GA可分兩種，一種是低特性粘度未封端的PLGA，另一種史高特性粘度未封端的PLGA。低特性粘度為0.1?0.35dl/g，優(yōu)選為0.2?0.3dl/g ;其重均分子量為4000?45000，優(yōu)選為15000?35000 ;高特性粘度為0.4?0.9dl/g，優(yōu)選為0.45?0.55dl/g ;其重均分子量為50000?145000，優(yōu)選為55000?85000。低特性粘度未封端的PLGA中丙交酯與乙交酯的摩爾比為50:50?75:25，優(yōu)選為50:50 ;高特性粘度未封端的PLGA中丙交酯與乙交酯的摩爾比為65:35?90:10，優(yōu)選為75:25。
[0061]作為本發(fā)明的實(shí)施例，其中二氯甲烷可替代為乙酸乙酯、庚烷、丙酮、乙腈或氯仿。
[0062]作為本發(fā)明的實(shí)施例，所述表面活性劑可以為聚乙烯醇、二-乙基己基琥珀酸酯磺酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、羥乙基纖維素、聚乙二醇、聚山梨酯、司盤和泊洛沙姆中的一種。
[0063]載有胰島素的PCADK-PLGA核-殼雙層微球的掃描電鏡照片見圖1，光學(xué)顯微鏡照片見圖2，體外釋放曲線見圖3 ;結(jié)果表明，從掃描電鏡照片可以看出微球形態(tài)圓整、光滑，粒徑大小均一不黏連；光學(xué)顯微鏡照片中呈現(xiàn)明顯的雙層結(jié)構(gòu)。
[0064]實(shí)施例二
[0065]載有牛血清白蛋白的PCADK-PLGA核-殼雙層微球
[0066]與實(shí)施例一中的制備載有胰島素的PCADK-PLGA核-殼雙層微球的方法相同，區(qū)別在于:
[0067]制備兩種單獨(dú)的油相時(shí)，分別是油相A:含有1mg的牛血清白蛋白和45mg的PCADK的二氯甲烷0.3ml，具體為將藥物通過超聲、渦旋等方法溶解或分散于溶有PCADK的二氯甲烷中；油相B:含有180mg的PLGA的二氯甲烷1.8ml ；
[0068]所述PCADK與PLGA重量比為2:8。
[0069]載有牛血清白蛋白的PCADK-PLGA核-殼雙層微球的掃描電鏡照片見圖4，光學(xué)顯微鏡照片見圖5，體外釋放曲線見圖6 ;結(jié)果顯示，微球形態(tài)圓整、光滑，粒徑大小均一不黏連，顯微鏡照片可見雙層結(jié)構(gòu)。
[0070]本發(fā)明核-殼雙層微球包括核和包圍在所述核周圍的殼，所述核是以聚縮酮或其衍生物為載體材料包裹藥物構(gòu)成，所述殼是聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸構(gòu)成。
[0071]作為本發(fā)明的實(shí)施例，采用PCADK作為內(nèi)核，藥物分散在其中，外層PLGA包裹。本發(fā)明制備的雙層微球，外層PLGA隨著時(shí)間延長產(chǎn)生降解，PLGA可生物降解、不產(chǎn)生有毒產(chǎn)物，降解產(chǎn)物為酸性，由于聚縮酮中縮酮鍵具有pH敏感性，會在酸性條件下加快降解，降解產(chǎn)物為中性，對蛋白、多肽類藥物活性無影響，并且其所發(fā)生的溶脹狀態(tài)對于生物大分子藥物而言也起到保護(hù)作用，保證其較高的活性。
[0072]本發(fā)明雙層微球不但可以實(shí)現(xiàn)零級釋藥和脈沖式給藥，其還重點(diǎn)解決了藥物突釋較為嚴(yán)重的情況，使得藥物可以在體內(nèi)保持較為恒定速率釋放。
[0073]對比例一
[0074]載有胰島素的PCADK單層微球制備
[0075](I)將15mg的胰島素與300mg的PCADK在13500rpm均質(zhì)條件下，分散于2ml 二氯甲烷溶液中，持續(xù)1-5分鐘，即得油包固液滴(s/o);
[0076](2)將步驟⑴得到的液滴在攪拌條件下滴加到百分比濃度為0.5-10%的氯化鈉和0.5-10%的表面活性劑的水溶液100-500mL中形成乳滴；200rpm低速攪拌l_5h，揮發(fā)有機(jī)溶劑，固化微球；
[0077](3)將步驟(2)所得離心，收集微球，去離子水洗滌微球3-5次，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，冷凍干燥得到微球。
[0078]其電鏡照片見圖7，體外釋放曲線見圖8 ;結(jié)果顯示，形態(tài)圓整，粒徑大小均一不黏連；但不同于本發(fā)明實(shí)施例一中的產(chǎn)物表面光滑，對比例一中的產(chǎn)物表面具有孔隙，在釋放時(shí)會有部分藥物快速擴(kuò)散出來，使體內(nèi)的血藥水平陡然升高，從而產(chǎn)生不良反應(yīng)。
