專利名稱：利用δ阿片受體促效藥來防止下泌尿系功能障礙的組合物和方法
背景技術：
發(fā)明領域本發(fā)明涉及哺乳動物的下泌尿系尿道功能障礙，尤其涉及使用δ阿片受體激動劑來調節(jié)控制排尿的肌肉的收縮和舒張以治療尿道疾病的組合物和方法。
相關技術說明國家腎尿疾病咨詢委員會(The National Kidney and UrologicDiseases Advisory Board)估計尿失禁(UI)影響了約17,000,000美國人。失禁是指很多人與衰老過程相關。然而，失禁不是衰老過程的自然部分。其可發(fā)生于任何年齡段，并可由多種原因引起，包括感染、藥物作用、肌肉弱化、激素不平衡、神經性疾病和靜止不動。失禁在很大程度上是被忽視的問題，這是由于受影響的人感到困窘、孤立、恥辱并不愿意討論這種問題的原因。
自制需要從中樞神經系統(tǒng)(CNS)輸入，并組合下泌尿系功能。CNS的作用是復雜的，并且沒有被完全理解，然而可以認為副交感神經、交感神經和體神經促使維持自制中所涉及的主要結構的活動。排尿(撒尿)的生理作用很復雜；然而基本上應該理解失禁的病因和治療。由于尿通過輸尿管進入膀胱，所以逼尿肌擴張而使得膀胱膨脹。由于膀胱裝入尿，所以膀胱壁內的擴張受體受到刺激，從而得到關于膀胱內尿量的大腦信息。當膀胱體積較小時，交感神經系統(tǒng)受到刺激，并且副交感神經系統(tǒng)受到抑制，從而使得內部括約肌收縮并且逼尿肌舒張。當膀胱被裝滿并需要排尿時，從大腦來的抑制信號被刺激副交感神經系統(tǒng)從而使得逼尿肌收縮、抑制交感神經系統(tǒng)從而使得內部括約肌舒張的興奮所代替。然后膀胱內壓升到超過尿道內阻力的值，從而尿流出膀胱。一旦膀胱排空，那么大腦再次發(fā)送使得副交感神經受抑制、交感神經受刺激的興奮，這樣逼尿肌舒張、內部括約肌收縮。膀胱也再次易于裝尿。因此，由于下泌尿系涉及多種CNS系統(tǒng)，所以通常難于預測藥物和疾病的影響。
不同類型的尿道功能障礙表現(xiàn)出不同的癥狀。例如，排尿困難包括尿頻、遺尿和尿急，并可由膀胱炎、前列腺炎、良性前列腺肥大(BPH)或神經性疾病引起。遺尿指尿在晚上或睡眠中無意流出。
確定出尿道功能障礙的類型和病因后，可以進行治療，各種治療包括行為性、手術和/或藥理治療技術。行為治療可以包括肌肉鍛煉、調節(jié)時間或吸取的流體量、和/或及時排空。然而，這種方法取決于動機，并且在某些情況下如公共機構中取決于負責管理失禁患者的看護員。
手術可以醫(yī)治某些疾病，如阻塞、前列腺增大、骨盆肌弱化，但手術被認為是最后考慮的手段，這是因手術伴隨有固有的并發(fā)癥。
藥物治療更常被用作尿道功能障礙防止技術，而代替行為治療和手術。已經使用了各種治療藥物，包括α-腎上腺素促效藥，如去甲麻黃堿和偽麻黃堿；抗膽堿藥，如奧昔布寧、丙胺太林、雙環(huán)維林和托特羅定；α-腎上腺素拮抗劑，如哌唑嗪、特拉唑嗪和多沙唑嗪；及三環(huán)抗抑郁劑。然而，這些藥物并不是對所有患者有效。更重要的是，這些藥物的副作用(如口干、惡心、失眠、虛弱和/或疲勞)會防礙治療或使患者產生抵觸。此外，疾病態(tài)或與其它藥物的相反作用會禁忌這些化合物的使用，或需要較小劑量而不能有效地防止尿道功能障礙。
因此，目前的藥物治療不能成功地解決這些與尿道功能障礙相關的問題。由此，本領域持續(xù)尋找改進的治療尿道功能障礙的藥劑，其能夠方便地使用而沒有障礙，并且不會產生與現(xiàn)有治療方法相關的問題。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個方面涉及通過給予需要這種治療的受試者藥物組合物來防止尿道功能障礙的方法，該藥物組合物含有有效量的δ阿片受體促效藥以降低尿道功能障礙的作用。該藥物組合物還含有額外的活性藥劑，已發(fā)現(xiàn)這些藥劑可有效地治療尿道功能障礙，盡管其具有某些副作用，例如α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑，從而這種劑量降低的額外活性藥劑與δ阿片受體促效藥組合使用可改善或者甚至消除這種副作用，或因組合而得到其它的協(xié)同作用。
本發(fā)明的另一方面涉及一種降低尿道功能障礙作用的方法，該方法包括給予該受試者藥物組合物，該藥物組合物含有有效量的δ阿片受體促效藥，該促效藥選自
及其藥學上可接受的鹽和酯。
本發(fā)明的另一方面涉及一種降低尿道功能障礙作用的方法，該方法包括給予該受試者有效量的至少一種下式化合物
其中Ar1是含有選自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳環(huán)或雜環(huán)芳香環(huán)，可以包括苯硫基、噻唑基、呋喃基、吡咯基、苯基或吡啶基，并且在其第一個碳原子上具有取代基Y，在其第二個環(huán)碳上具有取代基R1，Y選自氫；鹵素；C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基；C1-C6鹵代烷基；C1-C6烷氧基；C3-C6環(huán)烷氧基；式SR8的硫化物，其中R8是C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基、或C5-C10芳基；式SOR8的亞砜，其中R8與上述相同；式SO2R8的砜，其中R8與上述相同；腈；C1-C6?；皇絅HCO2R8的烷氧羰氨基(氨基甲?；?，其中R8與上述相同；羧酸或其酯、酰胺或鹽；式CH2NR9R10的氨甲基，其中R9和R10可相同或不同，并可以是氫、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C2-C6羥烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6環(huán)烷基或C5-C10芳基，或R9和R10一起形成5或6個原子的環(huán)，該環(huán)原子選自N和C；式CONR9R10的碳酰胺，其中R9和R10與上述相同，或其C2-C30肽共軛物；及式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10與上述相同；G是碳或氮；R1是氫、鹵素或C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基；R3、R4和R5可相同或不同，并獨立地選自氫和甲基，其中R3、R4或R5中的至少一個不是氫，條件是甲基的總個數(shù)不超過2，R3、R4和R5中的任何兩個可形成1～3個碳原子的橋；R6選自氫；C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基；C3-C6環(huán)烷基；具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基；具有C1-C4烷氧基和C1-C4烷基部分的烷氧烷基；C2-C4氰烷基；C2-C4羥烷基；具有C1-C4烷基部分的氨羰烷基；及R12COR13，其中R12是C1-C4亞烷基，R13是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基或羥基，或R6是 Ar2是含有選自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳環(huán)或雜環(huán)芳香環(huán)，并且在其碳原子上具有取代基X，其中X選自鹵素(氟、溴、氯、碘)、氫、羥基和其酯、羧基和其酯；羧基C1-C4烷基和其酯；羧酸、烷氧基、羥甲基和其酯；及氨基、其碳酰胺和磺酰胺；及其藥學上可接受的鹽。
出乎意料地是，上述不含有用羥基或甲基化的羥基取代的酚環(huán)的化合物對于治療尿道問題是有效的，即使用羥基取代的酚環(huán)被認為是肽和非肽配體的關鍵藥效團而用于識別δ-阿片受體并產生生理作用。Liao等(1998)，J.Med.Chem.，41，4767-4776。
在本發(fā)明進一個方面中，提供藥物組合物以實施本發(fā)明的方法。在一個實施方案中，該藥物組合物含有有效量的至少一種δ阿片受體促效藥、其藥學上可接受的鹽和酯，并組合有藥學上可接受的載體和可選擇地用于尿道功能障礙的額外活性藥劑，該促效藥選自

該額外的活性藥劑包括但不限于α-腎上腺素促效藥，如去甲麻黃堿和偽麻黃堿；抗膽堿藥，如奧昔布寧、丙胺太林、雙環(huán)維林和托特羅定；α-腎上腺素拮抗劑，如哌唑嗪、特拉唑嗪和多沙唑嗪；及三環(huán)抗抑郁劑。
其它類型的成分也可混合在該組合物中，例如賦形劑、表面活性劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、螯合劑等，這對于藥物組合物制劑和藥物傳輸領域中的所屬技術人員來講是可以理解的。
藥物組合物的給予可以在預定的劑量方案內進行，從而使δ阿片受體促效藥可有效地治療下泌尿系功能障礙。
藥物組合物的傳輸可通過任何能夠有效減輕尿道功能障礙的給予途徑來進行，包括但不限于口服、直腸、陰道、外用、舌下、粘膜、鼻內、眼睛、皮下、肌肉內、靜脈內、皮膚、脊髓、鞘內、關節(jié)內、動脈內、蛛網膜下、支氣管內、淋巴內、尿道內、肺腔注射和尿道栓劑給藥。
本發(fā)明的另一方面涉及一種用于治療尿道功能障礙例如遺尿、失禁、或尿痛的試劑盒，其中該試劑盒包括本文所述的δ阿片受體促效藥，例如藥學上可接受的鹽或酯形式，其中提供有效量的該阿片受體促效藥以降低尿道功能障礙的作用。該試劑盒也可包括關于給藥、劑量頻率、患者應遵守的禁忌等的書面說明，其置于試劑盒容器中，如傳送和/或存儲容器。
從下面的說明書和所附的權利要求書中可更清楚本發(fā)明的其它方面、特征和實施方案。
附圖簡要說明

圖1A、B和C總結了本發(fā)明示例性的δ阿片受體促效藥的δ阿片受體親合性。
圖2A、B和C總結了通過靜脈注射給予的本發(fā)明示例性的δ阿片受體促效藥的兩種尿動力學參數(shù)的膀胱內壓評估結果。
圖3總結了通過口服給予的本發(fā)明示例性的δ阿片受體促效藥的兩種尿動力學參數(shù)的膀胱內壓評估結果。
圖4表明經歷部分尿道限制的受試動物的膀胱內壓跡線及口服給予本發(fā)明化合物1的影響。跡線1a、1c；2a，2c；和3a，3c表明膀胱收縮和排空頻率引起的排尿壓力變化。跡線1b，1d；2b，2d；和3b，3d表明收集在盒子中的排空體積。
發(fā)明詳細說明及其優(yōu)選的實施方案以下面引述的美國專利的全部內容作為參考Chang等，美國專利5,552,404，1996年9月3日公布；Chang等，美國專利5,574,159，1996年11月12日公布；Chang等，美國專利5,658,908，1997年8月19日公布；Chang等，美國專利5,681,830，1997年10月28日公布；Chang等，美國專利5,854,249，1998年12月29日公布；Chang等，美國專利5,807,858，1998年9月15日公布；Chang等，美國專利5,985,880，1999年11月16日公布；及Chang等，美國專利6,300,332，2001年10月9日公布。
δ阿片受體存在于包括人在內的多種物種的中樞和外圍神經系統(tǒng)中。δ阿片受體被認為在多種身體功能中起作用，如循環(huán)和疼痛系統(tǒng)、免疫調節(jié)作用和和胃腸疾病。
促效藥是與δ阿片受體結合從而通過產生藥理反應來影響生化和/或生理途徑的藥劑。阿片受體活動的主要神經作用之一是阻隔斷神經傳遞素的釋放，如乙酰膽堿和去甲腎上腺素。盡管不希望限于任何特定的作用機理，但是可以認為用本發(fā)明公開的特定的δ阿片受體促效藥之一活化δ阿片受體最終導致在副交感神經末端的乙酰膽堿的釋放，從而防止肌肉收縮而使撒尿同時延遲。
定義在詳細說明本發(fā)明之前，可以理解本發(fā)明不限于特定的藥物傳輸系統(tǒng)。也可以理解本文所用的術語僅用于闡明特定的實施方案，而不是用來限制。
在說明和要求保護本發(fā)明中，下面的術語具有下面所述的定義。
本文所用的″皮膚″傳輸包括皮膚(或″經皮″)及經粘膜給藥，即使藥物通過皮膚或粘膜組織傳輸進血流。
本文所用的″外用給藥″指外用藥物或藥學上的活性藥劑傳輸至皮膚或粘膜。
本文所用的″載體″或″賦形劑″指適于藥物給予的載體材料。有用的載體和賦形劑包括任何這種本領域公知的材料，例如任何液體、凝膠、溶劑、液體稀釋劑、穩(wěn)定劑等，它們是非毒性的，并不與組合物的其它成分以有害的方式相互作用。
本文所用的用于治療尿道疾病的化合物的″有效量″是指可引起這種疾病的至少一種癥狀或參數(shù)得到改善的量。
用于治療尿道功能障礙的δ阿片受體促效藥在本發(fā)明的方法中，有效量的δ阿片受體促效藥被給予至患有或易患有尿道功能障礙的受試者。在第一實施方案中，適合的δ阿片受體促效藥包括下面的化合物
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟芐基)-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺 4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(4-氟芐基)-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺 3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)芐基)苯氧乙酸
3-((α-S)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺 3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺 3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟丙基)-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺 3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚
4-((α-S)-α-((2S，5R)-4-(4-溴芐基)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺 N-(3-氟苯基)-N-甲基-3-((哌啶-4-亞基)(3-羥基苯基)甲基)-苯甲酰胺 3-((S)-((2S，5 R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)-甲基)苯酚 4-{4-[(R)-(4-二甲基氨磺?；?苯基)-(3-羥基苯基)-甲基]-(2S，5R)-二甲基-哌嗪-1-甲基}-苯甲酸 N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羥基苯基)甲基)苯甲酰胺及其藥學上可接受的鹽、酯和活性代謝物。這種化合物的組和物也預期包括在本發(fā)明的范圍內。
δ阿片受體促效藥也可以其酰胺或前藥和/或組合物的形式給予?；钚运巹┑柠}、酯、酰胺和前藥可使用合成有機化學領域的所屬技術人員公知的標準方法進行制備，其公開在例如J.March，Advanced有機ChemistryReactions，Mechanisms and Structure，4th Ed.(New YorkWiley-Interscience，1992)中。例如，酸加成鹽可使用常規(guī)方法從自由堿來制備(通常其中藥物的中性形式包括中性-NH2基團)，這包括與適合的酸反應。一般地，活性藥劑的堿性形式可以溶解在極性有機溶劑中，例如甲醇或乙醇，而酸被加入其中。生成的鹽或者沉淀，或者通過加入少量的極性溶劑而從溶液中析出。用于制備酸加成鹽的適合酸包括有機酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲基磺酸、乙基磺酸、p-甲苯磺酸、水楊酸等，及無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。通過用適合的堿處理，酸加成鹽可以轉化成自由堿。反之，在活性藥劑上的酸部分的堿性鹽的制備可通過相似方式使用藥學上可接受的堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣、三甲胺等來制備。
