專利名稱：殼－核雙層微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種制藥技術(shù)領(lǐng)域的制劑制備方法，尤其是一種殼-核雙層微球
的制備方法。 制藥行業(yè)從藥物發(fā)現(xiàn)，到臨床的應(yīng)用，最后一個環(huán)節(jié)是藥物制劑。其中有一部分 藥物需要長期給藥才能治愈；還有一部分需要靶向等局部給藥。要達到這些目的，原料藥 必須要制備成相應(yīng)的劑型。例如需要長期給藥但在體內(nèi)的半衰期短的藥物，宜制備成緩釋 或控釋劑型；對于一些腫瘤的治療，需要一些藥物靶向于病照，例如靶向于腫瘤血管的栓塞 微球制劑等；基因重組技術(shù)用于治療蛋白的表達和生產(chǎn)的20多年以來，到目前為止，已有 30多個蛋白藥物產(chǎn)品投入臨床使用，近200個在審批和研發(fā)過程中，涌現(xiàn)出一批諸如安進 (Amgen)、基因技術(shù)(Genentech)等一批新的大型醫(yī)藥公司。相對于蛋白大分子藥物本身的 快速發(fā)展，其劑型技術(shù)進展緩慢。 一方面，蛋白大分子藥物口服不吸收、體內(nèi)半衰期短，需要 注射給藥；另一方面，許多何爾蒙、細胞因子類的蛋白藥物治療周期長，長期而頻繁地注射 成為必須，也影響患者順應(yīng)性的主要原因。緩釋蛋白藥物的劑型的研發(fā)，由于在制備微粒過 程導致活性的損失諸如W/0/W法制備的微球易突釋等缺點。發(fā)展制備具有活性保護的蛋白 微球又可以提高包封率和減少突釋的方法勢在必行。人們?yōu)榱藴p少突釋研究了制備雙層微 球，但是到目前還是不能解決這一難題。 經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)文獻的檢索發(fā)現(xiàn)，[Meng Shi， Yi-Yan Yang， Cheng-Shu Chaw，
Suat-Hong Goh， Shabbir M. Moochhala， Steve Ng， Jorge Heller， Double walledPLA/ PLGA microspheres -encapsulation of water—soluble and water—insolubl印roteins and their release priorities, Journal of Controlled Release 89(2003)167 77]， [Meng Shi， Yi_Yan Yang， Cheng_Shu Chaw， Suat_Hong Goh， Shabbir M. Moochhala， Steve
Ng， Jorge Heller，雙層POE/PLGA微球包封水溶性和水不溶性蛋白和它們的釋放特點，控 制釋放雜志，89(2003) 167-177]Meng Shi等人在該文獻報道了利用W/0/W方法把牛血清白 蛋白(BSA)和環(huán)孢霉素A(CyA)的包封在PLGA/PLA殼-核微球里。該文獻利用W/0/W最 見的復(fù)乳法來制備雙層微球，而復(fù)乳法的油水界面是公認的蛋白殺手，導致水溶性的蛋白 在該界面的聚集，同樣致使包封率也不高，存在不完全釋放和突釋。[Morita T. ， Sakamura
Y. ， Horikiri Y. ， Suzuki T. ， Yoshino H. ， Proteinencapsulation into biodegradable microspheres by a novel S/0/W emulsion methodusing poly (ethylene glycol)as a protein micronization adjuvant,Journal ofControlled Release 69(2000)435 44]，
(Morita T.等人在該文獻報道了利用新S/0/W乳化法制備載蛋白微球。只是改變了表面活 性劑以前報道較多的是用PVA，在這篇文獻改用PEG。但是仍然不能克服包封率低，存在突 釋和不完全釋放的缺點。
背景技術(shù)：

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種殼_核雙層微球的制備方 法。使其制備的微粒表面光滑圓整，均勻度好，顆粒規(guī)整無粘連；包封率高，突釋小，載藥量高。 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的 本發(fā)明將藥物顆粒分散在聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚 苯乙烯(PS)或聚乳酸(PLA)和聚[1，3_雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80) (P(CPP : SA20 : 80))的有機溶液中，或把親水性的藥物顆粒與PLA的有機溶液混和后，再 把PSA、PS或P(CPP : SA 20 : 80)的有機溶液混和；或把疏水性的藥物顆粒與PSA、PS或
p(cpp : sa 20 : so)先混和，再把pla的有機溶液混和；并攪拌或漩渦等使之分散均勻形
成混懸液；然后將混懸液加到外油相，再攪拌或漩渦形成微球，最后把它轉(zhuǎn)移到大水相中固 化1-4小時；然后離心收集微球，凍干保存。
本發(fā)明包括以下步驟 ①將藥物顆粒加入到聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚苯 乙烯(PS)或聚乳酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80) (P(CPP : SA20 : 80))微球方法的有機混合溶液、或把親水性的藥物顆粒與PLA的有機溶 液混和后，再把PSA、PS或P(CPP : SA 20 : 80)的有機溶液混和；或把疏水性的藥物顆粒 與psa、ps或p(cpp : sa20 : 80)先混和，再把pla的有機溶液混和；并攪拌或漩渦等使之
分散均勻形成混懸液。即油相-l(O》中攪拌或漩渦等使之均勻分散形成均勻的混懸液；
②將完成步驟①形成微球的混懸液加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的氯化 鈉溶液和重量百分比濃度為1-10% (w/w)表面活性劑乳化O. l-5min，然后把它轉(zhuǎn)移到重量 百分比濃度為1-10% (w/w)的氯化鈉溶液固化1-4小時；
③將完成步驟②的樣品凍干的微球； 所述的藥物顆粒，指的是親水性的藥物顆粒，或藥物載入到輔料中制備的顆粒，或 疏水性的藥物通過制劑的方法制備成不溶于有機溶劑的顆粒；