[0079]對比例二
[0080]載有牛血清白蛋白的PCADK單層微球制備
[0081](I)將15mg的牛血清白蛋白與300mg的PCADK在13500rpm均質(zhì)條件下，溶解于2ml 二氯甲烷溶液中，持續(xù)1-5分鐘，即得油包油液滴(ο/ο);
[0082](2)把步驟(I)得到的液滴在攪拌條件下滴加到百分比濃度為0.5-10%的氯化鈉和0.5-10%的表面活性劑的水溶液100-500ml中形成乳滴；200rpm低速攪拌l_5h，揮發(fā)有機(jī)溶劑，固化微球；
[0083](3)將步驟(2)所得離心，收集微球，去離子水洗滌微球3-5次，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，冷凍干燥得到微球。
[0084]通過實(shí)施例與對比例的體外釋放曲線圖中可看出，實(shí)施例中藥物累積釋放度隨時(shí)間增加穩(wěn)定，釋放曲線近乎成直線，藥物接近零級釋放；而且在24小時(shí)內(nèi)，藥物釋放低于10%，與對比例中普通單層聚縮酮微球相比，其明顯解決了聚縮酮微球24小時(shí)釋放量超過40%的突釋問題。
[0085]本發(fā)明可用其他的不違背本發(fā)明的精神或主要特征的具體形式來概述。因此，無論從哪一點(diǎn)來看，本發(fā)明的上述實(shí)施方案都只能認(rèn)為是對本發(fā)明的說明而不能限制本發(fā)明，作為本發(fā)明的實(shí)施例，所述藥物可為小分子藥物和生物大分子藥物。小分子藥物為鹽酸阿霉素、鹽酸表阿霉素、兩性霉素B、羅替戈汀、石杉堿甲、利培酮、納曲酮和紫杉醇中的一種；生物大分子藥物為蛋白多肽類大分子藥物、核酸、抗體、疫苗和多糖中的一種。其中蛋白多肽類大分子藥物可為:促紅細(xì)胞生成素、干擾素、生長激素、表皮生長因子、白細(xì)胞介素、集落刺激因子、凝血因子、重組胰島素、骨形成蛋白、組織多肽抗原、甲狀旁腺激素及其衍生物等。
[0086]對于生物大分子藥物而言，其自身結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，很容易在制備、保存或釋放過程中由于體內(nèi)外環(huán)境而經(jīng)受化學(xué)降解或物理變化，從而喪失活性。例如蛋白質(zhì)是由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合而成的高分子化合物，肽鏈折疊或螺旋構(gòu)成一定的空間結(jié)構(gòu)，從而發(fā)揮某一特定功能，但在外界物理、化學(xué)條件刺激下，蛋白質(zhì)側(cè)鏈或其肽鏈易斷裂或發(fā)生聚集形變，從而破壞蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象，進(jìn)而生物活性喪失。因此，在制備蛋白、多肽類藥物制劑時(shí)，條件要求苛刻，以防蛋白、多肽類藥物結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，降低活性。本發(fā)明的制備方法得到了解決突釋現(xiàn)象且包封率高的核-殼雙層微球。
[0087]權(quán)利要求書指出了本發(fā)明的范圍，而上述的說明并未指出本發(fā)明的范圍，因此，在與本發(fā)明的權(quán)利要求書相當(dāng)?shù)暮x和范圍內(nèi)的任何改變，都應(yīng)認(rèn)為是包括在本發(fā)明的權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種核-殼雙層微球的制備方法，其特征在于，步驟如下: (1)制備兩種單獨(dú)的油相，分別是油相A:含有藥物、聚縮酮或其衍生物的有機(jī)溶液；油相B:含有聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物的有機(jī)溶液； 合并、混合油相A和油相B，高速攪拌得到A/B相，即ο/ο相； 所述聚縮酮或其衍生物與聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物重量比為9:1-1:9 ; (2)合并、混合步驟(I)得到的Α/Β相和溶液C，形成乳劑，即o/o/w相； 所述溶液C是重量百分比濃度為0.5-10%的氯化鈉和重量百分比濃度為0.5-5%的表面活性劑的水溶液； (3)將步驟(2)得到的乳劑低速攪拌l_5h，得到固化微球； (4)將步驟(3)得到的固化微球進(jìn)行離心、洗滌、冷凍干燥，得到核-殼雙層微球。