藥學上可接受的鹽的實例包括衍生于適合堿如堿金屬(例如鈉、鉀)、堿土金屬(例如鈣、鎂)、銨和NR’4+(其中R′是C1-C4烷基)的鹽。藥學上可接受的氨基鹽包括有機羧酸鹽，如乙酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、乳糖酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽；有機磺酸鹽，如甲基磺酸鹽、乙基磺酸鹽、羥乙基磺酸鹽、苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽；及無機酸鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽和氨基磺酸鹽。具有羥基的化合物的藥學上可接受的鹽由這種化合物的陰離子與適合的陽離子如Na+、NH4+、或NR’4+(其中R′例如是C1-4烷基)結合而成。
酯的制備包括功能化δ阿片受體促效藥中的羥基和/或羧基功能化。羥基酯通常是自由醇的?；〈难苌?，即衍生于式RCOOH的羧酸，其中R是烷基，并優(yōu)選是低級烷基。酯可在需要時通過常規(guī)的水解過程再轉化成自由酸。藥學上可接受的酯的實例包括本發(fā)明化合物中的羥基的羧酸酯，其中酯的羧酸部分中的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如正丙基、叔丁基、正丁基)、烷氧烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧烷基(例如苯氧甲基)和芳基(例如，苯基)；烷基-，芳基-或芳基烷基磺?；?例如甲基磺酰基)；氨基酸酯(例如L-纈氨酸酯或L-異亮氨酯)；二羧酸酯(例如半琥珀酸酯)；碳酸酯(例如乙氧羰基酯)；氨基甲酸酯(例如二甲基氨基羰基酯、(2-氨基乙基)氨基羰基酯)；及無機酸酯(例如單、二或三磷酸酯)。在藥物分子結構中的羧基的酯通?？蓮腃1-C4醇(例如乙醇、丙醇)或芳烷基醇(例如芐醇)來制備。酰胺和前藥也可按相似的方式來制備。
δ阿片受體促效藥的其它衍生物和類似物可使用合成有機化學領域所屬技術人員公知的常規(guī)技術來進行制備，或可參照相關文獻來制備。此外，手性活性藥劑可以是純異構體形式，或它們可作為異構體的外消旋混合物形式來給藥。
藥物制劑及給藥方式本發(fā)明的制劑包括適于口服、鼻內、外用(包括口腔和舌下)、直腸、陰道和/或腸胃外給藥的那些。取決于想用的給藥方式，藥物組合物可以是固體、半固體或液體劑量形式，例如片劑、栓劑、藥丸、膠囊、粉末、液體、懸浮液、霜劑、藥膏、洗液等，優(yōu)選的是單位劑形適于單次精確給藥。組合物包括有效量的δ阿片受體促效藥及需要時的藥學上可接受的載體，此外也可包括其它藥劑、佐劑、稀釋劑、緩沖劑等。給于的活性藥劑的量應取決于受治療的受試者、受試者的體重、給藥方式及診斷醫(yī)生的判斷。
尿道疾病及其癥狀包括尿急、尿頻、失禁、尿漏、遺尿、尿痛、尿緩及難于排空膀胱。額外的參數(shù)是尿體積。用于治療這種疾病的δ阿片受體促效藥的有效量可通過本領域中的實驗來確定，如建立多種劑量和頻率，并與實驗單元作比較?？梢岳斫馊魏闻R床上或統(tǒng)計顯著性的任何癥狀或不利方面的削弱都在本發(fā)明的范圍內。臨床上顯著性削弱指患者和/或醫(yī)生可察覺到這一現(xiàn)象。
單個患者可以同時患有幾種尿痛癥狀，如尿急和尿頻，它們均可通過本發(fā)明的方法來降低。在失禁的情況下，尿頻的降低或不希望通過的尿體積的降低都被認為是治療方法的有益作用。
可與載體材料混合以產生單次劑量形式的δ阿片受體促效藥的量優(yōu)選是可有效治療尿道疾病的量。一般地，δ阿片受體促效藥的量約為總制劑重量的1％～99％，優(yōu)選約為5％～70％，最優(yōu)選約為10％～30％。給予的δ阿片受體促效藥的量還取決于受治療的受試者、受試者的體重、給藥方式及診斷醫(yī)生的判斷。
對于固體組合物而言，常規(guī)非毒性的固體載體包括例如藥物級甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等。液體藥物給予組合物可以例如通常將本文所述的活性化合物和可選擇的藥物佐劑在賦形劑例如水、鹽水、水性葡萄糖、甘油、乙醇等中溶解、分散等來制備，從而形成溶液或懸浮液。需要時，被給予的藥物組合物也可含有少量的非毒性的輔助物質，如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑等，例如乙酸鈉、單月桂酸山梨聚糖酯、三乙醇胺乙酸鈉、三乙醇胺油酸鹽等。實際上制備這種劑形的方法對本領域所屬技術人員是公知或清楚的；例如，參見Remingtonthe Science andPractice of Pharmacy，19thEd.(Easton，Pa.Mack Publishing Co.，1995)。
對于口服給藥，組合物通常是片劑或膠囊形式，或可以是水性或非水溶液、懸浮液或糖漿形式。片劑和膠囊是優(yōu)選的口服給藥形式?？诜玫钠瑒┖湍z囊一般包括一種或多種常用的載體，如乳糖和玉米淀粉。通常也可加入潤滑劑，如硬脂酸鎂。當使用液體懸浮液時，本發(fā)明的δ受體促效藥可與乳化劑或懸浮劑混合。需要時也可加入香味劑、著色劑和/或甜味劑。其它可選擇地加到口服制劑中的成分包括但不限于防腐劑、懸浮劑、增稠劑等。
如果使用腸胃外給藥，那么通常使用注射。注射的制劑可制成常規(guī)形式，如液體溶液或懸浮液，在注射前適于溶解或懸浮在液體中的固體形式，或乳化液。優(yōu)選地，使用適合的載體、分散劑或潤濕劑及懸浮劑根據(jù)本領域公知的技術配制無菌注射懸浮液。無菌注射制劑也可以是非毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液?？梢允褂玫目山邮艿妮d體和溶劑是水、Ringer′s溶液和等滲壓氯化鈉溶液。此外，無菌固定油、脂肪酯或多元醇也常用作溶劑或懸浮介質。腸胃外給藥另一種可選擇的途徑是使用較低釋放或持續(xù)釋放系統(tǒng)，從而可保持恒定的劑量水平。
活性藥劑可通過適于尿道藥物傳輸?shù)乃幬镏苿﹣斫o予。這種制劑含有一種或多種選定的載體或賦形劑，如水、硅樹脂、蠟、凡士林油、聚乙二醇(″PEG″)、丙二醇(″PG″)、脂質體、糖如甘露醇和乳糖和/或各種其它的材料，特別優(yōu)選的是聚乙二醇及其衍生物。
優(yōu)選的是傳輸劑型的本發(fā)明化合物，其可提供可控制或持續(xù)釋放δ阿片受體促效藥。在這種情況下，劑型通常包括可生物相容、可生物降解材料，通常是可生物降解的聚合物。這種聚合物的實例包括聚酯、聚烷基氰基丙烯酸酯、聚原酸酯、聚酸酐、白蛋白、凝膠和淀粉。這些和其它的聚合物可被用來提供可生物降解的微粒，其能夠控制和持續(xù)釋放藥物，從而最小化所需要的劑量頻率。
本發(fā)明的化合物也可通過皮膚或粘膜組織使用常規(guī)皮膚藥物傳輸系統(tǒng)來傳輸，即皮膚″貼片″，其中本發(fā)明的組合物通常包含在用作藥物傳輸裝置被粘貼于身體表面上的層壓結構內。在這種結構中，藥物組合物通常包含在用于構成上方支持層下面的層或″存儲器″中。這種層壓裝置可以含有一個存儲器，或者其也可含有多個存儲器。在一個實施方案中，存儲器包括藥學上可接受的接觸粘合材料的聚合基質，其用于在藥物傳輸中將系統(tǒng)粘合到皮膚上。適合的皮膚接觸粘合材料的實例包括但不限于聚乙烯、聚硅氧烷、聚異丁烯、聚丙烯酸酯、聚氨酯等。可選擇地，含有存儲器和皮膚接觸粘合劑的活性藥劑以分離層和不同層存在，并且粘合劑在存儲器之下，在這種情況下其可以是上述的聚合基質或可以是液體或凝膠存儲器，或者也可以采用其它形式。層壓層中的支持層用作這種裝置的上表面，并構成層壓結構的基本結構元件，從而可使裝置具有柔軟性。選定用作支持層的材料對于活性藥劑和存在的任何其它基本上是不滲透的。
可選擇地，本發(fā)明的藥物組合物可以栓劑形式來直腸給藥。這些可通過將藥劑與適合的無刺激性賦形劑混合來制備，這種賦形劑在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因而會在直腸中熔化，從而釋放藥物。這種材料包括可可油、蜂蠟和聚乙二醇。栓劑的重量通常約為1mg～50mg。然而，本領域所屬技術人員可以理解栓劑的大小可以隨活性藥劑的功效、組合物的性質和其它因素而變化。
本發(fā)明的藥物組合物也可以鼻內氣溶膠或吸入給藥。鼻內噴霧制劑包括活性化合物的純化水溶液，其含有防腐劑和等滲壓試劑。這種制劑優(yōu)選被調節(jié)到與鼻內粘膜相容的pH和等滲壓態(tài)。這種組合物可根據(jù)藥物制劑領域中公知的技術來制備，并可制成鹽水溶液，同時應用芐醇或其它適合的防腐劑、吸收促進劑以增強生物可用性、促進劑如氟碳或氮和/或其它常規(guī)穩(wěn)定劑或分散劑。
本發(fā)明的δ阿片受體促效藥可制備成用于外用藥物輸送的制劑，如藥膏和霜劑。藥膏是半固體制劑，其通常以礦脂或其它的礦脂衍生物為基礎。含有選定的δ阿片受體促效藥的霜劑在本領域是公知的粘性液體或半固體乳狀液，或是水包油或是油包水。霜劑是可水洗的，并含有油相、乳化劑和水相。油相有時也稱為″內部″相，其通常由礦脂和脂肪醇如十六烷基或十八烷基醇組成；水相盡管通常不是必須的，但其體積超過油相，并通常含有保濕劑。霜劑中的乳化劑通常是非離子、陰離子、陽離子或兩性表面活性劑。本領域所屬技術人員可以理解，特定的藥膏或霜劑可使活性藥劑的傳輸最優(yōu)化。對于其它載體或賦形劑而言，藥膏應該是惰性、穩(wěn)定、非刺激性和非敏感性的。
眼用制劑可按與鼻內噴霧相似的方法來制備，除了pH和等滲壓因素優(yōu)選調節(jié)到適合眼用。
在某些應用中，優(yōu)選使用“向量化”形式的活性藥劑，如在脂質體或其它密封介質中封裝活性藥劑，或固定活性藥劑，例如在適合的生物分子(如選自蛋白、脂蛋白、糖蛋白和多糖)上共價結合、螯合或結合配位。
除了本發(fā)明的δ阿片受體促效藥外，上述藥物制劑還可含有一種或多種藥物活性藥劑，其中額外的活性藥劑曾被用于治療尿道功能障礙，其劑量與通常沒有本發(fā)明的δ阿片受體促效藥存在下的給予量相比較低，從而可改善或者甚至消除額外的活性藥劑的常見副作用。額外的藥物活性藥劑可以包括但不限于偽麻黃素、麻黃素、去甲麻黃堿、哌唑嗪、多沙唑嗪、特拉唑嗪、抗組胺劑、三環(huán)抗抑郁劑、奧昔布寧、丙胺太林、托特羅定、鹽酸雙環(huán)維林、消炎痛、巴氯芬、雌激素、丙咪嗪、洛沃克、thiroidazine、氟哌啶醇、苯托品、羥哌氟丙嗪、特布他林、普萘洛林、異搏定、甲基多巴、利血平、胍乙啶和鎮(zhèn)靜劑。
本發(fā)明所預期的δ阿片受體促效藥包括示意性表明的那些及其生理功能性衍生物?！迳砉δ苄匝苌铩逯干鲜龌衔锏乃帉W上可接受的鹽、醚、酯或者醚或酯的鹽，或任何其它的化合物，其中經給藥至受者其能夠提供(直接或間接)所述的化合物或其活性代謝物或殘渣。
當然，所給予的δ阿片受體促效藥的量、所用的劑量方案取決于所選定的特定δ阿片受體促效藥、欲治療的受試者的年齡和一般條件、受試者患病的嚴重度及診斷醫(yī)生的判斷。一般地，治療用的本發(fā)明化合物的有效劑量可在很大范圍內變化，這取決于所涉及到的特定疾病，在本領域中很容易確定本發(fā)明化合物的適合治療劑量對于所述的組合物在每種疾病中得到治療效果，優(yōu)選地10微克(μg)～500毫克(mg)/千克受者體重/天，更優(yōu)選為50μg～75mg/千克體重/天，最優(yōu)選為1mg～50mg/千克體重/天。在一天內所需的劑量可以按適合的時間間隔分一次、二次、三次、四次、五次、六次或更多次分劑量給予。
給藥的方式和劑量形式當然影響化合物的治療量，對于給定的治療應用這是所需要和有效的。例如，對于同樣的活性成分而言，口服給藥劑量通常至少為腸胃外給藥方法中所用的劑量水平的兩倍，例如2-10倍。在口服給藥中，本發(fā)明化合物的劑量水平可以為5-200mg/70kg體重/天。在片劑形式時，通?；钚运巹┑膭┝克綖?0-100mg/片。
一般地，當局部給藥時日劑量小于全身給藥方式的劑量，通常δ阿片受體促效藥每天給藥1至4次?？蛇x擇地，較大的原始裝填劑量可被用來得到δ阿片受體促效藥的有效水平，并可用較小的劑量保持那種水平。取決于δ阿片受體促效藥的半衰期和選定的給藥途徑的適用性，可以調節(jié)劑量方案以得到滿意的治療尿道疾病結果。
試劑盒本發(fā)明也包括患者用試劑盒，用于實施治療下泌尿系功能障礙的本發(fā)明方法。試劑盒含有欲給予的藥物組合物和/或用于給予藥物組合物的裝置(例如經尿道藥物輸送裝置，如注射器、皮膚貼片等)、用于在存儲過程中和使用前容納組合物和/或傳輸裝置并優(yōu)選是密封的容器及用于以有效方式實施給藥的說明。制劑可由單位劑型的本發(fā)明δ阿片受體促效藥組成。試劑盒可以含有相同藥劑的不同劑量的多種制劑。說明可以是書面形式或圖片形式，或可置于記錄介質上，包括磁帶和錄相帶等。
可以理解盡管已結合具體實施方案說明了本發(fā)明，但上前述說明及下面的實施例僅用于說明而不是限制本發(fā)明。本發(fā)明范圍內的其它方面、優(yōu)點和變化對于本發(fā)明領域所屬技術人員是明顯的。下面的實例闡明合成本發(fā)明化合物的優(yōu)選步驟。
除非另有所指，所有的化學試劑均購于Aldrich ChemicalCompany，Milwaukee，Wisconsin。使用商業(yè)溶劑而未經進一步純化。在磁場強度為200～600MHz的不同儀器上得到NMR譜。用Waters液相色譜系統(tǒng)進行HPLC分析，其安裝有717+自動取樣器、600E系統(tǒng)控制器和996光電二極管檢測器。使用化學電離(CI)、電子噴霧(ES)或快速原子轟擊(FAB)儀器進行質譜分析。在用硅膠GF(250微米)預涂覆的E.Merck玻璃片是進行分析性薄層色譜。使用AtlanticMicrolab，Norcross，Georgia進行元素分析。
實施例14-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟芐基)-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺[4-(N，N-二乙基氨基甲酰基)苯甲醛]將4-羧基苯甲醛(100.3g，0.67mol)溶解/懸浮在甲苯(1200mL)中，加入二甲基甲酰胺(0.15mL)，攪拌懸浮液，同時滴加亞硫酰二氯(53.5mL，87.2g，0.73mol)。在氮氣中將反應混合物加熱至回流，攪拌2h，在此期間內將醛酸但不是所有的加到溶液中。再加入亞硫酰二氯(20mL，32.6g，0.27mol)，持續(xù)回流過夜。蒸發(fā)透明的反應混合物，在無水四氫呋喃(1500mL)中溶解殘渣。將溶液在冰/水浴中冷卻，將二乙胺(173mL，122g，1.67mol(2.5當量))滴加到攪拌的溶液中。除去冰浴，持續(xù)攪拌2.5h。過濾反應混合物，除去白色晶體鹽酸二乙胺副產物。晶體用乙酸乙酯(2×600mL)洗滌，放置洗液。蒸發(fā)四氫呋喃濾液，將殘渣溶解在乙酸乙酯洗液中。隨后用1M鹽酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀釋的碳酸鈉溶液(飽和∶H2O，1∶1，2×600mL)、水(2×300mL)和飽和氯化鈉溶液(300mL)洗滌。分離有機層，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得標題化合物，淡褐色油，使用時未經進一步純化。(產率115.7g，84％)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺在氮氣中將4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(51.3g，250mmol)、苯并三唑(29.8g，250mmol)和(-)-(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(38.6g，250mmol，Chirotech Division of Dow Pharma，Cambridge，UK)的甲苯(2500mL)溶液加熱回流2.5h，同時共沸除水。在此過程中通過Dean/Stark汽水閥逐漸除去甲苯，直至反應混合物殘余體積減至約700-800mL。