本發(fā)明廣泛涉及作為增殖性疾病如癌癥，和一系列退行性疾病如骨關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、心臟病和炎癥性腸病治療的藥物。本發(fā)明尤其涉及包含芳基和/或烷基取代的吲哚類(lèi)化合物的藥物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及治療或預(yù)防疾病或病癥如增殖性疾病(尤其是癌癥)的方法。本發(fā)明還涉及制備所述化合物的工藝方法。

發(fā)明背景

本發(fā)明說(shuō)明書(shū)參考任何現(xiàn)有技術(shù)并非承認(rèn)或建議，所述現(xiàn)有技術(shù)在任何管轄地均組成常見(jiàn)的一般知識(shí)的一部分，或?qū)τ诒绢I(lǐng)域技術(shù)人員而言，所述現(xiàn)有技術(shù)和/或結(jié)合其他現(xiàn)有技術(shù)，可以合理地應(yīng)該被理解、被認(rèn)為是相關(guān)的。

癌癥已殺死成千上萬(wàn)的人，并在美國(guó)成為第二大死因。如今，在治療或預(yù)防多種多樣的癌癥中已取得重大突破。例如，乳腺癌患者已從早期篩查項(xiàng)目以及各種外科手術(shù)技術(shù)中獲益。然而，這些通常證明使人在身體上和情感上衰弱。并且，經(jīng)歷手術(shù)和后續(xù)化療的患者，在他們所患疾病上通常會(huì)經(jīng)歷復(fù)發(fā)。

一種特定攻擊癌細(xì)胞的潛在的新方法是通過(guò)破壞癌細(xì)胞的細(xì)胞骨架系統(tǒng)，其主要包含在肌動(dòng)蛋白中。所述肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架密切地參與細(xì)胞分裂和細(xì)胞遷移。然而，肌動(dòng)蛋白作為腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞骨架和肌肉肌小節(jié)的肌動(dòng)蛋白微絲，起著無(wú)處不在的作用。不同的角色但相似的結(jié)構(gòu)使得肌動(dòng)蛋白成為藥物研發(fā)中較難的靶標(biāo)，由于其多余的脫靶副反應(yīng)。

發(fā)明摘要

本發(fā)明尋求解決上述問(wèn)題中的一個(gè)或多個(gè)，和/或提供治療改善(如癌癥治療)，并在其中一個(gè)實(shí)施例提供抗原肌球蛋白的化合物。

第一方面，本發(fā)明提供通式(I)所示化合物，或其藥學(xué)上可接受的藥物或前藥，

其中：

R₁和R₂獨(dú)立地為H或C₁-C₆烷基；

R₃是N(R₇)₂或3至7個(gè)原子組成的碳環(huán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₇取代；

R₄和R₅獨(dú)立地為或5或6個(gè)原子組成的碳環(huán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₈替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代；

R₆是C₁-C₆烷基基團(tuán)、C₂-C₆烯烴基團(tuán)、或具有5至10個(gè)環(huán)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)的碳環(huán)，其中1或2個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、O、N、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代，或R₆是

X₁不存在，或X₁是具有1至10個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)，或具有2至10個(gè)碳原子的烯基基團(tuán)；

X₂、X₃和X₄獨(dú)立地不存在，或獨(dú)立地選自由以下基團(tuán)組成的組：S、O、NH、NHR₇、C(O)、C(O)NH、具有1至10個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)、具有2至10個(gè)碳原子的烯烴基團(tuán)、CH(R₇)CHC(R₇)C(O)、(CH₂)_0-5C(R₇)C(R₇)(CH₂)_0-5、和5或6個(gè)原子組成的碳環(huán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₇替換；

X₅是O、NH、NR₇或S；

R₇是H、C₁-C₆烷基、(CH₂)_1-5OMe、CF₃、CN或OCF₃；和

R₈是H、OH、烷基(如C₁-C₆烷基)、烯基(如C₂-C₆烯基)、鹵基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、或與R₄、R₅或R₆上的兩個(gè)相鄰碳原子并合的二氧戊環(huán)。

X₁可以是具有1至10個(gè)碳原子(如具有1至5個(gè)碳原子)的烷基基團(tuán)。

R₃可以是N(R₇)₂或4、5、6或7個(gè)原子組成的碳環(huán)(如環(huán)烷基)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₇取代。

R₁和R₂可獨(dú)立地為C₁-C₆烷基(如R₁可以是，譬如，CH₃或CH₂CH₃，和R₂可以是，譬如，CH₃或CH₂CH₃)。

X₂、X₃和X₄可獨(dú)立地選自由以下基團(tuán)組成的組：S、O、NH、NHR₇、C(O)、C(O)NH、具有1至10個(gè)碳原子(如1至5個(gè)碳原子)的烷基基團(tuán)、CH(R₇)CHC(R₇)C(O)、(CH₂)_0-5C(R₇)C(R₇)(CH₂)_0-5、和5個(gè)原子組成的碳環(huán)(如芳基)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子(如1或2個(gè)環(huán)碳原子)可任選地被S、N、O、NH或NR₇(如N和/或O)替換。

R₄和R₅可獨(dú)立地為5或6個(gè)原子組成的芳基或環(huán)烷基基團(tuán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₈替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代。

R₆可以是C₁-C₆烷基基團(tuán)(如CH₃或CH₂CH₃)或具有6至10個(gè)環(huán)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)的芳基基團(tuán)，其中1或2個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、O、N、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代。R₆可以是：

在其中一個(gè)實(shí)施例，所述式(I)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的藥物或前藥，是：

其中：

R₁和R₂可以均為CH₃或CH₂CH₃。

X₁可以是具有1至5個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)(如CH₂、(CH₂)₂或(CH₂)₃)。

R₃可以是4、5、6、或7個(gè)原子組成的環(huán)烷基基團(tuán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₇取代，譬如：

R₃可以是6個(gè)原子組成的環(huán)烷基基團(tuán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₇取代，譬如：

X₅可以是NH或NR₇。R₇可以是C₁-C₆烷基(如CH₃或CH₂CH₃)。

X₂可以是具有1至10個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)、O或NH。X₂可以是(CH₂)_1-5(如CH₂、(CH₂)₂或(CH₂)₃)。

R₄可以是5或6個(gè)原子組成的芳基基團(tuán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₈替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代，譬如：

R₈可以是H。

X₃可以是C(O)。

R₅可以是5或6個(gè)原子組成的環(huán)烷基基團(tuán)，其中1至3個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、N、O、NH或NR₈替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代，譬如：

X₄可以是具有1至5個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)(如CH₂、(CH₂)₂或(CH₂)₃)。

R₆可以是具有9或10個(gè)環(huán)碳原子的雙環(huán)芳基基團(tuán)，其中1或2個(gè)環(huán)碳原子可任選地被S、O、N、NH或NR₇替換，和其中所述環(huán)可任選地被R₈取代。R₆可以選自：

R₈可以是選自H、烷氧基、鹵基、和與R₆上的兩個(gè)相鄰碳原子并合的二氧戊環(huán)。R₈可以是烷氧基(如OCH₃或OCH₂CH₃)。R₈可以是鹵基(如氟)。

尤其，本發(fā)明第一方面的所述化合物體現(xiàn)在以下結(jié)構(gòu)：

在其中一個(gè)實(shí)施例，所述化合物是：

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-7-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮

(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-7-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮。

第二方面，本發(fā)明涉及藥物組合物，其包含式(I)所示化合物以及藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本發(fā)明所述化合物和藥物組合物可適于增殖性疾病的治療或預(yù)防。相應(yīng)地，另一方面，本發(fā)明涉及治療或預(yù)防患者增殖性疾病的方法，所述方法包含給予所述患者有效量的根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物在制備用于治療或預(yù)防增殖性疾病的藥物中的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于患者增殖性疾病的治療或預(yù)防的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于患者增殖性疾病的治療或預(yù)防。

在一個(gè)或多個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述增殖性疾病是癌癥，優(yōu)選固體腫瘤。在各種優(yōu)選實(shí)施例，所述癌癥是選自由乳腺癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮癌、腦癌、皮膚癌、結(jié)腸癌和膀胱癌組成的組。

本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解在本發(fā)明上下文中，“有效量”是指對(duì)被治療患者給予足夠量，從而產(chǎn)生所需的治療或藥理效應(yīng)。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及完全或部分預(yù)防患者固體腫瘤復(fù)發(fā)的方法，所述方法包含給予患者有效量的根據(jù)本發(fā)明第一方面所述的式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物。

另一方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述的化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物在制備用于完全或部分預(yù)防固體腫瘤復(fù)發(fā)的藥物中的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述的式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于完全或部分預(yù)防患者固體腫瘤復(fù)發(fā)的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述的式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于完全或部分預(yù)防患者固體腫瘤的復(fù)發(fā)。

本發(fā)明所述化合物或藥物組合物可適于炎癥性疾病或病癥的治療或預(yù)防。相應(yīng)地，另一方面，本發(fā)明涉及治療患者炎癥性疾病或病癥的方法，所述方法包含給予所述患者有效量的根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物在制備用于治療炎癥性疾病或病癥的藥物中的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于患者炎癥性疾病或病癥的治療的用途。

在進(jìn)一步方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明第一方面所述式(I)化合物或根據(jù)本發(fā)明第二方面所述藥物組合物用于患者炎癥性疾病或病癥的治療。

所述炎癥性疾病或病癥可以是骨關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病(如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病)、潰瘍性直腸炎、遠(yuǎn)端結(jié)腸炎、自身免疫性疾病(如SLE、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎小球性腎炎)、哮喘或涉及肺部炎癥的疾病、或心血管疾病(如動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、和血脂異常)。

所述式(I)的化合物可以用于單獨(dú)治療或聯(lián)合一個(gè)或多個(gè)其他藥物(如化學(xué)治療劑或抗炎劑)進(jìn)行治療，例如作為聯(lián)合治療的一部分。

另一方面，本發(fā)明涉及制備式(I)所示化合物的工藝方法，包括以下步驟：

另一方面，本發(fā)明涉及制備式(I)所示化合物的工藝方法，包括以下步驟：

另一方面，本發(fā)明涉及制備式(I)所示化合物的工藝方法，包括以下步驟：

本發(fā)明的進(jìn)一步方面和上述段落中所描述方面的進(jìn)一步實(shí)施例，將通過(guò)下述描述、給出的例子和參照附圖從而變得顯而易見(jiàn)。

附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1：肌動(dòng)蛋白微絲在通過(guò)化合物(A)3504、(B)3507和(C)3516處理的SK-N-SH神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中的成像和定量。細(xì)胞被488-Atto-Phallodin和DAPI染色從而分別顯現(xiàn)肌動(dòng)蛋白微絲束和細(xì)胞核。顯示在頂部板是來(lái)自對(duì)照(單獨(dú)媒介物)的代表性的灰度免疫熒光圖像，5μM和10μM處理的細(xì)胞。中間板(與放大插圖顯示在底部板)顯示具有定量線(xiàn)性特征的細(xì)胞圖像的疊加。彩色線(xiàn)表示檢測(cè)到的肌動(dòng)蛋白微絲。同時(shí)還顯示的是細(xì)胞數(shù)量、單絲數(shù)量/單元和單絲數(shù)量/單元面積(μM²)的定量。統(tǒng)計(jì)分析是使用ANNOVA-多重比較的一種方法來(lái)執(zhí)行完成，其中每個(gè)藥物治療組均與所述對(duì)照進(jìn)行比較。****p<0.0001，****p<0.001，***p<0.01，**p<0.1。

圖2：肌動(dòng)蛋白微絲在通過(guò)化合物(A)3504、(B)3507和(C)3516處理的SK-N-SH神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中的成像和定量。細(xì)胞被γ9d(羊多克隆，1:100)染色，隨后被488-共軛的第二抗體(1：1000)和DAPI染色，從而分別顯現(xiàn)包含絲束和細(xì)胞核的Tpm3.1。顯示在頂部板是來(lái)自對(duì)照(單獨(dú)媒介物)的代表性的灰度免疫熒光圖像，5μM和10μM處理的細(xì)胞。中間板(與放大插圖顯示在底部板)顯示具有定量線(xiàn)性特征的細(xì)胞圖像的疊加。彩色線(xiàn)表示檢測(cè)到的肌動(dòng)蛋白微絲。同時(shí)還顯示的是細(xì)胞數(shù)量、單絲數(shù)量/單元和單絲數(shù)量/單元面積(μM²)的定量。統(tǒng)計(jì)分析是使用ANNOVA-多重比較方法的一種來(lái)執(zhí)行完成，其中每個(gè)藥物治療組均與所述對(duì)照進(jìn)行比較。****p<0.0001，****p<0.001，***p<0.01，**p<0.1。

