專利名稱：茚并吲哚化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于以茚并吲哚為構(gòu)架的新型的疏水抗氧化劑。它能高效地減少即抑制類脂類或雙相類脂類上的自由基，由此終止類脂類的過氧化過程和防止由這種過程或有關(guān)的過程而引起的各種病理反應(yīng)和疾病。本發(fā)明還涉及至少含有一種本發(fā)明的化合物或它們的鹽(特別是治療上可接受的鹽)作為活性組份的組合物，尤其是藥物組合物。另外，本發(fā)明還涉及制備這種化合物的方法和以藥物治療方式以及非醫(yī)藥應(yīng)用的方式使用該活性化合物的方法。在以非醫(yī)藥應(yīng)用方式使用中特別重要的是用于控制或終止藥用過程中的自由基。
一些生物過程或多或少地會(huì)產(chǎn)生一些含有能接受電子或能與它周圍的電子配對(duì)的不成對(duì)電子的穩(wěn)定中間體，這樣的中間體被稱之為自由基，它們可以是各種酶催化反應(yīng)和非酶催化劑反應(yīng)的產(chǎn)物，某些這樣的中間體對(duì)身體機(jī)能起著重要的作用，如對(duì)于DNA合成中還原核糖核苷二磷酸和在前列腺素合酶反應(yīng)中產(chǎn)生前列腺素。前列腺素主要與細(xì)胞損傷后的炎性反應(yīng)和其它各種機(jī)能有關(guān)，其它自由基間的反應(yīng)包括在嗜中性細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中的骨髓過氧物酶反應(yīng)，該反應(yīng)能殺滅細(xì)菌和其他入侵微粒和破壞在線粒體呼吸鏈中的電子轉(zhuǎn)移。大多數(shù)有機(jī)體含有化學(xué)抗氧化劑如α-生育酚(維生素E)抗壞血酸和不同的自由基以及過氧化鈍化酶如超氧物歧化酶，過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶。
現(xiàn)在各種類型的自由基越來越與多種病理反應(yīng)和疾病有聯(lián)系，例如局部缺血或再灌注損傷，血栓形成和栓塞，動(dòng)脈粥樣硬化，過敏癥/炎性反應(yīng)如支氣管氣喘和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，與Parkinson病有關(guān)的癥狀，Alzheimer病或老化，白內(nèi)障，糖尿病，腫瘤，抗腫瘤或免疫抑制劑和化學(xué)藥品的毒性，對(duì)于這些病理反應(yīng)和疾病一個(gè)可能的解釋是由于未知的原因抗自由基損傷的內(nèi)生保護(hù)劑不能有效地起作用以保護(hù)各組織免受自由基損傷。由過量產(chǎn)生的自由基引起的類脂類過氧化可能是上述各種病理反應(yīng)和疾病中的一個(gè)重要的損傷途徑。施用能抑制自由基間反應(yīng)(如類脂類過氧化)的外加的抗氧化劑將提供一種防止或治療上述病理反應(yīng)和疾病的方法。本發(fā)明描述了茚并吲哚類的新型抗氧化劑。它們能滿足在隔膜上積累即具有有效的疏水性和有效的類脂類過氧化抑制劑的兩個(gè)要求。這些新的抗氧化劑比任何其他的抗氧化劑如α-生育酚更為有效。
本發(fā)明的化合物也可以以非醫(yī)藥應(yīng)用的方式用于穩(wěn)定易氧化變質(zhì)的化合物，例如用于皮膚保護(hù)產(chǎn)品，食品添加劑，食品防腐劑和用于其它產(chǎn)物的保存。本發(fā)明延伸至兩種穩(wěn)定方法即使用茚并吲哚的穩(wěn)定方法和使用得到的穩(wěn)定組合物的穩(wěn)定方法。
以上描述的一些本發(fā)明的化合物為5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚和5，6-二氫茚并〔2，1-b〕吲哚，它公開在FASEBJ.2，A407(1988)。在其文摘中描述了抑制在用CCl4引發(fā)的NADPH-強(qiáng)壯鼠的肝臟微粒體中的類脂類過氧化。另外，在Fd Chem.Toxicol，26，517(1988)中描述了5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚是有效的類脂類過氧化抑制劑。
在日本專利申請(qǐng)194916/85(56471/87)中公開了2-羥基-和2-甲氧基取代的5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚。
從J chem.Physics，49，(7)，2906(1968)中可以得知5-甲基-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚和5-新戊基-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚是閃爍劑。
在J.Prakt.Chemie，4，(18)，41(1962)中公開了8-甲基-，8-甲氧基-，8-乙氧基-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚。
在美國專利3714148中公開了作為在制備二苯吖辛因衍生物方法中的分離中間體的7-氯-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚。
在J.Chem.Soc.2，2225(1952)中公開了3-異丙基-，3-氯-，8-溴-3-甲基-，3-氯-8-甲基-，8-溴-3-氯-，3，8-二甲基-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有結(jié)構(gòu)式ⅠA(DHII)和ⅠB(iSO-DHII)的茚并一吲哚結(jié)構(gòu)的化合物是有效的類脂類過氧化過程的抑制劑。下列結(jié)構(gòu)式ⅠA和ⅠB的化合物或它們的鹽是特別有效的抗氧化劑。
其中R是氫或低級(jí)烷基，R1和R2分別選自氫或低級(jí)烷基，R3，R4和R6分別選自氫，鹵素或低級(jí)烷基，R5是氫，羥基，鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，單或雙烷基氨基，NH2或NR11COR12，R7，R8，R9和R10分別選自氫，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R11是氫或低級(jí)烷基，R12是低級(jí)烷基，上述各基團(tuán)的定義應(yīng)滿足下述先決條件ⅰ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB中當(dāng)R為氫時(shí)R1到R10的取代基中至少有一個(gè)取代基不為氫，ⅱ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R，R1，R2，和R10為氫，R7和R9為低級(jí)烷基，R3，R4，R5和R6為氫或低級(jí)烷基或R5為羥基或低級(jí)烷氧基時(shí)R8不是羥基，本發(fā)明的新化合物或它們的鹽具有結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB，
其中R是氫或低級(jí)烷基，
R1和R2分別選自氫或低級(jí)烷基，R3，R4和R6分別選自氫、鹵素或低級(jí)烷基，R5為氫，羥基，鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R7，R8，R9和R10分別選自氫、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R11為氫或低級(jí)烷基，R12為低級(jí)烷基，上述各基團(tuán)定義的先決條件為ⅰ)在結(jié)構(gòu)式ⅠB中當(dāng)R為氫時(shí)R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不是氫，ⅱ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R為氫，甲基或新戊基時(shí)R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，ⅲ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R，R1，R2和R10為氫，R7和R9為低級(jí)烷基和R3，R4，R5和R6為氫或低級(jí)烷基或R5為羥基或低級(jí)烷氧基時(shí)R8不是羥基或甲氧基，ⅳ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R4為氯時(shí)R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不是氫，ⅴ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R9為乙基、異丙基、甲氧基或乙氧基時(shí)R至R8或R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不是氫，ⅵ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R9為乙基時(shí)R5不是甲基，ⅶ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R9為甲氧基或乙氧基時(shí)R3和R6不能同時(shí)為甲基，ⅷ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R8為甲基時(shí)R3和R9不能同時(shí)為甲基或R至R7，R9或R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不是氫;
ⅸ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R5為溴時(shí)R至R4，R6至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫;
在類脂類過氧化過程中作為有效抑制劑的結(jié)構(gòu)式ⅠA和ⅠB的下列化合物或它們的藥學(xué)上可接受的鹽對(duì)于醫(yī)學(xué)治療是特別有用的抗氧化劑，
其中R為氫或低級(jí)烷基，R1、R2分別選自氫或低級(jí)烷基，R3、R4和R6分別選自氫、鹵素或低級(jí)烷基;
R5為氫、羥基、鹵素或低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基、單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12;