用無水四氫呋喃(1000mL)稀釋溶液，在冰/異丙醇浴中冷卻至～0℃，并在氮氣中攪拌，同時于～20min內通過大口雙尖針加入苯基溴化鎂(四氫呋喃中1.0M，500mL，500mmol)。在加入過程中，幾乎立即形成鎂鹽的懸浮液，但沒有稠至會防礙有效攪拌。開始時懸浮液是黃赭色，直到加入約三分之二的格氏試劑時，反應混合物快速變至紅棕色。除去冰浴，將懸浮液在環(huán)境溫度下攪拌1.5h，然后用飽和氯化銨水溶液(125mL)猝滅反應。攪拌黃色懸浮液30min，加入無水氯化鎂(125g)。將懸浮液再攪拌1小時，并過濾。濾餅用四氫呋喃(400mL)洗滌，合并濾液和洗液，蒸發(fā)至棕色油。將殘渣在乙酸乙酯(2500mL)和氫氧化鈉水溶液(1.0M，1000mL)間分配。分離有機層，依次用1MNaOH(3×1000mL)、水(3×1200mL)和飽和氯化鈉水溶液(750mL)洗滌。將乙酸乙酯(75mL)加至部分結晶的懸浮液中，從而在黑色的母液中得到淺色的晶體稠漿。過濾懸浮液，固體用少量冷的乙酸乙酯洗滌，并在室溫下真空干燥，得到輕度反白固體(38.31g)。黑色濾液和洗液蒸發(fā)成黑色油，再次靜置部分結晶。殘渣用乙酸乙酯(20mL)研磨，過濾得淡黃色晶體(4.04g)?？偖a量42.35g(40.4％)。1H NMR((CD3)2SO，500MHz)；δ0.94(d，J＝6.2Hz，3H)；1.09(d，J＝6.2Hz，3H，部分被br m，6H遮住)；1.80(m，1H)；2.09(dd，J＝11，7Hz，1H)；2.50(br m，1H，部分被DMSO遮住)；2.72(dd，J＝11，2.8Hz，1H)；2.84(dd，J＝14，7Hz，1H)；3.16(dd，J＝14，5.2Hz，1H)；3.28(br m，3H)；5.10(s，1H)，被5.09(d，J＝10.6Hz，1H)部分重疊；5.16(dd，J＝17，1.4Hz，1H)；5.79(m，1H)；7.28(m，5H)；7.38(m，2H)；7.42(d，J＝8Hz，2H)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺在氮氣中將雙(二亞芐基丙酮)鈀(1.438g，2.5mmol，Acros Organics)和1，4-雙(二苯基膦基)丁烷(1.066g，2.5mmol，Acros Organics)的四氫呋喃(20mL)溶液在室溫下攪拌15min，然后用注射器加到在氮氣中攪拌的4-((α-S)-α-(((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(20.98g，50mmol)和硫代水楊酸(9.25g，60mmol)的無水四氫呋喃(100mL)溶液中。在氮氣中于室溫下攪拌反應混合物2h，蒸發(fā)至干，將殘渣溶解在乙酸乙酯(120mL)中，用醚(300mL)稀釋。溶液用稀釋的碳酸鈉溶液(飽和∶H2O，1∶3，3×200mL)洗滌。有機溶液用戊烷(800mL)稀釋，用3M鹽酸(5×40mL)、然后1M鹽酸(3×50mL，與水(3×50mL)交替)萃取。合并水性萃取物，過濾除去少量的懸浮固體，用5M NaOH將pH調節(jié)至12。用二氯甲烷(3×150mL)萃取得到的油狀懸浮液。合并有機萃取物，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)至干，得到4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺淡黃色固體(18.07g，97.8％)。產物在薄層色譜(硅膠，EM60F254，乙酸乙酯中4％NH4OH/10％EtOH，Rf＝0.25)表現(xiàn)為單點，使用時未經進一步純化。C24H33N3O0.2H2O計算值C，75.24；H，8.79；N，10.97。理論值C，75.24；H，8.87；N，10.86％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ0.93(d，J＝6.3Hz，3H)；1.12(br m，3H)；1.20(d，J＝6.1Hz，3H)；1.24(br m，3H)；1.55(dd，J＝9.7，11.3Hz，1H，部分被br m，2H遮住)；2.33(m，1H)；2.68(m，2H)；2.89(m，1H)；2.92(dd，J＝12.1，3.1Hz，1H)；3.29(brm，2H)；3.54(br m，2H)；5.38(s，1H)；7.14(m，2H)；7.30(m，3H)；7.35(m，2H)；7.46(d，J＝7.8Hz，2H)。
4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟芐基)-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺將4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(9.128g，24.05mmol)的乙腈(150mL)溶液加到碘化鈉(360mg，2.4mmol)中，在氮氣中攪拌，同時加入三乙胺(12mL，8.76g，86.6mmol)，然后加入3-氟芐基溴(5.9mL，9.09g，48.1mmol)。加入氟芐基溴后立即出現(xiàn)混濁，1小時后稠化成白色晶體。在氮氣中于室溫下攪拌反應混合物過夜。蒸發(fā)除溶劑，向殘渣中加入飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)。過濾收集到大量的白色沉淀，水洗，室溫下真空干燥(10.54g，89.2％)。C31H38FN3O0.2H2O計算值C，75.79；H，7.88；N，8.55；F，3.87。理論值C，75.80；H，7.78；N，8.49；F，3.75％。
通過在250mL Erlenmeyer燒瓶中將產物攪拌下溶解在熱的異丙醇(39mL)中并加熱至微沸來重結晶。分批加入水，直至在微混的溶液(加入22mL水)持續(xù)觀察到混濁。攪拌下將燒瓶冷卻至室溫，然后持續(xù)攪拌下用冰-水浴冷卻1h。過濾收集晶體，用冷的2∶1的異丙醇/水洗滌，得到白色晶體(10.11g，96％)。C31H38FN3O計算值C，76.35；H，7.85；N，8.62；F，3.90。理論值C，76.36；H，7.85；N，8.62；F，3.77％。1H NMR(CDCl3，300MHz)；δ1.06(d，J＝6.1Hz，3H)；1.15(d，J＝6.1Hz，3H，部分被br m，3H重疊)；1.22(br m，3H)；1.94(dd，J＝10.8，8.1Hz，1H)；2.02(dd，J＝10.7，8.2Hz，1H)；2.57(br m，2H)；2.67(m，2H)；3.18(d，J＝13.8Hz，1H)；3.28(br m，2H)；3.53(br m，2H)；3.87(d，J＝13.5Hz，1H)；5.15(s，1H)；6.90(br t，J＝8.2Hz，1H)；7.04(m，2H)；7.21(m，3H)；7.30(m，5H)；7.46(d，J＝8.0Hz，2H)。
實施例2從4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(實施例1)和4-氟芐基溴按與實施例1相似的過程制備4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(4-氟芐基)-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺。C31H38FN3O計算值C，76.35；H，7.85；N，8.62；F，3.90。理論值C，76.32；H，7.86；N，8.60；F，3.95％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ1.07(d，J＝6.2Hz，3H)；1.10(d，J＝6.3Hz，3H，被br m，3H部分重疊)；1.23(br m，3H)；1.93(m，1H)；1.98(dd，J＝11.1，8.3Hz，1H)；2.54(br m，2H)；2.65(m，2H)；3.14(d，J＝13.1Hz，1H)；3.28(br m，2H)；3.54(br m，2H)；3.86(d，J＝13.1Hz，1H)；5.15(s，1H)；6.90(t，J＝8.2Hz，2H)；7.20(d，J＝7.3Hz，2H)；7.24(m，2H)；7.27(m，1H；被CDCl3部分重疊)；7.29(d，J＝9.4Hz，2H)；7.33(m，2H)；7.46(d，J＝8.1Hz，2H)。
實施例33-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)芐基)苯氧乙酸將3-溴苯酚(400g，2.31mol)、叔丁基氯二甲基硅烷(391g，2.54mol)和咪唑(346g，5.08mol)的5000mL二氯甲烷溶液在室溫下攪拌過夜。將反應溶液倒入2000mL水中，分離各層。1N氫氧化鈉水溶液(3×1500mL)和水(2×1500mL)洗滌有機層，然后通過硅膠墊(400g，二氧化硅60，230-400目)。用二氯甲烷(2×500mL)洗滌硅膠，合并濾液，減壓除溶劑，得到669g(98.4％)的3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷，透明淡黃色液體。NMR(300MHz，CDCl3)δ0.2(s，6H)；1.0(s，9H)；6.75(m，1H)；7.0(br s，1H)；7.1(m，2H)。
通過回流下將3-溴苯氧基-叔丁基二甲基硅烷(27.3g，92.6mmol)和二溴乙烷(3.45g，18.4mmol)在100mL無抑制劑的無水四氫呋喃中的混合物緩慢加到鎂屑(3.57g，147mmol)在無抑制劑的無水四氫呋喃中，形成3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基苯基溴化鎂?；亓飨聰嚢?小時后，將淺棕色透明混合物冷卻至室溫。
將4-羧基苯甲醛(100.3g，0.67mol)溶解/懸浮在甲苯(1200mL)中，加入二甲基甲酰胺(0.15mL)，攪拌懸浮液，同時滴加亞硫酰二氯(53.5mL，87.2g，0.73mol)。在氮氣中將反應混合物加熱至回流，攪拌2h，在此期間內將醛酸但不是所有的加到溶液中。再加入亞硫酰二氯(20mL，32.6g，0.27mol)，持續(xù)回流過夜。蒸發(fā)透明的反應混合物，在無水四氫呋喃(1500mL)中溶解殘渣。將溶液在冰/水浴中冷卻，將二乙胺(173mL，122g，1.67mol(2.5當量))滴加到攪拌的溶液中。除去冰浴，持續(xù)攪拌2.5h。過濾反應混合物，除去白色晶體鹽酸二乙胺副產物。結晶用乙酸乙酯(2×600mL)洗滌，放置洗液。蒸發(fā)四氫呋喃濾液，將殘渣溶解在乙酸乙酯洗液中。隨后用1M鹽酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀釋的碳酸鈉溶液(飽和∶H2O，1∶1，2×600mL)、水(2×300mL)和飽和氯化鈉溶液(300mL)洗滌。分離有機層，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺，淡褐色油，使用時未經進一步純化。(產率115.7g，84％)。
在安有冷凝器和Dean-Stark汽水閥的1000mL圓底燒瓶中加入4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(9.50g，46.3mmol)、苯并三唑(5.51g，46.3mmol)、(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(7.15g，46.3mmol，Chirotech Division of Dow Pharma，Cambridge，England)及400mL甲苯。在氮氣中加熱回流反應，直至在汽水閥中沒有觀察到額外的水(約2小時)。將反應冷卻至室溫，真空濃縮至體積剩約50mL。在氮氣中將無水四氫呋喃(100mL)加到燒瓶中，同時攪拌以溶解所有殘渣。在室溫下通過雙頭針將苯并三唑加成物的溶液加到3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基苯基溴化鎂的溶液中(上述的)。攪拌2小時后，通過加入20mL飽和氯化銨水溶液猝滅反應。加入無水硫酸鎂，并過濾反應物。真空除溶劑，在800mL乙酸乙酯中再次溶解殘渣。用4×200mL的1M氫氧化鈉、200mL的水、200mL的飽和氯化鈉水溶液洗滌乙酸乙酯溶液。有機層用無水硫酸鎂干燥，除去溶劑，得32.7g黑色油。將油溶解在250mL四氫呋喃和250mL的3M鹽酸中，并在室溫下攪拌2小時。用3×250mL的2∶1的乙醚/乙酸乙酯萃取反應溶液。將乙酸乙酯(300mL)加到水層中，用氫氧化鈉水溶液將pH調節(jié)至8。分離各層，水部分用3×300mL的乙酸乙酯萃取。合并有機萃取物，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥，真空除溶劑，得到12.4g棕色殘渣。殘渣用300g的硅膠色譜純化，用含1-15％乙醇的二氯甲烷梯度洗脫，得到5.54g的4-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺，無色膠(按4-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺計為27％)。
用無水四氫呋喃(2×5mL)洗滌氫化鈉(分散在油中60％，250mg(150mg NaH，6.25mmol))，加入無水四氫呋喃(10mL)作為上清液。在攪拌的懸浮液中溶解4-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(435mg，1.0mmol)，當沸騰平息時，加入碘化鈉(15mg，0.1mmol)。在氮氣中將氯乙酸甲酯(350mL，434mg，4mmol)加到攪拌的懸浮液中，在環(huán)境溫度下攪拌反應過夜。通過通入二氧化碳氣體(從干冰得到)部分中和反應混合物，然后加入冰乙酸，直至通過濕指示帶測量的懸浮液的pH為5。將反應混合物蒸發(fā)至干，將殘渣在乙酸乙酯(10mL)和1M HCl(5mL)間分配。用1MHCl(2×3mL)萃取有機層，用飽和碳酸鈉溶液將合并的酸性萃取物的pH調節(jié)至8。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取油狀水性懸浮液，用無水硫酸鈉干燥合并的有機萃取物。將溶液蒸發(fā)至黃色膠。將殘渣溶解在乙酸乙酯中，并加到(4×15cm)硅膠Biotage柱上，用含10％乙醇的乙酸乙酯洗脫。含有產物的餾分用t.l.c.(二氧化硅，EM60F254，含10％EtOH的EtOAc，Rf＝0.52)檢測，蒸發(fā)至干，室溫2mmHg下干燥，得到3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)芐基)苯氧基乙酸甲酯，無色透明淡黃色膠。將殘渣溶解在乙醇(4mL)和氫氧化鈉水溶液(2.5M，1.0mL，2.5mmol)中，并在室溫下攪拌6h。蒸發(fā)溶液除去大量的乙醇，加入水(5mL)。持續(xù)蒸發(fā)直至剩余約4mL溶液。再加入8mL水，蒸發(fā)溶液至約一半體積，以確保完全除去乙醇。過濾除去少量的懸浮固體，用3MHCl將溶液的pH調節(jié)至6。將溶液蒸發(fā)至干，用無水乙醇蒸發(fā)殘渣幾次以確保除去水。用乙醇(3×20mL)萃取殘渣，合并乙醇萃取物，過濾，蒸發(fā)至干。用乙酸乙酯(5mL)研磨膠狀殘渣，過濾，蒸發(fā)，高真空下干燥，得到3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-4-(二乙基氨基羰基)芐基)苯氧乙酸，易碎白色泡沫(52mg，9.5％)。C29H39N3O40.9NaCl0.5H2O計算值C，63.45；H，7.20；N，7.65。理論值C，63.83；H，7.19；N，7.25％；1H NMR(在D2O中0.1M NaOD，300MHz)；δ0.86(d，J＝6.3Hz，3H)；0.94(t，J＝7.1Hz，3H)；1.01(d，J＝6.1Hz，3H)；1.09(t，J＝7.2Hz，3H)；1.81(t，J＝11.3Hz，1H)；2.09(t，J＝11.2Hz，1H)；2.43(m，2H)；2.73(m，3H)；3.13(q，J＝7.1Hz，2H)；3.25(dd，J＝13.5，5.8Hz，1H)；3.38(q，J＝7.2Hz，2H)；4.32(s，2H)；5.09(s，1H)5.14(d，J＝7.8Hz，1H)；5.24(s，1H)；5.74(m，1H)；6.73(s，1H)；6.80(s，2H)；7.21(m，3H)；7.32(d，J＝8.2Hz，2H)。質譜(ESI-，-5KV，MeOH)；m/z493，(m+，25％)；492.5，((M-1)+，100％)。