圖3：化合物3507對(duì)Tpm3.1-調(diào)節(jié)的肌動(dòng)蛋白微絲解聚作用動(dòng)力學(xué)的影響。6μM肌動(dòng)蛋白微絲(35％芘標(biāo)記)，存在或不存在Tpm3.1的飽和量(10μM)情況下，稀釋12倍成F-肌動(dòng)蛋白緩沖液(100mM NaCl，10mM Tris-HCl pH 7.0，2mM MgCl₂，1mM EGTA，0.2mM CaCl₂，0.2mM ATP，0.5mM DTT，0.01％(v/v)NaN₃)的(A和B)解聚作用時(shí)間進(jìn)程。F-肌動(dòng)蛋白和Tpm3.1的終濃度分別為0.5μM和0.83μM。Tpm3.1在與F-肌動(dòng)蛋白混合之前，用50μM化合物3507或1％(v/v)DMSO預(yù)孵育。解聚作用數(shù)據(jù)歸一化至初始熒光值。在化合物4015或4093存在的情況下，對(duì)于單獨(dú)F-肌動(dòng)蛋白或Tpm3.1/F-肌動(dòng)蛋白的解聚作用的(C和D)初始速率(V₀)。解聚作用的初始速率從開(kāi)始的3600s進(jìn)行測(cè)定，適于線(xiàn)性回歸模型。數(shù)據(jù)代表平均值±SEM，平均從n>6重復(fù)。****p<0.0001。

圖4：在神經(jīng)母細(xì)胞瘤的側(cè)翼異種移植模型(CHLA-20)中，將化合物3507/30％w/v Dexolve-7每天以150mg/kg進(jìn)行IP給藥，并給藥18天。腫瘤體積每2-3天進(jìn)行測(cè)定。

圖5：在黑色素瘤的側(cè)翼異種移植模型(A375)中，將化合物3507/30％w/v Dexolve-7以2x/周并以60mg/kg進(jìn)行IV給藥，并給藥14天。腫瘤體積每2-3天進(jìn)行測(cè)定。**p<0.01。

本發(fā)明實(shí)例的詳細(xì)說(shuō)明

本發(fā)明是基于驚人地發(fā)現(xiàn)通式(I)所示化合物能有效抑制原肌球蛋白，從而在治療增殖性疾病，尤其是癌癥方面得到了意想不到的改善結(jié)果。所述肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的研究涉及大量輔助控制和調(diào)節(jié)蛋白。與癌癥細(xì)胞的細(xì)胞骨架有關(guān)的肌動(dòng)調(diào)節(jié)蛋白的識(shí)別和特定靶向，提供了研發(fā)特定癌癥藥物但沒(méi)有不必要副反應(yīng)的機(jī)會(huì)。

肌動(dòng)蛋白微絲是通過(guò)球狀肌動(dòng)蛋白蛋白單體的聚合作用來(lái)構(gòu)建的。所述肌動(dòng)蛋白單體通過(guò)一端承載正電荷，而另一端承載負(fù)電荷來(lái)進(jìn)行兩極化。所述肌動(dòng)蛋白微絲因此具有所有在同一方向?qū)R的所述肌動(dòng)蛋白的蛋白。所述這些微絲具有與其相關(guān)的二級(jí)螺旋蛋白，原肌球蛋白。所述原肌球蛋白在調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白微絲功能中扮演著不可或缺的角色。在結(jié)構(gòu)上，所述肌動(dòng)蛋白微絲是由聚合的肌動(dòng)蛋白單體和原肌球蛋白二聚體置于所述肌動(dòng)蛋白微絲的α螺旋槽，從而形成均聚物。已有超過(guò)40種哺乳動(dòng)物原肌球蛋白亞型，每一種均調(diào)節(jié)特定的肌動(dòng)蛋白微絲。所述特定的原肌球蛋白亞型調(diào)節(jié)癌癥細(xì)胞的細(xì)胞骨架，破壞這種相互作用，從而提供特異性治療癌癥細(xì)胞的基礎(chǔ)。

I.定義

以下是一些用于本領(lǐng)域術(shù)語(yǔ)的定義，可以幫助理解本發(fā)明。這些術(shù)語(yǔ)均作為一般定義，且這些術(shù)語(yǔ)單獨(dú)不應(yīng)該限制本發(fā)明的范圍，僅提出用于更好地理解本發(fā)明下述內(nèi)容。

除非上下文另有要求或具體聲明為相反內(nèi)容，否則本發(fā)明所列舉整數(shù)、步驟、或要素均作為單獨(dú)的整數(shù)、步驟或要素，顯然包括單數(shù)和復(fù)數(shù)形式的整數(shù)、步驟或要素。

本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)領(lǐng)會(huì)本發(fā)明易受變化和改變而非那些具體描述的影響。應(yīng)理解本發(fā)明包括所有這些變化和改變。本發(fā)明也包括所有本發(fā)明說(shuō)明書(shū)所提及或表明的步驟、特征、組合物和化合物，單獨(dú)地或集體地，任何及任何兩個(gè)或多個(gè)所述步驟、特征、組合物和化合物的所有組合。

本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“包含”和“包括”為開(kāi)放式和非限制性表達(dá)，除非另有說(shuō)明。

貫穿本發(fā)明的術(shù)語(yǔ)“任選取代的”表示所述基團(tuán)可能或可能不進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)非氫原子取代基團(tuán)取代或并合(以便形成多環(huán)體系)。對(duì)于一個(gè)特定的官能團(tuán)，合適的化學(xué)上可行的任選取代基對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。典型的任選取代基包括C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、OH、鹵素、O(C₁-C₄烷基)、NR^aR^b其中R^a和R^b各自獨(dú)立地選自H、C₁-C₃烷基、CONH₂、SH、S(C₁-C₃烷基)、-CH₂-O(C_1-3烷基)、C_6-10芳基、-CH₂-苯基、羥基-(C_1-3烷基)、和鹵基-(C_1-3烷基)。目前優(yōu)選的任選取代基包括C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、-CH₂-(C_1-3)烷氧基、C_6-10芳基、-CH₂-苯基、鹵素、OH、羥基-(C_1-3)烷基、和鹵基-(C_1-3)烷基，如CF₃、CH₂CF₃。

“?；北硎就榛?CO-基團(tuán)，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的定義。酰基實(shí)例包括乙?；捅郊柞；?。所述烷基基團(tuán)可以是C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷基、或C₁-C₃烷基基團(tuán)。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“烷基”作為一個(gè)基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是指具有1-12個(gè)碳原子、或1-10個(gè)碳原子、或1-6個(gè)碳原子、或1-4個(gè)碳原子、或1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪族烴基團(tuán)。因此，術(shù)語(yǔ)烷基的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、1-丙基、異丙基、1-丁基、2-丁基、異丁基、叔丁基、戊基、1,2-二甲基丙基、1,1-二甲基丙基、戊基、異戊基、己基、4-甲基戊基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、1,2,2-三甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、庚基、1-甲基己基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、4,4-二甲基戊基、1,2-二甲基戊基、1,3-二甲基戊基、1,4-二甲基戊基、1,2,3-三甲基丁基、1,1,2-三甲基丁基、1,1,3-三甲基丁基、5-甲基庚基、1-甲基庚基、辛基、壬基、癸基等等。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“烯基”作為一個(gè)基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是指脂肪族烴基團(tuán)，其包含至少一個(gè)碳-碳雙鍵，且其可以是直鏈或支鏈的，例如在正常鏈中，一個(gè)基團(tuán)具有2-12個(gè)碳原子、或2-6個(gè)碳原子、或2-4個(gè)碳原子。在正常鏈中，所述基團(tuán)可以包含多個(gè)雙鍵，且每個(gè)雙鍵的定位各自獨(dú)立地為順式或反式，E或Z。烯基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于次乙基、乙烯基、烯丙基、1-甲基乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1,3-丁二烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1,3-戊二烯基、2,4-戊二烯基、1,4-戊二烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、1,3-己二烯基、1,4-己二烯基、2-甲基戊烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、1-壬烯基、1-癸烯基等等。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“烯基氧基”是指-O-烯基基團(tuán)，其中烯基具有如本發(fā)明所述的定義。優(yōu)選的烯基氧基基團(tuán)是C₂-C₁₂烯基氧基基團(tuán)。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“烷基氧基”和“烷氧基”為同義詞，是指-O-烷基基團(tuán)，其中烷基具有本發(fā)明所述的定義。目前優(yōu)選的烷氧基基團(tuán)是C_1-6烷氧基或C_1-4烷氧基或C_1-3烷氧基。其實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基、n-丙氧基、異丙氧基、2-丁氧基、叔丁氧基等等。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“烷基氨基”或“烷氨基”包括單烷基氨基和二烷基氨基，除非另有說(shuō)明?！皢瓮榛被笔侵辅CNH-烷基基團(tuán)，其中烷基具有本發(fā)明上述的定義?！岸榛被笔侵辅CN(烷基)₂基團(tuán)，其中每個(gè)烷基可以相同或不同，并且每個(gè)烷基具有本發(fā)明所述的定義。所述烷基基團(tuán)可以是C₁-C₆烷基基團(tuán)。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“炔基”作為一個(gè)基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是指脂肪族烴基團(tuán)，其包含碳-碳三鍵，且其在正常鏈中，可以是直鏈或支鏈的可具有2-12個(gè)碳原子、或2-6個(gè)碳原子、或2-4個(gè)碳原子。結(jié)構(gòu)實(shí)例包括但不限于乙炔基和丙炔基。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“炔基氧基”是指-O-炔基基團(tuán)，其中炔基具有本發(fā)明所述的定義。目前優(yōu)選的炔基氧基基團(tuán)是C₂-C₆炔基氧基基團(tuán)、C₂-C₄炔基氧基。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“芳基”作為一個(gè)基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是指(i)任選取代的單環(huán)、或并合多環(huán)、芳香的碳環(huán)(環(huán)結(jié)構(gòu)上的環(huán)原子均為碳原子)，其中每個(gè)環(huán)具有5-18個(gè)原子。目前優(yōu)選的芳基基團(tuán)的每個(gè)環(huán)具有6-14個(gè)原子，或更加優(yōu)選每個(gè)環(huán)具有6-10個(gè)原子。芳基基團(tuán)的實(shí)例包括苯基、萘基、菲基等等；(ii)任選取代的部分飽和的雙環(huán)芳香碳環(huán)部分，其中苯基與C_5-7環(huán)烷基或C_5-7環(huán)烯基基團(tuán)并合在一起形成環(huán)結(jié)構(gòu)，例如四氫萘基、茚基或茚滿(mǎn)基。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“環(huán)烯基”是指非芳香性單環(huán)或多環(huán)環(huán)系包含至少一個(gè)碳-碳雙鍵，且每個(gè)環(huán)可以有5-10個(gè)碳原子。單環(huán)環(huán)烯基的實(shí)例包括環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基或環(huán)庚烯基。所述環(huán)烯基基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)取代基團(tuán)取代。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

“環(huán)烷基”是指飽和或部分飽和的單環(huán)或并合多環(huán)或螺多環(huán)的碳環(huán)，其中每個(gè)環(huán)可以包含3至9個(gè)碳原子，譬如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等等，除非另有說(shuō)明。所述環(huán)烷基包括單環(huán)體系如環(huán)丙基和環(huán)己基，雙環(huán)體系如十氫萘，和多環(huán)體系如金剛烷。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)”是指基于碳原子的環(huán)體系，其旨在包括如本發(fā)明所定義的芳基、環(huán)烯基、環(huán)烷基、和雜芳基基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵基”為同義詞，均指氟、氯、溴或碘。

“雜芳基”無(wú)論單獨(dú)使用或作為基團(tuán)的一部分是指包含芳香環(huán)(例如5-或6-個(gè)原子組成的芳香環(huán))的基團(tuán)，并在所述芳香環(huán)上具有一個(gè)或多個(gè)雜原子作為環(huán)原子，且余下環(huán)原子為碳原子。合適的雜原子包括氮、氧或硫原子。雜芳基的實(shí)例包括噻吩、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并異噻唑、萘并[2,3-b]噻吩、呋喃、異吲嗪、二苯并呋喃哌嗪(xantholene)、氧硫雜蒽酮(phenoxatine)、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲哚、異吲哚、1H-吲唑、嘌呤、喹啉、異喹啉、酞嗪、萘啶、喹喔啉、鄰二氮萘、咔唑、菲啶、吖啶、吩嗪、噻唑、異噻唑、吩噻嗪、噁唑、異噁唑、噁二唑、吩噁嗪、2-,3-或4-吡啶基、2-,3-,4-,5-,或8-喹啉基、1-,3-,4-,或5-異喹啉基、1-,2-,或3-吲哚基、和2-,或3-噻吩基。所述基團(tuán)可以是末端基團(tuán)或橋接基團(tuán)。