R7、R8、R9和R10分別選自氫或羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基，單或雙烷基氨基，NH2或NR11COR12;
R11為氫或低級(jí)烷基;
R12為低級(jí)烷基;
上述各基團(tuán)定義的先決條件為ⅰ)當(dāng)R為氫時(shí)R1至R10中至少有一個(gè)取代基不為氫;
ⅱ)在結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R、R1、R2和R10為氫，R7和R9為低級(jí)烷基，R3、R4、R5和R6為氫或低級(jí)烷基或R5為羥基或低級(jí)烷氧基時(shí)R8不能為羥基。
本發(fā)明的茚并吲哚和異-茚并吲哚結(jié)構(gòu)具有下列的環(huán)編號(hào)。
茚并吲哚結(jié)構(gòu)
5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚，(DHII)異-茚并吲哚結(jié)構(gòu)
5，6-二氫茚并〔2，1-b〕吲哚(異-DHII)本發(fā)明化合物的取代基定義中，術(shù)語“低級(jí)”是指碳原子數(shù)不超過6，優(yōu)選的是碳原子數(shù)不大于4。
在R、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12的定義中低級(jí)烷基是具有1-6個(gè)碳原子的烷基，優(yōu)選的是具有1-4個(gè)碳原子的烷基，如甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、仲丁基或叔-丁基，特別優(yōu)選的是甲基和乙基。
R5、R7、R8、R9和R10的定義中的低級(jí)烷氧基是具有1-6個(gè)碳原子，優(yōu)選的是具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異-丙氧基、正-丁氧基、仲-丁氧基或叔-丁氧基，特別優(yōu)選的是甲氧基和乙氧基。
在R3、R4、R5和R6定義中的鹵素是氯、溴、碘或氟。
在R5、R7、R8、R9和R10定義中的單或雙低級(jí)烷基氨基包括甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、丙基氨基、二丙基氨基、丁基氨基、二丁基氨基、優(yōu)選的是乙基氨基或二乙基氨基。
本發(fā)明化合物中的一組優(yōu)選的化合物是其中的R8為單或雙低級(jí)烷基氨基，特別是乙基氨基和二乙基氨基，和那些其中的R3和/或R5是低級(jí)烷基特別是甲基的化合物以及那些其中的R5是低級(jí)烷氧基，特別是甲氧基的化合物和那些其中的R8是NR11COR12特別是NH-乙酰基的化合物。
本發(fā)明化合物中的另一組優(yōu)選的化合物是這些化合物，其中ⅰ)R8是單或雙低級(jí)烷基氨基，優(yōu)選的是乙基氨基或二乙基氨基和R、R1至R7和R9至R10為氫;
ⅱ)R5為低級(jí)烷氧基，優(yōu)選的是甲氧基和R、R1至R4和R6至R10為氫;
ⅲ)R3和/或R5為低級(jí)烷基，優(yōu)選的為甲基，和R、R1、R2、R4、R6至R10為氫;
ⅳ)R8為NHCOR14，優(yōu)選的為NH-乙酰基。
下列是結(jié)構(gòu)式ⅠA和ⅠB的優(yōu)選化合物
5，10-二氫-10，10-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-6-氯代茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-氟代茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-10-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-6，8-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-甲氧基-1，3，6，8-四甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-甲氧基-1，3-二甲基-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-羥基-1，3-二甲基-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2，8-二甲氧基-1，3-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-叔丁基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-乙基氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-二乙基氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲氧基-7，9-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-羥基-7，9-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲氧基-6-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，6-二氫-9-甲氧基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-異丙基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-氟代茚并〔1，2-b〕吲哚5，6-二氫-9-叔丁基茚并〔2，1-b〕吲哚5，10-二氫-2-(N-乙酰基-N-乙基)氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2-乙酰氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-6-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-6-異丙基-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-4，6-二甲基-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-二乙基氨基-6-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-乙基氨基-6-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲氧基-6，10，10-三甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-9-二乙基氨基-6-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-9-甲氧基-6-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-7，9-二甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚
5，10-二氫-8-二乙基氨基-6，10，10-三甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-4-二乙基氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-3-羥基-2，4-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-3-甲氧基-2，4-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-7-羥基-6，8-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-7-甲氧基-6，8-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2，8-二羥基-1，3，7，9-四甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-2，8-二甲氧基-1，3，7，9-四甲基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-羥基-7，9-二叔丁基茚并〔1，2-b〕吲哚5，10-二氫-8-甲氧基-7，9-二叔丁基茚并〔1，2-b〕吲哚5，6-二氫-9-甲氧基-7-甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-二乙基氨基-7-甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-2-羥基-1，3-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚
5，6-二氫-2-二氧基-1，3-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-羥基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-甲氧基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-羥基-8，10-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-甲氧基-8，10-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-8-羥基-7，9-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-8-甲氧基-7，9-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-乙酰氨基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-(N-乙酰基-N-乙基)氨基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-9-乙酰氨基茚并〔2，1-b〕吲哚5，10-二氫-8-乙酰氨基茚并〔1，2-b〕吲哚5，6-二氫-1-二乙基氨基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-二乙基氨基茚并〔2，1-b〕吲哚5，6-二氫-3-羥基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚上述某些優(yōu)選的化合物是已知的并已公開在現(xiàn)有技術(shù)中。