實施例43-((α-S)-α-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺使用改進的還原氨化法從3-氟苯胺制備3-氟-N-甲基苯胺。首先，在40℃下將37％的甲醛水溶液以1∶1比例加到苯并三唑中來制備1-羥甲基苯并三唑，然后冷卻至室溫以沉淀產物。過濾后，將羥甲基苯并三唑(125g)在含有3-氟苯胺(92.2g)的甲苯中加熱至回流。使用Dean-Stark汽水閥共沸除水。3小時后，將混合物冷卻至室溫，然后冷凍幾小時以完全沉淀。濾掉白色結晶固體，得到174.2g(86.6％)的1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并三唑。
在干四氫呋喃中將1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并三唑(173.9g)調成漿。在室溫下將硼氫化鈉(32.5g)分批加到混合物中。加畢后，將混合物回流4小時。然后冷卻溶液，倒入含有冰的400mL 5N HCl中。在室溫下攪拌1小時。然后用10N氫氧化鈉溶液將溶液pH調節(jié)至9-10。用乙醚萃取產物。用1N氫氧化鈉溶液洗滌醚萃取物，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌。有機相用硫酸鈉干燥，過濾，然后減壓下蒸發(fā)，得到87.5g(97％)的3-氟-N-甲基苯胺，無色油。[NMR(200MHz，DMSO-d6)δ2.76(s，3H)；3.41(br s，1H)；6.59-6.92(m，3H)；7.27(q，J＝8.0HZ，1H)]。在色譜中，將油溶解在乙醚中，用醚HCl沉淀，同時劇烈攪拌。過濾白色固體，用醚洗滌，然后用熱乙醇∶乙酸乙酯/～1∶30重結晶。鹽酸鹽比自由堿更穩(wěn)定和易于處理。
在80mL干甲苯、亞硫酰二氯(7mL，96mmol)和5滴DMF中將3-羧基苯甲醛(Fluka；12.01g，80mmol)調成漿。在燒瓶上放置帶有硫酸鈣干燥管的回流冷凝器。溶液變透明后，將混合物回流1小時，然后冷卻。除去揮發(fā)物。用真空泵方便地抽吸殘渣。
在150mL干四氫呋喃中溶解粗酸氯化物，并在冰/水浴中冷卻。加入N-甲基-3-氟苯胺鹽酸鹽(13.05g，80.8mmol)。然后用加料漏斗滴加50mL干四氫呋喃中的三乙胺(35mL，250mmol)。1小時內將混濁溶液升至室溫，然后攪拌過夜。為除去大量的沉淀物，加入100mL乙醚，過濾反應混合物。用更多的醚洗滌鹽后，減壓除溶劑。殘渣用乙酸乙酯萃取，用1N HCl洗滌兩次，然后用水、碳酸鈉溶液、飽和NaCl溶液洗滌。用硫酸鈉/硫酸鎂干燥有機層，減壓蒸發(fā)除溶劑。得到粗N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺，淺金色油，19.92g(96％，未經色譜產率)[NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.38(s，3H)；6.94-7.02(m，2H)；7.18-7.29(m，2H)；7.46(t，J＝7.7Hz，1H)；7.55(d，J＝7.6Hz，1H)；7.81(m，2H)；9.90(s，1H)]。
將2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(3.30g，21.4mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并三唑(2.58g，21.6mmol)、N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺(5.51g，21.4mmol)混合在175mL干甲苯中，并加入一滴三乙胺。將混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴溫度)。將燒瓶安上Dean-Stark汽水閥，以允許共沸除水。在氮氣中將混合物回流2-3小時，收集～150mL的甲苯/水共沸物。減壓除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以琥珀/黃色油粗物質可用于隨后的反應中。
上述的粗苯并三唑加成物溶解于100mL四氫呋喃中，并通過雙頭針加到40mL的1M苯基溴化鎂的四氫呋喃(40mmol)中。反應輕微放熱，然后轉變成黃棕色混濁溶液。在氮氣中于室溫下攪拌2小時后，反應用5mL飽和氯化銨溶液猝滅。攪拌約半小時，加入過量的無水硫酸鎂。減壓下過濾濃縮溶液，得到含有苯并三唑的粗產物。將殘渣溶解在150mL乙酸乙酯和100mL乙醚中，用1M NaOH溶液(4×100mL)萃取除去苯并三唑。有機層用2N HCl溶液(2×75mL)萃取。合并酸性萃取物，用25％的NaOH水溶液調節(jié)至pH2.5，用乙酸乙酯萃取(3×75mL)，棄去水性部分。合并有機萃取物，然后用1M NaOH溶液調節(jié)至pH9，分離。用飽和氯化鈉溶液洗滌后，用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓除乙酸乙酯。用硅膠色譜(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)純化殘渣油，得到2.03g(4.3mmol)的目標產物，琥珀/橙色樹脂。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.10-7.38(m，8H)，6.97(br dd，J～7.5Hz，2H)，6.83-6.89(m，1H)，6.76(br d，J-7.8Hz，2H)，5.76-5.93(m，1H)，5.19(d，J＝12.6Hz，1H)，5.16(d，J＝5.4Hz，1H)，5.08(s，1H)，3.48(s，3H)，3.37(dd，J＝6.0，14.4Hz，1H)，2.84(dd，J＝8.1，8.1Hz，1H)，2.77(dd，J＝3.0，11.4Hz，1H)，2.44-2.56(m，1H)，2.38(br d，J～9.3Hz，2H)，2.06(t，J＝10.5Hz，1H)，1.67-1.80(m，2H)，1.10(d，J＝6.0Hz，3H)，0.96(d，J＝6.0Hz，3H)。
C30H34FN3O，0.25C4H8O2計算值C，75.43；H，7.35；N，8.51；F，3.85％。理論值C，75.47；H，7.38；N，8.34；F，3.70％。該物質可轉化成鹽酸鹽，并用CH2Cl2/Et2O沉淀成粉末狀淺棕褐色固體。C30H34FN3O2.0HCl0.3C4H10O0.03CH2Cl2計算值C，65.89；H，6.92；N，7.38；Cl，12.83％。理論值C，65.75；H，7.03；N，7.13；Cl，12.76％。
實施例53-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺使用改進的還原氨化法從3-氟苯胺制備3-氟-N-甲基苯胺。首先，在40℃下將37％的甲醛水溶液以1∶1比例加到苯并三唑中來制備1-羥甲基苯并三唑，然后冷卻至室溫以沉淀產物。過濾后，將羥甲基苯并三唑(125g)在含有3-氟苯胺(92.2g)的甲苯中加熱至回流。使用Dean-Stark汽水閥共沸除水。3小時后，將混合物冷卻至室溫，然后冷凍幾小時以完全沉淀。濾掉白色結晶固體，得到174.2g(86.6％)的1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并三唑。
在干四氫呋喃中將1-(3-氟苯胺基)甲基)-1H-苯并三唑(173.9g)調成漿。在室溫下將硼氫化鈉(32.5g)分批加到混合物中。加畢后，將混合物回流4小時。然后冷卻溶液，倒入含有冰的400mL 5NHCl中。在室溫下攪拌1小時。然后用10N氫氧化鈉溶液將溶液pH調節(jié)至9-10。用乙醚萃取產物。用1N氫氧化鈉溶液洗滌醚萃取物，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌。有機相用硫酸鈉干燥，過濾，然后減壓下蒸發(fā)，得到87.5g(97％)的3-氟-N-甲基苯胺，無色油。[NMR(200MHz，DMSO-d6)δ2.76(s，3H)；3.41(br.s，1H)；6.59-6.92(m，3H)；7.27(q，J＝8.0HZ，1H)]。在色譜中，將油溶解在乙醚中，用醚HCl沉淀，同時劇烈攪拌。過濾白色固體，用醚洗滌，然后用熱乙醇∶乙酸乙酯/～1∶30重結晶。鹽酸鹽比自由堿更穩(wěn)定和易于處理。
在80mL干甲苯、亞硫酰二氯(7mL，96mmol)和5滴DMF中將3-羧基苯甲醛(Fluka；12.01g，80mmol)調成漿。在燒瓶上放置帶有硫酸鈣干燥管的回流冷凝器。溶液變透明后，將混合物回流1小時，然后冷卻。除去揮發(fā)物。用真空泵方便地抽吸殘渣。在150mL干四氫呋喃中溶解粗酸氯化物，并在冰/水浴中冷卻。加入N-甲基-3-氟苯胺鹽酸鹽(13.05g，80.8mmol)。然后用加料漏斗滴加50mL干四氫呋喃中的三乙胺(35mL，250mmol)。1小時內將混濁溶液升至室溫，然后攪拌過夜。為除去大量的沉淀物，加入100mL乙醚，過濾反應混合物。用更多的醚洗滌鹽后，減壓除溶劑。殘渣用乙酸乙酯萃取，用1N HCl洗滌兩次，然后用水、碳酸鈉溶液、飽和NaCl溶液洗滌。用硫酸鈉/硫酸鎂干燥有機層，減壓蒸發(fā)除溶劑。得到粗N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺，淺金色油，19.92g(96％，未經色譜產率)[NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.38(s，3H)；6.94-7.02(m，2H)；7.18-7.29(m，2H)；7.46(t，J＝7.7Hz，1H)；7.55(d，J＝7.6Hz，1H)；7.81(m，2H)；9.90(s，1H)]。
將2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(1.28g，8.3mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并三唑(1.00g，8.3mmol)、N-(3-氟苯基)-3-甲酸基-N-甲基苯甲酰胺(2.14g，8.3mmol)混合在100mL干甲苯中，并加入一滴三乙胺。將混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴溫度)。將燒瓶安上Dean-Stark汽水閥，以允許共沸除水。在氮氣中將混合物回流2-3小時，收集～75mL的甲苯/水共沸物。減壓除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以琥珀/黃色油粗物質可用于隨后的反應中。
將3-溴苯酚(8.65g，50mmol)、叔丁基氯二甲基硅烷(7.97g，51.8mmol)和咪唑(8.85g，130mmol)的70mL無水二甲基甲酰胺溶液在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮反應混合物后，將殘渣溶解在200mL乙醚中，用250mL的水萃取兩次，用飽和氯化鈉溶液洗滌。醚萃取物用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓除溶劑。用硅膠短柱(3.5×10cm)色譜化淡黃色液體，用戊烷洗脫。合并所需要的餾分，除去溶劑，得到12.78g(89％)的3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷，透明液體。NMR(300MHz，CDCl3)δ0.2(s，6H)；1.0(s，9H)；6.75(m，1H)；7.0(br s，1H)；7.1(m，2H)。
將3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(4.21g，14.6mmol，1.76當量)的溶液溶解在干四氫呋喃(30mL)中，在氮氣中冷卻至-75℃。劇烈攪拌溶液，用注射器將正丁基鋰的己烷溶液(9.1mL，1.6M的溶液，14.5mmol，1.75當量)緩慢加到溶液中。在75℃下攪拌40分鐘后，用雙頭針將溶液轉移至燒瓶中，其中含有溴化鎂醚化物在無水四氫呋喃(50mL)中的懸浮液(4.37g，16.9mmol，2.03當量)，并在室溫下攪拌1小時。接下來，將粗苯并三唑加成物(用上述的2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪形成)溶解在10mL的四氫呋喃中，并用雙頭針加到新制的芳基溴化鎂試劑中。反應輕微放熱，然后轉變成黃棕色混濁溶液。在氮氣中于室溫下攪拌2小時后，反應用3-4mL飽和氯化銨溶液猝滅。攪拌約半小時，加入過量的無水硫酸鎂。減壓下過濾濃縮溶液，得到含有苯并三唑副產物的粗甲硅烷基醚。將殘渣溶解在乙酸乙酯中，用10％NaOH水溶液萃取三次除去苯并三唑。有機層用飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓除乙酸乙酯。
通過在室溫下在40mL的四氫呋喃中溶解殘渣并加入40mL的3NHCl水溶液來除去叔丁基二甲基甲硅烷基保護基。加入酸后溶液升溫。在室溫下攪拌混合物90分鐘。減壓濃縮反應以除去大部分有機溶劑。在水和乙醚∶乙酸乙酯/3∶2的溶液之間分配殘渣。酸性層用乙醚∶乙酸乙酯/3∶2的溶液萃取兩次。用NaOH水溶液將水層調節(jié)至pH＝2，此時保持混濁，并開始沉淀出黑色油。加入二氯甲烷(～100mL)，并劇烈攪拌。分離，水層再次用過量的二氯甲烷洗滌。合并有機萃取物，用水分配，劇烈攪拌下用NaOH水溶液調節(jié)至pH＝9。然后分離，水層再次用過量的二氯甲烷洗滌。合并萃取物，用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓蒸發(fā)溶劑。粗物質用硅膠柱色譜化(約20-25g硅膠/克粗物質)，首先用二氯甲烷洗脫，然后用含20％乙酸乙酯的二氯甲烷洗脫以除去少量的極性雜質。然后用含2％氫氧化銨(溶液A)、梯度為二氯甲烷(溶液B)的乙酸乙酯溶液洗脫柱子，極性很快從25％到達100％(B中的溶液A)。合并目標餾分，減壓除溶劑，得到非對映異構體的10∶1混合物，粗產率60％。
通過將非對映異構體的混合物溶解在熱乙酸乙酯(2-3mL/g物質)中，分批加入己烷(乙酸乙酯體積的兩倍)，同時保持溶液是熱的結晶產物。攪拌下將溶液逐漸冷卻24小時，得到1.78g的(+)-3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，反白色結晶固體(m.p.＝144-145℃)。NMR(200MHz，DMSO-d6)δ0.84(d，J＝6.0Hz，3H)；0.97(d，J＝5.9Hz，3H)；1.69(dd，J1＝7.7Hz，J2＝10.7Hz，1H)；2.01(dd，J1＝7.4Hz，J2＝10.7Hz，1H)；2.28(br.d，J＝8.3Hz，1H)；2.40-2.52(m，2H)；2.67(br d，J＝10.5Hz，1H)；2.82(dd，J1＝7.6Hz，J2＝13.2Hz，1H)；3.17(br.d，J＝14.0Hz，1H)；3.34(s，3H)；4.80(s，1H)；5.10(d，J＝10.1Hz，1H)；5.17(d，J＝17.3Hz，1H)；5.70-5.84(m，1H)；6.42(d，J＝7.1Hz，1H)；6.56(s，1H)；6.65(d，J＝8.3Hz，1H)；6.90-7.32(m，9H)；9.31(s，1H)。質譜(CI-CH4)m/z488(m+1，100％)，334(39％)，153(87％)。[α]D20＝+4.9℃(無水乙醇，c＝1.2)。
