N-丁基-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成技術領域，具體涉及一種N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲 哚-2-甲酰胺類化合物的制備方法。
【背景技術】
[0002] 嘧啶并吲哚衍生物是一類人工合成的尾加壓素II(UII)抑制劑。有研究表明，UII 與心血管疾病、腎病及糖尿病的病理過程及發(fā)病機制密切相關。9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚 (PI)對腫瘤細胞存在抑制增殖的作用。以PI為母環(huán)，在2位，4位，9位作不同取代基，其系 列嘧啶并吲哚類衍生物對細胞增殖作用的影響也不同。
[0003] 對于下列通式表示的化合物：
[0004]
[0005] 式中：
[0006] 札代表氫原子或芐基；
[0007] r2代表氫原子或conhch2ch2ch3;
[0008] R3代表氫原子或NHCH2CH2CH2CH3;
[0009] PI1401 ：^=H,R2=CCONHCH2CH2CH3,R3=H；
[0010] PI1402 :札=芐基，R2=C0NHCH2CH2CH3,R3=H;
[0011] PI1403 ：^=H,R2=H,R3=NNHCH2CH2CH2CH3；
[0012] PI1404 :札=H，R2=H，R3=NHCH2C00H。
[0013] 根據(jù)目前研究結果，PI-1401、PI-1403、PI-1404對正常生長的人血管平滑肌細胞 (VSMC)有抑制作用，PI-1402則對VSMC有促進作用。PI-1401在母環(huán)2位酰胺取代，對細 胞仍有抑制增殖的作用，判斷2-酰胺有抑制細胞增殖的作用；PI-1402與PI-1401在2-取 代基完全相同，在9位添加芐基取代，對細胞有促增殖作用，判斷9-芐基有促進細胞增殖 的作用；PI-1403，PI-1404均為母環(huán)4位取代，判斷4-氨基有抑制細胞增殖的作用；同時， PI-1403對細胞的抑制作用隨著濃度的增大而增大，判斷其抑制增殖作用有劑量依賴性； 而PI-1404則隨著化合物濃度增大，抑制作用先增大后降低，最大抑制濃度為10-7mol/L， 判斷低濃度-C00H取代有抑制細胞增殖作用，高濃度-C00H取代存在保護細胞作用。
[0014] 根據(jù)目前研究結果，PI-1401有明確的拮抗UII作用，其具有抗心肌纖維化，抗動 脈粥樣硬化，抗腎間質纖維化，降低血糖，保護糖尿病腎臟的作用。

【發(fā)明內容】

[0015] 本發(fā)明的目的在于提供一種簡單有效的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲 酰胺的制備方法。
[0016] 為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術方案予以實現(xiàn)：
[0017] -種N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法，其制備步驟如下：
[0018] (1)、2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪與2-氨基吲哚反應得到中間體I9H-嘧啶 并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，純化中間體I;
[0019](2)、中間體I用濃HC1溶解并加熱至回流，冷卻至室溫，抽濾得到中間體II9H-嘧 啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸；（3)、中間體II用THF(四氫呋喃）溶解，加入EDC.HC1 (1-乙 基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽及H0Bt(l-羥基苯并三唑），再加三乙胺和正 丁胺，反應結束后純化，即可。
[0020] 優(yōu)選地，所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法，其制備 步驟如下：
[0021] (1)、取2,4,6-三乙氧羰基-1，3,5-三嗪溶于01^0，隊保護，加熱至50°(：.攪拌下 加入2-氨基吲哚.反應結束得到中間體I9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，純 化中間體I，其純化過程為：首先用H20、二氯甲烷萃取三次，再用有機相依次水洗、飽和氯 化鈉水溶液依次洗滌，Na2S04干燥，回收溶劑得固體化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲 燒-乙酸乙酯洗脫獲得黃色粉末；
[0022] (2)、將純化后的中間體I用濃HC1溶解并加熱至回流。反應8小時后結束，冷卻 至室溫，抽濾得到黃色固體中間體II9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸；
[0023] (3)、將中間體II用THF溶解，加入EDC.HC1及HOBt，再加三乙胺和正丁胺。24小 時后反應結束得目標產物N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，純化目標產物，其 純化過程為：首先用H20、乙酸乙酯萃取三次，再用有機相依次水洗、飽和氯化鈉水溶液依次 洗滌，Na2S04干燥。回收溶劑得固體化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯 洗脫獲得固體。
[0024] 優(yōu)選地，所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法，其制備 步驟（1)中所述反應試劑2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪與2-氨基吲哚的摩爾量比為 2:1〇
[0025] 本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明以4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪與2-氨基吲哚為原 料，發(fā)生反電子環(huán)加成反應得到中間產物，再經過酯基水解選擇性脫羧、酰胺縮合反應制得 目標產物，工藝簡單、目標產物收率高，適合工業(yè)化生產。
【具體實施方式】
[0026] 下面通過具體的實施方式，對本發(fā)明做詳細的描述，但本發(fā)明不限于這些實例本 身。
[0027]實施例：
[0028]
[0029] 1. 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯3的合成
[0030] 取 2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪 1. 49g(5mmol)溶于 10mLDMS0，r^^護，加熱 至50°C?攪拌下加入2-氨基吲哚（420mg，2. 5mmol)。2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪是 一個活性較高的雙烯體，強給電子基團氨基能夠提高2-氨基吲哚作為親雙烯體的反應活 性，兩者發(fā)生加成反應得到的中間體失去氨，最后發(fā)生一個Retro-Diels-Alder反應失去 NC-C00Et形成了 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯。反應結束后首先用100mLH20、 二氯甲烷萃取三次（3X50mL)，再用有機相依次水洗、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，Na2S04 干燥?；厥杖軇┑霉腆w化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脫獲得黃色 粉末78〇11^，產率99%。熔點 201-202°(：。