本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“雜原子”或其變體如“雜”是指O、N、NH和S。

本發(fā)明實(shí)施例公開(kāi)的一些化合物可以以單一立體異構(gòu)體、外消旋體、和/或?qū)τ钞悩?gòu)體和/或非對(duì)映異構(gòu)體混合物存在。所有此類(lèi)單一立體異構(gòu)體、外消旋體和其混合物均可認(rèn)為在本發(fā)明描述或要求的主題范圍之內(nèi)。

此外，通式(I)在適用情況下，旨在包含所述化合物的溶劑化物以及非溶劑化形式。因此，通式(I)包括具有指明結(jié)構(gòu)的化合物，包括其水合物或溶劑化物形式，以及其非水合物和非溶劑化物形式。

術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指在健全的醫(yī)療判斷范圍之內(nèi)，適合用于接觸人類(lèi)或動(dòng)物的組織而沒(méi)有過(guò)度的毒性、刺激性、過(guò)敏反應(yīng)等，并且與合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比率相應(yīng)的那些鹽。本領(lǐng)域技術(shù)人員周知，藥學(xué)上可接受的鹽由S.M.Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences,1977,66:1-19中詳細(xì)描述了藥學(xué)上可接受的鹽。所述的鹽可以在最后分離純化本發(fā)明化合物時(shí)就地制備得到，或分別通過(guò)游離堿與合適的有機(jī)酸反應(yīng)制備得到。本發(fā)明化合物合適的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可以通過(guò)無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸制備得到。此類(lèi)無(wú)機(jī)酸的實(shí)例有鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、碳酸、硫酸、和磷酸。合適的有機(jī)酸可以選自脂肪族有機(jī)酸類(lèi)、脂環(huán)族有機(jī)酸類(lèi)、芳香族有機(jī)酸類(lèi)、雜環(huán)有機(jī)酸類(lèi)、羧基有機(jī)酸類(lèi)、和磺酸有機(jī)酸類(lèi)，有機(jī)酸的實(shí)例有甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、葡萄糖醛酸、富馬酸、順丁烯二酸、丙酮酸、烷基磺酸、芳基磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、氨茴酸、甲磺酸、水楊酸、p-羥基苯甲酸、苯基乙酸、扁桃酸、阿波酮酸、帕莫酸、泛酸、對(duì)氨基苯磺酸、環(huán)己基氨基磺酸、硬脂酸、海藻酸、β-羥基酪酸、半乳糖二酸、和半乳糖醛酸。本發(fā)明化合物合適的藥學(xué)上可接受的堿加成鹽包括由鋰、鈉、鉀、鎂、鈣、鋁、和鋅制成的金屬鹽，和由有機(jī)堿譬如膽堿、二乙醇胺、嗎啉制成的有機(jī)鹽?；蛘哂蒒,N'-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)、普魯卡因制成的有機(jī)鹽，銨鹽，季銨鹽如四甲基銨鹽，氨基酸加成鹽如甘氨酸和精氨酸形成的鹽。如果化合物均為固體，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解本發(fā)明化合物、藥物和鹽可以不同晶型或多晶型形式存在，其所有存在形式均可認(rèn)為在本發(fā)明和指定通式的范圍之內(nèi)。

“前藥”是指化合物在體內(nèi)通過(guò)代謝方式(如通過(guò)水解、還原或氧化作用)可轉(zhuǎn)換成本發(fā)明所述化合物。例如本發(fā)明包含羥基基團(tuán)的化合物的酯類(lèi)前藥可以通過(guò)體內(nèi)水解，從而轉(zhuǎn)換成母分子。合適的酯類(lèi)實(shí)例有醋酸酯類(lèi)、檸檬酸酯類(lèi)、乳酸酯類(lèi)、酒石酸酯類(lèi)、丙二酸酯類(lèi)、草酸酯類(lèi)、水楊酸酯類(lèi)、丙酸酯類(lèi)、琥珀酸酯類(lèi)、富馬酸酯類(lèi)、馬來(lái)酸酯類(lèi)、亞甲基-雙-β-羥基萘甲酸酯類(lèi)、龍膽酸酯(gestisates)、羥乙基磺酸酯類(lèi)、二-p-甲苯酰酒石酸酯類(lèi)、甲烷磺酸酯類(lèi)、乙烷磺酸酯類(lèi)、苯磺酸酯類(lèi)、p-甲苯磺酸酯類(lèi)、環(huán)己基氨基磺酸酯類(lèi)和奎尼酸酯類(lèi)。

本發(fā)明所使用的術(shù)語(yǔ)“治療”是指治愈性治療和預(yù)防性治療。因此，本發(fā)明上下文公開(kāi)的術(shù)語(yǔ)“治療”包含醫(yī)治、改善減輕或調(diào)和癌癥或其相關(guān)癥狀的嚴(yán)重程度。

“預(yù)防”或“防止”是指預(yù)防/防止所述癌癥的發(fā)生或調(diào)和所述癌癥的嚴(yán)重程度，如果所述癌癥病情發(fā)展是繼本發(fā)明化合物或藥物組合物給藥之后。此舉可以預(yù)防臨床上明顯的有害細(xì)胞整體增殖的發(fā)作，或個(gè)人處于危險(xiǎn)中有害細(xì)胞快速增殖的臨床前明顯階段的發(fā)作。同樣可認(rèn)為惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)移的預(yù)防、或惡性細(xì)胞累進(jìn)的捕捉或逆轉(zhuǎn)均包含在所述這個(gè)定義中。

術(shù)語(yǔ)“治療有效的”或“藥理學(xué)上有效的”旨在證明每個(gè)藥物的合格量，即通過(guò)每個(gè)藥物本身的治療，從而將實(shí)現(xiàn)改善疾病嚴(yán)重程度和發(fā)生頻率的目標(biāo)，同時(shí)避免常與其他療法相關(guān)的嚴(yán)重副反應(yīng)。

“藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑”包括但不限于，任何生理學(xué)上的緩沖(即pH值約為7.0-7.4)媒介包含合適的水溶性有機(jī)載體、常規(guī)溶劑、分散介質(zhì)、填充劑、固體載體、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑。合適的水溶性有機(jī)載體包括但不限于生理鹽水、葡萄糖、玉米油、二甲亞砜和明膠膠囊。其他常規(guī)添加劑包括乳糖、甘露醇、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉，粘合劑如結(jié)晶纖維素、纖維素衍生物、阿拉伯樹(shù)膠、明膠，分解劑如羧甲基纖維素鈉，和潤(rùn)滑劑如滑石粉或硬脂酸鎂。

“患者”包括任何人類(lèi)或非人類(lèi)動(dòng)物。因此，除了用于人類(lèi)治療之外，本發(fā)明化合物還可以用于獸醫(yī)哺乳動(dòng)物的治療，包括寵物和家畜，譬如但不限于狗、貓、馬、牛、羊和豬。

本發(fā)明上下文中的術(shù)語(yǔ)“給予”和其變體包括“施予”和“給藥”，包括通過(guò)任何適當(dāng)?shù)姆椒ǎ佑|、應(yīng)用、遞送或提供本發(fā)明化合物或組合物至有機(jī)體或表面。

II.本發(fā)明化合物的合成

本發(fā)明涉及本發(fā)明通式(I)所示的功能化的吲哚類(lèi)化合物，以及所述化合物作為治療藥物的用途。

通式(I)所示的化合物，或其鹽、水合物或溶劑化物，可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來(lái)制備得到。對(duì)于制備式(I)化合物的一般合成方案均如下所述。

對(duì)于制備式(I)所示化合物，目前優(yōu)選的合成路線(xiàn)的第一步是使吲哚結(jié)構(gòu)骨架與若干連接基團(tuán)的其中一個(gè)進(jìn)行連接。化合物與C或O基團(tuán)進(jìn)行連接的具體應(yīng)用條件如方案4所示。

下一步是N-烷基化所述取代的吲哚，如方案5所示。或者，所述N-烷基化可以在所述連接基團(tuán)進(jìn)行連接之前進(jìn)行。

所述N-烷基化吲哚可以進(jìn)一步與若干連接基團(tuán)連接，N-連接化合物的具體應(yīng)用條件如方案6所示。

上述方案4-6所述方法可提供一個(gè)或多個(gè)優(yōu)點(diǎn)包括高產(chǎn)率、控制立體化學(xué)、合成步驟少、和對(duì)于放大生產(chǎn)而言，其反應(yīng)條件溫和。

上述方法僅僅是代表性的，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，路線(xiàn)的改變和變化均是顯而易見(jiàn)的，并均在本發(fā)明公開(kāi)的廣泛的范圍之內(nèi)。

III.使用本發(fā)明化合物的治療方法

本發(fā)明通式(I)所示化合物和其藥物組合物，可以用于增殖性疾病的治療或預(yù)防，尤其是癌癥。本發(fā)明化合物和組合物可以用于多種多樣癌癥(腫瘤)的治療，包括但不限于固體腫瘤，譬如乳腺癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮癌、腦癌、皮膚癌、結(jié)腸癌和膀胱癌。

有利地，本發(fā)明化合物可擁有優(yōu)越的藥學(xué)性質(zhì)，如通過(guò)葡萄糖轉(zhuǎn)移酶和其他水溶性轉(zhuǎn)移酶如硫化酶(sulfases)對(duì)共軛結(jié)合提高抵抗，所述硫化酶(sulfases)可以對(duì)增殖細(xì)胞如癌癥細(xì)胞過(guò)表達(dá)。這可能有助于賦予優(yōu)越的藥學(xué)性質(zhì)，例如通過(guò)減少接合和消除而體現(xiàn)的增強(qiáng)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。

適合本發(fā)明化合物遞送的藥物組合物及其制備方法，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。所述組合物及其制備方法可在如Remington’s Pharmaceutical Sciences,19th Edition(Mack Publishing Company,1995)中找到。

本發(fā)明化合物或藥物組合物可以口服、靜脈給藥、滴鼻、直腸給藥、不經(jīng)腸道給藥、皮下給藥、肌內(nèi)注射、外敷、或任何可遞送活性藥物有效量至組織或位點(diǎn)進(jìn)行處理或治療的方法。應(yīng)領(lǐng)會(huì)不同的劑量可被要求用于不同病癥的治療。藥物的有效量是指引起腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)、生長(zhǎng)或大小在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著減少的量。可對(duì)本發(fā)明藥物響應(yīng)的腫瘤疾病包括但不限于乳腺癌。

本發(fā)明化合物或藥物組合物的劑型和用量可以很容易參照已知的治療或預(yù)防方案來(lái)確定。

譬如，所述化合物和藥物組合物可以配制成口服、注射、直腸、不經(jīng)腸道、皮下、靜脈或肌內(nèi)遞送的劑型。特殊劑型的非限制性實(shí)例包括片劑、膠囊、囊片、粉劑、顆粒劑、注射劑、安瓶劑、小瓶、隨時(shí)可用的溶液劑或混懸劑、凍干材料、栓劑和埋植劑。所述固體劑型，如所述片劑或膠囊可含有任何數(shù)量的合適的藥學(xué)上可接受的上述賦形劑或載體。

對(duì)于靜脈給藥、肌內(nèi)給藥、皮下給藥或腹腔內(nèi)給藥，一個(gè)或多個(gè)化合物可以與無(wú)菌水溶液結(jié)合，其中無(wú)菌水溶液可與接受者的血液更好地等滲。所述制劑可以通過(guò)在水中溶解固體活性成分來(lái)制備得到，所述水中含有生理學(xué)上可相容的物質(zhì)如氯化鈉或甘氨酸，和一個(gè)與生理?xiàng)l件相容的緩沖pH體系，從而產(chǎn)生一種水溶液，并使所述溶液表現(xiàn)為無(wú)菌。所述制劑可以單位劑量或多劑量存在于包裝容器中，如密封安瓶或小瓶。

對(duì)于使用本發(fā)明化合物和/或藥物組合物治療疾病狀況，其給予治療有效化合物的量和給藥方案取決于多種因素，包括年齡，體重，性別，和患者醫(yī)療狀況，疾病嚴(yán)重程度，給藥途徑和頻率，特定化合物的使用，有害的增殖細(xì)胞的位置，以及個(gè)人治療的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，因此可能相差很大。如果所述化合物是通過(guò)局部而非系統(tǒng)給藥，并且用于預(yù)防而非用于治療，藥物劑量通常會(huì)更低。這種治療方法可以根據(jù)需要經(jīng)常給藥，并且在一段時(shí)間內(nèi)通過(guò)治療醫(yī)生來(lái)判斷其必要性。本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)，所述抑制劑的給藥方案或治療有效量在給藥時(shí)需要針對(duì)每個(gè)個(gè)體進(jìn)行優(yōu)化。所述藥物組合物可以含有活性成分的量為約0.1至2000mg的范圍，優(yōu)選約0.5至500mg的范圍，最優(yōu)選在約1和200mg之間。日劑量為約0.01至100mg/kg體重，優(yōu)選在約0.1和約50mg/kg體重之間，可能是合適的。所述日劑量可以每天以1至4劑量進(jìn)行給藥。