在氮氣中將(+)-3-((α-R)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺(4.88g，10mmol)、N-苯基三氟甲烷-磺酰亞胺(3.82g，10.7mmol)和三乙胺(3.1mL，22mmol)溶解在75mL二氯甲烷中，并在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮后，將殘渣溶解在100mL乙酸乙酯中，用Na2CO3溶液(3×100mL)、水(1×100mL)和鹽水(1×100mL)洗滌。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)，得到6.1g(9.8mmol)的三氟甲烷磺酸酯，粘稠金黃色油。
通過Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水楊酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基部分。濃縮反應，將殘渣溶解在50mL乙酸乙酯和100mL乙醚中。用Na2CO3溶液(3×100mL)和水(1×100mL)洗滌后，用3N HCl(3×20mL)和1N HCl(1×20mL)萃取有機溶液。用NaOH溶液將酸性萃取物調節(jié)至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)，得到4.44g(7.6mmol)的3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-(三氟甲基磺酰氧基)芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，粘稠深琥珀橙色油。
將上述的自由胺(0.93g，1.6mmol)與無水碳酸鈉粉末(1.39g，13.2mmol)、10mL無水乙腈、碘化鈉(0.10g，0.67mmol)和4-氯甲基-2-甲基噻唑鹽酸鹽(0.34g，1.84mmol)混合。在氮氣中于室溫下將反應攪拌兩天，然后減壓濃縮。將殘渣懸浮在15mL乙醇中，加入10mL的2N NaOH溶液，在室溫下攪拌反應過夜。真空除去乙醇，在水和二氯甲烷間分配殘渣。用6N HCl將溶液調節(jié)至pH8.5，分離，再次用二氯甲烷(2×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)，得到0.71g(1.2mmol)的3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(2-甲基-4-噻唑基甲基)-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺，反白泡沫。1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.31(s，1H)，7.15-7.26(m，6H)，6.95-7.09(m，3H)，6.86(d，J＝7.9Hz，1H)，6.62(dd，J＝1.5，8.0Hz，1H)，6.52(s，1H)，6.38(d，J＝7.5Hz，1H)，4.81(s，1H)，3.70(d，J＝14.5Hz，1H)，3.47(d，J＝14.5Hz，1H)，3.31(s，3H)，2.67(br dd，J＝～9Hz，1H)，2.60(s，3H)，2.37-2.48(m，2H，部分被DMSO峰遮住)，2.27(br d，J＝～9Hz，1H)，2.05(dd，J＝8.4，10.9Hz，1H)，1.65(dd，J＝8.4，10.9Hz，1H)，0.96和0.94(重疊對d，J＝～7Hz，3H)。C32H35FN4O2S0.30C4H8O20.07CH2Cl2計算值C，67.60；H，6.40；N，9.48；F，3.21；S，5.42％。理論值C，67.51；H，6.54；N，9.47；F，3.22；S，5.65％。這種物質被轉化成鹽酸鹽，用EtOH/H2O凍干成蓬松的反白固體。C32H35FN4O2S1.0HCl0.85H2O計算值C，62.96；H，6.22；N，9.18；S，5.25；Cl，5.81％。理論值C，63.06；H，6.22；N，8.99；S，5.26；Cl，5.85％。
實施例63-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3-氟丙基)-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺3-((α-R)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-(三氟甲基磺酰氧基)-芐基)-N-(3-氟苯基)-N-甲基苯甲酰胺(從實施例5得到，0.70g，1.2mmol)與無水碳酸鈉粉末(0.65g，6.1mmol)、10mL無水乙腈、碘化鈉(0.03g，0.2mmol)和1-溴-3-氟丙烷(0.12mL，1.3mmol)混合。在氮氣中于室溫下將反應攪拌三天，然后減壓濃縮。將殘渣懸浮在15mL乙醇中，加入10mL 10％w/v的NaOH水溶液，在室溫下攪拌反應2小時。真空除去乙醇，在水和二氯甲烷間分配殘渣。用3N HCl將溶液調節(jié)至pH8.5，分離，再次用二氯甲烷(2×15mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(EtOAc+2％NH4OH/CH2Cl2)，得到0.39g(0.77mmol)的目標產物，反白泡沫。1HNMR(600MHz，d6-DMSO)δ9.28(s，1H)，7.17-7.24(m，5H)，7.04-7.07(m，2H)，6.97(dt，J＝2.2，8.4Hz，1H)，6.88(dd，J＝1.2，8.0Hz，1H)，6.61(dd，J＝1.8，8.0Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.41(d，J＝7.4Hz，1H)，4.74(br s，1H)，4.42(dt，J＝47.5，6.0Hz，2H)，3.30(s，3H)，2.70(dd，J＝2.9，11.0Hz，1H)，2.55-2.61(m，1H)，2.48-2.52(m，1H-被部分DMSO峰遮住)，2.38-2.42(m，1H)，2.26(br d，J～9.2Hz，1H)，2.19-2.24(m，1H)，2.00(dd，J＝7.3，10.8Hz，1H)，1.70-1.75(m，1H)，1.64-1.70(m，2H)，0.95(d，J＝6.2Hz，3H)，0.86(d，J＝6.2Hz，3H)。C30H35F2N3O2計算值C，70.98；H，6.95；N，8.28；F，7.48％。理論值C，70.78；H，7.23；N，8.19；F，7.24％。
實施例73-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚將2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(3.06g，20mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并三唑(2.38g，20mmol)和2-甲苯甲醛(2.40g，20mmol)混合在140mL干甲苯中。將混合物置于油浴中，保持在120-130℃(浴溫度)。將燒瓶安上Dean-Stark汽水閥，以允許共沸除水。在氮氣中將混合物回流2-2.5小時，收集～100mL的甲苯/水共沸物。減壓除去剩余的甲苯。由于加成物的水敏感性，所以粗琥珀/黃色油粗物質可用于隨后的反應中，而不用純化。
將3-(溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(從實施例5得到，9.49g，33mmol)的溶液溶解在干四氫呋喃(50mL)中，在氮氣中冷卻至-75℃。劇烈攪拌溶液，用注射器將正丁基鋰的己烷溶液(13mL，2.5M的溶液，32.5mmol)緩慢加到溶液中。在-75℃下攪拌45分鐘后，用雙頭針將溶液轉移至燒瓶中，其中含有溴化鎂醚化物在無水四氫呋喃(100mL)中的懸浮液(9.55g，37mmol)，并在室溫下攪拌1小時。接下來，將粗苯并三唑加成物(用上述的2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪和甲苯甲醛形成)溶解在50mL的四氫呋喃中，并用雙頭針加到新制的芳基溴化鎂試劑中。反應輕微放熱，然后轉變成黃棕色混濁溶液。在氮氣中于室溫下攪拌2小時后，反應用5mL飽和氯化銨溶液猝滅。攪拌約5分鐘，加入過量的無水硫酸鎂。減壓下過濾濃縮溶液，得到含有苯并三唑副產物的粗甲硅烷基醚。將殘渣溶解在乙酸乙酯中，用1N NaOH水溶液(3×100mL)萃取除去苯并三唑。有機層用飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓除乙酸乙酯。
將殘渣溶解在50mL的無水乙腈并加入四乙氟化銨二水合物(6.21g，33.5mmol)來除去叔丁基二甲基甲硅烷基。在氮氣中于室溫下攪拌1小時后，濃縮反應，將殘渣溶解在100mL乙酸乙酯中。用稀釋的NaHCO3溶液(3×75mL)和水(1×50mL)萃取混合物。有機層用100mL乙醚稀釋，用10％檸檬酸溶液(5×20mL)萃取，直至不能再萃取到有色物質。合并水性萃取物，用50％NaOH水溶液調節(jié)至pH8.5，用二氯甲烷(3×50mL)萃取。有機溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余固體用硅膠柱過濾(EtOAc+2％NH4OH)，得到2.08g(5.93mmol)的二苯甲基立體異構體混合物，淺棕褐色固體。用酸乙酯/庚烷結晶，得到0.85g(2.42mmol)的3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚，白色蓬松針狀晶體。1H NMR(600MHz，d6-DMSO)δ9.25(s，1H)，7.58(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dt，J＝2.0，7.2Hz，1H)，7.04-7.08(m，3H)，6.70(d，J＝7.7Hz，1H)，6.68(s，1H)，6.58(dd，J＝1.8，8.0Hz，1H)，5.73-5.80(m，1H)，5.15(dd，J＝1.7，17.2Hz，1H)，5.07(dd，J＝0.9，10.1Hz，1H)，4.90(s，1H)，3.10(dd，J＝5.3，13.9Hz，1H)，2.86(dd，J＝6.8，13.9Hz，1H)，2.75-2.78(m，1H)，2.69(dd，J＝3.1，11.1Hz，1H)，2.49-2.53(m，1H-部分被DMSO峰遮住)，2.19(s，3H)，2.06(dd，J＝6.1，11.1Hz，1H)，1.97(dd，J＝5.6，11.3Hz，1H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)，0.92(d，J＝6.4Hz，3H)。C23H30N2O計算值C，78.82；H，8.63；N，7.99％。理論值C，78.89；H，8.67；N，8.09％。這種物質被轉化成鹽酸，用H2O凍干成蓬松的白色固體。C23H30N2O1.1HCl0.35H2O計算值C，69.60；H，8.08；N，7.06；Cl，9.83％。理論值C，69.57；H，8.05；N，6.93；Cl，9.77％。
實施例84-(α-S)-α-((2S，5R)-4-(4-溴芐基)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺通過按與實施例1相似的方式用4-溴芐基溴烷基化4-((α-S)-α-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺(從實施例1得到)制備標題化合物(產率89.87％)。C31H38BrN3O計算值C，67.87；H，6.98；N，7.66；Br，14.57。理論值C，68.00；H，7.02；N，7.68；Br，14.44％。1H NMR(CDCl3，600MHz)；δ1.06(d，J＝6.2Hz，3H)；1.10(d，J＝6.1Hz，3H，重疊br m，3H)；1.23(br m，3H)；1.94(br t，J＝9.4Hz，1H)；2.01(dd，J＝11.1，8.1Hz，1H)；2.54(m，2H)；2.65(d，J＝9.2Hz，2H)；3.13(d，J＝13.4Hz，1H)；3.27(br m，2H)；3.54(br m，2H)；3.83(d，J＝13.5Hz，1H)；5.15(s，1H)；7.17(d，J＝8.1Hz，2H)；7.21(d，J＝7.5Hz，2H)；7.27(d，J＝6.2Hz，1H，部分被CHCl3遮住)；7.29(d，J＝8.1Hz，2H)；7.32(br t，J＝7.4Hz，2H)；7.39(d，J＝8.3Hz，2H)；7.46(d，J＝8.1Hz，2H)。
實施例9N-(3-氟苯基)-N-甲基-3-((哌啶-4-亞基)(3-羥基苯基)甲基)-苯甲酰胺哌啶-4-羧酸乙酯(50g)、二碳酸二叔丁基酯(76.4g)和Na2CO3(64.4g)在H2O/THF(530mL/212mL)中的混合物回流2h。冷卻至室溫后，反應混合物用EtOAc(400mL×3)萃取。合并有機層，用水(500mL×1)和鹽水(500mL×1)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到哌啶-1，4-二羧酸-叔丁基酯4-乙酯(85.6g)。1H NNM(600MHz，DMSO-d6)δ4.04(q，2H，J＝7.0Hz)，3.81(m，2H)，2.80(bs，2H)，2.48(m，1H)，1.77(m，2H)，1.37(m，2H)，1.36(s，9H)，1.16(t，J＝7.0Hz)。
在20℃下向上述產物和NHMe(OMe):HCl(48.6g)的干THF(650mL)混合物中加入i-PrMgCl(2.0M THF溶液，498.4mL，996.8mmo1)。在-5℃下將得到的溶液攪拌2h，然后NH4Cl水溶液猝滅反應，用EtOAc(800mL×2)萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到4-(N-甲氧基-N-甲基氨基甲?；?哌啶-1-羧酸叔丁基酯(80.3g)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ4.08(m，2H)，3.67(s，3H)，3.14(s，3H)，2.76(bs，3H)，1.63(m，4H)，1.41(s，9H)。
在氮氣中于-75℃下向(3-溴苯氧基)-叔丁基二甲基硅烷(從實施例5得到，6.12g)的THF(120mL)溶液中緩慢加入正丁基鋰(9.37mL，2.5M溶液)。15分鐘后，滴加4-(N-甲氧基-N-甲基氨基甲?；?哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.80g)的THF(10mL)溶液。在氮氣中攪拌反應過夜，同時升至室溫。通過緩慢加入NH4Cl水溶液(80mL)猝滅反應。用EtOAc(120mL)萃取生成的混合物。用水(80mL×3)和鹽水(80mL×1)洗滌有機層，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物(9.13g)，經純化得到純4-[3-(叔丁基-二甲基硅氧烷基)苯甲?；鵠哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.12g；57％)。1HNMR(600MHz，DMSO-d6)δ7.60(d，1H，J＝8.0Hz)，7.41(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，7.32(m，1H)，7.11(dd，1H，J＝8.0，2.5Hz)，3.94(m，2H)，3.57(m，1H)，2.90(bs，2H)，1.72(m，2H)，1.38(s，9H)，1.37(m，2H)，0.94(s，9H)，0.19(s，6H)。