具有結(jié)構(gòu)式ⅠA和ⅠB的化合物可以以本身的形式或以藥學(xué)上可接受的鹽的形式存在。
藥物制劑按照本發(fā)明結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB的化合物可以以含有游離堿形式的活性組份或藥學(xué)上可接受的無毒性酸加成鹽形式的活性組份的藥物制劑的形式按藥學(xué)上可接受的劑形通過口服、直腸、直皮或注射給藥，所說的無毒性酸加成鹽可以是氫氯化物、氫溴化物、乳酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、氨基磺酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽等。劑形可以是固體、半固體或液體制劑。通?；钚越M份的含量為制劑的0.1%～99%(重量)，更具體的是對(duì)于注射制劑，活性組份為制劑的0.5～20%(重量)，對(duì)于口服給藥，活性組份的含量為制劑的0.2-50%(重量)。對(duì)于直皮給藥通常使用的活性組份占合適的載體的0.1～5%(重量)。
為制備劑量單位形式的適宜于口服使用的含結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物的藥物制劑，將選出的化合物與固體賦形劑混合，例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉如土豆淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉、纖維素衍生物，粘合劑如明膠或聚乙烯基吡咯烷酮，潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等，混合后再將其壓制成片狀。如果需要有包覆層的藥片，它的核可以按上述方法制得，而后再用含有樹膠，阿拉伯樹膠、明膠、滑石、二氧化鈦等的濃糖液包覆即可制得。另外，這種藥片也可以用本領(lǐng)域內(nèi)普通技術(shù)人員熟知的聚合物來包覆，這種聚合物溶解在易揮發(fā)的有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑混合物中。為了容易地區(qū)分含不同活性物質(zhì)或不同量活性化合物的藥片可以在包覆層中加入顏料。
為制備軟膠囊，可以將活性物質(zhì)與植物油或聚乙二醇混合來制得。硬膠囊可以含有活性物質(zhì)的顆粒，它的制備可以使用上述用于片劑制備的賦形劑如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇，淀粉(如，土豆淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉)，纖維素衍生物或明膠。液體或半固體藥劑也是填入硬膠囊中。
直腸給藥的藥劑單位可以是溶液或懸浮液或制成含有與中性脂肪基劑混合的活性物質(zhì)的栓劑或制成含有與植物油或石蠟油混合的活性物質(zhì)的直腸給藥膠囊。
口服的液體制劑可以是糖漿或懸浮液，例如含有約0.2%至20%(重量)在此所述的活性物質(zhì)，其余的是糖和由乙醇，水，丙三醇和丙二醇形成的混合物的液體。任選的在這種液體制劑中還可含有調(diào)色劑，調(diào)味劑，蔗糖和羧甲基纖維素作為增稠劑或含有本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員熟知的其它賦形劑。
通過注射給藥的胃腸外應(yīng)用的溶液可以是活性物質(zhì)水溶性的藥學(xué)上可接受的鹽的水溶液，優(yōu)選的為濃度是約0.5%～10%(重量)的水溶液。這些溶液還可以含有穩(wěn)定劑和/或緩沖劑，它們可以被方便地制成各種劑量單位的針?biāo)帯?br> 本發(fā)明的化合物在用于人體治療過程中的合適的每日劑量為對(duì)于口服0.01～100mg/Kg(體重)對(duì)于胃腸外給藥0.001～100mg/Kg(體重)。
制備方法本發(fā)明的化合物可以按下面的合成路線來制備，但是它的制備并不只限這些方法，本發(fā)明的化合物還可以現(xiàn)有技術(shù)中描述的方法來制備。
a)5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚(DHII，ⅠA)和在苯型環(huán)的原子上有官能基團(tuán)和/或在C-10上有取代基(如烷基(如甲基，乙基，異丙基);或烷氧基(如甲氧基或乙氧基))的類似物可以用Fischer indole Synthesis來制備。
1-茚酮(Ⅲ)或在苯型環(huán)上和C-3上帶有合適的官能團(tuán)取代的等同物起始原料與以游離堿或鹽，優(yōu)選的為氫氯化物的形式存在的苯肼進(jìn)行反應(yīng)。R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10與前述結(jié)構(gòu)式ⅠA中所定義的相同。通常反應(yīng)物溶于溶劑中，優(yōu)選的為醇類溶劑如乙醇或丙醇。在某些情況下反應(yīng)不需要加熱，但是某些情況下有必要將反應(yīng)混合物加熱到回流溫度保持1小時(shí)或更長的時(shí)間。苯腙產(chǎn)物可以通過用水稀釋反應(yīng)混合物，然后過濾分離或用合適的溶劑萃取來分離。用結(jié)晶法和色譜分離法可使其進(jìn)一步提純。對(duì)于色譜分離來說，硅膠柱色譜分離是理想的分離方法，其中可以使用多種洗脫溶劑。
苯腙環(huán)化反應(yīng)制得DHII和它的衍生物的方法是將苯腙化合物溶解在合適的溶劑中，優(yōu)選的是醇類溶劑如乙醇或丙醇，然后用酸如鹽酸，乙酸或三氟乙酸處理，反應(yīng)中需要加熱。路易士酸如氯化鋅象在鹵化溶劑如氯仿中的多磷酸酯一樣可以用于催化該環(huán)化反應(yīng)?？梢钥闯鋈绻谶@二步反應(yīng)的第一步中使用苯肼鹽，則中間產(chǎn)物苯腙衍生物可不被分離，在這種情況下環(huán)化的DHII產(chǎn)物是直接形成的。如果將苯腫和茚酮在乙酸溶劑中進(jìn)行反應(yīng)可以得到類似的結(jié)果。
用水稀釋反應(yīng)混合物然后通過過濾或溶劑萃取可以將產(chǎn)物二氫茚并吲哚(DHII)從反應(yīng)混合物中分離出來，進(jìn)一步的提純可以通過從合適的溶劑中結(jié)晶或通過由硅膠作為柱材料的柱色譜分離來進(jìn)行。在另外的環(huán)化反應(yīng)中在沒有溶劑存在的情況下，苯腙可以用二氧化硅來加熱。然后產(chǎn)物二氫茚并吲哚可以在反應(yīng)結(jié)束后用合適的溶劑從二氧化硅中萃取出來。所得產(chǎn)物的提純可按前述的方法來進(jìn)行。
b)5，6-二氫茚并〔2，1-b〕吲哚(異DHII，ⅠB)和在苯型環(huán)的原子上有官能基團(tuán)和有C-5的雙取代基的類似物可以通過Fischer indole Synthesis來制備。
2-茚酮(Ⅳ)或在苯型環(huán)上和C-1上具有合適的官能基團(tuán)取代的等同物起始原料與苯肼(Ⅱ)或它們的鹽進(jìn)行反應(yīng)。對(duì)于上述的化合物，其中R1和R2是氫，或R1是低級(jí)烷基和R2是氫，R7至R10為氫。當(dāng)R1和R2為低級(jí)烷基時(shí)R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，和R10與前述結(jié)構(gòu)式ⅠB中的定義相同。反應(yīng)條件和其它的反應(yīng)物與前述的DHII制備方法中的相似。
c)DHII骨架的另一個(gè)合成方法包括合適的3-苯甲酰基吲哚(Ⅴ)的環(huán)化和所得的四環(huán)酮(Ⅵ)的還原。
其中R，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10與前述結(jié)構(gòu)式ⅠA中的定義相同。這里的環(huán)化是通過酮和鈀(o)的反應(yīng)來進(jìn)行的。當(dāng)環(huán)化用Pd進(jìn)行時(shí)R11為氫，苯甲酰基帶有碘代基，鄰位上具有羰基的化合物，它們最好暴露在紫外線下進(jìn)行環(huán)化。當(dāng)環(huán)化反應(yīng)通過光化學(xué)反應(yīng)來進(jìn)行時(shí)，R11為鹵素優(yōu)選的為碘、溴未取代的苯甲?；衔锖退鼈儹h(huán)化參見Synthesis，607(1978)，和Heterocycles，2433(1983);光化學(xué)環(huán)化反應(yīng)可參見Chem.SOC.Perkin Trans.1，1523(1974)。
四環(huán)酮的還原可以通過與在乙醚或四氫呋喃中的氫化鋁鋰的反應(yīng)來進(jìn)行，另外，羰基可以用Wolff-Kishner還原法來還原。
d)5，6-二氫茚并〔2，1-b〕吲哚(異-DHII)骨架的另一個(gè)合成方法包括由相應(yīng)的鄰位鹵代酰苯胺(Ⅶ)經(jīng)金屬取代如鋰取代而得的合適的二價(jià)陰離子Ⅷ按照Wender和White(Tetrahedron39，3767(1983))的方法與合適的α-鹵代酮Ⅸ進(jìn)行的反應(yīng)。
R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10與前述結(jié)構(gòu)式ⅠB中的定義相同。
X1為鹵素如溴，X2為氯，在某些情況下，當(dāng)所需的閉環(huán)反應(yīng)沒有迅速發(fā)生時(shí)，則需要用強(qiáng)堿如叔丁醇鉀進(jìn)一步處理來完成反應(yīng)。
制得的DHII(ⅠA)和異-DHII(ⅠB)化合物的改良e)5-烷基DHII衍生物可以由溶解在非質(zhì)子傳遞溶劑如丙酮，乙腈，二甲基亞砜(DMSO)，二甲基甲酰胺(DMF)中的相應(yīng)的5H-DHII化合物與堿如氫化鈉，以及烷基鹵化物或烷基硫酸鹽即R-鹵化物，R-硫酸鹽(其中R為低級(jí)烷基)進(jìn)行N-烷基化反應(yīng)來合成。
5-甲基化合物最好是通過使用在二甲基亞砜中的氫化鈉溶液，然后加入作為烷基化劑的二甲基硫酸鹽來合成。6-烷基異DHII衍生物也是以上述類似的方法來合成。