本發(fā)明化合物可以連同上述藥物載體、稀釋劑或賦形劑進(jìn)行給藥?；蛘叱酥?，所述化合物可以聯(lián)合其他藥物如化學(xué)治療藥物或免疫刺激藥物或治療藥物進(jìn)行給藥。

術(shù)語(yǔ)“聯(lián)合治療”或“輔助治療”定義為使用本發(fā)明化合物和一個(gè)或多個(gè)其他藥物，意在包含每個(gè)藥物順序進(jìn)行給藥的方案，并將提供聯(lián)合用藥的有益效果，并且意在包含將這些藥物實(shí)質(zhì)上同時(shí)進(jìn)行共同給藥，如含有這些活性成分固定比率的單個(gè)制劑配方，或以多個(gè)、每個(gè)藥物分開(kāi)的制劑配方共同給藥。

根據(jù)本發(fā)明各種實(shí)例，一個(gè)或多個(gè)通式(I)所示化合物可以聯(lián)合一個(gè)或多個(gè)其他治療藥物進(jìn)行配制或給藥。因此，根據(jù)本發(fā)明各種實(shí)例，一個(gè)或多個(gè)通式(I)所示化合物可以包括在用外科手術(shù)和/或其他已知處理或治療藥物，例如其他抗癌藥物，尤其是化學(xué)治療藥物、放射治療藥物、和/或輔助或預(yù)防用藥物的聯(lián)合治療方案中。

已有大量抗腫瘤藥物可通過(guò)商用、臨床評(píng)價(jià)和臨床前研究途徑獲得，并通過(guò)藥物聯(lián)合化學(xué)治療，可選用作為癌癥或其他腫瘤疾病的治療。此類(lèi)抗腫瘤藥物分為幾個(gè)大類(lèi)，即抗生素類(lèi)藥物、烷化劑、抗代謝物、激素類(lèi)藥物、免疫類(lèi)藥物、干擾素類(lèi)藥物、和一類(lèi)其他藥物?；蛘撸渌鼓[瘤藥物，如間質(zhì)金屬結(jié)合蛋白酶抑制劑可被使用?？捎糜诼?lián)合治療的合適藥物將通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)識(shí)別。合適的藥物已被列舉，例如在默克索引An Encyclopaedia of Chemicals,Drugs and Biologicals,12^th Ed.,1996中，其全部?jī)?nèi)容將并入本發(fā)明作為參考。

聯(lián)合方案可以涉及活性藥物在不同情況下一起、順序、或以適當(dāng)?shù)亩ň嚯x間隔進(jìn)行給藥。包含本發(fā)明化合物的活性藥物的聯(lián)合可以是協(xié)同作用。

所述通式(I)所示化合物的共同給藥可以被作為化學(xué)治療藥物或其他抗腫瘤藥物并處在同一單位劑量的通式(I)所示化合物所影響，或通式(I)所示化合物和化學(xué)治療藥物或其他抗腫瘤藥物可以同時(shí)或在相似時(shí)間，存在于離散單位劑量給藥的個(gè)體中。順序給藥可以是任何順序要求，當(dāng)?shù)诙€(gè)或后續(xù)化合物被給藥時(shí)，尤其是當(dāng)期望得到累積效應(yīng)或協(xié)同效應(yīng)時(shí)，可以要求第一個(gè)或初始化合物正在進(jìn)行的生理效應(yīng)是當(dāng)前的。

本發(fā)明的實(shí)例將參照實(shí)施例來(lái)進(jìn)行詳細(xì)討論，所述實(shí)施例將僅作為范例，其無(wú)論如何不應(yīng)該被認(rèn)為限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例

步驟1：2,3-二甲基-1H-吲哚-5-甲醛的制備

在-78℃下，向5-溴-2,3-二甲基-1H-吲哚(5.0g，22.42mmol)的干燥THF(50mL)攪拌溶液中，加入t-BuLi(44.8mL，67.20mmol)。所得反應(yīng)混合物在相同溫度下攪拌反應(yīng)1小時(shí)。然后在-78℃下，向反應(yīng)體系中加入干燥DMF(5.0mL，65.00mmol)。在所述溫度下進(jìn)一步攪拌反應(yīng)2小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，在-40℃下所述反應(yīng)采用飽和氯化銨溶液淬滅，并且用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用20-25％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到2,3-二甲基-1H-吲哚-5-甲醛為黃色固體(3.0g，77％)。LCMS:m/z 174.0[M+H]⁺。

步驟2和3：3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯的制備

室溫下，將對(duì)甲苯磺酰肼(5.36g，28.9mmol)加至2,3-二甲基-1H-吲哚-5-甲醛(5.0g，28.9mmol)的干燥1,4-二氧六環(huán)(100mL)攪拌溶液中。在冷卻至0℃之前，將溫度升至80℃并攪拌反應(yīng)2小時(shí)。

向所述粗品2,3-二甲基-5-((1-對(duì)甲苯磺?；?2λ²-二氮烷基)甲基)-1H-吲哚的反應(yīng)體系中，加入K₂CO₃(5.96g，43.2mmol)和(3-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(5.18g，28.8mmol)。將反應(yīng)溫度升至110℃并攪拌反應(yīng)4小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)體系濃縮，并用水稀釋?zhuān)缓笥靡宜嵋阴ポ腿?。合并的有機(jī)層用水和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用20-25％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯為棕色固體(4.0g，47％)。LCMS:m/z 294.38[M+H]⁺。

步驟4：3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸的制備

將3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(4.0g，13.60mmol)溶于THF:H₂O:MeOH(6:2:2)的混合物。0℃下，加入LiOH.H₂O(1.14g，27.20mmol)。反應(yīng)混合物允許在室溫下攪拌反應(yīng)16個(gè)小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)體系濃縮，然后加入乙酸乙酯和水，使其分層。收集水層，并在0℃下采用飽和檸檬酸溶液酸化。過(guò)濾，得到固體，并真空干燥，得到3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸為棕色固體(2.9g，77％)。LCMS:m/z 280.39[M+H]⁺。

步驟5：(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

向3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(300mg，1.08mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中加入DIPEA(0.5mL)，然后攪拌10分鐘，隨后加入HATU(817.6mg，2.150mmol)并攪拌反應(yīng)30分鐘。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，并加入1-(4-氟苯乙基)哌嗪(246.2mg，1.183mmol)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中。過(guò)濾，收集所得沉淀，并干燥得到(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(300mg，60％)。LCMS:m/z 470.23[M+H]⁺。通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(58％)。LCMS:m/z482.47[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(56％)。LCMS:m/z 496.48[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(70％)。LCMS:m/z 470.32[M+H]⁺。

3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(72％)。LCMS:m/z 482.41[M+H]⁺。

3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(62％)。LCMS:m/z 452.23[M+H]⁺。

步驟6-1：(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將NaH(30.6mg，1.2779mmol)分批加至(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(300mg，0.6389mmol)的DMF(4mL)攪拌溶液中。反應(yīng)混合物允許升至室溫?cái)嚢?0分鐘。然后在0℃下滴加溴氯丙烷(0.13mL，1.2779mmol)，所得混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用乙酸乙酯作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為褐色粘性液體(200mg，57％)。LCMS:m/z 546.0[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(50％)。LCMS:m/z 558.0[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(58％)。LCMS:m/z 572.0[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(43％)。LCMS:m/z546.39[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(43％)。LCMS:m/z 558.45[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(45％)。LCMS:m/z 528.31[M+H]⁺。

步驟6-2：化合物3501，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(3-((2,3-二甲基-1-(3-氯丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(200mg，0.366mmol)的乙腈(5mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(137.1mg，0.9155mmol)和碳酸鈉(116.4mg，1.0986mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(91.70mg，0.9155mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯(60mL)稀釋?zhuān)盟春望}水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3501)為淡黃色膠狀固體(43mg，19％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.37–7.30(m,2H),7.28–7.22(m,4H),7.19–7.13(m,2H),7.09(t,J＝9.0Hz,2H),6.91(br d,J＝8.3Hz,1H),4.09–4.02(m,4H),3.66–3.46(m,4H),2.71(t,J＝7.1Hz,2H),2.64–2.15(m,22H),2.14(s,3H),1.81–1.71(m,2H)。LCMS:m/z 610.56[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3502，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(34％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.41–7.37(m,2H),7.25(br s,1H),7.23–7.19(m,2H),7.15–7.07(m,3H),6.92(br d,J＝6.8Hz,1H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),4.11(t,J＝6.8Hz,2H),4.08(s,2H),3.76(s,3H),3.72(br s,2H),3.46(br s,2H),2.79–2.20(m,24H),2.18(s,3H),1.88(五重峰,J＝6.8Hz,2H)。LCMS:m/z 622.58[M+H]⁺。

化合物3503，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(18％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.42–7.33(m,2H),7.27–7.22(m,2H),7.20(br d,J＝6.8Hz,1H),7.14(br s,1H),6.92(dd,J＝8.0Hz,1.2Hz,1H),6.83–6.77(m,2H),6.65(dd,J＝8.4Hz,1.2Hz,1H),5.90(s,2H),4.13(t,J＝6.8Hz,2H),4.08(s,2H),3.71(br s,2H),3.34(br s,2H),2.77(br s,4H),2.70–2.65(m,2H),2.59–2.47(m,11H),2.36(t,J＝6.8Hz,2H),2.31(s,3H),2.25(br s,2H),2.18(s,3H),1.89(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 636.54[M+H]⁺。

化合物3504，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(12％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.40–7.34(m,2H),7.33–7.18(m,4H),7.15(br s,1H),7.06–6.96(m,2H),6.96–6.87(m,2H),4.12–4.08(m,4H),3.71(br s,2H),3.38(br s,2H),2.81–2.71(m,2H),2.71–2.47(m,10H),2.46–2.21(m,12H),2.32(s,3H),1.87(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 610.6[M+H]⁺。

化合物3505，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(12％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.35–7.32(m,2H),7.28–7.25(m,2H),7.21–7.13(m,3H),6.91(br d,J＝8.4Hz,1H),6.82–6.72(m,3H),4.09–4.03(m,4H),3.73(s,3H),3.53(br s,2H),3.25(br s,2H),2.74–2.61(m,4H),2.47–2.15(m,20H),2.14(s,3H),1.82–1.71(m,2H)。LCMS:m/z 622.58[M+H]⁺。

化合物3506，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(12％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.42–7.08(m,11H),6.94–6.89(m,1H),4.11–4.01(m,4H),3.62–3.43(m,4H),2.76–2.67(m,2H),2.63–2.10(m,25H),1.91–1.81(m,2H)。LCMS:m/z 592.58[M+H]⁺。

方案8.化合物3507–3512的一般合成

步驟1：5-甲氧基-2,3-二甲基-1H-吲哚的制備

將2-丁酮(11.93mL，128.8mmol)加至4-甲氧基肼鹽酸鹽(15.00g，85.89mmol)的乙酸(150mL)攪拌溶液中，然后將反應(yīng)混合物加熱至80℃攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去乙酸，反應(yīng)體系采用飽和NaHCO₃溶液堿化。過(guò)濾，收集所得灰色沉淀，并干燥1小時(shí)。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用20％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到5-甲氧基-2,3-二甲基-1H-吲哚為灰色固體(8.8g，59％)。LCMS:m/z 176.23[M+H]⁺。

步驟2：2,3-二甲基-1H-吲哚-5-醇的制備

0℃下，將BBr₃(12.18mL，128.40mmol)加至5-甲氧基-2,3-二甲基-1H-吲哚的DCM(50mL)攪拌溶液中。將溫度保持在0-5℃攪拌反應(yīng)2小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物采用飽和NaHCO₃堿化，然后用CH₂Cl₂萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析色譜，并使用20-50％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到2,3-二甲基-1H-吲哚-5-醇為米白色固體(8.2g，100％)。LCMS:m/z 162.08[M+H]⁺。

步驟3：5-羥基-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯的制備

室溫下，向2,3-二甲基-1H-吲哚-5-醇(7.20g，44.7mmol)的乙腈(72mL)攪拌溶液中加入Boc-酸酐(29.2g，134mmol)和DMAP(0.55g，4.472mmol)。反應(yīng)體系在室溫下攪拌過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，減壓蒸去乙腈，得到N-Boc-5-羥基吲哚和N,O-二-Boc-保護(hù)的化合物(8.2g，51.42mmol)的粗品混合物。將所述混合物再次溶于甲醇(828mL)，加入K₂CO₃(21.3g，154.2mmol)，所得混合物在室溫下攪拌反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后加入乙酸(10mL)，所得混合物攪拌10分鐘。反應(yīng)體系采用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)100-200目硅膠柱層析，并采用20％乙酸乙酯的石油醚進(jìn)行洗脫純化，得到5-羥基-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯為棕色液體(9.5g，72％)。LCMS:m/z 262.40[M+H]⁺。

