化會(huì)產(chǎn)生濃度10倍之差。如 果制造PCF納米脂質(zhì)體內(nèi)外pH梯度差為3個(gè)單位時(shí)，理論上就會(huì)造成內(nèi)外濃度的1000倍 之差。不同PH梯度(pHl-4，pH2-5，pH3_6，pH4_7)對(duì)PCF納米脂質(zhì)體包封率的影響，發(fā)現(xiàn) PH4-7梯度制備的PCF納米脂質(zhì)體都具有較高的包封率，為91. 39%，而pH3-6梯度的包封 率為88. 27%。但是pH4-7梯度制得的PCF納米脂質(zhì)體穩(wěn)定性較差，容易分層，因而確定制 備PCF納米脂質(zhì)體的pH梯度范圍為pH3-6。
PH梯度pHl-4pH2-5pH3-6pH4-7包封率(％)47. 2468. 0788. 2791. 39此外PCF納米脂質(zhì)體的制備過(guò)程中，需要控制水合溫度高于卵磷脂的相變溫度， 這樣才能使其在水溶液中分散均勻。經(jīng)試驗(yàn)確定，水合溫度定為50°C較合適，低于50°C時(shí) 制備的PCF納米脂質(zhì)體包封率迅速降低，而高于50°C時(shí)，卵磷脂容易氧化水解。在制備PCF納米脂質(zhì)體的過(guò)程中，通常需要通過(guò)外加能量使體系中的粒子再分 散，以獲得粒徑小且分布均勻的PCF納米脂質(zhì)體，增加體系的穩(wěn)定性，本發(fā)明采用超聲處 理，超聲處理可以減小PCF納米脂質(zhì)體的顆粒度，使其分散更加均勻，有利于肽的跨膜運(yùn) 動(dòng)，提高包封率，但是超聲強(qiáng)度過(guò)大會(huì)破壞PCF納米脂質(zhì)體膜從而引起芯材的泄露，會(huì)產(chǎn)生 大量的熱，也容易引起磷脂的氧化。因此，超聲強(qiáng)度確定為200W，超聲時(shí)間為5-lOmin(間歇 超聲)。本發(fā)明提供了 PCF納米脂質(zhì)體及其制備方法，優(yōu)選確定了 pH梯度法制備脂質(zhì)體工藝和配方為膽固醇重量配比為50份，卵磷脂重量配比為200份，吐溫80重量配比為60份， 海洋PCF添加重量配比為20份，乙醚與0.3mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液體積比3 1， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度50°C，水合時(shí)間30min，pH梯度3_6，超聲時(shí)間5min。按照上述配方和工藝制 得的海洋活性PCF脂質(zhì)體的包封率能達(dá)到97. 29%，所制得脂質(zhì)體為圓球形單室脂質(zhì)體(圖 5)，由馬爾文電位儀NanO-ZS90對(duì)所制脂質(zhì)體粒徑主要分布及電位進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，優(yōu) 化工藝所得脂質(zhì)體的粒徑平均分布在200nm以下，Zeta電位結(jié)果表明，抗氧化肽脂質(zhì)體帶 負(fù)電荷，平均Zeta電位為-21. 3mV，具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性。粒徑小于200nm，占總含量的85% 以上(圖6)，作為化妝品的活性成分符合透皮吸收的要求，可以直接作為化妝品原料作用。 將扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體分別置于室溫和低溫環(huán)境下(4 6°C)，每隔一段時(shí)間測(cè)量其包封 率。一般來(lái)說(shuō)，長(zhǎng)期存放后的脂質(zhì)體局部會(huì)形成較大的膜塊，在貯存過(guò)程中，脂質(zhì)體會(huì)發(fā)生 絮凝，所包容的活性成分也會(huì)逐漸泄漏。但低溫環(huán)境可以延緩這一變化，故包封率的衰減得 到明顯控制(圖7)，穩(wěn)定性有所加強(qiáng)，本發(fā)明中的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體在4°C下一個(gè)月內(nèi)基 本保持穩(wěn)定，包封率保持在95%以上。本發(fā)明提供了一種扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體及其制備方法，采用本發(fā)明獲得的扇 貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體為球形單室脂質(zhì)體，形態(tài)均一，包封率高達(dá)97. 29%，粒子直徑平均 分布在200nm以下，總含量在85%以上，平均Zeta電位為-21. 3mV，穩(wěn)定性較強(qiáng)，包封率在 4°C下一個(gè)月內(nèi)基本保持穩(wěn)定。


圖1為PCF載量對(duì)脂質(zhì)體包埋效果的影響圖2為膽固醇加量對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響圖3為吐溫80對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響圖4為乙醚與檸檬酸_檸檬酸鈉緩沖液體積比對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響圖5為扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的單層膜結(jié)構(gòu)電鏡圖像圖6為扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的粒徑分布7扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的穩(wěn)定性
