一類n-取代-1-(9h-嘌呤-6-取代)哌啶-4-甲酰胺衍生物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及抗病毒劑和抗癌領(lǐng)域，公開了一類，取代-l-(9f嘌呤-6-取代）哌 啶-4-甲酰胺衍生物在農(nóng)業(yè)植物病毒病防治及抗癌方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 嘌呤衍生物具有抗病毒、抗癌和降血壓等重要的生物醫(yī)學(xué)活性，顯示出廣泛的 應(yīng)用前景。目前部分嘌呤衍生物已成功開發(fā)了商品化的藥物，如抗病毒藥劑阿糖腺苷 (Vidarabine)和抗癌藥物氟達(dá)拉濱（fludarabinr)、氯法拉濱（clofarabine)等。
[0003] 1?具有抗病毒活性的嘌呤衍生物 2014年，Cho等（Cho，J.H. ;Bondana，L. ;Detorio，M.A. ;Montero，C. ;Bassit，L.C. ;Amblard，F(xiàn). ;Coats,S.J. ;Schinazi，R.F.Synthesisandantiviral evaluationof2-amin〇-6_carbamoylpurinedioxolanenucleosidederivativesand theirphosphoramidatesprodrugs[J].Bioorg. Med. Chem.22，6665-6671.) 報(bào)道的2-氨基-6-甲?；〈堰识跷飙h(huán)核苷衍生物具有較高的抗病毒活性，抗HIV-l 和抗HBV活性測(cè)試EC5。值最低可達(dá)到0. 041 #M、0. 1 #M。
[0004] 2015年，Wu等（Wu，C.-H. ;Wang,C.-J. ;Chang,C.-P. ;Cheng,Y.-C. ;Song, J. -S. ;Jan,J. -J. ;Chou,M. -C. ;Ke,Y. -Y. ;Ma,J. ;Wong,Y. -C. ;Hsieh,T. -C.;Tien,Y. -C. ;Gullen,E.A. ;Lo,C. -F. ;Cheng,C. -Y. ;Liu,Y. -ff. ;Sadani,A. A. ;Tsai,C. -H. ;Hsieh,H. -P. ;Tsou,L.K. ;Shia,K. -S.Function-Oriented DevelopmentofCXCR4AntagonistsasSelectiveHumanImmunodeficiencyVirus (HIV)-1EntryInhibitors[J].J； 〇￡皿，2015，58，1452-1465.)報(bào)道的趨化因 子受體CXCR4類似物2, 6-雙取代嘌呤環(huán)衍生物具有較高的抗艾滋病毒病毒HIV活性，其EC5。最低可達(dá)0. 51nM，且表現(xiàn)出較低的細(xì)胞毒性（CC5Q> 50 #M)。
[0005] 同年，楊松等（楊松，周青，鄭玉濤，葉意強(qiáng)，趙遠(yuǎn)超，陳玉婷，胡德禹，薛 偉，吳志兵.一種以煙草花葉病毒RNA解旋酶為靶標(biāo)的抗病毒藥物虛擬篩選方法[P]. CN104504301，（2015).)以虛擬篩選方法輔助設(shè)計(jì)合成的含磷酸根的2-氨基（氯）-6-取 代嘌呤衍生物，對(duì)煙草花葉病毒TMV表現(xiàn)出一定的抑制活性，化合物濃度為500 #g/mL時(shí) 抗TMV治療活性為41. 9%。
[0006] 2.具有抗癌活性的嘌呤衍生物 2012年，Blanchard等（Blanchard,S. ;Soh，C.K. ;Lee,C.P. ;Poulsen，A. ;Bonday,Z. ;Goh,K.L. ;Goh,K.C. ;Goh,M.K. ;Pasha,M.K.; Wang,H. ;Williams,M. ;Wood,J.M. ;Ethirajulu,K. ;Dymock,B.ff. 2-Anilin〇-4-aryl-8H-purinederivativesasinhibitorsofPDK1 [J].Bioorg. Med. 〇￡皿，2012，22，2880-2884.)報(bào)道的2-苯胺基取代-4-芳基-8H-嘌呤衍生物具 有較高的激酶抑制活性和細(xì)胞增殖抑制活性，對(duì)3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶-1 (PDK1)的 EC5。最低可達(dá)0. 15