f)羥基取代的化合物可以從相應(yīng)的烷氧基取代的化合物通過標(biāo)準(zhǔn)的醚脫烷基化方法，即使用不同的路易士酸來合成。
g)N-烷基氨基取代的化合物可以用常用的還原方法或烷基化后還原的方法從相應(yīng)的N-酰基化合物制得。
h)N-酰基氨基取代的化合物可以用常用的?；椒◤南鄳?yīng)的胺制得。
下列實(shí)施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明的原理及實(shí)施方案，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此，實(shí)施例中的溫度是指攝氏溫度。
實(shí)施例1 5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚將1-茚酮(13.21g，0.1mol)和鹽酸苯肼(14.48g，0.1mmol)的混合物在冰醋酸(150cm3)中加熱。當(dāng)溶液的溫度達(dá)到回流溫度時(shí)，鹽酸肼已經(jīng)溶解。隨后從該溶液中將會(huì)沉淀出褐色固體。立即停止加熱并將反應(yīng)冷卻。過濾出固體并用大量的水洗滌，然后在多孔狀淀土上干燥，將干燥后所得的固體加入到無水乙醇(150Cm3)中并加熱到沸騰，然后再進(jìn)行熱濾，得到的產(chǎn)物用冷乙醇(150Cm3)洗滌，在真空爐中干燥得到米色固體狀的標(biāo)題化合物。收率18.50g(90%)熔點(diǎn)258-9℃。1H NMR(DMSO-d6)δ3.67(2H，S)，7.07(1H，ddd，)，7.14(1H，ddd，)，7.20(1H，ddd，)，7.36(1H，dd，)，7.51(1H，d，)，7.52(1H，d，)，7.57(1H，d，)，7.67(1H，d，)，11.6(1H，br，)。
實(shí)施例2。5，10-二氫-5-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚在氮?dú)夥障聦浠c(375mg，15.6mmol)加入到二甲基亞砜(DMSO)(13cm3)中。將所得溶液加熱到70℃直止無氣體(H2)溢出為止。然后將溶液冷卻至室溫并加入溶解在最少量DMSO中的5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚(2.69g，13.1mmol)。在室溫下攪拌1小時(shí)之后再加入二甲基硫酸酯(1.5cm3，15mmol)，并繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后小心地加入水(3cm3)并將該反應(yīng)物倒入冰/水中。用吸濾收集生成的固體，所得固體先用水洗滌并用水泵干燥，然后再用汽油洗滌(60°-80℃)。從乙醇中結(jié)晶得到無色針形的標(biāo)題化合物。收率1.52g(53%)，熔點(diǎn)152℃。1H NMR(CDCl3)δ3.55(2H，S，)，3.85(3H，S，)，6.8-7.4(8H，m，arom，)。
實(shí)施例3 5，10-二氫-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚向攪拌過的鹽酸對(duì)-甲氧基苯肼(3.5g，20mmol)和1-茚酮(2.35g，20mmol)在無水乙醇(80cm3)中的溶液中逐滴加入三乙胺(2.01cm3，20mmol)，繼續(xù)攪拌該溶液直至薄層液相色譜分析顯示出反應(yīng)混合物中不再含有剩余的起始反應(yīng)物(約1小時(shí))。除去溶劑，將所得的黃色殘留物置于多磷酸酯在氯仿中的溶液(它由五氧化二磷(50g)在氯仿(100cm3)和乙醚(50cm3)中的溶液煮沸12小時(shí)后制得的)中回流加熱。1小時(shí)后除去溶劑，將所得的黑色殘留物置于水(200cm3)中攪拌。該混合物用乙醚萃取3次，有機(jī)相用水洗滌并用MgSO4干燥，除去溶劑后得到本色的固體，然后從乙酸乙酯/汽油(60-80℃)中結(jié)晶得到本色片狀的標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)207℃收率3.8g(78%)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.66(2H，S，)，3.79(3H，S，)，7.4-7.6(7H，m，)，11.4(1H，br，)。
實(shí)施例4 5，10-二氫-10-甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將3-甲基-1-茚酮(500mg，3.42mmol)(它是由類似于A.M.Weidler等人在Acta Chem.Scand.，18P.148(1964)中描述的方法制得的)和苯肼(0.35cm3，3.5mmol)在冰醋酸(20cm3)中加熱至回流溫度，2分鐘后將濃鹽酸(1cm3)加入到回流冷凝器中，繼續(xù)使反應(yīng)混合物沸騰75分鐘，然后將其冷卻。將冷卻后的溶液倒入冰/水中并用乙酸乙酯萃取，萃取液依次用鹽水和水洗滌，然后用MgSO4干燥。真空蒸發(fā)溶劑，殘留物用柱色譜分離(10%EtOAc/汽油〔60-80℃〕)得到乳白色固體狀的標(biāo)題化合物。收率320mg(43%)，熔點(diǎn)153-155℃，1H NMR(DMSO-d6)δ1.50(3H，d，)，3.85(1H，q)，7.0-7.6(8H，m，)，11.55(1H，S，)。
實(shí)施例5 5，10-二氫-10，10-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將由R.Knorr等人在Leibig′s Annalen，1207(1980)中描述的方法制得的3，3-二甲基-1-茚酮(20.0g，0.125mol)和苯肼(12.3cm3，0.125mol)在冰醋酸(200cm3)中的溶液加熱到回流溫度。通過冷凝器加入濃鹽酸(10cm3)，然后繼續(xù)使反應(yīng)混合物沸騰2小時(shí)，將該所得的溶液冷卻并倒入水(500cm3)中。用乙醚萃取該水3冷，收集萃取液并用鹽水和水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑，向所得的殘留物中加入汽油(60-80℃)，將得到的懸浮液加熱至沸騰，得到的固體產(chǎn)物經(jīng)過濾后，濃縮其母液，冷卻的同時(shí)又得到了更多的固體產(chǎn)物，作為母液被分離出來的附加產(chǎn)物進(jìn)一步濃縮。收集固體產(chǎn)物并從汽油中結(jié)晶得到標(biāo)題化合物。收率10.2g(35%)，熔點(diǎn)160℃，1H NMR(CDCl3)δ1.60(6H，s，)、7.1-7.7(8H，m，)、8.16(1H，s，)。
實(shí)施例6 5，10-二氫-6，8-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將鹽酸2，4-二甲基苯肼(1.27g，7.35mmol)和1-茚酮(1g，1.1eq)的冰醋酸(15cm3)中的溶液加熱至回流溫度30分鐘。冷卻反應(yīng)混合物并將其倒入冰/水(200cm3)中，用鹽飽和所得的溶液，用乙醚萃取。用MgSO4干燥所得的醚溶液，在真空中蒸發(fā)。過量的乙酸通過在真空中與甲苯和石油醚(60-80℃)的蒸餾被除去，得到深色固體，所得產(chǎn)物先用“吸濾瓶”色譜提純，然后從汽油(60-80℃)中結(jié)晶得到無色固體的標(biāo)題化合物。收率0.53g(31%)，熔點(diǎn)182℃。1H NMR(CDCl3)，δ2.42，2.46(6H，S，)，3.62(2H，S，)，6.7-7.6(6H，m，)，8.05(1H，br，)。
實(shí)施例7 5，6-二氫茚并〔2，1-b〕吲哚將2-茚酮(5.25g，39.7mmol)和鹽酸苯肼(5.74g，39.7mmol)在冰醋酸(60cm3)中加熱至回流溫度1小時(shí)，然后冷卻，將所得溶液倒入冰/水中并通過過濾收集沉淀的固體。在用柱色譜法部分提純后，從乙酸乙酯中結(jié)晶(活性炭)得到無色針狀的標(biāo)題化合物，收率0.64g(80%)，熔點(diǎn)205℃。1H NMR(DMSO-d6)，δ3.65(2H，S，)，7.0-7.2(8H，)，10.40(1H，br，)。
實(shí)施例8 5，10-二氫-6-氯茚并〔1，2-b〕吲哚ⅰ)將1-茚酮(熔點(diǎn)128℃，72mg，0.28mmol)的鄰-氯代苯腙從二氯甲烷中吸附到二氧化硅上(Merck NO.7736，500mg)，將所得的粉末在吸水真空的條件下加熱到140℃30分鐘。冷卻時(shí)，產(chǎn)物用乙酸乙酯從二氧化硅中被萃取出來，然后除去溶劑，殘留物通過含有5%乙酸乙酯/汽油(60-80℃)的“快速”二氧化硅填料的洗脫來提純。得到無色固體的標(biāo)題化合物，收率47mg(65%)。
ⅱ)將1-茚酮(650mg，2.5mmol)的鄰-氯代苯腙在多磷酸酯(參見5，10-二氫-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚的制備方法)的氯仿溶液中煮沸30分鐘。除去溶劑，殘留物置于水(75cm3)中攪拌1小時(shí)。用乙醚萃取得到的綠色溶液用水洗滌，用MgSO4干燥并蒸發(fā)。用柱色譜(Rf〔5%EtOAc/汽油(60-80℃)〕0.5)分離提純得到標(biāo)題化合物的無色固體。收率500mg(82%)，熔點(diǎn)139℃。1H NMR(CDCl3)δ3.72(2H，S，)，7.0-7.6(7H，m，)，8.5(1H，br，)。
實(shí)施例9 5，10-二氫-8-甲基茚并〔1，2〕吲哚將鹽酸對(duì)-甲苯基肼(9.75g，61.5mmol)和1-茚酮(8.13g，61.5mmol)在含有濃鹽酸(5cm3)的乙醇(60cm3)中加熱至回流溫度。加熱2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物慢慢地冷卻至室溫，所得產(chǎn)物被分離，過濾，用10%的乙醇水溶液洗滌，在真空爐中干燥，得到標(biāo)題化合物的無色結(jié)晶固體。收率10.0g(74%)，熔點(diǎn)225℃(從乙醇)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.4(3H，S，)，3.6(2H，S，)，7.8-8.7(7H，m，)，11.7(1H，br，)。