2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中的藥物為生物大分子藥物，包括蛋白多肽類大分子藥物、核酸、抗體、疫苗和多糖中的一種。3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中的油相A與油相B中聚合物質(zhì)量濃度分別為10-15%。4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟⑴中的聚縮酮通過1，4-環(huán)己烷二甲醇與2，2- 二甲氧基丙烷聚合而成，具有縮酮單元結(jié)構(gòu)，縮酮單元中含有兩個(gè)氧原子，其重均分子量為2000?10000。5.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中的聚縮酮衍生物為醇類衍生物，其重均分子量為2000?100000。6.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中的聚乳酸-羥基乙酸共聚物為未封端的丙交酯-乙交酯共聚物，其特性粘度為0.1?0.35dl/g ;其重均分子量為4000?45000 ;所述丙交酯與乙交酯的摩爾比為50:50?75:25。7.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中的聚乳酸-羥基乙酸共聚物為未封端的丙交酯-乙交酯共聚物，其特性粘度為0.4?0.9dl/g ;其重均分子量為50000?145000 ;所述丙交酯與乙交酯的摩爾比為65:35?90:10。8.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)的有機(jī)溶液，所述有機(jī)溶液中的有機(jī)溶劑是二氯甲烷、乙酸乙酯、庚烷、丙酮、乙腈及氯仿中的至少一種。9.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)的表面活性劑為聚乙烯醇、二-乙基己基琥珀酸酯磺酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、羥乙基纖維素、聚乙二醇、聚山梨酯、司盤和泊洛沙姆中的一種。10.一種如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的制備方法制備的核-殼雙層微球，其特征在于，所述核-殼雙層微球包括核和包圍在所述核周圍的殼，所述核是以聚縮酮或其衍生物為載體材料包裹藥物構(gòu)成，所述殼是聚乳酸-羥基乙酸共聚物構(gòu)成。11.一種如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的制備方法制備的核-殼雙層微球，其特征在于，所述核-殼雙層微球包括核和包圍在所述核周圍的殼，所述核是以聚縮酮或其衍生物為載體材料包裹藥物構(gòu)成，所述殼是聚乳酸構(gòu)成。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種核-殼雙層微球的制備方法。步驟：(1)油相A：含藥物、聚縮酮或其衍生物的有機(jī)溶液；油相B：含聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物的有機(jī)溶液；合并、混合油相A和油相B，高速攪拌得到A/B相；(2)合并、混合得到的A/B相和溶液C，形成乳劑；溶液C是氯化鈉和表面活性劑的水溶液；(3)將上述得到的乳劑低速攪拌1-5h，得到固化微球；(4)將得到的固化微球進(jìn)行離心、洗滌、冷凍干燥，得到核-殼雙層微球。本發(fā)明采用聚縮酮或其衍生物作為內(nèi)核，藥物分散在其中，外層聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物包裹，雙層微球?qū)崿F(xiàn)零級釋藥和脈沖式給藥，解決了藥物突釋較為嚴(yán)重的情況，使得藥物可以在體內(nèi)保持較為恒定速率釋放。
【IPC分類】A61K47/34, A61K9/50
【公開號】CN105106174
【申請?zhí)枴緾N201510560639
【發(fā)明人】慕宏杰, 孫考祥, 楚永超, 張峰溥
【申請人】煙臺大學(xué)
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年9月6日