所述的藥物包括小分子藥物和大分子藥物； 所述的小分子藥物指的主要是化學藥物，大分子藥物主要是指生物大分子藥物， 尤其指蛋白大分子藥物、疫苗、抗體、核酸或脂質(zhì)體藥物； 所述的蛋白大分子藥物為促紅細胞生成素(EPO)、重組人粒細胞集落剌激因子 (G-CSF)、粒細胞_巨噬細胞集落剌激因子(GM-CSF)、疫苗、干擾素(IFN)、生長激素(GH)、表 皮生長因子(EGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-P)、胰島素樣生長因 子(IGF)、血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)、血小板生長因子(PDGF)、內(nèi)皮生長因子(EGF)、神 經(jīng)生長因子(NGF)、骨衍生性生長因子(BDGF)、骨形成蛋白(BMP)、組織多肽抗原(TPA)、抗 體(antibody)、凝血因子VIII (VIII)、或凝血因子IX遺傳因子； 所述的核酸為反義核苷酸(anti-RNA)、小分子RNA(RNAi)或基因(DNA);所述的 輔料指的主要是可以注射用級別，尤其是小糖類(蔗糖、海藻糖、葡萄糖、麥芽糖、或乳糖)、 及多羥基類化合物(甘露醇、山梨醇、甘油、l，2-丙二醇、赤鮮糖醇、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚 環(huán)氧乙烷、或聚吡咯烷酮)、多糖類化合物(葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、或環(huán) 糊精物質(zhì))、氨基酸化合物(甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、谷氨酸或組氨酸)、或無機鹽類物質(zhì)(鋅鹽、f丐鹽、銅鹽、鎂鹽、或鉬鹽)的一種或任意組合； 所述的藥物顆粒，其藥物顆粒的粒徑大小在0. 2-10 mm，以粒徑為1_5 y mm為佳。
所述的藥物顆粒，其重量百分比濃度為0. 2-50% (w/w)之間；以1-20% (w/w)為 佳。 所述的油相-l(O》為聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚 苯乙烯(PS)或聚乳酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)
(p(cpp : sa20 : 80))的有機溶液； 所述的聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚苯乙烯(PS)或聚乳 酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80) (P(CPP : SA 20 : 80)) 的有機溶液為聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚苯乙烯(PS)或聚乳酸 (PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)(P(CPP : SA 20 : 80)) 的有機溶液添加O. 1-20% (w/w)聚乙二醇(PEG)或泊洛沙姆(poloxmer) ;PLA和PSA的二 氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、氯仿、或丙酮有機溶液，以二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈或它們 的任意組合的有機溶液為佳； 所述的聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚苯乙烯(PS)或聚乳 酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80) (P(CPP : SA 20 : 80)) 的有機溶液濃度為PLA的重量百分比濃度為0. 5-80% (w/w)，其中以5-30% (w/w)為佳； PSA、PS或P(CPP : SA 20 : 80)的重量百分比濃度為20-99. 5% (w/w)，其中以70-95%
(w/w)為佳； 所述的表面活性劑為聚乙烯醇(PVA)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、 泊洛沙姆(poloxmer)、聚三梨醇、乙基纖維素(EC)、或吐溫； 所述的表面活性劑為PVA的重量百分比濃度為0. 5-10% (w/w)或含重量百分比 濃度為0.5-10% (w/w)氯化鈉等鹽溶液、PEG的重量百分比濃度為0.5-20% (w/w)或含重 量百分比濃度為0. 5-10% (w/w)氯化鈉等鹽溶液、PVP重量百分比濃度為濃度為0. 5-20% (w/w)或含重量百分比濃度為0.5-10% (w/w)氯化鈉等鹽溶液、泊洛沙姆重量百分比濃度 為0. 5-20%或含重量百分比濃度為0. 5-10% (w/w)氯化鈉等鹽溶液、或乙基纖維素重量百 分比濃度為為0.5-20% (w/w)或含重量百分比濃度為0.5-10% (w/w)氯化鈉等鹽溶液。
所述微球的粒徑為1-500 ii m，以10-100 ii m為佳； 本發(fā)明選擇了合適比例和濃度的聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA) 和聚苯乙烯(PS)或聚乳酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)
(p(cpp : sa 20 : so))的混合材料，使水溶性的藥物顆?；蛴腿苄缘乃幬锿ㄟ^制劑的方法 制備成油不溶的顆粒，避免用常規(guī)的w/o和w/o/w的包封率不高，及s/o/o的突釋嚴重，造
成的環(huán)境污染的缺點；采用該方法制備微球，其粒徑的大小可以根據(jù)不同需要，進行控制， 不污染環(huán)境；可以避免對藥物的治療的作用影響，尤其是那些物理化學性質(zhì)不穩(wěn)定的，對油 水界面敏感的藥物，如生物大分子藥物如蛋白質(zhì)大分子藥物、DNA、RNA或siRNA藥物。微粒 的表面光滑圓整，顆粒規(guī)整無粘連，粒徑可以根據(jù)需要進行調(diào)控從1 P m到500 m，其凍干 粉劑為白色細膩、疏松，不會塌陷、不粘連，再分散性良好?？梢赃\用到各種藥物緩釋或控釋 微球的制備及疫苗的佐劑。
具體實施例方式以下對本發(fā)明的實施例作詳細說明以下實施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進 行實施，給出了詳細的實施方式和過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。
以下實施例的實施條件
—、空白殼_核微球制備
1.制備油相-1 (0》 油相-i(o》的制備把PSA和PLA按照重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、 i : 6、6 : i、5 : i、4 : i、3 : 1、或2 : i混合溶于有機溶劑制備成濃度為1-50% (w/w)， 形成油相-1 (0》。