實(shí)施例10 5，10-二氫-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚將鹽酸4-異丙基苯肼(6.3g，34mmol)和1-茚酮(4.5g，34mmol)的混合物在含有濃鹽酸(2cm3)的乙醇(40cm3)中加熱至回流溫度。加熱持續(xù)4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，在這同時(shí)將會(huì)從溶液中結(jié)晶出無色晶體的產(chǎn)物。所得的化合物經(jīng)過濾，在真空爐中干燥，和從乙醇/水中重結(jié)晶得到無色的棱晶。收率6.59g，(79%)，熔點(diǎn)193℃(從乙醇/水)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.27(6H，d，)、2.96(1H，七重峰，)、3.65(2H，S，)、6.9-7.6(7H，m，)、11.2(1H，br，)。
實(shí)施例115，10-二氫-2-甲氧基-1，3-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將5-甲氧基-4，6-二甲基-1-茚酮(3.0g，16mmol)和鹽酸苯肼(2.3g，16mmol)的混合物在含有濃鹽酸(2cm3)的乙醇(20cm3)中加熱至回流溫度。反應(yīng)混合物回流加熱6小時(shí)后被冷卻至室溫，然后加入水，過濾出生成的沉淀物，將所得產(chǎn)物在真空爐中干燥，用柱色譜分離提純得到無色固體的標(biāo)題化合物。收率2.8g(67%)，熔點(diǎn)177℃(從乙酸乙酯汽油(60-80℃))。1H NMR(CDCl3)δ2.36(6H，s，)、3.56(2H，s，)、3.76(3H，S，)、7.1-7.6(5H，m，)、8.2(1H，br，)。
實(shí)施例125，10-二氫-2-羥基-1，3-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將5，10-二氫-2-甲氧基-1，3-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚(2.4g，9.1mmol)和氯化吡啶鎓(5.8g)混合并將其加熱至200℃30分鐘，冷卻反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯和水中分配，有機(jī)相用2M鹽酸洗滌3次，然后用水洗滌3次，用MgSO4干燥，真空除去溶劑，殘留物用柱色譜分離提純得到標(biāo)題化合物的無色棱晶。收率1.5g(66%)熔點(diǎn)190℃(從二氯甲烷)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.25(3H，s，)、2.26(3H，S，)、3.50(2H，s，)、6.9-7.5(5H，m，)、8.16(1H，br，)、11.33(1H，br，)。
實(shí)施例135，10-二氫-2-甲氧基-1，3-二甲基-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚將5-甲氧基-4，6-二甲基-1-茚酮(3.1g，16mmol)和鹽酸對(duì)-異丙基苯肼(3.05g，16mmol)的混合物在含有濃鹽酸(2cm3)的乙醇(20cm3)中加熱至回流溫度，反應(yīng)混合物回流加熱4小時(shí)后，將其冷卻至室溫，將生成的結(jié)晶沉淀物過濾，用10%乙醇水溶液洗滌，在真空爐中干燥得到標(biāo)題化合物的淺綠色結(jié)晶固體。收率3.04g(62%)，熔點(diǎn)130℃(從乙醇)，1H NMR(CDCl3)δ1.33(6H，d，)、2.34(3H，s，)、2.35(3H，s，)3.02(1H，七重峰，)、3.6(1H，br，)、3.76(2H，s，)、7.08(1H，s，)、7.30(1H，d，)7.45(1H，s，)、8.12(1H，s，)。
實(shí)施例145，10-二氫-8-叔丁基茚并〔1，2-b〕吲哚將鹽酸4-叔丁基苯肼(1.74g，8.67mmol)和1-茚酮(1.15g，1eq)在乙醇(15cm3)中的溶液加熱至回流溫度，加入幾滴濃鹽酸，將反應(yīng)混合物加熱至回流12小時(shí)后，將其冷卻，過濾固體物質(zhì)得到無色針狀的物質(zhì)，熔點(diǎn)202℃，1H NMR(CDCl3)δ8.15(1H，br)、7.7-7.1(7H，m)、3.7(2H，br)、1.42(9H，s)實(shí)施例155，10-二氫-2-羥基-1，3-二甲基-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚將5，10-二氫-2-甲氧基-1，3-二甲基-8-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚(0.50g，1.64mmol)在無水條件下溶解在無水二氯甲烷(DCM，2cm3)中，并冷卻至-78℃，加入三溴化硼(2cm3、1.2eq在DCM中的1M溶液)，然后加熱至室溫，由此生成了懸浮液。20分鐘后使其再次溶解，然后小心地加入水(2cm3)，混合物用更多的二氯甲烷(DCM)和飽和碳酸氫鈉溶液(一些固體在萃取過程中被最終溶解)萃取，二氯甲烷層用Na2SO4干燥，通過“快速”二氧化硅填料(用二氯甲烷洗脫)過濾得到白色固體(0.43g，90%)熔點(diǎn)173℃(分解)，1H NMR(CDCl3)δ8.04(1H，br)、7.43(1H，br)、7.29(1H，d，J＝8.2)、7.04(1H，br)、4.58(1H，br)、3.55(2H，br)、30.2(1H，七重峰，J＝7.0Hz)、2.30(3H，s)、2.29(3H，s)、1.33(6H，d，J＝7.0Hz)。
實(shí)施例165，10-二氫-2-甲氧基-1，3，6，8-四甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將4，6-二甲基-5-甲氧基-1-茚酮(2.2g，11.6mmol)和鹽酸2，4-二甲基苯肼(2.00g，1eq)在含有濃鹽酸(1cm3)的乙醇(15cm3)中加熱至回流溫度。2小時(shí)后，過濾出沉淀物并用氫氧化銨溶液洗滌。所有收集得到的物質(zhì)在鹽析分離協(xié)助下用乙酸乙酯萃取。將溶劑干燥并在真空中蒸發(fā)，所得產(chǎn)物用柱色譜分離來提純(用5%EtOAc/60-80℃汽油洗脫)，吲哚產(chǎn)物從二氯甲烷/60-80℃汽油中重結(jié)晶得到淺黃色的針狀產(chǎn)物。熔點(diǎn)210℃，1H NMR(CDCl3)δ8.03(1H，br)，7.25(1H，S)，7.15(1H，S)，6.81(1H，S)，3.76(3H，S)，3.53(2H，S)，2.49(3H，S)，2.43(3H，S)，2.37(6H，S)。
實(shí)施例17 5，10-二氫-2，8-二甲氧基-1，3-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將4，6-二甲基-5-甲氧基-1-茚酮(3.32g，17.5mmol)和鹽酸4-甲氧基苯肼(3.05g，1eg)在含有鹽酸(1cm3)的乙醇(25cm3)中的溶液加熱到回流溫度2小時(shí)，冷卻后除去溶劑，所得物質(zhì)被萃取分布在乙醚和碳酸氫鈉溶液中。有機(jī)層經(jīng)干燥，蒸發(fā)和用柱色譜分離(用50%二氯甲烷/60-80℃汽油洗脫)提純得到淺黃色固體產(chǎn)物(2.30g，45%)，熔點(diǎn)180℃(從EtOAc/60-80°汽油)。
1H NMR(CDCl3)δ8.10(1H，br)，7.19(1H，d，J＝8.6HZ)，7.06(1H，d，J＝2.3HZ)，6.98(1H，S)，6.79(1H，dd，J＝8.6 2.3)，3.87(3H，S)，3.75(3H，S)，3.49(2H，S)，2.33(3H，S)，2.31(3H，S)。
實(shí)施例18 5，10-二氫-8-氟代茚并〔1，2-b〕吲哚將鹽酸4-氟代苯肼(1.83g，11.25mM)和1-茚酮(1.49g)在乙醇(20cm3)中的混合物加熱至回流溫度，加入濃鹽酸(1cm3)，然后再繼續(xù)加熱5小時(shí)，冷卻反應(yīng)混合物，從冷的溶液中結(jié)晶出無色片狀的產(chǎn)物，然后通過過濾和干燥收集得到最后的產(chǎn)物(1.90g，75%)熔點(diǎn)225-227℃(從乙酸乙酯/汽油〔60-80℃〕)。1H NMR(CDCl3)δ8.3(1H，br，S)，7.6-6.9(7H，m)，3.70(2H，S)。
實(shí)施例19 5，6-二氫-9-甲氧基茚并〔2，1-b〕吲哚將鹽酸4-甲氧基苯肼(3.5g)和2-茚酮(2.6g)溶解在含有濃鹽酸(0.5cm3)的乙醇(25cm3)中，所得的溶液被回流加熱2小時(shí)。減壓下除去溶劑得到的黑色殘留物用乙酸乙酯處理并過濾。濾液與二氧化硅(25g)混合，然后減壓下除去溶劑，殘留物置于二氧化硅柱的頂部并用乙酸乙酯60-80℃石油醚(1∶10)洗脫，最后得到淺褐色針狀的吲哚(2.35g，50%)，熔點(diǎn)170-171℃。1H NMRδ3.65(2H，S)，3.90(3H，S)，6.84(1H，dd，J＝8.5和2.5HZ)，7.08(1H，ddd，J＝7.5，7.5和1.0HZ)，7.20(1H，d，J＝8.5HZ)，7.24(1H，ddd，J＝7.5，7.5和0.5HZ)，7.30(1H，d，J＝2.5HZ)，7.39(1H，d，J＝7.5HZ)，7.61(1H，d，J＝7.5HZ)，8.09(1H，br，S)。
實(shí)施例20 5，6-二氫-9-異丙基茚并〔2，1-b〕吲哚將鹽酸4-異丙基苯肼(3.13g，16.8mM)和1-茚酮(2.22g，1eg)的懸浮液在含有濃鹽酸(0.5cm3)的無水乙醇(20cm3)中回流加熱4小時(shí)，真空除去乙醇，產(chǎn)物用柱色譜分離(用10%乙酸乙酯/石油醚(60-80℃)洗脫)進(jìn)行部分提純，最后從乙酸乙酯/汽油中結(jié)晶，由此提純得到淺綠色針狀的產(chǎn)物(0.84g，18.7%)，熔點(diǎn)144℃，1H NMRδ8.05(1H，br，S)，7.7-7.0(7H，m)，3.65(2H，S)，3.07(1H，七重峰，J＝7.0HZ)，1.35(6H，d，J＝6.9HZ)。