[0007] 2013 年，Gucky等（Gucky，T. ;Jorda，R. ;Zatloukal，M. ;Bazgier，V.; Berka，K. ;Reznickova,E. ;Beres，T. ;Strnad，M. ;Krystof,V.Anovelseriesof highlypotent2,6,9_trisubstitutedpurineeye1in-dependentkinaseinhibitors [J].ifedA⑶;?，2013，56，6234-6247.)報(bào)道的2, 6, 9-三取代嘌呤衍生物對(duì)周期蛋 白依賴性激酶（CDKs)具有高的抑制活性，其IC5。值最低可達(dá)7. 1nM，在小鼠肝癌模型中表 現(xiàn)出較強(qiáng)的抗癌活性。
[0008] 2015 年，Patel等（Patel，H.J. ;Patel，P.D. ;Ochiana，S. 0?;Yan，P.; Sun,ff. ;Patel,M.R. ;Shah,S.K. ;Tramentozzi，E. ;Brooks,J. ;Bolaender，A.; Shrestha，L. ;Stephani，R. ;Finotti，P. ;Leifer，C. ;Li,Z. ;Gewirth,D.T.; Taldone，T. ;Chiosis，G.Structure-ActivityRelationshipinaPurine-Scaffold CompoundSerieswithSelectivityfortheEndoplasmicReticulumHsp90Paralog 6印94[<1].^#^/.〇_.，2015，58，3922-3943.)報(bào)道的8,9-二取代-6-氨基嘌呤衍生 物對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶（Grp94)具有較高的抑制活性且表現(xiàn)出高的選擇性，其IC5。值最低可 達(dá)0.22nM。此外，該類化合物在諸多炎癥和癌癥的細(xì)胞模型中也表現(xiàn)出了較高的活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的是： 嘌呤環(huán)衍生物都具有較好的抗病毒、抗癌活性，本發(fā)明提供了一類結(jié)構(gòu)新穎的A取 代-l-(9f嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酰胺衍生物，通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明提供的化合物對(duì) 煙草花葉病毒活性具有良好的治療活性，對(duì)肺腺癌細(xì)胞A549具有較高的抑制活性。
[0010] 本發(fā)明提供的化合物結(jié)構(gòu)通式如下所示：
式中： 札選自氫、鹵素原子； R2選自C1-C6的烷基、苯基、取代苯基、芐基、苯乙基、取代苯乙基、芳香雜環(huán)亞甲基、芳 香雜環(huán)乙基。
[0011] &選自氫、氟、氯、溴、碘原子； R2選自C1-C6的烷基、苯基、取代苯基、芐基、苯乙基、取代苯乙基、芳香雜環(huán)亞甲基、芳 香雜環(huán)乙基。
[0012] 札中所指的鹵素原子為氯原子。
[0013]馬中所指的C1-C6的烷基為正丁基；所指的取代苯基為4-氟苯基；所指的取代 苯乙基為3, 4-二甲氧基苯乙基、3-氟苯乙基、2-氟苯乙基；所指的芳香雜環(huán)亞甲基為呋 喃-2-取代亞甲基；所指的芳香雜環(huán)乙基為If吲哚-3-取代乙基。
[0014] 本發(fā)明所述具體化合物如下所示：

本發(fā)明提供的化合物可作為在制備防治植物病毒農(nóng)藥和農(nóng)藥添加劑、抗癌藥物及藥物 添加劑中的應(yīng)用；所述植物病毒為煙草花葉病毒，所述癌細(xì)胞為肺腺癌細(xì)胞A549。
[0015] 本發(fā)明化合物可采用如下方法進(jìn)行制備：
采用取代嘌呤A與4-哌啶甲酸反應(yīng)得到中間體B，在溶劑為％A二甲基甲酰胺、堿為 三乙胺、催化劑為1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽與1-羥基苯并三唑的 條件下與各種取代胺發(fā)生酸胺縮合反應(yīng)制得目標(biāo)化合物C。