2.空白殼-核微球制備 油相-1(0》加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和重量百分比濃度為 1-10% (w/w)的表面活性劑水溶液并攪拌、超聲或漩渦0. l-5分鐘形成0/W，然后轉(zhuǎn)入重量 百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化鈉溶液固化l-4小時，離心收集微球并凍干 或揮發(fā)除去有機溶劑得到干燥的微球。
二、制備載藥物的微球 1.制備藥物顆粒，對與小分子藥物可以是常規(guī)的碾磨法、沉淀法、粉碎法或造粒 法；對于生物大分子藥物可以是水相-水相乳液法、低溫噴霧干燥法、相分離法、超臨界法 或金屬離子與生物大分子形成的復(fù)合物的方法；
2.制備混懸液 混懸液的制備把親水性的藥物顆粒與PLA的有機溶液混和后，再把PSA的有機溶 液混和(其中聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA)和聚苯乙烯(PS)或聚乳酸 (PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)(P(CPP : SA 20 : 80)) 的濃度比例均按照空白油相制備)；或把疏水性的藥物顆粒與聚癸二酸酐(PSA)、聚苯乙烯
(ps)或聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)(p(cpp : sa 20 : so))先
混和，再把PLA的有機溶液混和(其中其中聚乳酸(PLA)和聚癸二酸酐(PSA)、聚乳酸(PLA) 和聚苯乙烯(PS)或聚乳酸(PLA)和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)
(p(cpp : sa 20 : 80))的濃度比例均按照空白油相制備)；形成混懸液。 3.把藥物顆粒與制備空白微球油相-1混勻形成均勻的混懸液； 4.把步驟2或步驟3的混懸液加到重量百分比濃度為1-10 % (w/w)氯化鈉和
1-10% (w/w)的表面活性劑水溶液，并攪拌、漩渦或超聲0. l-5分鐘，形成復(fù)乳； 5.把步驟4的復(fù)乳，滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化
鈉溶液固化1-4小時，離心收集微球并洗滌3-5次，然后凍干得微球。 以下實施例克服了水溶性好的藥物包封率不高、突釋嚴重的缺點；對于生物大分 子藥物來說，克服了油水界面、高剪切力、界面、和交聯(lián)劑等，在溫和的條件下把生物大分子 藥物，如蛋白質(zhì)、多肽、疫苗、DNA、 RNA、 SiRNA、病毒和脂質(zhì)體載入微球中，能夠長期保持活 性。大大的減少保存的費用和提高療效。同時制備的雙層的微球大大的減少突釋。
實施例一 載有小分子藥物顆粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)按照親水性小分子藥物顆粒和PLA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比
7為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : 10等比例攪拌、漩 渦或超聲i-5分鐘形成均勻得混懸液，再把psa的有機溶液加到上述混懸液中，再攪拌、漩
渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體(s/0》乳液；或按照疏水性的藥物分子
顆粒和PLA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為i : i、i : 2、1 : 3、1 : 4、i : 5、 1 : 6、i : 7、1 : 8、i : 9、1 : 10等比例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再
把PLGA的有機溶液加到上述混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即
油包固體(s/0》乳液; (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳；
(3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例二 載有生物大分子藥物顆粒PLA/PSA殼_核微球的制備 (1)按照生物大分子藥物顆粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合溶
液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io等比例
攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液中，再
攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(s/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的1000ml氯化鈉溶 液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例三 載有牛血清白蛋白(BSA)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (l)BSA多糖和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合溶液重量比為
i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : 10等比例攪拌、漩渦或
超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液中，再攪拌、漩渦或
超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(s/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/w)的表面活性劑 水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到濃度為1-10% (w/w)的1000ml氯化鈉溶液固化1-4 小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。 實施例四 載有干擾素(ifn)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)載有干擾素(IFN)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合
溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io等比
例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(s/0》乳液；