在氮氣中回流3-碘苯甲酸(15.0g)和SOCl2(120mL)的混合物1h。將溶液冷卻至室溫，用旋轉蒸發(fā)儀濃縮除去SOCl2。殘余的3-碘苯甲酰氯真空干燥2h，然后溶解在CHCl3(200mL)中，在氮氣中于0℃下攪拌20分鐘。向溶液中滴加3-氟苯基胺(6.72g)，然后加入Et3N(12.24g)。在氮氣中于室溫下攪拌過夜后，通過加入水(10mL)猝滅反應。用水(100mL×3)和鹽水(100mL×1)洗滌得到的混合物，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物(19.8g)，用CHCl3重結晶得到純N-(3-氟-苯基)-3-碘苯甲酰胺，白色固體(13.5g；71％)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.47(s，1H)，8.27(s，1H)，7.94(m，2H)，7.71(m，1H)，7.53(m，1H)，7.40-7.32(m，2H)，6.93(m，1H)。
在氮氣中于0℃下將氫化鈉(1.11g，在礦物油中60％NaH)加到CH3I(4.53g)和N-(3-氟苯基)-3-碘苯甲酰胺(7.26g)的DMF(120mL)溶液中。在0℃下攪拌5分鐘后，在氮氣中于室溫下攪拌反應4h。通過緩慢加入飽和NH4Cl(120mL)水溶液，然后加入水(100mL)猝滅反應。用乙醚(300mL×2)萃取混合物。合并醚層，用水(150mL×4)和鹽水(150mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物(7.56g)，用柱色譜純化，得到N-(3-氟-苯基)-3-碘-N-甲基苯甲酰胺(5.88g；78％)。1HNMR(600MHz，DMSO-d6)δ7.64(m，2H)，7.28(m，1H)，7.24(d，1H，J＝7.5Hz)，7.19(m，1H)，7.04-6.99(m，3H)，3.33(s，3H)。
在氮氣中于-78℃下將正丁基鋰(1.61mL，1.92M溶液；3.10mmol)一次性加到N-(3-氟苯基)-3-碘-N-甲基苯甲酰胺(1.0g；2.82mmol)和4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)苯甲?；鵠-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(1.182g；2.82mmol)在THF(150mL)的混合物中。在氮氣中攪拌反應過夜，同時升至室溫。向反應混合物中加入飽和NH4Cl溶液(25mL)，然后加入25mL水。用醚(300mL×2)萃取混合物。醚層用水(200mL×2)和鹽水(200mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到2.03g粗產物，用硅膠柱色譜純化，用含30％EtOAc的戊烷洗脫，得到4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲酰基]苯基}羥甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(763mg；42％)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ7.34(bs，1H)，7.29(s，1H)，7.23-7.16(m，3H)，7.09(m，2H)，6.94(m，2H)，6.85(m，2H)，6.60(d，1H，J＝7.0Hz)，5.25(s，1H)，3.88(m，2H)，3.35(s，3H)，2.60(bs，2H)，2.34(m，1H)，1.37(s，9H)，1.36(m，2H)，1.16(m，2H)，0.91(s，9H)，0.12(s，6H)。
將4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基-氨基甲?；鵠苯基}羥甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(3.59g)和對甲苯磺酸一水合物(3.5g)在苯(200mL)中的混合物在安裝有Dean-Stark汽水閥的圓底燒瓶中回流過夜。將反應溶液冷卻至室溫。將飽和Na2CO3溶液(50mL)加到溶液中，然后加入100mL的H2O。用EtOAc(300mL)萃取得到的混合物。觀察到固體在兩層間移動。因此，將75mL 0.5M NaOH溶液加到混合物中。攪拌30分鐘后，混合物變得透明。分離有機層和水層。水層用EtOAc(100mL×1)萃取。合并有機層，用水(75mL×2)和鹽水(75mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-([3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲?；鵠苯基}-亞甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.83g；粗)。粗產物的TLC和1H NMR表明了化合物的混合物，其顯然包括不帶N-Boc和/或O-TBDMS保護基的目標脫水產物。粗產物未經純化而用于下步中。
將四氫呋喃(70mL)和3N HCl(50mL)加到上述的粗4-([3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]{3-[N-(3-氟苯基)-N-甲基氨基甲?；鵠苯基}-亞甲基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(2.75g)中。得到的混合物在60℃下攪拌4h。將反應混合物冷卻至室溫，然后加入水(100mL)。得到的溶液用乙醚(100mL×2)萃取。剩下的水層用10％NaOH中和至pH≈9。此時水層變混濁。用正丁醇(100mL×3)萃取混濁的水混合物。合并正丁醇層，用水(75mL×2)和鹽水(75mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物(2.27g；粗)，經純化得到N-(3-氟苯基)-3-[(3-羥基苯基)-哌啶-4-亞基-甲基]-N-甲基-苯甲酰胺(579mg)。1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ9.25(s，1H)，7.23(m，3H)，7.09(d，1H，J＝10.0Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.96(ddd，1H，J＝8.5，8.5，2.5Hz)，6.92(m，2H)，6.85(s，1H)，6.56(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，6.34(s，1H)，6.31(d，1H，J＝7.5Hz)，3.35(s，3H)，2.65(m，2H)，2.55(m，2H)，2.13(bs，1H)，2.07(m，2H)，1.72(m，2H)；理論值C，72.87；H，6.51；N，5.86。計算值C，72.77；H，6.62；N，5.98。
實施例103-((S)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚通過Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水楊酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB從3-((S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(2-甲基苯基)甲基)苯酚(實施例7，1.07g，2.2mmol)除去烯丙基。濃縮反應，將殘渣溶解在50mL乙酸乙酯和50mL乙醚中。用Na2CO3溶液(2×50mL)和水(1×50mL)洗滌后，用3N HCl(4×20mL)萃取有機溶液。用50％NaOH水溶液將酸性萃取物調節(jié)至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(EtOAc+2％NH4OH)，得到0.54g(1.2mmol)的粘稠淺琥珀色油。
將上述的自由胺(0.50g，1.1mmol)懸浮在20mL乙醇中，加入10mL10％w/v NaOH水溶液，反應在室溫下攪拌2小時。真空除去乙醇，將殘渣在水和二氯甲烷間分配。用3N HCl將溶液調節(jié)至pH8.5，分離，再次用二氯甲烷(2×20mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。從殘余油得到目標產物0.39g(1.1mmol)，淺棕褐色泡沫。1HNMR(600MHz，d6-DMSO)δ9.28(br s，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，1H)，7.16(brt，J～7.4Hz，1H)，7.06-7.11(m，3H)，6.59-6.62(m，2H)，6.56(s，1H)，5.12(s，1H)，2.87(dd，J＝2.8，11.8Hz，1H)，2.73-2.78(m，1H)，2.56-2.62(m，1H)，2.47-2.50(m，1H-部分被DMSO峰遮住)，2.44(dd，J＝8.8，11.8Hz，1H)，2.11(s，3H)，1.74(dd，J＝8.7，11.3Hz，1H)，0.98(d，J＝6.4Hz，3H)，0.87(d，J＝6.4Hz，3H)。C20H26N2O0.3H2O0.35CH2Cl2計算值C，70.73；H，7.96；N，8.11％。理論值C，70.78；H，7.87；N，8.08％。這種物質被轉化成鹽酸鹽，用H2O凍干成蓬松的淺褐色/棕褐色固體。C20H26N2O0.95HCl0.9H2O計算值C，66.49；H，8.02；N，7.75；Cl，9.32％。理論值C，66.36；H，7.86；N，7.61；Cl，9.23％。
實施例114-(4-[(R)-(4-二甲基氨磺?；交?-(3-羥基苯基)甲基]-(2S，5R)-二甲基-哌嗪-1-甲基)苯甲酸在0℃下用漏斗將叔丁基二甲基氯硅烷(26.01g；172.56mmol)加到3-羥基苯甲醛(20.7g；164.35mmol)和咪唑(27.97g；410.9mmol)的CHCl3(300mL)溶液中。在氮氣中攪拌反應過夜，同時升至室溫。反應混合物用水(100mL×3)和鹽水(100mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物(29.56g)，用柱色譜純化，用(i)戊烷和(ii)含3％EtOAc的戊烷洗脫，得到3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯甲醛(21g；54％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.93(s，1H)，7.45(d，1H，J＝7.5Hz)，7.38(dd，1H，J＝7.5，7.5Hz)，7.31(d，1H，J＝1.0Hz)，7.09(1H，dd，J＝7.5，1.0Hz)，0.98(s，9H)，0.20(s，6H)。
在氮氣中于0℃下將二甲基胺(100mL，2.0M THF溶液；200mmol)加到對碘苯磺酰氯(54.76g；181mmol)的吡啶(300mL)溶液中，然后加入N，N-二甲基氨基吡啶(15mg)。在氮氣中攪拌反應兩天，同時從0℃升至室溫。將反應溶液倒入1.2升水中。目標產物從H2O/吡啶溶液中析出。過濾收集固體，用H2O(300mL×2)洗滌。將固體溶解在EtOAc(500mL)中。EtOAc溶液用5％HCl(300mL×3)、水(300mL×2)和鹽水(300mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-碘-N，N-二甲基苯磺酰胺(49.46g；88％)，白色固體，其未經進一步純化而用于下一步反應。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.88(d，2H，J＝8.5Hz)，7.46(d，2H，J＝8.5Hz)，2.69(s，3H)。
4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺步驟1-制備亞胺鹽中間體向安裝有Soxhlet萃取器(填充有分子篩)的3頸燒瓶中加入苯并三唑(618mg；5.19mmol)、3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯甲醛(1.227g；5.19mmol)、(+)-(2S，5R)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(961mg；6.23mmol)和甲苯(1 50mL)。在氮氣中將溶液回流20h，冷卻至室溫。
步驟2-制備格氏試劑在氮氣中于室溫下將異丙基氯化鎂(6.91mL，2.0M THF溶液；13.82mmol)加到4-碘-N，N-二甲基-苯磺酰胺(4.3g；13.82mmol)的溶液中。攪拌20分鐘后，反應混合物的TLC表明形成新點，起始原料消失。
步驟3-中間體反應在氮氣中于室溫下35分鐘內將步驟1的溶液用注射器滴加到步驟2制備的格氏試劑中，同時劇烈攪拌反應溶液。在氮氣中于室溫下攪拌反應過夜。通過加入飽和NH4Cl(10mL)水溶液猝滅反應。通過加入EtOAc(120mL)和水(120mL)稀釋得到的混合物。用硅藻土墊過濾混濁的混合物。將濾液倒入分離漏斗中。分離有機層和水層。用10％NaOH(75mL×4)萃取有機層，用水(100mL×3)和鹽水(100mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物，用硅膠柱純化，通過CombiFlashTMSq 16x(梯度100％CH2Cl2～含7％MeOH的CH2Cl2)進行，得到4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.3g；45％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.71(d，2H，J＝8.0Hz)，7.35(d，2H，J＝8.0Hz)，7.12(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.92(s，1H)，6.84(d，1H，J＝8.0Hz)，6.71(d，1H，J＝8.0Hz)，5.82(1H，m)，5.23-5.11(m，3H)，3.35(dd，1H，J＝14.0，5.5Hz)，2.88(dd，1H，J＝14.0，8.0Hz)，2.82(dd，1H，J＝11.0，3.0Hz)，2.73(s，6H)，2.68(dd，1H，J＝11.0，2.5Hz)，2.55(m，2H)，2.16(dd，1H，J＝11.0，8.5Hz)，1.85(dd，1H，J＝11.0，9.0Hz)，1.18(d，3H，J＝6.0Hz)，1.01(d，3H，J＝6.0Hz)，0.96(s，9H)，0.17(s，3H)，0.16(s，3H)。