步驟4：5-(3-(甲氧基羰基)苯氧基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯的制備

向5-羥基-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(7.00g，26.7mmol)的DCM(100mL)攪拌溶液中加入(3-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(14.4g，80.361mmol)。然后加入Cu(OAc)₂(12.16g，66.96mmol)，隨后再加入NEt₃(18.5ml，133.93mmol)，反應(yīng)體系通氧氣凈化4小時(shí)。整個(gè)反應(yīng)體系在氧氣氛下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)慮。濾液用水稀釋?zhuān)⒉捎肈CM萃取。所得有機(jī)層用鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)100-200目硅膠柱層析，并采用10％乙酸乙酯的石油醚進(jìn)行洗脫純化，得到5-(3-(甲氧基羰基)苯氧基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯為棕色液體(8.2g,77％)。LCMS:m/z 396.43[M+H]⁺。

步驟5：3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸的制備

向5-(3-(甲氧基羰基)苯氧基)-3-甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(8.20g，20.8mmol)的THF(100mL)和水(100mL)攪拌溶液中，加入LiOH.H₂O(17.4g，415mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)4小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，減壓蒸去THF，并將反應(yīng)體系冷卻至0℃，采用1N HCl酸化(至pH 1)，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物與正戊烷一起研磨，得到純的3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸為米白色固體(5.0g，86％)。LCMS:m/z 282.2[M+H]⁺。

步驟6：(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

向3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸(0.25g，0.88mmol)的DMF(3mL)攪拌溶液中加入DIPEA(0.70mL，4.44mmol)。攪拌10分鐘后，加入HATU(0.50g，1.33mmol)，所得混合物在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)30分鐘。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，并加入1-(4-氟苯乙基)哌嗪(0.32g，1.33mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中，并用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)100-200目硅膠柱層析，并采用30％乙酸乙酯的石油醚進(jìn)行洗脫純化，得到(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為黃色固體(410mg，97％)。LCMS:m/z 472.52[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(92％)。LCMS:m/z 484.56[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(97％)。LCMS:m/z 498.50[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(71％)。LCMS:m/z 472.55[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(92％)。LCMS:m/z 484.56[M+H]⁺。

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(89％)。LCMS:m/z 454.47[M+H]⁺。

步驟7-1：(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將KOtBu(0.29g，4.434mmol)分批加至(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(0.41g，0.88mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中。反應(yīng)混合物允許升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)30分鐘。然后在0℃下，向反應(yīng)混合物中滴加溴氯丙烷(0.43mL，4.43mmol)。將反應(yīng)混合物升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，并用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，并減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色膠狀固體(130mg，27％)。LCMS:m/z 548.59[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(64％)。LCMS:m/z 560.53[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(74％)。LCMS:m/z 574.89[M+H]⁺。

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(39％)。LCMS:m/z548.55[M+H]⁺。

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(57％)。LCMS:m/z 560.53[M+H]⁺。

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(43％)。LCMS:m/z 530.41[M+H]⁺。

步驟7-2：化合物3507，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(250mg，0.455mmol)的乙腈(10mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(170mg，1.137mmol)和碳酸鈉(241mg，2.27mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(182mg，1.82mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃并攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(30mL)稀釋?zhuān)⒂盟春望}水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3507)為米白色固體(87mg，31％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.42(d,J＝9.0Hz,1H),7.38(t,J＝7.8Hz,1H),7.24(dd,J＝8.4Hz,6.0Hz,2H),7.12–7.06(m,3H),7.02–6.96(m,2H),6.81(dd,J＝8.7Hz,2.1Hz,1H),6.76(br s,1H),4.12(t,J＝6.9Hz,2H),3.57(br s,2H),3.33(br s,2H),2.72–2.14(m,26H),2.13(s,3H),1.85–1.74(m,2H)。LCMS:m/z 621.54[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3508，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(6％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.43(d,J＝8.7Hz,1H),7.38(t,J＝7.5Hz,1H),7.14–7.08(m,3H),7.04–6.96(m,2H),6.86–6.79(m,3H),6.77(br s,1H),4.12(t,J＝6.9Hz,2H),3.71(s,3H),3.51(br s,4H),2.70–2.15(m,24H),2.13(s,3H),1.88–1.74(m,2H)。LCMS:m/z 624.65[M+H]⁺。

化合物3509，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(35％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.41–7.33(m,2H),7.15–7.00(m,3H),6.85–6.79(m,2H),6.73–6.60(m,2H),6.65(br d,J＝8.1Hz,1H),5.89(s,2H),4.16(t,J＝6.9Hz,2H),3.81–3.51(m,2H),3.53–3.37(m,2H),2.72–2.64(m,2H),2.61–2.42(m,10H),2.42–2.25(m,12H),2.17(s,3H),1.94(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 638.48[M+H]⁺。

化合物3510，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(41％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.42–7.32(m,2H),7.28(td,J＝7.8Hz,6.0Hz,1H),7.09(d,J＝2.4Hz,1H),7.07–6.87(m,5H),6.84–6.78(m,2H),4.17(t,J＝6.9Hz,2H),3.70(br s,2H),3.43(br s,2H),2.83–2.77(m,2H),2.64–2.32(m,19H),2.31(s,3H),2.17(s,3H),1.91(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 612.51[M+H]⁺。

化合物3511，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(15％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ77.38(t,J＝7.5Hz,1H),7.39(d,J＝8.7Hz,1H),7.18(dd,J＝8.4Hz,6.6Hz,1H),7.09(d,J＝2.1Hz,1H),7.08–7.00(m,2H),6.83–6.72(m,5H),4.16(t,J＝6.9Hz,2H),3.77(s,3H),3.71(br s,2H),3.43(br s,2H),2.73(dd,J＝9.6Hz,6.6Hz,2H),2.63–2.29(m,19H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),1.90(五重峰,J＝7.2Hz,2H)。LCMS:m/z 624.49[M+H]⁺。

化合物3512，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(60％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.43(d,J＝8.7HZ,1H),7.38(t,J＝7.5Hz,1H),7.32–7.16(m,5H),7.13(d,J＝2.1Hz,1H),7.03–6.96(m,2H),6.82(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),6.77(br s,1H),4.12(t,J＝6.9Hz,2H),3.54(br s,4H),3.03–2.18(m,24H),2.14(s,3H),1.88–1.64(m,2H)。LCMS:m/z 594.52[M+H]⁺。

方案9.化合物3513–3518的一般合成

步驟1：(3-硝基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮的制備

向3-硝基苯甲酸(1.0g，5.9mmol)的DMF(10mL)攪拌溶液中加入DIPEA(1.97mL，11.3mmol)。攪拌10分鐘后，加入HATU(4.55g，11.97mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下進(jìn)一步攪拌30分鐘。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，然后加入1-苯乙基哌嗪(1.1mL，5.8mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。反應(yīng)進(jìn)度通過(guò)TCL監(jiān)測(cè)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中，并用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-硝基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮為棕色固體(1.5g，74％)。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)(3-硝基苯基)甲酮(94％)

(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(3-硝基苯基)甲酮(70％)

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-硝基苯基)甲酮(31％)

(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)(3-硝基苯基)甲酮(64％)

(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(3-硝基苯基)甲酮(49％)

步驟2：(3-氨基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(3-硝基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(1.50g，4.42mmol)的乙醇和水(1:1，各15mL)攪拌溶液中，加入Fe粉(1.23g，22.1mmol)和NH₄Cl(475mg，8.88mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至60℃攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾，并蒸去乙醇。水層用乙酸乙酯萃取，所得有機(jī)層用鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用6％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-氨基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮為棕色固體(1.0g，73％)。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-氨基苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(70％)

(3-氨基苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(45％)

(3-氨基苯基)(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(41％)

(3-氨基苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(89％)

(3-氨基苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(52％)

步驟3：5-溴-1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚的制備

0℃下，將NaH(1.80g，44.6mmol)分批加至5-溴-2,3-二甲基-1H-吲哚(5.00g，22.3mmol)的DMF(50mL)攪拌溶液中。將混合物升至室溫，并攪拌30分鐘。0℃下，向反應(yīng)體系中滴加溴氯丙烷(11.68mL，111.6mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，并用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到5-溴-1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚為粉色固體(2.6g，40％)。LCMS:m/z 302.10[M+H]⁺。

步驟4：5-溴-2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚的制備

室溫下，向5-溴-1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚(9.00g，29.9mmol)的乙腈(20mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(11.2g，74.7mmol)、碳酸鈉(7.93g，74.7mmol)，然后加入N-甲基哌嗪(7.40g，74.7mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯(60mL)稀釋?zhuān)缓笥盟春望}水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到5-溴-2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚為米白色固體(3.2g，30％)。LCMS:m/z 365.98[M+H]⁺。

步驟5：化合物3513，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

將(3-氨基苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(120mg，0.355mmol)和NaOtBu(78mg，0.82mmol)加至5-溴-2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚(100mg，0.273mmol)的1,4-二氧六環(huán)(3mL)攪拌溶液中。反應(yīng)混合物通入氬氣10分鐘。然后向反應(yīng)體系中加入Pd₂(dba)₃(17mg，0.019mmol)和2-二環(huán)己膦基-2’-(N,N-二甲胺)-聯(lián)苯(16mg，0.041mmol)，并再次通入氬氣10分鐘。將反應(yīng)混合物加熱至90℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)⒂霉柙逋吝^(guò)濾。所得有機(jī)層用水洗和鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物采用制備TCL，并使用5％甲醇的CH₂Cl₂洗脫純化，得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3513)為淡黃色固體(50mg，15％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.29(d,J＝8.4Hz,1H),7.26–7.12(m,4H),7.05–6.95(m,3H),6.93(dd,J＝8.7Hz,1.8Hz,1H),6.82(br s,1H),6.67(br d,J＝7.2Hz,1H),4.16(t,J＝6.6Hz,2H),3.72(br s,2H),3.51(br s,2H),2.89–2.66(m,6H),2.66–2.42(m,13H),2.42–2.24(m,5H),2.18(s,3H),1.92(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 611[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3514，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(43％)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ7.88(br s,1H),7.32(d,J＝8.8Hz,1H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),7.13–7.09(m,3H),6.91(br d,J＝8.0Hz,1H),6.86(dd,J＝8.8Hz,2.0Hz,1H),6.83(d,J＝8.4Hz,2H),6.60(d,J＝7.6Hz,1H),4.08(t,J＝6.8Hz,2H),3.71(s,3H),3.52(br s,4H),2.66(dd,J＝8.8Hz,6.8Hz,2H),2.46–2.11(m,22H),1.78(五重峰,J＝6.8Hz,2H)。LCMS:m/z 623.17[M+H]⁺。

化合物3515，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)甲酮(28％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.91(br s,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,1H),7.17(t,J＝8.1Hz,1H),7.13(d,J＝1.5Hz,1H),6.91(br d,J＝8.4Hz,1H),6.86(dd,J＝8.4Hz,1.5Hz,1H),6.83–6.75(m,3H),6.66(dd,J＝8.1Hz,1.5Hz,1H),6.60(br d,J＝7.2Hz,1H),5.95(s,2H),4.08(t,J＝6.9Hz,2H),3.51(br s,4H),2.69–2.59(m,2H),2.48–2.14(m,22H),2.13(s,3H),1.82–1.72(m,2H)。LCMS:m/z 637.49[M+H]⁺。

化合物3516，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(22％)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ7.90(br s,1H),7.35–7.27(m,2H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.13(d,J＝1.6Hz,1H),7.11–7.04(m,2H),7.00(td,J＝8.4Hz,2.0Hz,1H),6.91(br d,J＝8.0Hz,1H),6.87(dd,J＝8.4Hz,2.1Hz,1H),6.80(br s,1H),6.60(br d,J＝7.6Hz,1H),4.08(t,J＝7.2Hz,2H),3.51(br s,4H),2.75(dd,J＝8.4Hz,7.2Hz,2H),2.58–2.52(m,2H),2.49–2.16(m,20H),2.13(s,3H),1.81–1.72(m,2H)。LCMS:m/z 611.18[M+H]⁺。

化合物3517，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(21％)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ7.91(br s,1H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),7.20–7.14(m,2H),7.13(d,J＝2.0Hz,1H),6.91(dd,J＝8.4Hz,1.2Hz,1H),6.86(dd,J＝8.8Hz,2.0Hz,1H),6.71–6.62(m,4H),6.60(br d,J＝7.2Hz,1H),4.08(t,J＝6.8Hz,2H),3.73(s,3H),3.54(br s,4H),2.73–2.68(m,2H),2.53–2.15(m,22H),2.13(s,3H),1.82–1.72(m,2H)。LCMS:m/z 623.1[M+H]⁺。