(2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例五 促紅細胞生成素(EPO)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)促紅細胞生成素(EPO)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的
混合溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io
等比例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把psa的有機溶液加到上述混懸液
中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例六 粒細胞集落剌激因子(G-CSF)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)粒細胞集落剌激因子(G-CSF)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或
它們的混合溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、
1 : 10等比例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述 混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》 乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳；
(3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例七 粒細胞-巨噬細胞集落剌激因子(GM-CSF)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備
(1)粒細胞-巨噬細胞集落剌激因子(GM-CSF)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙
腈、乙酸乙酯或它們的混合溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、 i : 8、i : 9、i : 10等比例攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機 溶液加到上述混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油 包固體(s/0》乳液; (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例八 生長激素(GH)多糖微粒PLA/PS殼-核微球的制備 (1)生長激素(GH)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合溶液
重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io等比例攪
拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液中，再攪
拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-lOOOml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例九 生長激素(GH)多糖微粒P(CPP : SA 20 : 80)殼_核微球的制備 (1)生長激素(GH)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合溶液
重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io等比例攪
拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把P(CPP : SA 20 : 80)的有機溶液加到上
述混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(s/
0》乳液; (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-lOOOml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例十 血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或
它們的混合溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、
1 : 10等比例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述 混懸液中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》 乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-1000ml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例i^一 骨形成蛋白(BMP)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備
(1)骨形成蛋白(BMP)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們的混合
溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io等比
例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液中，
再攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳；
(3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-lOOOml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
實施例十二 骨衍生性生長因子(BDGF)多糖微粒PLA/PSA殼-核微球的制備 (1)骨衍生性生長因子(BDGF)多糖微粒和PLA的二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或它們
的混合溶液重量比為i : i、i : 2、i : 3、i : 4、i : 5、i : 6、i : 7、i : 8、i : 9、i : io
等比例攪拌、漩渦或超聲1-5分鐘形成均勻得混懸液，再把PSA的有機溶液加到上述混懸液