[0031] 4 匪R(300MHz，CDC13)S:12.ll(s，lH)，8.87(d，J=8. 1Hz，lH)，8.07(d，J =8. 1Hz, 1H), 7. 73-7. 68(m, 1H), 7. 49-7. 43(m, 1H), 4. 59(d,J= 7. 5Hz, 4H), 1. 63-1. 56 (m, 6H)；
[0032] 13CNMR(75MHz,CDC13)S: 165. 3, 165. 0, 158. 1，150. 5, 147. 1，141. 5, 130. 4, 126. 6 ,122. 3, 117. 9, 115. 5, 113. 3, 63. 3, 62. 8, 14. 3, 14. 2 ；
[0033] ES-MS:314[M+H]+〇
[0034] 2. 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸4的合成
[0035] 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯3 (1. 2g)用50毫升濃HC1溶解并加熱 至回流，9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯上的二個酯基發(fā)生水解反應，并且4位 上的羧基脫去。8小時候反應結束，冷卻至室溫。抽濾得到黃色固體727mg，產率89%.熔 點 223-226 °C。
[0036] 4NMR(300MHz，DMS0-d6)S: 12. 73 (s，1H)，9. 00 (s，1H)，8. 68 (d，J= 8. 1Hz，1H)，7 ? 63-7. 62 (m，2H)，7. 42-7. 35 (m，1H);
[0037] 13CNMR(75MHz，CDC13)S: 165. 5, 157. 2, 153. 1，147. 7, 139. 7, 129. 0, 125. 8, 121. 4 ,118. 0, 117. 9, 111. 9 ；
[0038]ESI-MS:214[M+H+]〇
[0039] 3.N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺5的合成
[0040] 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸4 (727mg)用20mL惰性有機溶劑THF溶解，加入 EDC，HC1 (784mg)及HOBt(553mg)，再加三乙胺（414mg)和正丁胺（252mg)。24小時后反應結 束得目標產物N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，反應結束后首先用100mLH20， 乙酸乙酯萃取三次（3X50mL).，再用有機相依次水洗、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，Na2S04 干燥?；厥杖軇┑霉腆w化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脫獲得固體 749mg，產率 82%。熔點 184-186°C。
[0041] 4MMR(300MHz，DMS0-d6)S: 12. 59(s，1H)，9. 12-9. 00(m，2H)，7. 60-7. 57(m，2H) ，7. 37-7. 32 (m，1H)，3. 45-3. 33 (m，2H)，1. 65-1. 56 (m，2H)，1. 43-1. 31 (m，2H)，0? 93 (t，J= 7. 2Hz, 3H)；
[0042] 13CNMR(75MHz,DMS〇-d6) 8 ： 164. 5, 157. 4, 152. 8, 149. 7, 139. 5, 128. 5, 127. 4, 121 .0, 121. 0, 118. 4, 111. 4, 38. 6, 31. 2, 19. 6, 13. 7 ；
[0043] ESI-MS:m/z269[M+H]+。
【主權項】
1. 一種N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法，其特征在于，制備步 驟如下： (1) 、2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪與2-氨基吲哚反應得到中間體I 9H-嘧啶并 [4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，純化中間體I ; (2)、中間體I用濃HCl溶解并加熱至回流，冷卻至室溫，抽濾得到中間體II9H-嘧啶并 [4, 5-b]吲哚2-羧酸； (3) 、中間體II用THF溶解，加入EDC HCl及HOBt，再加三乙胺和正丁胺，反應結束后純 化，即可。2. 根據(jù)權利要求1所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法， 其特征在于，制備步驟如下： (1) 、取2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪溶于DMSO, N2保護，加熱至50°C ?攪拌下加入 2_氨基吲哚.反應結束得到中間體I嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，純化中間體 I，其純化過程為：首先用H20、二氯甲烷萃取三次，再用有機相依次水洗、飽和氯化鈉水溶 液依次洗滌，Na 2SO4干燥，回收溶劑得固體化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲烷-乙酸 乙酯洗脫獲得黃色粉末； (2)、將純化后的中間體I用濃HCl溶解并加熱至回流。反應8小時后結束，冷卻至室 溫，抽濾得到黃色固體中間體II嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸； (3) 、將中間體II用THF溶解，加入EDC. HCl及HOBt，再加三乙胺和正丁胺，24小時后反 應結束得目標產物N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，純化目標產物，其純化過 程為：首先用H20、乙酸乙酯萃取三次，再用有機相依次水洗、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌， Na 2SO4干燥?；厥杖軇┑霉腆w化合物，柱色譜分離，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脫獲 得固體。3. 根據(jù)權利要求2所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法， 其特征在于：步驟（1)中所述反應試劑2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪與2-氨基吲哚的 摩爾量比為2:1。
【專利摘要】本發(fā)明涉及嘧啶并[4,5-b]吲哚類化合物的制備方法，具體地說是N-丁基-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺的制備方法。該化合物是以2,4,6-三乙氧羰基-1,3,5-三嗪與2-氨基吲哚發(fā)生反電子環(huán)加成反應得到中間產物，再經過酯基水解脫羧、酰胺縮合反應而得。該化合物對細胞增殖具有抑制作用，可用作多種不同適應癥的藥物。本發(fā)明工藝簡單，且目標產物收率高。
【IPC分類】A61P3/10, A61P9/00, A61P13/12, A61P9/10, C07D487/04
【公開號】CN105037374
【申請?zhí)枴緾N201510411929
【發(fā)明人】李相軍, 徐國興, 閆夢彤, 任立群
【申請人】吉林大學
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年7月14日