4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪基-1)-(3-羥基-苯基)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺將鹽酸(3M，7mL)加到4-{(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-[3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-苯基]-甲基}-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.3g)的THF(15mL)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。將水(15mL)加到反應中。用乙醚(25mL×3)萃取反應混合物。剩余的H2O層用10％NaOH中和至pH＝8-9，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。合并EtOAc層，用水(20mL×3)和鹽水(20mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到0.83g粗產物。粗產物用硅膠柱色譜純化，通過CombiFlashTMSq 16x(梯度100％CH2Cl2～含7％MeOH的CH2Cl2)進行，得到4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪基-1)-(3-羥基-苯基)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺(720mg；70％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71(d，2H，J＝8.5Hz)，7.35(d，2H，J＝8.5Hz)，7.14(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.89(bs，1H)，6.85(d，1H，J＝8.0Hz)，6.68(d，1H，J＝8.0，2.5Hz)，5.83(1H，m)，5.24-5.12(m，3H)，3.32(dd，1H，J＝13.5，5.0Hz)，2.86(dd，1H，J＝13.5，8.0Hz)，2.78(dd，1H，J＝11.5，3.0Hz)，2.72(s，6H)，2.65(dd，1H，J＝11.0，2.5Hz)，2.51(m，2H)，2.14(dd，1H，J＝11.5，9.0Hz)，1.81(dd，1H，J＝11.0，9.5Hz)，1.16(d，3H，J＝6.0Hz)，0.98(d，3H，J＝6.0Hz)；MS(FAB，甘油)m/z444(M++H)，290，153；理論值C，58.32；H，6.66；N，8.18。計算值(C24H33N3O3S0.8CH2Cl2)C，58.23；H，6.82；N，8.21。
在氮氣中于室溫下在10分鐘內將雙(二亞芐基丙酮)鈀(199mg)加到1，4-雙(二苯基膦基)丁烷(148mg)的THF(4mL)溶液中。然后用注射器將得到的Pd催化劑[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]轉移到4-[(R)-((2R，5S)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪基-1)-(3-羥基-苯基)-甲基]-N，N-二甲基-苯磺酰胺(3.08g)和硫代水楊酸(1.28g)的THF(130mL)溶液中。在氮氣中于室溫下攪拌反應過夜。濃縮反應混合物，將EtOAc(350mL)加到剩余殘渣中，然后加入1N HCl(300mL)。將得到的混合物倒入分離漏斗中。分離EtOAc層和酸性水層。用EtOAc(100mL×3)萃取酸性水層。用1NNaOH溶液將酸性水層中和至pH≈8。此時觀察到固體從水溶液中析出。用EtOAc∶MEOH＝95∶5(200mL×4)萃取混濁的水混合物。合并有機層，用水(100mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到2.46g粗產物，經純化得到4-[(R)-(3-羥基苯基)-((2R，5S)-二甲基哌嗪基-1)-甲基]-N，N-二甲基-苯磺酰胺(1.82g，65％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.28(s，IH)，7.74(d，2H，J＝8.0Hz)，7.43(d，2H，J＝8.0Hz)，7.09(dd，1H，J＝8.0，8.0Hz)，6.78(s，1H)，6.69(d，1H，J＝8.0Hz)，6.61(d，1H，J＝8.0Hz)，5.33(s，1H)，2.81-2.72(m，2H)，2.62(s，6H)，2.62-2.40(m，2H)，2.13(m，1H)，1.87(bs，1H)，1.39(1H，dd，J＝10.0，10.0Hz)。
4-[(R)-(3-羥基苯基)-((2R，5S)-二甲基哌嗪基-1)甲基]-N，N-二甲基苯磺酰胺(210mg)、4-羧基苯甲醛(156mg)和乙酸(63mg)的混合物溶于10mL THF和5mL DMF，在氮氣中于室溫下攪拌30分鐘。將三乙酰氧基硼氫化鈉(276mg)加到溶液中。反應在氮氣中于室溫下攪拌過夜。通過加入水(2mL)猝滅反應。真空濃縮得到的混合物除去THF。剩余的殘渣用H2O(70mL)稀釋，得到pH≈5的混濁的水混合物。水層用1MNaOH溶液中和至pH≈8。白色固體(目標產物)漂浮在水混合物中。過濾混合物，用水(15mL×2)洗滌固體。將固體溶解在EtOAc(60mL)中。EtOAc溶液用水(40mL×1)和鹽水(40mL×1)洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，得到粗產物，用硅膠柱色譜純化，通過CombiFlashTMSq 16x(梯度100％CH2Cl2～含10％MeOH的CH2Cl2)進行，得到4-{4-[(R)-(4-二甲基氨磺酰基-苯基)-(3-羥基苯基)甲基]-(2S，5R)-二甲基哌嗪-1-甲基}苯甲酸，白色固體(148mg；53％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.97(d，2H，J＝8.0Hz)，7.77(d，2H，J＝8.5Hz)，7.57(d，2H，J＝8.5Hz)，7.45(d，2H，J＝8.0Hz)，7.12(dd，1H，J＝8.0Hz)，6.89(s，1H)，6.84(d，1H，J＝8.0)，6.66(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，5.22(s，1H)，4.16(d，1H，J＝13.5Hz)，3.67(d，1H，J＝13.5Hz)，2.99-2.87(m，3H)，2.68(s，6H)，2.64(m，1H)，2.38(m，1H)，2.11(m，IH)，1.93(d，3H，J＝6.5Hz)，1.15(d，3H，J＝6.5Hz)。MS(FAB，甘油)m/z538.1(M++H)，404.2，290.2；理論值C，63.28；H，6.69；N，7.39。計算值(C29H35N3O5S0.9CH3OH)C，58.23；H，6.82；N，8.21。
實施例12N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羥基苯基)甲基)苯甲酰胺3-羧基苯甲醛(150g，100mmol)加到250mL 3口圓底燒瓶中，在氮氣中與110mL甲苯攪拌。將亞硫酰二氯(8.75mL，120mmol)加到混合物中，然后加入6滴DMF。在燒瓶上放置帶有硫酸鈣干燥管的回流冷凝器。將反應置于油浴中，加熱使浴溫度保持在120℃以下。將混合物回流1小時，得到透明溶液，然后冷卻至室溫。用無水甲苯稀釋溶液，真空除去所有揮發(fā)物。
將粗酸氯化物溶解在200mL干四氫呋喃中，并在冰/水浴中冷卻。通過加料漏斗滴加三乙胺(27.88mL，200mmol)的70mL干四氫呋喃溶液，然后滴加二乙胺(10.45mL，100mmol)。將混濁的溶液1小時內升至室溫，攪拌過夜。加入水，產物用二氯甲烷萃取。有機層用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鈉干燥，真空除去溶劑。得到3-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(17.72g)，淺金黃色油(86％，未色譜化產率)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.04-1.18(m，6H)；3.17-3.45(m，4H)；7.65-7.66(m，2H)；7.85(s，1H)；7.93-7.94(m，1H)；10.03(s，1H)。
將2R，5S-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(2.31g，15mmol，ChirotechDivision of Dow Pharma，Cambridge，England)、苯并三唑(1.80g，15.15mmol，1.01當量)和3-甲酸基-N，N-二乙基苯甲酰胺(3.08g，15mmol)混合在150mL干甲苯中，并加入兩滴三乙胺。將混合物置于油浴中，保持在140℃(浴溫度)以下。將燒瓶安上Dean-Stark汽水閥和回流冷凝器，以允許共沸除水。在氮氣中將混合物回流2-3小時，然后減壓除去大部分甲苯。粗加成物未經分離而用于下面步驟中。
將粗苯并三唑加成物溶解在～20mL四氫呋喃中，并用雙頭針加到3-苯氧基-叔丁基二甲基硅烷溴化鎂(從實施例5得到，1.75當量)的溶液中。在氮氣中于室溫下攪拌2小時后，反應用6-8mL飽和氯化銨溶液猝滅。攪拌30分鐘后，加入過量的無水硫酸鎂。減壓下過濾濃縮溶液，得到含有苯并三唑副產物的粗甲硅烷基醚。將殘渣溶解在乙酸乙酯中，用10％NaOH水溶液萃取三次，除去大部分苯并三唑。有機層用飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓除乙酸乙酯。
通過在室溫下在80mL的四氫呋喃中溶解殘渣并加入80mL的3NHCl水溶液來除去叔丁基二甲基甲硅烷基保護基。加入酸后溶液升溫。在室溫下攪拌混合物90分鐘。減壓濃縮反應以除去大部分有機溶劑。在水和乙醚∶乙酸乙酯/3∶2的溶液之間分配殘渣。酸性層用乙醚∶乙酸乙酯/3∶2的溶液萃取兩次。用NaOH水溶液將水層調節(jié)至pH＝2，此時保持混濁，并開始沉淀出黑色油。加入二氯甲烷(～100mL)，并劇烈攪拌。分離，水層再次用過量的二氯甲烷洗滌。合并有機萃取物，用水分配，劇烈攪拌下用NaOH水溶液調節(jié)至pH＝9。然后分離，水層再次用過量的二氯甲烷洗滌。合并二氯甲烷萃取物，用硫酸鈉/硫酸鎂干燥，減壓蒸發(fā)溶劑。粗物質用硅膠柱色譜化(約20-25g硅膠/克粗物質)，首先用二氯甲烷洗脫，然后用含20％乙酸乙酯的二氯甲烷洗脫以除去少量的極性雜質。然后用含2％氫氧化銨(溶液A)、梯度為二氯甲烷(溶液B)的乙酸乙酯溶液洗脫柱子，極性很快從25％到達100％(B中的溶液A)。合并目標餾分，減壓除溶劑。得到非對映異構體的10∶1混合物(約2.01g)。通過用乙酸乙酯(5-10mL)的溶液、然后緩慢加入庚烷(10-20mL)、逐漸冷卻得到純產物，得到1.35g(+)-3-((αR)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N，N-二乙基苯甲酰胺，反白結晶固體，異構體純度＞98％(NMR測定)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.90-0.92(d，J＝6.1Hz，3H)；0.94-1.04(m，6H)；1.06-1.08(d，J＝6.1Hz，3H)；1.73-1.76(m，2H)；2.01-2.15(m，1H)；2.52-2.56(q，J＝11.1Hz，2H)；2.69-2.72(q，J＝14.0Hz，2H)；2.75-2.82(q，J＝13.9Hz，1H)；3.11-3.40(d，J＝4.9Hz，2H)；3.56-3.62(d，J＝13.3Hz，2H)；5.05-5.11(dd，J1＝6.1Hz，J2＝16.6Hz，2H)；5.16(s，1H)；5.70-5.82(m，1H)；7.13-7.16(d，J＝7.3Hz，1H)；7.24-7.41(m，7H)；9.31(s，1H)。
在氮氣中將3-((R)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥基芐基)-N-二乙基苯甲酰胺(4.35g，10mmol)、N-苯基三氟甲烷-磺酰亞胺(3.82g，10.7mmol)和三乙胺(3.1mL，22mmol)溶解在75mL二氯甲烷中，并在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮后，將殘渣溶解在100mL乙酸乙酯中，用Na2CO3溶液(3×100mL)、水(1×100mL)和鹽水(1×100mL)洗滌。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(含2％NH4OH的EtOAc/CH2Cl2)，得到6.01g(10.59mmol)的三氟甲烷磺酸酯，粘稠金黃色油。
通過Genet法[J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995)]在硫代水楊酸存在下使用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基。濃縮反應，將殘渣溶解在50mL乙酸乙酯和100mL乙醚中。用Na2CO3溶液(3×100mL)和水(1×100mL)洗滌后，用3N HCl(3×20mL)和1N HCl(1×20mL)萃取有機溶液。用NaOH溶液將酸性萃取物調節(jié)至pH8.5，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。溶液用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘余油用硅膠柱色譜純化(含2％NH4OH的EtOAc/CH2Cl2)，得到4.39g(8.32mmol)的粘稠深琥珀橙色油。
將上述自由胺(0.87g，1.50mmol)的乙腈(10mL)溶液加到碘化鈉(100mg)、碳酸鈉(0.88g，8.30mmol)中，在氮氣中于室溫下攪拌，同時加入4-吡啶甲基氯鹽酸鹽(0.27g，1.65mmol)。反應在6小時內完成。蒸發(fā)除溶劑，殘渣在二氯甲烷和水之間分配，水層用二氯甲烷萃取多于兩次。合并有機萃取物，用(Na2SO4/MgSO4)干燥，減壓濃縮。殘渣是黑紅色無定形固體，用硅膠柱色譜純化(EtOAc/CH2Cl2＝1/1，然后75％EtOAc和含2％NH4OH的CH2Cl2)，得到0.35g(0.72mmol)的N，N-二乙基-3-((R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-4-(哌啶-4-甲基)哌嗪基-1-)(3-羥基苯基)-甲基)苯甲酰胺，白色無定形固體。通過在乙醇中溶解堿并用乙醇中的0.2M HCl滴定至pH3.60制得鹽。得到的鹽溶液凍干過夜，得到白色粉末狀固體。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ0.90-1.10(m，12H)；1.90-2.08(m，2H)；2.58-2.68(m，5H)；3.08-3.50(m，4H)；3.68-3.79(d，J＝15.1Hz，1H)；4.94(s，1H)；6.61-6.76(m，3H)；7.07-7.44(m，7H)；8.43-8.45(d，J＝5.7Hz，2H)；9.32(s，1H)。487.6(M+1，100％)，509.3(30％)。C30N38N4O2HClH2O計算值C，66.59；H，7.64；N，10.35；Cl，6.55。理論值C，66.23；H，7.56；N，10.23；Cl，6.73。
實施例13阿片受體親合性的體外測試一組阿片受體促效藥用于治療尿道功能障礙，評估其在大鼠腦膜(μ和δ阿片樣物質)和豚鼠小腦(κ阿片受體)中的體外阿片受體親合性。從大鼠全腦或豚鼠小腦(由Pel-Freeze Biological Inc.(Rogers，AR.)供應)制備用于放射性配體結合的膜。在50mM TRIS(Tris[羥甲基]氨基甲烷)緩沖液(pH7.4)中均質化組織，其含有50μg/mL大豆胰島素抑制劑、1mM EDTA(乙二胺四乙酸)和100μM PMSF(苯基甲基磺酰氯)。均質化的大腦組織在500×g下離心30分鐘(4℃)以除去較大的碎片。上清液超聲降解10秒(P.E.裝置2，4℃)。然后使用10mM TRIS-蔗糖緩沖液(pH7.4)加入蔗糖溶液，最終濃度為0.35M，然后將大腦膜在40,000×g下離心30分鐘(4℃)。然后用10mM TRIS緩沖液(pH7.4)洗滌膜球兩次，其含有50μg/mL大豆胰島素抑制劑、lmM EDTA和100μMPMSF。