中，再攪拌、漩渦或超聲l-5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固體即油包固體(S/0》乳液； (2)把步驟(1)得乳液滴加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)氯化鈉和1-10% (w/V)的表面活性劑水溶液并攪拌、漩渦或超聲0. 1-5分鐘形成復(fù)乳； [ono] (3)把步驟(2)的復(fù)乳加到重量百分比濃度為1-10% (w/w)的100-lOOOml氯化 鈉溶液固化1-4小時； (4)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3-5次，凍干后得到微球。
權(quán)利要求
一種殼-核雙層微球的制備方法，其特征在于，包括以下步驟①混懸液的制備把藥物顆粒分散在聚乳酸和聚癸二酸酐、聚乳酸和聚苯乙烯或聚乳酸和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20∶80)的有機溶液中，或把親水性的藥物顆粒與PLA的有機溶液混和后，在把聚癸二酸酐、聚苯乙烯或聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20∶80)的有機溶液混和；或把疏水性的藥物顆粒與聚癸二酸酐、聚苯乙烯或聚[1，3雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20∶80)先混和，再把PLA的有機溶液混和；形成混懸液。②將混懸液加到重量百分比濃度為1-10％的氯化鈉和重量百分比濃為度1-10％的表面活性劑水溶液，攪拌0.1-5min形成1-500μm的微球；③將完成步驟②的復(fù)加到重量百分比濃度為1-10％的100-1000mL氯化鈉溶液固化1-4小時，離心收集微球并洗滌3-5次，然后凍干得微球；④將完成步驟③的樣品凍干的微球。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼_核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的藥物，包括疏 水的小分子藥物、親水性小分子藥物或大分子藥物；其重量百分比濃度為0. 2-50%，所述 的藥物顆粒，其藥物顆粒的粒徑大小在0. 2-10 ii m。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼-核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的小分子藥物指 化學藥物，大分子藥物是指蛋白大分子藥物、疫苗、抗體、核酸或脂質(zhì)體藥物的生物大分子 藥物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼-核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的蛋白大分子藥 物為促紅細胞生成素、重組人粒細胞集落剌激因子、粒細胞_巨噬細胞集落剌激因子、疫 苗、干擾素、生長激素、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、胰島素樣生長 因子、血管內(nèi)皮細胞生長因子、血小板生長因子、內(nèi)皮生長因子、神經(jīng)生長因、骨衍生性生長 因子、骨形成蛋白、組織多肽抗原、抗體、凝血因子VIII或IX遺傳因子。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼_核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的油相-1 (01) 為聚乳酸和聚癸二酸酐、聚乳酸和聚苯乙烯或聚乳酸和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙 烷-癸二酸](20 : 80)的有機溶液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的殼-核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的有機溶液為 聚乳酸和聚癸二酸酐、聚乳酸和聚苯乙烯或聚乳酸和聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸 二酸](20 : 80)的二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、氯仿、或丙酮有機溶液；所述的聚乳酸和聚癸二酸酐、聚乳酸和聚苯乙烯或聚乳酸和聚[1，3-雙(對羧基苯氧 基)丙烷-癸二酸](20 : 80)的有機溶液其濃度為聚乳酸的重量百分比濃度為O. 5-80%; 聚癸二酸酐、聚苯乙烯或聚[1，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](20 : 80)的重量百 分比濃度為20-99. 5%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼_核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的表面活性劑 為PVA的重量百分比濃度為0. 5-10%或含重量百分比濃度為0. 5-10%氯化鈉等鹽溶液、 PEG的重量百分比濃度為0. 5-20%或含重量百分比濃度為0. 5-10%氯化鈉等鹽溶液、PVP 重量百分比濃度為0. 5-20%或含重量百分比濃度為0. 5-10%氯化鈉等鹽溶液、泊洛沙姆 重量百分比濃度為0. 5-20%或含重量百分比濃度為0. 5-10%氯化鈉等鹽溶液、或乙基纖 維素重量百分比濃度為0. 5-20%或含重量百分比濃度為0. 5-10%氯化鈉等鹽溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求l所述的殼-核雙層微球的制備方法，其特征是，所述的微球的粒徑為 1_500 li m。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種制藥技術(shù)領(lǐng)域的制劑制備方法，尤其是一種殼-核雙層微球的制備方法。本發(fā)明將藥物顆粒分散在PLA和PSA的有機溶液中，并攪拌或漩渦等使之分散均勻形成混懸液；然后將混懸液加到外油相，再攪拌或漩渦形成微球，最后把它轉(zhuǎn)移到大水相中固化1-4小時；然后離心收集微球，凍干保存。本發(fā)明制備微球表面光滑圓整，顆粒規(guī)整無粘連，粒徑可以根據(jù)需要進行調(diào)控從1μm到500μm，其凍干粉劑為白色細膩，疏松，不會塌陷，不粘連，再分散性良好?？梢赃\用到各種藥物緩釋或控釋微球的制備及疫苗的佐劑。
文檔編號A61K9/19GK101773479SQ200910312550
公開日2010年7月14日 申請日期2009年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月30日
發(fā)明者任甜甜, 吳飛, 洪曉蕓, 袁偉恩, 金拓 申請人:上海交通大學