化合物3518，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(13％)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ7.90(br s,1H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),7.30–7.11(m,7H),6.92(br d,J＝7.2Hz,1H),6.87(br s,J＝8.4Hz,1H),6.81(br s,1H),6.60(br d,J＝7.2Hz,1H),4.09(t,J＝6.8Hz,2H),3.52(br s,4H),2.75–2.68(m,2H),2.63–2.14(m,22H),2.13(s,3H),1.84–1.73(m,2H)。LCMS:m/z 593.55[M+H]⁺。

方案10.化合物3519–3524的一般合成

步驟1和2：4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯的制備

室溫下，將對(duì)甲苯磺酰肼(2.14g，11.50mmol)加至2,3-二甲基-1H-吲哚-5-甲醛(2.0g，11.50mmol)的干燥1,4-二氧六環(huán)(50mL)攪拌溶液中。將溫度升至80℃并保持2小時(shí)。

80℃下，向粗品2,3-二甲基-5-((1-對(duì)甲苯磺酰基-2λ²-二氮烷基)甲基)-1H-吲哚的反應(yīng)體系中，加入K₂CO₃(2.38g，17.20mmol)和(4-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(2.07g，11.50mmol)。然后將反應(yīng)溫度升至110℃并攪拌反應(yīng)4小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物濃縮，用水稀釋?zhuān)缓笥靡宜嵋阴ポ腿　：喜⒌挠袡C(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用20-25％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯為棕色固體(1.5g，45％)。LCMS:m/z 294.41[M+H]⁺。

步驟3：4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸的制備

0℃下，向4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(3.0g，10.20mmol)的THF:H₂O:MeOH(6:2:2)混合溶液中加入LiOH.H₂O(1.28g，30.70mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物濃縮，然后加入乙酸乙酯和水，使其分層。收集水層，并在0℃下用飽和檸檬酸溶液酸化。過(guò)濾，收集所析出沉淀，真空干燥，得到4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸為棕色固體(1.8g，63％)。LCMS:m/z 280.39[M+H]⁺。

步驟4：(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮的制備

向4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸(250mg，0.896mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中，加入DIPEA(0.5mL)。攪拌10分鐘后，加入HATU(511.0mg，1.3440mmol)，反應(yīng)混合物繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，加入1-苯乙基哌嗪(187.5mg，0.9856mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中。析出沉淀，過(guò)濾收集所得沉淀，并干燥，得到(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮為米白色固體(300mg，74％)。LCMS:m/z 452.34[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(74％)。LCMS:m/z 470.1[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(70％)。LCMS:m/z 482.0[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(79％)。LCMS:m/z 496.0[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(65％)。LCMS:m/z 470.32[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(67％)。LCMS:m/z 482.28[M+H]⁺。

步驟5-1：(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將NaH(21.2mg，0.8857mmol)分批加至(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(200mg，0.4428mmol)的DMF(4mL)攪拌溶液中。將混合物升至室溫?cái)嚢?0分鐘。0℃下，向反應(yīng)體系中滴加溴氯丙烷(0.10mL，0.8857mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將冰水加至反應(yīng)混合物中，然后用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用乙酸乙酯作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮為棕色膠狀固體(150mg，64％)。LCMS:m/z 528.34[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(57％)。LCMS:m/z 546.33[M+H]⁺。

4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(65％)。LCMS:m/z 558.41[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(43％)。LCMS:m/z 572.34[M+H]⁺。

4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(65％)。LCMS:m/z 546.33[M+H]⁺。

4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(78％)。LCMS:m/z 558.36[M+H]⁺。

步驟5-2：化合物3524，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(150mg，0.284mmol)的乙腈(5mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(85.1mg，0.568mmol)和碳酸鈉(90.3mg，0.852mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(71.1mg，0.710mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(40mL)稀釋?zhuān)⒂盟春望}水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(化合物3524)為米白色固體(37mg，22％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.36–7.12(m,11H),6.91(br d,J＝8.7Hz,1H),4.07(t,J＝7.2Hz,2H),4.01(s,2H),3.52(br s,4H),2.75–2.69(m,2H),2.61–2.56(m,2H),2.47–2.15(m,20H),2.14(s,3H),1.82–1.69(m,2H)。LCMS:m/z 592.58[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3519，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(6％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.36(br s,4H),7.29–7.22(m,4H),7.03(t,J＝9.0Hz,2H),6.94(br d,J＝8.4Hz,1H),4.19(t,J＝6.6Hz,2H),4.08(s,2H),3.71(br s,4H),3.20–2.64(m,18H),2.36(br s,6H),2.19(s,3H),1.99–1.88(m,2H)。LCMS:m/z 610.56[M+H]⁺。

化合物3520，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(23％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.32–7.23(m,6H),7.12(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(br d,J＝8.7Hz,1H),6.82(d,J＝8.4Hz,2H),4.07(t,J＝6.6Hz,2H),4.01(br s,2H),3.70(s,3H),3.52(br s,4H),3.28–3.21(m,2H),2.52–2.18(m,22H),2.14(s,3H),1.82–1.71(m,2H)。LCMS:m/z 622.54[M+H]⁺。

化合物3521，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)甲酮(18％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.32(br s,4H),7.27–7.20(m,2H),6.93(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),6.73–6.63(m,3H),5.88(s,2H),4.17(t,J＝6.9Hz,2H),4.07(s,2H),3.73(br s,4H),2.99–2.34(m,24H),2.19(s,3H),1.96-1.87(m,2H)。LCMS:m/z 636.54[M+H]⁺。

化合物3522，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(15％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.35–7.23(m,7H),7.11–7.04(m,2H),7.04-6.95(m,1H),6.91(br d,J＝8.4Hz,2H),4.07(t,J＝6.9Hz,2H),4.01(s,2H),3.51(br s,4H),2.79–2.68(m,2H),2.57–2.16(m,22H),2.14(s,3H),1.82–1.71(m,2H)。LCMS:m/z 610.53[M+H]⁺。

化合物3523，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物23)(20％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.33–7.22(m,6H),7.17(t,J＝8.1Hz,1H),6.92(br d,J＝7.8Hz,1H),6.81–6.72(m,3H),4.16–4.01(m,4H),3.76(s,3H),3.53(br s,4H),2.82–2.20(m,21H),2.18(s,3H),1.97(s,3H),1.81–1.68(m,2H)。LCMS:m/z 622.54[M+H]⁺。

方案11.化合物3525–3530的一般合成

步驟1：5-(4-(甲氧基羰基)苯氧基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯的制備

向5-羥基-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(6.80g，26.0mmol)的CH₂Cl₂(70mL)攪拌溶液中，加入(4-(甲氧基羰基)苯基)硼酸(14.0g，78.1mmol)，隨后加入Cu(OAc)₂(11.8g，65.1mmol)和TEA(34.0mL，260mmol)。向所述體系中通入氧氣4小時(shí)進(jìn)行凈化。整個(gè)反應(yīng)體系在氧氣氛下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土濾篩過(guò)濾。濾液用水稀釋?zhuān)⒂肅H₂Cl₂萃取。所得有機(jī)層用鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)100-200目硅膠柱層析，并使用10％乙酸乙酯的石油醚進(jìn)行洗脫純化，得到目標(biāo)產(chǎn)品5-(4-(甲氧基羰基)苯氧基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯為棕色液體(6.50g，63％)。LCMS:m/z 396.3[M+H]⁺。

步驟2：4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸的制備

向5-(4-(甲氧基羰基)苯氧基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(6.50g，16.5mmol)的THF(75mL)、水(75mL)、和甲醇(75mL)攪拌溶液中，加入LiOH.H₂O(13.8g，329mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)4小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，減壓蒸去THF。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，用1N HCl酸化(pH 1)，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物與正戊烷一起研磨，得到純的4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸(4.00g，86％)。LCMS:m/z 282.34[M+H]⁺。

步驟3：(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

向4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯甲酸(300mg，1.06mmol)的DMF(3mL)攪拌溶液中，加入DIPEA(0.93mL，5.33mmol)。攪拌10分鐘后，加入HATU(0.6g，1.59mmol)，然后反應(yīng)混合物在室溫下繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應(yīng)體系冷卻至0℃，加入1-(4-氟苯乙基)哌嗪(0.40g，1.59mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，并減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)100-200目硅膠柱層析，并使用30％乙酸乙酯的石油醚進(jìn)行洗脫純化，得到(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為粘性棕色固體(450mg，89％)。LCMS:m/z 472.52[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(77％)。LCMS:m/z 484.50[M+H]⁺。

((4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(87％)。LCMS:m/z 498.56[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(22％)。LCMS:m/z 472.52[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(99％)。LCMS:m/z 484.56[M+H]⁺。

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(23％)。LCMS:m/z 454.53[M+H]⁺。

步驟4-1：(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將NaH(75.0mg，1.88mmol)分批加至(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(445mg，0.944mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中。將混合物升至室溫?cái)嚢?0分鐘。0℃下，向反應(yīng)混合物中滴加溴氯丙烷(0.19mL，1.88mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，加入冰水，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色膠狀固體(340mg，66％)。LCMS:m/z 548.52[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(62％)。LCMS:m/z 560.93[M+H]⁺。

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(61％)。LCMS:m/z 574.92[M+H]⁺。

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(62％)。LCMS:m/z548.32[M+H]⁺。

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(60％)。LCMS:m/z 560.93[M+H]⁺。

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(67％)。LCMS:m/z 530.57[M+H]⁺。

步驟4-2：化合物3525，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(335mg，0.610mmol)的乙腈(4mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(229mg，1.52mmol)和碳酸鈉(194mg，1.83mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(153mg，1.52mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(30mL)稀釋?zhuān)笥盟春望}水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3525)為米白色固體(56mg，15％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.38–7.34(m,3H),7.22(dd,J＝8.4Hz,5.2Hz,2H),7.09(d,J＝1.6Hz,1H),6.98(t,J＝8.8Hz,2H),6.94(d,J＝8.8Hz,2H),6.80(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),4.20(t,J＝6.8Hz,2H),3.63(br s,4H),2.87–2.76(m,2H),2.75–2.34(m,22H),2.18(s,3H),1.94(五重峰,J＝6.8Hz,2H)。LCMS:m/z612.54[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3526，4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(18％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD)δ7.38–7.33(m,3H),7.12(d,J＝8.7Hz,2H),7.09(d,J＝2.1Hz,1H),6.94(d,J＝9.0Hz,2H),6.86–6.77(m,3H),4.19(t,J＝6.6Hz,2H),3.75(s,3H),3.63(br s,4H),2.80–2.71(m,2H),2.66–2.29(m,19H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),1.98–1.87(m,2H)。LCMS:m/z 624.6[M+H]⁺。

化合物3527，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)甲酮(9％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.37(d,J＝8.4Hz,3H),7.10(d,J＝2.0Hz,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,2H),6.82(dd,J＝8.8Hz,2.0Hz,1H),6.74–6.66(m,3H),5.88(s,2H),4.23(t,J＝6.8Hz,2H),3.66(br s,4H),2.95–2.40(m,21H),2.39(s,3H),2.18(s,3H),1.99–1.91(m,2H)。LCMS:m/z 638.52[M+H]⁺。

化合物3528，4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(25％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD)δ7.40–7.33(m,3H),7.27(td,J＝8.1Hz,6.0Hz,1H),7.09(d,J＝2.4Hz,1H),7.07–6.85(m,5H),6.81(dd,J＝8.7Hz,2.4Hz,1H),4.20(t,J＝6.6Hz,2H),3.64(br s,4H),2.87–2.47(m,16H),2.47–2.34(m,8H),2.18(s,3H),1.94(五重峰,J＝7.2Hz,2H)。LCMS:m/z 612.51[M+H]⁺。

化合物3529，4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(26％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD)δ7.40–7.33(m,3H),7.17(t,J＝8.1Hz,1H),7.09(d,J＝1.8Hz,1H),6.94(d,J＝8.7Hz,2H),6.82–6.71(m,4H),4.19(t,J＝7.2Hz,2H),3.76(s,3H),3.63(br s,4H),2.86–2.49(m,16H),2.43–2.32(m,5H),2.32(s,3H),2.18(s,3H),2.00–1.88(m,2H)。LCMS:m/z 624.52[M+H]⁺。

化合物3530，4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氧基)苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(12％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.37(d,J＝8.4Hz,3H),7.29–7.14(m,5H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(dd,J＝9.2Hz,2.4Hz,1H),4.21(t,J＝7.2Hz,2H),3.63(br s,4H),2.99–2.72(m,6H),2.72–2.46(m,13H),2.46–2.32(m,5H),2.18(s,3H),1.95(五重峰,J＝6.8Hz 2H)。LCMS:m/z 594.52[M+H]⁺。