在10mM TRIS緩沖液(pH7.4)中進行放射性配體結合分析，其含有50μg/mL大豆胰島素抑制劑、1mM EDTA、5mM MgCl2和100μMPMSF。氚標記的DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)從NewEngland Nuclear購得，并用作對比例(2-3×10-10M最終濃度)中的配體，其中0.5×10-6M納洛酮(從SIGMA Chemical Co.購得)限定了非特異性結合。所有的結合分析在室溫下進行90分鐘，然后通過在GF/C玻璃纖維過濾器上快速過濾而終止(Whatman，Hillsboro，OR)，使用50mMTRIS緩沖液(4℃，pH7.4)和Brandel半自動細胞收集器(型號M48，Brandel，Gaithersburg，MD)。過濾器用50mM TRIS緩沖液(4℃，pH7.4)洗滌兩次，將過濾器置于液體閃爍放射性物質中，被束縛的放射活性用Beckman LS 6500閃爍計數(shù)器來計數(shù)?；衔镆种平Y合DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)的功效被確定為降低標記化合物結合的濃度的50％(IC50)。
體外測試結果總結在圖1(表1)中，表明所有的測試化合物都有一定的δ阿片受體活性，盡管其中一些比另一些具有更大的活性。
實施例14δ阿片受體促效藥對健康有意識大鼠的膀胱內壓參數(shù)的影響使用重量為200～250克的雄性大鼠。大鼠可自由取食，除了在進行實驗時將其在22-24℃下保持12小時亮暗循環(huán)至少一周。
大鼠用戊巴比妥65mg/kg i.p.腹腔注射來麻醉，并仰臥。在刮過和清洗過的中線腹壁上取得約10mm長的切口。尿道膀胱未與組織粘合，排空，然后在切口處插入聚乙烯(PE50)導管，并永久縫合。在后肩域通過皮下通道取出導管，其與塑料適配器連接以避免被大鼠除去。為靜脈(i.v.)注射測試化合物，將聚乙烯管(PE50)插進頸靜脈，并從后肩域取出。由于膀胱內壓圖參數(shù)在植入導管后受時間影響，大鼠用1mg/kg青霉菌G進行肌肉內處理，以防止感染，并在植入后和測試之前休息3天。
為口服給予測試化合物，將聚乙烯管(PE50)插進胃中，并永久縫合。在后肩域通過皮下通道取出導管，其與塑料適配器連接以避免被大鼠除去。
在實驗期間，將大鼠置于Bllman’s籠中，膀胱管的自由尖端通過T-型管與壓力傳感器(Grass PT300或Gould P23)相連以記錄膀胱壓力，并與蠕動泵相連以按0.1mL/min的恒定速率將鹽水溶液連續(xù)輸送進膀胱。連續(xù)記錄輸液期間的內腔壓力。評估兩種尿道動力學參數(shù)排尿壓力和排尿時間間隔，其等于逼尿肌收縮之前的體積容量(收縮頻率下降)。排尿壓力被定義為在排尿期間因逼尿肌收縮引起的最大膀胱壓力。數(shù)據(jù)被計算為每次劑量下的幾種動物測試結果的平均值。藥效表達為相對于對照數(shù)據(jù)(100％)的百分比。
用輸送鹽水溶液以確定在沒有測試化合物被用作對照基線時的大鼠活性。中止輸送鹽水溶液，給予測試化合物。在靜脈給予90分鐘后和口服給藥120分鐘后，記錄每一動物的膀胱內壓測量圖，計算記錄的膀胱內壓測量圖參數(shù)的平均值。
靜脈注射不同的本發(fā)明測試化合物后記錄90分鐘內的膀胱內壓測量圖，其結果總結在圖2(表2)中。特別地，結果表明靜脈(i.v.)給予化合物1、2、3、4、10和12影響膀胱收縮的抑制。化合物1-10和12引起膀胱收縮的頻率降低(膀胱收縮的時間間隔增大，說明膀胱容量增大)?；衔?、2、3、4、10和12因引起膀胱收縮強度下降和膀胱收縮頻率下降而影響這兩種參數(shù)。
化合物1、2、8和11也被通過胃導管口服給予來測試效力。測試上述相同的膀胱內壓測量圖，結果總結在圖3中的表3中?？诜o予化合物1和11使膀胱收縮頻率下降和收縮壓力下降，從而增大膀胱容量。出乎意料的是，化合物1對于這兩種給藥方法表現(xiàn)出相似的效力，這表明不同的給藥方式可得到化合物相似的血液水平。有趣的是，化合物1不包括用羥基或甲基化的羥基取代的酚環(huán)?？梢酝茰y出酚環(huán)上的羥基或甲氧基是肽和非肽配體的關鍵藥效團，其可識別δ阿片受體并起生理作用。然而，化合物1己被發(fā)現(xiàn)在沒有這種酚環(huán)時有驚人的功效，從而可提供出乎意料的生理作用。
實施例15δ阿片受體促效藥對部分尿道受到限制的大鼠的膀胱內壓參數(shù)的影響使用重量為200～250克的雄性大鼠。使膀胱出口受阻從而使部分尿道受限制的方法基本上如Malmgren等J.Urol.1371291-1294報導的，其內容在此引入作為參考。麻醉后，將腹壁和會陰剃毛，并用優(yōu)碘清洗。在較低中線腹壁上取得切口，記住膀胱和最近的尿道。將外徑為～1mm的塑料棒與尿道平行放置，用絲稠繃帶環(huán)繞尿道和塑料棒。固定繃帶后，除去外部的塑料棒，從而確保內腔直徑為～1mm。給予動物止痛藥丁丙諾啡，并回收。6周后進行第二次手術以除去尿道繃帶，此時放置膀胱內壓導管。在尿道中植入塑料棒6周在此區(qū)域引起炎癥，并使測試大鼠膀胱肌肉不穩(wěn)定，這與真正的尿道功能障礙帶來的副作用相似。
在實驗期間，膀胱管通過T-型管與壓力傳感器(Grass PT300或Gould P23)相連以定容地記錄膀胱壓力，并與蠕動泵相連以按0.1mL/min的恒定速率將鹽水溶液連續(xù)輸送進膀胱。連續(xù)記錄輸液期間的壓力信號。
評估測試大鼠中的兩種尿道動力學參數(shù)排尿壓力和排空時間間隔，其等于逼尿肌收縮之前的體積容量(收縮頻率下降)。記錄膀胱活性的變化，表達為壓力或體積隨時間的變化。
圖4表明三個測試大鼠的尿道動力學參數(shù)的膀胱內壓跡線，由于以前植入的障礙其尿道受到損害。跡線表明了在給予測試化合物之前和口服給予10mg/kg的化合物1之后的測試動物的尿道動力學參數(shù)。圖左側的跡線表明給予化合物1之前的三個測試動物的壓力和排空記錄(1a和b，2a和b，和3a和b)。觀察跡線1a和1b，表明測試動物#1的膀胱肌肉經歷了多次強力的收縮。此外從跡線1b可以看出連續(xù)排空的動物在膀胱中幾乎不存儲尿。另兩個測試動物的跡線也表明不穩(wěn)定的膀胱。三個測試動物口服化合物1后，收縮和體積容量得到明顯改進。跡線1c和1d表明收縮頻率和每次收縮的壓力明顯降低。此外，跡線1d表明體積容量增大，在排空前測試動物的膀胱容量增大。與跡線1b中的連續(xù)排空相反，測試動物間斷排空，因而在排空之間可存儲較大體積的尿。很明顯在給予化合物1之后，三個測試動物在壓力收縮的頻率和強度(下降)方面都表現(xiàn)出明顯改進，并且體積存儲量也得到改進。
權利要求
1.一種防止受試者尿道功能障礙的方法，所述的方法包括給予所述的受試者有效量的δ阿片受體促效藥以防止尿道功能障礙，其中所述的δ阿片受體促效藥選自 及其藥學上可接受的鹽和酯。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述的δ阿片受體促效藥以藥物組合物給予，所述的藥物組合物含有δ阿片受體促效藥或其藥學上可接受的鹽或酯及藥學上可接受的載體。
3.如權利要求2所述的方法，其中所述的組合物的給予方式選自口服、直腸、陰道、外用、舌下、粘膜、鼻內、眼睛、皮下、肌肉內、靜脈內、皮膚、脊髓、鞘內、關節(jié)內、動脈內、蛛網膜內、支氣管內、淋巴內、子宮內給藥。
4.如權利要求3所述的方法，其中所述的組合物以單一劑型給予。
5.如權利要求2所述的方法，其中所述的用于治療尿道功能障礙的藥物組合物還含有至少一種額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑。
6.如權利要求5所述的方法，其中所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
7.如權利要求1所述的方法，其中所述的尿道功能障礙包括尿道失禁。
8.一種防止尿道功能障礙的藥物組合物，所述的藥物組合物包括有效量的用以防止尿道功能障礙的δ阿片受體促效藥和藥學上可接受的載體，其中所述的δ阿片受體促效藥選自 及其藥學上可接受的鹽和酯；和藥學上可接受的載體。
9.一種用于治療尿道功能障礙的藥物單位劑型，所述的劑型含有如權利要求8所述的δ阿片受體促效藥，其中所述的藥物單位劑型選自片劑、軟彈性凝膠膠囊、皮膚貼片及栓劑。
10.如權利要求8所述的藥物組合物，還含有至少一種額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑。
11.如權利要求10所述的藥物組合物，其中所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
12.如權利要求8所述的藥物組合物，其中所述的尿道功能障礙包括尿道失禁。
13.一種防止尿道功能障礙的試劑盒，所述的試劑盒包括有效量的用以防止尿道功能障礙的δ阿片受體促效藥，其中所述的δ阿片受體促效藥選自 及其藥學上可接受的鹽和酯。
14.如權利要求13所述的試劑盒，還含有至少一種額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑，所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
15.一種防止受試者尿道功能障礙的方法，所述的方法包括給予所述的受試者有效量的δ阿片受體促效藥以防止尿道功能障礙，其中所述的δ阿片受體促效藥具有下式結構 或其藥學上可接受的鹽或酯。
16.如權利要求15所述的方法，其中所述的δ阿片受體促效藥以藥物組合物給予，所述的藥物組合物含有δ阿片受體促效藥或其藥學上可接受的鹽或酯及藥學上可接受的載體。
17.如權利要求16所述的方法，其中所述的組合物的給予方式選自口服、直腸、陰道、外用、舌下、粘膜、鼻內、眼睛、皮下、肌肉內、靜脈內、皮膚、脊髓、鞘內、關節(jié)內、動脈內、蛛網膜內、支氣管內、淋巴內、子宮內給藥。
18.如權利要求17所述的方法，其中所述的組合物以單一劑型給予。
19.如權利要求15所述的方法，其中所述的用于治療尿道功能障礙的藥物組合物還含有至少一種額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑。
20.如權利要求19所述的方法，其中所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
21.如權利要求15所述的方法，其中所述的尿道功能障礙包括尿道失禁。
22.一種防止尿道功能障礙的藥物組合物，所述的藥物組合物包括有效量的用以防止尿道功能障礙的δ阿片受體促效藥和藥學上可接受的載體，其中所述的δ阿片受體促效藥具有下式結構 或其藥學上可接受的鹽或酯。
23.如權利要求22所述的藥物組合物，還含有至少一種額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑。
24.如權利要求23所述的藥物組合物，其中所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
25.如權利要求22所述的藥物組合物，其中所述的δ阿片受體促效藥以約1mg～50mg/千克體重/天的劑量給予所述的受試者。
26.如權利要求22所述的藥物組合物，其中所述的δ阿片受體促效藥以約10μg～500mg/kg所述的受試者體重/天的劑量給予所述的受試者。
27.如權利要求22所述的藥物組合物，其中所述的δ阿片受體促效藥以約50μg～75mg/千克體重/天的劑量給予所述的受試者。
28.如權利要求22所述的藥物組合物，其中所述的藥物組合物經口服給予。
29.一種降低受試者尿道功能障礙作用的方法，所述的方法包括給予所述的受試者有效量的至少一種下式的δ阿片受體促效藥 其中Ar1是含有選自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳環(huán)或雜環(huán)芳香環(huán)，可以包括苯硫基、噻唑基、呋喃基、吡咯基、苯基或吡啶基，并且在其第一個碳原子上具有取代基Y，在其第二個環(huán)碳上具有取代基R1，Y選自氫；鹵素；C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基；C1-C6鹵代烷基；C1-C6烷氧基；C3-C6環(huán)烷氧基；式SR8的硫化物，其中R8是C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基、或C5-C10芳基；式SOR8的亞砜，其中R8與上述相同；式SO2R8的砜，其中R8與上述相同；腈；C1-C6?；?；式NHCO2R8的烷氧羰氨基(氨基甲?；?，其中R8與上述相同；羧酸或其酯、酰胺或鹽；式CH2NR9R10的氨甲基，其中R9和R10可相同或不同，并可以是氫、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C2-C6羥烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6環(huán)烷基或C5-C10芳基，或R9和R10一起形成5或6個原子的環(huán)，所述的環(huán)原子選自N和C；式CONR9R10的碳酰胺，其中R9和R10與上述相同，或其C2-C30肽共軛物；及式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10與上述相同；G是碳或氮；R1是氫、鹵素或C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基；R3、R4和R5可相同或不同，并獨立地選自氫和甲基，其中R3、R4或R5中的至少一個不是氫，條件是甲基的總個數(shù)不超過2，R3、R4和R5中的任何兩個可形成1～3個碳原子的橋；R6選自氫；C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基；C3-C6環(huán)烷基；具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基；具有C1-C4烷氧基和C1-C4烷基部分的烷氧烷基；C2-C4氰烷基；C2-C4羥烷基；具有C1-C4烷基部分的氨羰烷基；及R12COR13，其中R12是C1-C4亞烷基，R13是C1-C4烷基或C1-C4烷氧基或羥基，或R6是 Ar2是含有選自碳、氮、氧和硫原子的5-或6-元碳環(huán)或雜環(huán)芳香環(huán)，并且在其碳原子上具有取代基X，其中X選自鹵素(氟、溴、氯、碘)、氫、羥基和其酯、羧基和其酯；羧基C1-C4烷基和其酯；羧酸、烷氧基、羥甲基和其酯；及氨基、其碳酰胺和磺酰胺；及其藥學上可接受的鹽。
30.如權利要求29所述的方法，其中所述的δ阿片受體促效藥選自 及其藥學上可接受的鹽和酯。
31.如權利要求29所述的方法，其中所述的δ阿片受體促效藥與藥學上可接受的載體結合。
32.如權利要求29所述的方法，其中所述的δ阿片受體促效藥與用于治療尿道功能障礙的活性藥劑結合，所述的活性藥劑選自α-腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α-腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
全文摘要
本發(fā)明提供用于治療尿道功能障礙的組合物和方法，其通過向需要這種治療的受試者給予藥物組合物實現(xiàn)，該藥物組合物含有有效量的用以降低尿道功能障礙作用的δ阿片受體促效藥。該組合物還可包括額外的用于治療尿道功能障礙的活性藥劑，例如α－腎上腺素促效藥、抗膽堿藥、α－腎上腺素拮抗劑及三環(huán)抗抑郁劑。
文檔編號C07D401/06GK1652787SQ03810492
公開日2005年8月10日 申請日期2003年5月9日 優(yōu)先權日2002年5月9日
發(fā)明者張寬仁, J·彼得·真戈, 凱斯圖蒂什·P·彼丘納什, 馬欣, 威廉·彭德格斯特, 詹其泰 申請人:安達制藥公司