實(shí)施例21 5，6-二氫-9-叔丁基茚并〔2，1-b〕吲哚攪拌2-茚酮(2.0g，15.2mM)在含有30%鹽酸(0.5cm)水溶液的乙醇(25cm3)中的溶液，然后與鹽酸4-叔丁基苯肼(3.0g，15.2mM)一起加熱4小時(shí)。接著加入硅膠(3.0g)并減壓除去溶劑，將殘留物置于二氧化硅(28g)柱的頂部，用5%乙酸乙酯在60-80℃汽油中的混合物洗脫，重復(fù)色譜分離得到所需的產(chǎn)物(0.35g，9%)，熔點(diǎn)182℃，1H NMRδ1.44(9H，S)，3.71(2H，S)，7.10(1H，ddd，J＝7.5，7.5，1.5HZ)，7.22-7.42(4H，m)，7.68(1H，br，d，J＝7.0HZ)，7.84(1H，br，S)，8.15(1H，S)。
實(shí)施例22 2-(N-乙酰氨基-5，10-二氫茚并〔1，2-b〕吲哚將苯肼(4.05g，37.5mM)，5-(N-乙酰氨基)茚-1-酮(由N.L.Allinger和E.S.Jones在J.Org，Chem.，1962，27，70中描述的方法制得)(5.8g，30.7mM)和4-甲苯磺酸(0.005g)在甲苯(125cm3)中的溶液在Dean Stark設(shè)備中加熱2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，然后過濾出淺褐色微晶體的產(chǎn)物腙(7.3g，85%)，熔點(diǎn)252-253℃。從上述實(shí)驗(yàn)得到的碾細(xì)的腙(8.5g，30mM)在攪拌的同時(shí)被加入到多磷酸酯溶液中，所說的多磷酸酯溶液是從五氧化二磷(30g)，氯仿(30cm3)和乙醚(cm3)混合24小時(shí)制得的。蒸除過量的溶劑，殘留物在60℃下加熱45分鐘，冷卻后將焦油狀的殘留物倒入水(150cm3)和氯仿(40cm3)中，所得的混合物被劇烈攪拌10分鐘，收集顏色仍為深色的固體并將其與二氯化硅(6g)混合，然后加到二氧化硅(20g)柱的頂部，該柱用乙酸乙酯洗脫。從洗脫液中得到淺黃色的固體產(chǎn)物。收率2.0g，27%，熔點(diǎn)＞240℃。1H1NMR(CDCl3)δ2.11(3H，S)，3.50(2H，S)，6.95-7.10(2H，m)，7.33-7.50(4H，m)，7.67(1H，br，S)。
實(shí)施例23 5，10-二氫-2-(N-乙基氨基)茚并〔1，2-b〕吲哚將5，10-二氫-2-(N-乙酰氨基)茚并〔1，2-b〕-吲哚(0.70g，2.8mM)在無水四氫呋喃(50cm3)的溶液在氮?dú)夥盏谋Ｗo(hù)下用氫化鋁鋰(0.40g，10.50mM)處理3小時(shí)。所得的混合物被加熱至回流溫度3小時(shí)，然后冷卻，通過加入酒石酸鈉鉀(5cm3)的飽和溶液來除去過量的反應(yīng)劑，然后分離有機(jī)相。殘留的含水漿液用四氫呋喃(3×10cm3)萃取，收集萃取液和有機(jī)相，通過相轉(zhuǎn)移紙過濾。然后蒸發(fā)，最終得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)225℃，收率0.47g，71%，1H NMR(CDCl3)δ1.23(3H，t，J＝7.0HZ)，3.09(2H，q，J＝7.0HZ)，3.59(2H，S)，4.80(1H，br，S)，6.56(1H，d，J＝7.5HZ)，6.87(1H，S)，7.01(2H，br，m)7.32-7.48(3H，br，m)，10.47(1H，br，S)。
實(shí)施例24，5，10-二氫-2(N-乙?；?N-乙基氨基)茚并〔1，2-b〕吲哚將5，10-二氫-2-(N-乙基氨基)茚并〔1，2-b〕吲哚(0.47g，1.90mM)和乙酸酐(4cm3)加熱至90-95℃4小時(shí)。冷卻后，向冷的溶液中加入水(30cm3)，將所得混合物劇烈攪拌1小時(shí)，收集生成的固體產(chǎn)物并用數(shù)滴冷的乙醇洗滌，得到無色固體的標(biāo)題化合物0.5g，90%，熔點(diǎn)232℃。1H NMR(CDCl3)δ1.16(3H，t，J＝7.0HZ)，1.90(3H，S)，3.73(2H，S)，3.81(2H，q，J＝7.0HZ)，7.05-7.20(4H，m)，7.46(1H，d，J＝7.5HZ)，7.57(1H，d，J＝8.0HZ)，7.63(1H，d，J＝7.0HZ)，10.36(1H，S)。
實(shí)施例25 5，10-二氫-2-(N，N-二乙基氨基)茚并〔1，2-b〕吲哚將5，10-二氫-2-(N-乙?；?N-乙基氨基)茚并〔1，2，b〕吲哚(0.5g，1.7mM)在無水的四氫呋喃(80cm3)中的溶液在氮?dú)夥盏谋Ｗo(hù)下用氫化鋁鋰(0.3g)處理1小時(shí)。將所得的混合物加熱到50℃1小時(shí)后，進(jìn)行冷卻并加入飽和的酒石酸鈉鉀(5cm3)。有機(jī)層從含水殘留物中傾析出來，殘留物用四氫呋喃(3×8cm3)洗滌。收集有機(jī)相，并通過相轉(zhuǎn)移紙洗滌和過濾，濾液經(jīng)蒸發(fā)后得到黃色固體。該黃色固體從95%的乙醇中結(jié)晶得到0.35g淺黃色棱狀的標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)204-206℃。柱色譜分離后(二氧化硅乙酸乙酯/60-80°汽油)，該化合物的熔點(diǎn)上升到205-206℃(0.26g，55%)。
實(shí)施例26 5，10-二氫-6-甲基-8-甲氧基茚并〔1，2-b〕吲哚ⅰ)將鹽酸2-甲基-4-甲氧基苯肼(23.6g，0.125mol)加入到乙酸鈉(30.8g，0.375mol)在650ml水中的溶液中。攪拌所得的混合物直止全部溶解，通過過濾除去剩余的有色的非溶物質(zhì)。向得到的純凈的溶液中加入1-茚酮(13.2g，0.1mol)溶解在150ml乙醇中的溶液。所得到的混合物在水浴中被加熱15分鐘，然后冷卻至室溫，在室溫下攪拌30分鐘后，將其置于冰浴中冷卻，用過濾分離出生成的晶體并用冷水洗滌。從乙醇中重結(jié)晶得到14.0g(53%)的1-茚酮的2-甲基-4-甲氧基苯腙。熔點(diǎn)131℃。
ⅱ)將14.0g(0.053mol)的1-茚酮的2-甲基-4-甲氧基苯腙在300ml乙醇中的混合物加熱至60℃，待大部分固體物質(zhì)溶解之后，加入120ml HCl-飽和乙醇，得到的溶液在室溫下攪拌15分鐘。蒸除溶劑，殘留物溶解在二氯甲烷中并用1M氫氧化鈉溶液洗滌3次，用飽和的氯化鈉溶液洗滌一次，用MgSO4干燥并蒸發(fā)得到13.2g粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜(用二氯甲烷作為洗脫液)分離提純，得到8.98g(68%)的所需化合物。然后從己烷/乙酸乙酯(9/1)中重結(jié)晶得到7.2g純的化合物，熔點(diǎn)181℃，1H-NMR(CDCl3)2.49(3H，S)，3.67(2H，S)，3.88(3H，S)，6.68(1H，S)，6.95(1H，d)，7.16-7.25(1H，dd)，7.3(1H，t)，7.45(1H，d)，7.5(1H，d)，8.12(1H，S)。
實(shí)施例27 5，10-二氫-8-甲氧基-7，9-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚將3.17g(0.024mol)的1-茚酮，5.46g(0.0269mol)的鹽酸3，5-二甲基-4-甲氧基苯肼，50ml乙酸和2.5ml濃鹽酸的混合物加熱回流1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物倒入過量的氫氧化鈉水溶液中。所得的混合物用醚萃取。用MgSO4干燥并蒸發(fā)后得到粗產(chǎn)物，用重結(jié)晶和柱色譜分離相結(jié)合的提純方法提純得到1.47g(23%)的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)2.42(3H，S)，2.61(3H，S)，3.28(3H，S)，3.85(2H，S)，7.07(1H，S)，7.19(1H，dd)，7.32(1H，dd)，7.43(1H，d)，7.53(1H，d)，8.1(1H，S)。
實(shí)施例28 5，10-二氫-8-羥基-7，9-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚該化合物可通過實(shí)施例27的合成方法少量地獲得，但也可以用類似于實(shí)施例12的方法，通過實(shí)施例27中獲得的5，10-二氫-8-甲氧基-7，9-二甲基茚并〔1，2-b〕吲哚的脫甲基化反應(yīng)而獲得。1H NMR(CDCl3)2.39(3H，S)，2.57(3H，S)，3.84(2H，S)，4.37(1H，S)，7.05(1H，S)，7.19(1H，dd)，7.32(1H，dd)，7.44(1H，d)，7.53(1H，d)，8.04(1H，S)。
實(shí)施例29 5，10-二氫-6-異丙基茚并〔1，2-b〕吲哚將12.6g(0.096mol)的1-茚酮，19.7g(0.105mol)的鹽酸2-異丙基苯肼，150ml的乙醇和10ml濃鹽酸的混合物加熱回流2小時(shí)，然后蒸除溶劑，殘留物懸浮在酸性水中。用醚萃取，用MgSO4干燥并蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物，用硅膠柱色譜法(用二氯甲烷/輕質(zhì)石油(2/8)作為洗脫液)分離提純，最后再從乙酸乙酯/輕質(zhì)石油中重結(jié)晶進(jìn)行提純。得到14.0g(59%)的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)1.48(6H，d)，3.37(1H，七重峰)，3.77(2H，S)，4.37(1H，S)，7.1-7.3(3H，m)7.37(1H，dd)，7.5-7.6(3H，m)，8.03(1H，S)。
實(shí)施例30 5，6-二氫-3-甲氧基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚ⅰ)在0℃，無光的條件下在攪拌的同時(shí)將磺酰氯(ca.leg)在30分鐘之內(nèi)逐滴加入到5-甲氧基-4，6-二甲基茚-1-酮(0.65g，3.4mmol)在無水醚(10cm3)中的溶液中，加完后，將反應(yīng)混合物加熱到室溫并繼續(xù)攪拌2小時(shí)。除去溶劑，固體殘留物用色譜法分離提純，其中先用50%二氯甲烷/石油醚(60-80℃)洗脫，然后再用二氯甲烷洗脫，由此得到二氯代衍生物〔RF(DCM)0.85，0.14g，14%〕(將作為廢料排出)和所需的2-氯-5-甲氧基-4，6-二甲基茚-1-酮〔RF(DCM)0.7〕，它是無色的固體(0.65g，85%)，熔點(diǎn)109-110℃。1H NMR(CDCl3)δ7.53(1H，S)，4.54(1H，dd，J＝7.8，3.7HZ)，3.79(3H，S)，3.64(1H，dd，J＝17.5，7.8HZ)，3.13(1H，dd，J＝17.5，3.5HZ)，2.33(3H，S)，2.25(3H，S)。