具體實(shí)施例方式本發(fā)明用下列實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明保護(hù)范圍并非限于下列實(shí)施 例。實(shí)施例1取大豆卵磷脂200mg、膽固醇50mg和吐溫8060mg，溶解于30ml乙醚中，恒溫50°C 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑，使磷脂在蒸發(fā)瓶底形成一層薄膜。加入0. 3mol/L檸檬酸-檸檬 酸鈉緩沖液(PH = 3) 10ml，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合30min后，使用0. 45微米濾膜過(guò)濾后得到空 白脂質(zhì)體溶液。取空白脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子量超濾膜截留脂質(zhì) 體，濾出液中檢測(cè)不到磷含量，說(shuō)明超濾膜對(duì)脂質(zhì)體能夠完全截留。在空白脂質(zhì)體溶液中加入PCF干粉，添加量為20mg，混合均勻，使用飽和Na2HP04 溶液將PH調(diào)高3，使pH到6，超聲5min左右，即得PCF納米脂質(zhì)體樣品，4°C放置保存。
取制備好的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子 量超濾膜截留脂質(zhì)體，收集一定體積的濾出液，測(cè)定其中游離的PCF總量，計(jì)算包封率為 97. 29%，使用馬爾文電位儀NanO-ZS90對(duì)所制脂質(zhì)體粒徑主要分布及電位進(jìn)行測(cè)定，粒子 直徑平均為194nm，帶負(fù)電位，具有較強(qiáng)穩(wěn)定性，4°C下貯存包封率在一個(gè)月內(nèi)維持在95% 以上。實(shí)施例2取大豆卵磷脂150mg、膽固醇30mg和吐溫80為20mg，溶解于30ml乙醚中，恒 溫50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑，使磷脂在蒸發(fā)瓶底形成一層薄膜。加入0. 3mol/L檸檬 酸_檸檬酸鈉緩沖液(PH = 3) 10ml，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合30min后，使用0. 45微米濾膜過(guò)濾 后得到空白脂質(zhì)體溶液。取空白脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子量超濾膜截留脂質(zhì) 體，濾出液中檢測(cè)不到磷含量，說(shuō)明超濾膜對(duì)脂質(zhì)體能夠完全截留。在空白脂質(zhì)體溶液中加入PCF干粉，添加量10mg，混合均勻，使用飽和Na2HP04溶 液將PH調(diào)高3，使pH到6，超聲5min左右，即得PCF納米脂質(zhì)體樣品，4°C放置保存。取制備好的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子 量超濾膜截留脂質(zhì)體，收集一定體積的濾出液，測(cè)定其中游離的PCF總量，計(jì)算包封率為 90. 33%，使用馬爾文電位儀NanO-ZS90對(duì)所制脂質(zhì)體粒徑主要分布及電位進(jìn)行測(cè)定，粒子 直徑平均為205nm，帶負(fù)電位，具有較強(qiáng)穩(wěn)定性，4°C下貯存包封率在一個(gè)月內(nèi)維持在85% 以上。實(shí)施例3取大豆卵磷脂250mg、膽固醇90mg和吐溫80100mg，溶解于30ml乙醚中，恒溫50°C 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑，使磷脂在蒸發(fā)瓶底形成一層薄膜。加入0. 3mol/L檸檬酸-檸檬 酸鈉緩沖液(PH = 4) 10ml，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合30min后，使用0. 45微米濾膜過(guò)濾后得到空 白脂質(zhì)體溶液。取空白脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子量超濾膜截留脂質(zhì) 體，濾出液中檢測(cè)不到磷含量，說(shuō)明超濾膜對(duì)脂質(zhì)體能夠完全截留。在空白脂質(zhì)體溶液中加入PCF干粉，添加量為40mg，混合均勻，使用飽和Na2HP04 溶液將PH調(diào)高3，使pH到7，超聲5min左右，即得PCF納米脂質(zhì)體樣品，4°C放置保存。取制備好的扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體5ml至Millipore超濾杯中超濾，使用1萬(wàn)分子 量超濾膜截留脂質(zhì)體，收集一定體積的濾出液，測(cè)定其中游離的PCF總量，計(jì)算包封率為 77. 21 %，使用馬爾文電位儀NanO-ZS90對(duì)所制脂質(zhì)體粒徑主要分布及電位進(jìn)行測(cè)定，粒子 直徑平均為218nm，帶負(fù)電位，具有較強(qiáng)穩(wěn)定性，4°C下貯存包封率在一個(gè)月內(nèi)維持在75% 以上。
權(quán)利要求