方案12.化合物3531–3536的一般合成

步驟1：(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮的制備

室溫下，向1-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪鹽酸鹽(500mg，2.99mmol)的DMF(10mL)的攪拌溶液中，加入HATU(2.27g，5.98mmol)、DIPEA(2.47mL，14.9mmol)和4-硝基苯甲酸(930mg，3.59mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中，并用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮為棕色固體(1.0g，90％)。LCMS:m/z 370.0[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮(100％)

(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮(72％)

(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮(27％)

(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮(68％)

(4-硝基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(75％)

步驟2：(4-氨基苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)(4-硝基苯基)甲酮(900mg，2.43mmol)的乙醇和水(1:1，各10mL)攪拌溶液中，加入Fe粉(300mg，12.16mmol)、和NH₄Cl(325mg，6.08mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至60℃攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾，蒸去濾液中的乙醇。所得水層用乙酸乙酯萃取，合并的乙酸乙酯層用鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，并減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用6％甲醇-DCM作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-氨基苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色固體(300mg，41％)。LCMS:m/z 340.0[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-氨基苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(72％)

(4-氨基苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(42％)

(4-氨基苯基)(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(43％)

(4-氨基苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(100％)

(4-氨基苯基)(4-苯乙基哌嗪-1-基)甲酮(74％)

步驟3：化合物3531，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

將(4-氨基苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(120mg，0.355mmol)和NaOtBu(78mg，0.82mmol)加至5-溴-2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚(100mg，0.273mmol)的1,4-二氧六環(huán)(3mL)攪拌溶液中。反應(yīng)混合物通氬氣10分鐘進(jìn)行脫氣。然后加入Pd₂(dba)₃(17mg，0.019mmol)和2-二環(huán)己膦基-2'-(N,N-二甲胺)-聯(lián)苯(16mg，0.041mmol)，反應(yīng)混合物繼續(xù)通氬氣10分鐘進(jìn)行脫氣。將反應(yīng)混合物加熱至90℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)⑼ㄟ^(guò)硅藻土過(guò)濾。所得有機(jī)層用水洗和鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)制備TCL，并使用5％甲醇的CH₂Cl₂進(jìn)行洗脫純化，得到(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3531)為淡黃色固體(20mg，21％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ8.11(br s,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(dd,J＝8.4Hz,5.7Hz,2H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),7.15(br s,1H),7.09(t,J＝9.0Hz,2H),6.92–6.83(m,3H),4.10(t,J＝6.9Hz,2H),3.51(br s,4H),2.78–2.70(m,2H),2.64–2.15(m,22H),2.14(s,3H),1.85–1.76(m,2H)。LCMS:m/z 611.53[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3532，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(42％)。

¹H NMR(300MHz,d_6-DMSO):δ8.12(br s,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),7.17–7.10(m,3H),6.92–6.80(m,5H),4.10(t,J＝6.6Hz,2H),3.71(s,3H),3.50(br s,4H),2.77–2.56(m,6H),2.48–2.19(m,18H),2.14(s,3H),1.86–1.75(m,2H)。LCMS:m/z 623.51[M+H]⁺。

化合物3533，(4-(2-(苯并[d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)乙基)哌嗪-1-基)(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)甲酮(18％)。

¹H NMR(400MHz,d_6-DMSO):δ8.12(br s,1H),7.33(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),7.15(d,J＝1.6Hz,1H),6.92–6.76(m,5H),6.67(br d,J＝8.4Hz,1H),5.95(s,2H),4.09(t,J＝6.8Hz,2H),3.50(br s,4H),2.69–2.61(m,2H),2.47–2.17(m,22H),2.14(s,3H),1.85–1.73(m,2H)。LCMS:m/z 637.47[M+H]⁺。

化合物3534，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-氟苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(11％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ8.11(br s,1H),7.37–7.26(m,2H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),7.15(d,J＝1.8Hz,1H),7.13–7.05(m,2H),7/00(td,J＝8.7Hz,2.1Hz,1H),6.93–6.79(m,3H),4.09(t,J＝6.9Hz,2H),3.50(br s,4H),2.81–2.72(m,2H),2.61–2.53(m,2H),2.48–2.29(m,15H),2.27–2.10(m,8H),1.84–1.72(m,2H)。LCMS:m/z 611.53[M+H]⁺。

化合物3535，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(3-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(30％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ7.90(br s,1H),7.35–7.12(m,5H),7.00–6.85(m,3H),6.83–6.72(m,3H),4.20(t,J＝6.6Hz,2H),3.77(s,3H),3.71(br s,3H),3.15–2.89(m,4H),2.89–2.41(m,17H),2.37(s,3H),2.19(s,3H),2.03–1.89(m,2H)。LCMS:m/z 623.51[M+H]⁺。

化合物3536，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)氨基)苯基)(4-(4-甲氧基苯乙基)哌嗪-1-基)甲酮(10％)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO):δ8.11(br s,1H),7.41–7.09(m,9H),6.96–6.77(m,3H),4.09(br s,2H),3.50(br s,4H),2.78–2.70(m,2H),2.63–2.50(m,9H),2.39–2.09(m,16H),1.83–1.74(m,2H)。LCMS:m/z 593.55[M+H]⁺。

方案13.化合物3537–3540的一般合成

步驟1：2-(6-甲氧基萘-2-基)乙烷-1-醇的制備

0℃下，向LiAlH₄(789mg，13.9mmol)的THF(100mL)混合物中加入2-(6-甲氧基萘-2-基)乙酸(3.00g，13.9mmol)?；旌衔镌诖藴囟认聰嚢?0分鐘后，將反應(yīng)體系慢慢升至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，0℃下用乙酸乙酯(3mL)和飽和氯化銨溶液(20mL)淬滅反應(yīng)，過(guò)濾，濃縮得到2-(6-甲氧基萘-2-基)乙烷-1-醇為白色固體(2.5g，95％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.89–7.80(m,3H),7.71(br s,1H),7.51–7.38(m,3H),4.67(t,J＝5.1Hz,1H),3.70(q,J＝6.9Hz,2H),2.89(t,J＝6.9Hz,2H)。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

2-(萘-2-基)乙烷-1-醇(77％)

2-(萘-1-基)乙烷-1-醇(86％)

2-(7-甲氧基萘-1-基)乙烷-1-醇(85％)

步驟2：2-(2-溴乙基)萘的制備

0℃下，向2-(萘-2-基)乙烷-1-醇(5.20g，30.2mmol)的DCM(100mL)溶液中，分批加入CBr₄(10.99g，33.21mmol)和PPh₃(8.70g，33.2mmol)。反應(yīng)混合物攪拌10分鐘后，將溫度升至室溫并攪拌反應(yīng)2小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用DCM萃取。合并的有機(jī)層用水洗、然后鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用10-15％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到2-(2-溴乙基)萘為黃色液體(5.2g，71％)。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

2-(2-溴乙基)-6-甲氧基萘(79％)

1-(2-溴乙基)萘(73％)

1-(2-溴乙基)-7-甲氧基萘(78％)

步驟3：4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制備

室溫下，向N-Boc哌嗪(4.94g，26.6mmol)的DMF(60mL)溶液中加入K₂CO₃(6.11g，44.3mmol)、2-(2-溴乙基)萘(5.2g，22.1mmol)和NaI(3.31g，22.1mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至80℃攪拌反應(yīng)12小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用40-50％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯為棕色膠狀固體(7.0g，93％)。LCMS:m/z 341.35[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(58％)

4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(46％)

4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(74％)

4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯

步驟4：1-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽的制備

0℃下，向4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7.00g，20.6mmol)的DCM(70mL)攪拌溶液中，加入1,4-二氧六環(huán)/HCl(10.3mL，～4M)。反應(yīng)混合物攪拌10分鐘后，將溫度升至室溫，然后反應(yīng)混合物攪拌反應(yīng)12小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，反應(yīng)混合物減壓濃縮，然后加入乙醚，將混合物過(guò)濾，得到1-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽為棕色固體(6.0g，89％)。LCMS:m/z 241.29[(M-HCl)+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

1-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽(91％)

1-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽(68％)

1-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽(74％)

步驟5：(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將HATU(511.0mg，1.344mmol)加至3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(250mg，0.896mmol)和DIPEA(0.5mL)的DMF(5mL)攪拌溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入1-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽(273mg，0.986mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)進(jìn)度通過(guò)TCL監(jiān)測(cè)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中。過(guò)濾，收集所析出沉淀，干燥。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用5％甲醇的CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色固體(0.40g，86％)。LCMS:m/z 517.55[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(63％)

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(63％)

(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(61％)

步驟6-1：(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將NaH(102mg,2.56mmol)分批加至(3-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(680mg，1.22mmol)的DMF(7mL)攪拌溶液中。然后將混合物升至室溫，攪拌30分鐘。0℃下向反應(yīng)混合物中滴加溴氯丙烷(1.20mL，6.49mmol)，然后在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用乙酸乙酯作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色膠狀固體(250mg，42％)。LCMS:m/z 608.3[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(98％)

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(66％)

(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(44％)

步驟6-2：化合物3537，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(150mg，0.284mmol)的乙腈(5mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(85.09mg，0.5680mmol)和碳酸鈉(90.31mg，0.8520mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(71.10mg，0.7100mmol)。然后將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(40mL)稀釋?；旌衔镉盟春望}水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用5％甲醇-CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3537)為淡黃色固體(35mg，11％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ8.05(br d,J＝8.1Hz,1H),7.88(dd,J＝7.5Hz,1.5Hz,1H),7.75(br d,J＝8.1Hz,1H),7.57–7.32(m,6H),7.34–7.18(m,3H),7.09(br s,1H),6.90(dd,J＝8.1Hz,1.5Hz,1H),4.08(s,2H),3.93(t,J＝6.9Hz,2H),3.73(br s,2H),3.28–3.20(m,4H),2.68–2.10(m,25H),1.77(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 642.54[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3538，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(23％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.84(d,J＝8.7Hz,1H),7.70(br d,J＝7.5Hz,1H),7.38–7.14(m,10H),6.90(br d,J＝8.4Hz,1H),4.07–3.98(m,4H),3.89(s,3H),3.61(br s,2H),3.33(br s,2H),3.21–3.12(m,2H),2.65–2.11(m,25H),1.76–1.64(m,2H)。LCMS:m/z 672.57[M+H]⁺。

化合物3539，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(22％)。

¹H NMR(300MHz,CD₃OD):δ8.05(br d,J＝8.1Hz,1H),7.88(br d,J＝7.2Hz,1H),7.76(br d,J＝7.8Hz,1H),7.58–7.33(m,6H),7.26–7.15(m,3H),7.09(br s,1H),6.91(br d,J＝8.1Hz,1H),4.09(s,2H),3.93(t,J＝6.6Hz,2H),3.74(br s,2H),3.25–3.19(m,4H),2.59–2.15(m,19H),2.14(s,3H),2.11(s,3H),1.78(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 642.54[M+H]⁺。

化合物3540，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(5％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.76–7.68(m,2H),7.63(br s,1H),7.37–7.31(m,3H),7.29–7.23(m,3H),7.19–7.10(m,3H),6.91(br d,J＝9.6Hz,1H),4.10–3.98(m,4H),3.84(s,3H),3.58(br s,4H),2.88–2.79(m,2H),2.63–2.11(m,25H),1.81–1.68(m,2H)。LCMS:m/z 672.53[M+H]⁺。

方案14.化合物3542–3545的一般合成

步驟1：(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將HATU(680mg，1.79mmol)加至4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(250mg，0.896mmol)、和DIPEA(0.45mL，2.68mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中。然后加入1-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪鹽酸鹽(276mg，0.997mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)16小時(shí)。反應(yīng)進(jìn)度通過(guò)TCL監(jiān)測(cè)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用5％甲醇的CH₂Cl₂作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮為棕色固體(400mg，86％)。LCMS:m/z 502.24[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(92％)

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(90％)

(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(90％)

步驟2-1：(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

0℃下，將NaH(15mg，0.63mmol)分批加至(4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(150mg，0.290mmol)的DMF(6mL)攪拌溶液中。將混合物升至室溫，攪拌30分鐘。0℃下向反應(yīng)體系中滴加溴氯丙烷(0.15mL，1.5mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用乙酸乙酯作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮為黃色液體(170mg，98％)。LCMS:m/z 578.43[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(42％)

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(36％)

(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(44％)