ⅱ)將鄰-溴代三氟乙酰苯胺(325mg，1.2mM)在四氫呋喃(THF)(20cm3)中的溶液冷卻至-78℃，向該溶液中加入甲基鋰(在乙醚中的1.4M溶液的1摩爾當(dāng)量)。十分鐘后再加入叔丁基鋰(在戊烷中的1.7M溶液的2摩爾當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，然后經(jīng)套管逐滴向其中加入氯代茚酮(272mg、1.2mM)在四氫呋喃(3cm3)中的溶液，結(jié)果所得的溶液被慢慢加熱到室溫并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。然后加入氫氧化鉀在甲醇(3cm3)中的10%溶液。攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物倒入2M HCl中。用二氯甲烷萃取(3×10cm3)，收集得到的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，在真空中蒸發(fā)得到固體殘留物，該殘留物經(jīng)硅膠柱色譜(用10%乙酸乙酯/石油醚(60-80℃)洗脫)分離后得到三氟乙酰苯胺(RF0.4)(50mg)，和2-氯-1-羥基-5-甲氧基-4，6-二甲基-1-(2′-三氟乙酰氨基苯基)茚(RF0.3)(220mg，44%)，后者是無色的固體化合物，熔點(diǎn)182℃，1H NMR(CDCl3)δ10.7(1H，br)，8.25(1H，dd)，7.36(1H，ddd)，7.06(1H，S)，6.98(1H，ddd)，6.39(1H，dd)，4.76(1H，dd，J＝4.8，2.7HZ)，3.78(3H，S)，3.63(1H，S，與D2O交換)，3.11(2H，2X第二順序的多重峰)，2.33(3H，S)，2.23(3H，S)。
ⅲ)將氯代羥基茚(19mg，50μmol)在四氫呋喃(0.5cm3)中的溶液逐滴加入到叔丁醇鉀(2摩爾當(dāng)量)在無水2-甲基丙醇(0.5cm3)中的溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，隨后加入水(0.25cm3)，在真空中除去有機(jī)溶劑。殘留物被萃取在鹽水和二氯甲烷中，有機(jī)萃取液用MgSO4干燥并在真空中濃縮至1cm3。向反應(yīng)中加甲醇?xì)溲趸?0.25cm3的10%溶液)，十分鐘后再加入三氟乙酸(0.5cm3)，30分鐘后，將反應(yīng)混合物倒入碳酸氫鈉的飽和溶液中，有機(jī)物萃取至二氯甲烷中，真空除去溶劑，殘留物用硅膠柱色譜分離(用二氯甲烷洗脫)得到異茚并吲哚的無色固體(9mg，70%)。熔點(diǎn)179-182℃(分解)。1H NMR(CDCl3)δ8.2(1H，br)，7.82(1H，m)，7.4-7.1(4H，m)，3.74(3H，S)，3.58(2H，S)，2.4(3H，S)2.3(3H，S)。
實(shí)施例31 5，6-二氫-3-羥基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚將5，6-二氫-3-羥基-2，4-二甲基茚并〔2，1-b〕吲哚將5，6-二氫-2，4-二甲基-3-甲氧基茚并〔2，1-b〕吲哚(50mg)在二氯甲烷(1cm3)中的溶液冷卻至-78℃并用三溴化硼(0.1cm3)處理。將反應(yīng)混合物攪拌幾分鐘后，加熱至室溫，然后倒入碎冰中，在加入過量碳酸氫鈉之后，用二氯甲烷從反應(yīng)混合物中萃取產(chǎn)物，收集的干燥后的萃取液被蒸發(fā)得到無色的固體。收率40mg。經(jīng)過硅膠柱色譜分離(二氯甲烷洗脫)得到標(biāo)題化合物的微晶形固體。熔點(diǎn)192-194℃，1H NMR δH10.2(1H，br，S)，7.5-7.0(5H，br，m)，3.62(2H，S)，2.35(3H，S)2.30(3H，S)。
藥理性質(zhì)本發(fā)明描述的茚并吲哚是生成陽離子，陽離子基或能夠氧化的基團(tuán)的疏水性結(jié)構(gòu)。通過在玻璃試管中對(duì)于由類脂類過氧化誘導(dǎo)的Fe2+-抗壞血酸鹽抑制的測試可以得知本發(fā)明的茚并吲哚是高效的抗氧化劑。結(jié)構(gòu)式(ⅠA)和(ⅠB)的化合物在兔平滑機(jī)細(xì)胞或鼠腹膜巨噬細(xì)胞存在下能有效地阻止人體血漿中脂蛋白的氧化。它們還能阻止離體的灌注的小鼠心臟的局部缺血和再灌注損傷和保護(hù)鼠或離體的小鼠肝細(xì)胞免受由四氯化碳、乙酰氨基苯、甲基甲磺酸鹽，甲萘醌、叔丁基氫過氧化物和N-甲基-N′-硝基-N-亞硝基胍引起的肝損傷。
這些性質(zhì)說明結(jié)構(gòu)式(ⅠA)和(ⅠB)的結(jié)構(gòu)能有效地用于防止或治療局部缺血或再灌注損傷特別是大腦和心臟的局部缺血/梗塞，血栓形成、栓塞、動(dòng)脈粥樣硬化、Parkinson病、Alzheimer病、老化、腫瘤和抗腫瘤藥物和免疫抑制劑的毒性，炎性反應(yīng)包括象支氣管氣喘和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎那樣的過敏/炎性反應(yīng)的病理反應(yīng)。其它的有效用途還有防止化學(xué)毒性或放射性損傷的化學(xué)保護(hù)。茚并吲哚化合物不會(huì)被紫外線明顯地活化，而使它們能夠用于皮膚保護(hù)產(chǎn)品中的，茚并吲哚化合物的其它有用的和重要的性質(zhì)是它們有穩(wěn)定細(xì)胞膜的能力。
藥理試驗(yàn)本發(fā)明化合物最重要的性質(zhì)是它們能有效地用作為自由基清除劑或抗氧化劑，本試驗(yàn)使用抑制類脂類過氧化50%(IC50)所需的結(jié)構(gòu)式(ⅠA)和(ⅠB)化合物的濃度的測定系統(tǒng)。類脂類過氧化的測定描述在下文中，表1中列出了測定所得的數(shù)據(jù)，下文中描述的其它的測定是用于測定茚并吲哚的細(xì)胞膜穩(wěn)定性的紅血細(xì)胞脆性試驗(yàn)(表2)，和用茚并吲哚保護(hù)小鼠肝細(xì)胞抗N-甲基-N′-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)的細(xì)胞毒性的試驗(yàn)(表3)。MNNG是一種強(qiáng)毒性試劑，它的作用機(jī)理包括自由基引起的細(xì)胞膜的不穩(wěn)定。
1.與類脂類過氧化有關(guān)的抗壞血酸鹽/Fe2+在亞鐵的/抗壞血酸鹽類脂類過氧化系統(tǒng)中，將6.25ml的0.1M磷酸鉀緩沖液(Kpi)pH為7.4加入到12.5mg無水的大豆磷脂中。用氬沖洗2分鐘后，用五層膠膜將所得的懸浮液密封，并用聲波處理直至懸浮液透明為止。最終得到的反應(yīng)混合物含有200μg/ml磷脂，10μM FeNH4(SO4)2或Fe(NH4)2(SO4)2和在0.1M KPi(pH為7.4)中的100μM抗壞血酸和將要在丙酮或DMSO中試驗(yàn)的抗氧化劑。載體的體積永遠(yuǎn)不能超過總體積的1%，通過加入抗壞血酸和鐵使反應(yīng)開始。反應(yīng)在室溫下在振蕩著的水浴中連續(xù)進(jìn)行30分鐘，然后通過加入10μM在DMSO中的0.5M丁基化的羥基甲苯而使反應(yīng)停止。上述反應(yīng)過程和順序用于2-硫代巴比土酸反應(yīng)物的測定，它被描述在Shertzer H.G.等人的Biochem.pharmacol，37，333(1988)中。表1表示了茚并吲哚和α-生育酚對(duì)于與類脂類過氧化有關(guān)的抗壞血酸鹽/Fe2+的作用。
表1化合物 pIC502-乙基氨基-DHII 7.92-二乙基氨基-DHII 7.49-甲氧基-異-DHII 6.48-甲氧基-DHII 6.26，8-二甲基-DHII 6.1
10，10-二甲基-DHII 6.1DHII 5.8異-DHII 5.88-甲基-DHII 5.710-甲基-DHII 5.78-異丙基-DHII 5.68-氟-DHII 5.66-氯-DHII 5.25-甲基-DHII 5.1α-生育酚(維生素E) 5.02.在紅血細(xì)胞中的細(xì)胞膜穩(wěn)定茚并吲哚的細(xì)胞膜穩(wěn)定作用是通過紅血細(xì)胞的脆性試驗(yàn)來測定的。以每公斤體重65mg戊巴比妥的量通過i.p.注射將鼠麻醉，然后將血樣從左心室移入肝素化的注射器中，并在0℃下用含有140mM Nacl，10mM檸檬酸鈉，5mM葡萄糖的緩沖液(pH為7.4)稀釋20倍。將稀釋后的血樣放在冰中。然后將0.75ml血的等分試樣放入4ml含有10μl溶解在DMSO載體中的抗氧化劑的小池中。在1分鐘輕度回蕩之后，用吸移管將0.75ml的0.9Nacl或水加入到該小池中，用Beckman DU-70分光光度計(jì)記錄在656nm處的吸光度。在沒有穩(wěn)定劑的情況下，當(dāng)加入水時(shí)，吸光度在15秒內(nèi)降低到0.8，當(dāng)將Nacl替代水加入時(shí)，與時(shí)間無關(guān)的吸光度為2.2。在穩(wěn)定化學(xué)藥物的濃度增加的情況下，在減少加入水之后，可以觀察到吸光度降低了。防滲透百分?jǐn)?shù)是由等式〔〔(2.2-0.8)-A〕/(2.2-0.8)〕×100%計(jì)算而得的，當(dāng)在已知濃度的藥物存在下加入水時(shí)，A＝2.2減去吸光度的降低量。然后根據(jù)處理藥物多個(gè)不同的濃度求出各不同的防滲透百分?jǐn)?shù)，并以這兩個(gè)值繪出一圖，該曲線的線性回歸斜度就是紅血細(xì)胞脆性保護(hù)指數(shù)值(RBC-PIV)，它是以每μM保護(hù)劑的防滲透百分?jǐn)?shù)來表示的。表2中列出了不同茚并吲哚和α-生育酚的RBC-PIV值。