1.一種扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體，其特征在于由下列PH梯度法制備扇貝抗氧化肽的 納米脂質(zhì)體，扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體為球形單室脂質(zhì)體，形態(tài)均一，包封率高達(dá)97. 29 %， 粒子直徑平均分布在200nm以下，總含量在85%以上，平均Zeta電位為-21. 3mV，穩(wěn)定性較 強(qiáng)，包封率在4°C下一個(gè)月內(nèi)基本保持穩(wěn)定；所述PH梯度法制備扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體，包括下列步驟①空白脂質(zhì)體的制備取大豆卵磷脂、膽固醇和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯溶解于乙醚溶劑中，大豆卵磷 脂重量配比為150-250份，膽固醇重量配比為30-90份，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯重量 配比為20-100份，恒溫50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑，使大豆卵磷脂在蒸發(fā)溶器底形成一 層薄膜后，加入適量0. 3mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，乙醚溶劑與0. 3mol/L檸檬酸-檸 檬酸鈉緩沖液體積比從1 1到5 1，調(diào)節(jié)pHl-4，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合20-40分鐘后，用 0. 45微米濾膜過(guò)濾后得到空白脂質(zhì)體溶液；②扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的制備在步驟①的空白脂質(zhì)體溶液中加入扇貝抗氧化肽干粉重量配比為5-40份，混合均勻 后，再使用飽和Na2HPO4溶液將pH調(diào)高3，pH梯度為3_6，后進(jìn)行超聲5_10分鐘，得扇貝抗 氧化肽納米脂質(zhì)體，4 V放置保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體，其特征在于所述乙醚溶劑與0.3mol/L檸 檬酸-檸檬酸鈉緩沖液體積比為3 1，大豆卵磷脂重量配比為200份，膽固醇重量配比為 50份，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯重量配比為60份，扇貝抗氧化肽重量配比為20份。
3.權(quán)利要求1或2扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體制備方法，其特征在于pH梯度法制備扇貝 抗氧化肽納米脂質(zhì)體包括下列步驟①空白脂質(zhì)體的制備取大豆卵磷脂、膽固醇和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯溶解于乙醚溶劑中，大豆卵磷 脂重量配比為150-250份，膽固醇重量配比為30-90份，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯重量 配比為20-100份，恒溫50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑，使大豆卵磷脂在蒸發(fā)溶器底形成一 層薄膜后，加入適量0. 3mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，乙醚溶劑與0. 3mol/L檸檬酸-檸 檬酸鈉緩沖液體積比從1 1到5 1，調(diào)節(jié)pHl-4，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)水合20-40分鐘后，用 0. 45微米濾膜過(guò)濾后得到空白脂質(zhì)體溶液；②扇貝抗氧化肽脂質(zhì)體的制備在步驟①的空白脂質(zhì)體溶液中加入扇貝抗氧化肽干粉重量配比為5-40份，混合均勻 后，再使用飽和Na2HPO4溶液將pH調(diào)高3，pH梯度為3_6，后進(jìn)行超聲5_10分鐘，得扇貝抗 氧化肽納米脂質(zhì)體，4 V放置保存。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體及其制備方法，該扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體通過(guò)pH梯度法由扇貝抗氧化肽、大豆卵磷脂、膽固醇和吐溫80制備而成。本發(fā)明扇貝抗氧化肽納米脂質(zhì)體為球形單室脂質(zhì)體，形態(tài)均一，包封率高，使用性能穩(wěn)定，粒子直徑平均分布在200nm以下，符合化妝品的透皮吸收要求，可直接作為化妝品材料應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61Q19/00GK102085157SQ201110029749
公開日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2011年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月27日
發(fā)明者劉均忠, 孫謐, 王偉, 王海英, 盛軍, 紀(jì)曉峰, 鄭蘭紅, 鄭媛 申請(qǐng)人:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所