[0016] 本發(fā)明過(guò)程中，所采用的中間體B可以采用以下方式制備：
i:：. 采取取代嘌呤A與4-哌啶甲酸在溶劑為正丁醇、堿為三乙胺的條件下，加熱回流，反應(yīng) 得到中間體B。
[0017] 有益效果： 本發(fā)所明合成的，取代-l_(9f嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酰胺衍生物的生物活性 測(cè)試結(jié)果表明，化合物對(duì)煙草花葉病毒在治療方面有良好的生物活性，化合物對(duì)人肺腺癌 細(xì)胞A549有良好的抑制活性。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為化合物C-9和對(duì)照藥劑寧南霉素在500 #g/mL濃度下對(duì)煙草花葉病毒的 治療活性測(cè)試效果圖，圖為葉片正面出斑情況。葉片左半邊是未施藥時(shí)(對(duì)照)出斑的情況， 葉片右半邊是施藥后出斑的情況，圖片表明化合物C-9對(duì)葉片具有良好的治療活性，高于 對(duì)照藥劑寧南霉素。
[0019] 圖2為化合物C-6和對(duì)照藥劑吉非替尼在10 #M、1 濃度下對(duì)供試肺腺癌細(xì) 胞A549的形態(tài)學(xué)影響效果圖。圖片表明化合物C-6首先抑制細(xì)胞增殖，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡， 而且這種作用主要表現(xiàn)為濃度和時(shí)間依賴型。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 實(shí)例1 :A(3,4-二甲氧基苯乙基嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酰胺（C-1) 的合成 (1)l-(9f嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酸的制備 向100mL正丁醇中加入6-氯噪呤（13. 0mmol)、4_哌啶甲酸（16. 9mmol)、9mL三乙 胺，加熱回流，反應(yīng)結(jié)束后體系冷卻至室溫，過(guò)濾除去過(guò)量的4-哌啶甲酸，收集濾液，減壓 蒸餾脫溶，得粗產(chǎn)品，加甲醇洗滌，抽濾收集濾餅，干燥得白色固體，收率92. 5%。
[0021] (2)A(3, 4-二甲氧基苯乙基）-l-(9f嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酰胺的制備 l-(9f嘌呤-6-取代）哌啶-4-甲酸（1. 0mmol)、1-羥基苯并三唑（1. 2mmol)溶于 DMF(6mL，經(jīng)干燥處理），加入三乙胺（279 #L，經(jīng)干燥處理），在冰浴條件下攪拌。0°C條件下加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽（1.2mmol)攪拌1h，加入 3, 4-二甲氧基苯乙胺（1.0mmol)，室溫?cái)嚢?0h，抽濾，DCM洗滌（50mL)，收集濾餅置于 紅外燈下干燥，收集濾液使用飽和NH4C1洗滌（2X10mL)，水洗（2X10mL)，無(wú)水~&2304干 燥過(guò)夜，過(guò)濾，減壓蒸餾脫溶，經(jīng)柱色譜（DCM:MeOH= 20:1)提純，產(chǎn)率69. 2%，熔點(diǎn)>250 °C;:HNMR(500MHz,DMSO-o^)S12.97 (s, 1H,purineNH), 8.16 (s, 1H,purine 2-H), 8.07 (s, 1H,purine8-H), 7.83 (t, / = 5. 5Hz, 1H,CONH), 6.81 (d,J= 8.2Hz, 1H,benzene5~H), 6.74 (s, 1H,benzene2-H), 6.65 (d, ^=8.1Hz,J2 = 1.6Hz, 1H,benzene6-H), 3.69 (s, 3H,benzene3-〇CH3), 3.67 (s, 3H,benzene 4-0CH3), 3.18-3.33 (m, 2H,piperidine2,6-H), 3.07 (s, 2H,NHCH2), 2.59 (t,J = 7.0Hz, 2H,CH2Ph), 2.38-2.44 (m, 1H,