表2化合物 RBC-PIV(%/μM)10，10-二甲基-DHII 0.48DHII 0.49異-DHII 0.505-甲基-DHII 0.74α-生育酚 0.103.防止肝細(xì)胞中MNNG的細(xì)胞毒性作用用小鼠肝細(xì)胞來測定茚并吲哚對(duì)于MNNG引起的細(xì)胞毒性的防止作用。肝細(xì)胞是從雄性的Sprague-Dawley鼠經(jīng)膠原酶處理制得的，該方法最初是由Zahlten和Stratman公開的(Zahlten，R.N.和Stratman，F(xiàn).W.Arch.Biochem.Biophys.163，600(1988))，Reitman等人改進(jìn)的(Reitman，F(xiàn).A.，Shertzer，H.G.和Berger，M.L.，Biochem，Pharmacol.37，3183(1988))。為了改進(jìn)存活力，將細(xì)胞在137mM Nacl，8.1mM Na2HPO4和1.5mM KH2PO4(pH為7.4)中通過0.508g/mlPercoll(Pharmacia AB，Uppsala，Sweden)進(jìn)行離心分離。然后將推斷的保護(hù)劑以在DMSO中的溶液的形式加入到這些細(xì)胞中。DMSO的最終濃度永遠(yuǎn)不能大于細(xì)胞懸浮液的5μl/ml。加入濃度為0.5mM的MNNG在乙醇中的溶液，得到乙醇的最終濃度為1%;乙醇本身并無作用。存活力是以排除0.2%錐蟲藍(lán)的細(xì)胞的百分比來測定的。茚并吲哚和α-生育酚乙酸酯對(duì)于細(xì)胞毒性的防止作用列于表3中。其中所列的值是時(shí)間延長1小時(shí)所需化合物的濃度，該時(shí)間是MNNG殺死50%活細(xì)胞所需的時(shí)間。
表3化合物 IC50(μm)DHII 3.1異-DHII 3.45-甲基-DHII 6.0α-生育酚乙酸酯 16權(quán)利要求
1.一種制備結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB的化合物或它們的鹽的方法
其中R為氫或低級(jí)烷基，R1和R2分別選自氫或低級(jí)烷基，R3、R4和R6分別選自氫，鹵素或低級(jí)烷基，R5為氫，羥基，鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12R7，R8，R9和R10分別選自氫，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R11為氫或低級(jí)烷基，R12為低級(jí)烷基，上述基團(tuán)定義的先決條件為i)當(dāng)結(jié)構(gòu)式ⅠB中的R為氫時(shí)，R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，ii)結(jié)構(gòu)ⅠA中，當(dāng)R為氫，甲基或新戊基時(shí)，R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，iii)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R，R1，R2和R10為氫，R7和R9為低級(jí)烷基，R3，R4，R5和R6為氫或低級(jí)烷基或R5為羥基或低級(jí)烷氧基時(shí)，R8不為羥基或甲氧基，iv)結(jié)構(gòu)式ⅠA中當(dāng)R4為氯時(shí)，R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，v)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R9為乙基，異丙基，甲氧基或乙氧基時(shí)，R至R8或R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，vi)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R9為乙基時(shí)，R5不為甲基，vii)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R9為甲氧基或乙氧基時(shí)，R3和R6不同時(shí)為甲基，viii)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R8為甲基時(shí)，R3和R9不同時(shí)為甲基或R至R7，R9或R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，ix)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R5為溴時(shí)，R至R4，R6至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，或在上述先決條件下的化合物的鹽；a)結(jié)構(gòu)式Ⅱ的苯肼和結(jié)構(gòu)式Ⅲ的1-茚酮的Fischer吲哚化反應(yīng)，
其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10如上述結(jié)構(gòu)式ⅠA中的定義，如果合適的話，接著還可用R-鹵化物或R-硫酸鹽進(jìn)行N-烷基化反應(yīng)，其中R如結(jié)構(gòu)式ⅠA中的定義，或b)結(jié)構(gòu)式Ⅱ的苯肼和結(jié)構(gòu)式Ⅳ的2-茚酮的Fischer吲哚化反應(yīng)
其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10如上述結(jié)構(gòu)式IB中的定義，如果合適的話，接著還可用R-鹵化物或R-硫酸鹽進(jìn)行N-烷基化反應(yīng)，其中R如上述結(jié)構(gòu)式IB中的定義；或c)結(jié)構(gòu)式V的3-苯甲酰吲哚的環(huán)化反應(yīng)，
其中R，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10如上定義，R11為氫或鹵素，接著使得到的結(jié)構(gòu)式Ⅵ的四環(huán)酮進(jìn)行還原反應(yīng)，或
d)結(jié)構(gòu)式Ⅶ的鄰鹵代酰苯胺進(jìn)行金屬取代反應(yīng)制得相應(yīng)的二價(jià)陰離子Ⅷ，接著再與α-鹵代酮進(jìn)行反應(yīng)
其中R1至R10如上述結(jié)構(gòu)式IB中的定義，X1是鹵素和X2是氯；或e)5-H-DRII衍生物或6-H-異-DHII衍生物分別與R-鹵化物或R-硫酸鹽進(jìn)行N-烷基化反應(yīng)，其中R如上述ⅠA和ⅠB中的定義；或f)用普通的方法使烷氧基取代的DHII衍生物或異-DHII-衍生物進(jìn)行脫烷基化反應(yīng)，得到相應(yīng)的羥基取代的DHII或異-DHII衍生物；或g)用普通的方法使相應(yīng)的N-酰基DHII衍生物或異-DHII衍生物進(jìn)行還原反應(yīng)，得到相應(yīng)的N-烷基氨基衍生物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R8為單或雙低級(jí)烷基氨基，優(yōu)選的為乙基或二乙基氨基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中R8為NR11COR12，優(yōu)選的為NH-乙?；?。
4.根據(jù)上述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的方法，其中R3和R5至少有一個(gè)為低級(jí)烷基，優(yōu)選的為甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3的任何一項(xiàng)權(quán)利要求的方法，其中R5為低級(jí)烷氧基，優(yōu)選的為甲氧基。
6.根據(jù)上述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的方法，其中R，R4，R6，R7，R9和R10為氫。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3的任何一項(xiàng)權(quán)利要求的方法，該方法是制備5，10-二氫-2-乙基氨基茚并〔1，2-b〕吲哚或5，10-二氫-2-二乙基氨基茚并〔1，2-b〕吲哚。
8.一種藥物組合物的制備方法，它包括將藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑與結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB的化合物或它們的藥學(xué)上可接受的鹽配制在一起，
其中R為氫或低級(jí)烷基，R1和R2分別選自氫或低級(jí)烷基，R3，R4和R6分別選自氫，鹵素或低級(jí)烷基，R5為氫，羥基，鹵素，低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基，單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R7，R8，R9和R10分別選自氫、羥基、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基或單或雙低級(jí)烷基氨基，NH2或NR11COR12，R11為氫或低級(jí)烷基，R12為低級(jí)烷基，上述基團(tuán)定義的先決條件為ⅰ)結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB中，當(dāng)R為氫時(shí)，R1至R10中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫，ⅱ)結(jié)構(gòu)式ⅠA中，當(dāng)R，R1，R2和R10為氫，R7和R9為低級(jí)烷基，R3，R4，R5和R6為氫或低級(jí)烷基或R5為羥基或低級(jí)烷氧基時(shí)，R8不為羥基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB為前述權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)權(quán)利要求中所定義的。
10.一種穩(wěn)定易氧化變質(zhì)的化合物的方法，它包括將該化合物與權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)權(quán)利要求中定義的結(jié)構(gòu)式ⅠA或ⅠB的化合物接觸接觸。
全文摘要
本發(fā)明介紹了結(jié)構(gòu)式為
文檔編號(hào)A61K31/40GK1049156SQ9010493
公開日1991年2月13日 申請(qǐng)日期1990年6月22日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月22日
發(fā)明者馬爾科姆·圣斯布里, 霍華德·G·舍澤 申請(qǐng)人:巴斯大學(xué), 辛辛那提大學(xué)