步驟6-2：化合物3542，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

室溫下，向(4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(170mg，0.284mmol)的乙腈(5mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(88.09mg，0.58mmol)和碳酸鈉(155mg，1.47mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(117mg，1.17mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至75℃攪拌反應(yīng)16小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(40mL)稀釋?zhuān)缓笥盟矗S后用鹽水洗。所得有機(jī)層用無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用5％甲醇-DCM作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3524)為黃色粘性液體(25mg，14％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ8.07(br d,J＝8.8Hz,1H),7.85(br d,J＝7.6Hz,1H),7.72(dd,J＝7.2Hz,2.0Hz,1H),7.53–7.44(m,2H),7.41–7.31(m,6H),7.24(br s,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,1H),6.92(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),4.13(t,J＝6.8Hz,2H),4.07(s,2H),3.82(br s,2H),3.59(br s,2H),3.32–3.25(m,2H),2.77–2.35(m,14H),2.34(s,3H),2.31(t,J＝6.8Hz,2H),2.26(s,3H),2.18(s,3H),1.89(五重峰,J＝6.8Hz,2H)。LCMS:m/z642.57[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3543，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(6-甲氧基萘-2-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(12％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.75–7.70(m,2H),7.63(br s,1H),7.34(br d,J＝9.9Hz,1H),7.31–7.23(m,7H),7.12(dd,J＝8.7Hz,2.1Hz,1H),6.92(br d,J＝9.6Hz,1H),4.07(t,J＝6.6Hz,2H),4.02(br s,2H),3.85(s,3H),3.50(br s,4H),2.89–2.81(m,2H),2.64–2.58(m,2H),2.51–2.13(m,23H),1.75(五重峰,J＝6.6Hz,2H)。LCMS:m/z 672.0[M+H]⁺。

化合物3544，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(33％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ8.04(br d,J＝8.4Hz,1H),7.91(dd,J＝7.5Hz,1.5Hz,1H),7.77(br d,6.9Hz,1H),7.58–7.45(m,2H),7.44–7.37(m,2H),7.31–7.23(m,6H),6.92(br d,J＝9.6Hz,1H),4.07(t,J＝7.2Hz,2H),4.02(br s,2H),3.55(br s,4H),3.24–3.18(m,2H),2.67–2.60(m,2H),2.47–2.12(m,23H),1.75(五重峰,J＝6.9Hz,2H)。LCMS:m/z 642.1[M+H]⁺。

化合物3545，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(33％)。

¹H NMR(300MHz,d₆-DMSO):δ7.84(d,J＝9.2Hz,1H),7.70(br d,J＝8.4Hz,1H),7.36–7.23(m,7H),7.20–7.15(m,3H),6.90(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),4.06–3.99(m,4H),3.61(br s,4H),3.18–3.11(m,2H),2.63–2.11(m,25H),1.71(五重峰,J＝7.2Hz,2H)。LCMS:m/z 672.1[M+H]⁺。

方案15.化合物3541和3546的一般合成

步驟1：2-(喹啉-6-基)乙酸甲酯的制備

向2-(喹啉-6-基)乙酸(2.0g，11mmol)的甲醇(40mL)溶液中加入濃硫酸(0.2mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)6小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物倒入水中，所得溶液用飽和NaHCO₃溶液中和，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，Na₂SO₄干燥，真空減壓濃縮得到2-(喹啉-6-基)乙酸甲酯(1.8g，85％)。LCMS:m/z 202.25[M+H]⁺。

步驟2：2-(喹啉-6-基)乙烷-1-醇的制備

0℃下，向LiAlH₄(680mg，17.9mmol)的THF(50mL)混合物中加入2-(喹啉-6-基)乙酸甲酯(1.8g，8.9mmol)。將混合物在此溫度下攪拌10分鐘，然后將反應(yīng)體系慢慢升至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，0℃下用乙酸乙酯(3mL)和飽和氯化銨溶液(20mL)淬滅反應(yīng)，過(guò)濾，減壓濃縮得到2-(喹啉-6-基)乙烷-1-醇(1.3g，84％)。LCMS:m/z 174.28[M+H]⁺。

步驟3：2-(喹啉-6-基)乙基甲磺酸酯的制備

0℃下，向2-(喹啉-6-基)乙烷-1-醇(1.3g,7.5mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入三乙胺(5.2mL，38mmol)和甲磺酰氯(1.2mL，15mmol)。反應(yīng)混合物在此溫度下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物倒入水中，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)萃取液用水洗和鹽水洗，Na₂SO₄干燥，蒸發(fā)濃縮得到2-(喹啉-6-基)乙基甲磺酸酯(1.7g，粗品)，其可直接使用無(wú)需進(jìn)一步純化。

步驟4：4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制備

室溫下，向N-Boc哌嗪(1.3g，7.2mmol)的DMF(60mL)溶液中加入K₂CO₃(1.49g，10.8mmol)和2-(喹啉-6-基)乙基甲磺酸酯(0.9g，3.6mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至80℃攪拌反應(yīng)12小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)層用水洗和鹽水洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析，并使用40-50％乙酸乙酯的石油醚作為洗脫劑進(jìn)行純化，得到4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.8g，66％)。LCMS:m/z 342.05[M+H]⁺。

步驟5：6-(2-(哌嗪-1-基)乙基)喹啉鹽酸鹽的制備

0℃下，向4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(800mg，2.3mmol)的DCM(50mL)攪拌溶液中，加入1,4-二氧六環(huán)/HCl(25mL，～4M)。反應(yīng)混合物攪拌10分鐘后，將溫度升至室溫，并攪拌反應(yīng)12小時(shí)。通過(guò)TCL檢測(cè)，確定起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物濃縮，加入乙醚，過(guò)濾，得到6-(2-(哌嗪-1-基)乙基)喹啉鹽酸鹽(0.6g，粗品)。LCMS:m/z 242.2[(M-HCl)+H]⁺。

步驟6-1：4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯的制備

0℃下，將NaH(400mg，16.7mmol)分批加至4-((2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(830mg，2.8mmol)的DMF(10mL)攪拌溶液中。將混合物升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)30分鐘。0℃下，向反應(yīng)體系中滴加溴氯丙烷(0.6g，3.8mmol)，然后反應(yīng)混合物在此溫度下攪拌反應(yīng)2小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，向反應(yīng)混合物中加入冰水，然后用乙酸乙酯萃取。所得有機(jī)層用鹽水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析純化，得到4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(380mg，36％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.30–7.27(m,3H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),6.94(dd,J＝8.0Hz,1.6Hz,1H),4.22(t,J＝6.8Hz,2H),4.18(s,2H),3.89(s,2H),3.50(t,J＝6.0Hz,2H),2.35(s,3H),2.22–2.16(m,5H)。LCMS:m/z 370.1[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

3-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(32％)。

步驟6-2：4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯的制備

室溫下，向4-((1-(3-氯丙基)-2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(380mg，1.0mmol)的乙腈(12mL)攪拌溶液中，加入碘化鈉(380mg，2.5mmol)和碳酸鈉(270mg，2.5mmol)，隨后加入N-甲基哌嗪(250mg，2.5mmol)。將反應(yīng)混合物升至80℃攪拌反應(yīng)12小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)缓笥盟春望}水溶液洗，無(wú)水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱層析色譜純化，得到4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(310mg，67％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.29–7.26(m,3H),7.18(d,J＝8.4Hz,1H),6.93(dd,J＝8.4Hz,1.2Hz,1H),4.12–4.07(m,4H),3.89(s,3H),2.82–2.31(m,16H),2.20(s,3H),1.92–1.85(m,2H)。LCMS:m/z 434.3[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(67％)。

步驟7：4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸的制備

室溫下，向4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸甲酯(200mg，0.46mmol)的THF:H₂O:MeOH(4:1:1，5mL)溶液中加入LiOH.H₂O(38mg，0.91mmol)。反應(yīng)混合物攪拌反應(yīng)12小時(shí)。待起始物料消耗完畢后，將反應(yīng)混合物濃縮，然后加入乙酸乙酯和水，使其分層。收集水層，并在0℃下用飽和檸檬酸溶液酸化。過(guò)濾，收集所析出的沉淀，真空干燥，得到4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(160mg，84％)。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(75％)。LCMS:m/z 420.3[M+H]⁺。

步驟8：化合物3541，(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮的制備

向3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯甲酸(90mg，0.21mmol)和6-(2-(哌嗪-1-基)乙基)喹啉鹽酸鹽(175mg，0.63mmol)的吡啶(3mL)溶液中，加入EDC.HCl(230mg，1.2mmol)?；旌衔镌?0℃下攪拌反應(yīng)1小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和水，使其分層。所得有機(jī)層用水洗和鹽水洗，然后干燥，減壓濃縮。所得殘留物經(jīng)制備HPLC純化得到(3-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(化合物3541)(8mg，6％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.83(m,1H),8.28(br d,J＝7.6Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(br s,1H),7.68–7.63(m,1H),7.55–7.49(m,1H),7.38–7.32(m,2H),7.28–7.22(m,2H),7.19–7.13(m,2H),6.91(br d,J＝8.8Hz,1H),4.09-4.00(m,4H),3.41–3.19(m,4H),2.97–2.89(m,2H),2.64–2.59(m,2H),2.39–2.08(m,23H),1.77-1.69(m,2H)。LCMS:m/z 643.4[M+H]⁺。

通過(guò)此方法制備得到其他類(lèi)似物：

化合物3546，(4-((2,3-二甲基-1-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)(4-(2-(喹啉-6-基)乙基)哌嗪-1-基)甲酮(2％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.83(dd,J＝4.4Hz,2.0Hz,1H),8.27(br d,J＝7.6Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(br s,1H),7.65(dd,J＝8.8Hz,2.0Hz,1H),7.49(dd,J＝8.4Hz,4.0Hz,1H),7.31–7.24(m,6H),6.91(br d,J＝9.2Hz,1H),4.11–4.02(m,4H),3.58(br s,4H),2.97–2.91(m,2H),2.68–2.61(m,2H),2.50–2.11(m,20H),1.85(s,3H),1.79–1.72(m,2H)。LCMS:m/z 643.4[M+H]⁺。

作為單一療法的抗原肌球蛋白化合物的活性

本發(fā)明化合物的抗增殖活性

在玻片模型中已識(shí)別在原肌球蛋白Tpm3.1上的結(jié)合位點(diǎn)，從而產(chǎn)生一系列本發(fā)明化合物作為原肌球蛋白抑制劑。在腫瘤細(xì)胞中，抑制Tpm3.1將導(dǎo)致肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的破壞和最終細(xì)胞死亡。

對(duì)化合物3501-3540和3542-3545抑制腫瘤細(xì)胞典型如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、結(jié)直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、和三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖的效能進(jìn)行評(píng)價(jià)。簡(jiǎn)言之，將通過(guò)對(duì)每個(gè)受試細(xì)胞株的細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)來(lái)計(jì)算得到預(yù)先確定的細(xì)胞數(shù)量，即將每個(gè)受試的細(xì)胞株接種于其各自的培養(yǎng)基中(采用ATCC培養(yǎng)參數(shù))，并在37℃、5％CO₂下，于96-孔培養(yǎng)板中，培育24小時(shí)。一旦附著，便將每個(gè)細(xì)胞株暴露于每個(gè)各自類(lèi)似物增加的濃度中(對(duì)于表1中化合物，濃度分別為0.03、0.3、3和30μM；對(duì)于表2中化合物，濃度分別為0.1、0.3、1、3、10和30μM)，繼續(xù)培育72小時(shí)，然后進(jìn)一步暴露于細(xì)胞-滴定度發(fā)光試劑(100μL/孔)中，繼續(xù)培育30分鐘，從而評(píng)價(jià)細(xì)胞存活率。冷發(fā)光是采用EnVision多標(biāo)記酶標(biāo)儀進(jìn)行捕捉的，且每個(gè)類(lèi)似物濃度的數(shù)據(jù)與未經(jīng)處理的對(duì)照進(jìn)行對(duì)比。對(duì)于化合物3501、3503、3505–08、3512–18、3520、3522–24和3531–36，制作對(duì)照與濃度百分比的半對(duì)數(shù)曲線(xiàn)圖，IC₅₀是采用線(xiàn)性回歸分析來(lái)確定的。對(duì)于化合物3502、3504、3509–11、3519、3521、3525–30、3537–40和3542–45，細(xì)胞存活率是通過(guò)對(duì)照(單獨(dú)媒介物)與劑量-響應(yīng)曲線(xiàn)進(jìn)行歸一化，且半數(shù)最大有效濃度(EC₅₀)值采用Graph Pad Prism6(非線(xiàn)性回歸反曲劑量–響應(yīng)變量斜率)來(lái)確定。

表1.本發(fā)明化合物對(duì)一系列體癌細(xì)胞的抗增殖活性

表2.本發(fā)明化合物對(duì)一系列體癌細(xì)胞的抗增殖活性

針對(duì)化合物3507對(duì)代表性細(xì)胞株黑色素瘤、前列腺癌、白血病和神經(jīng)母細(xì)胞瘤的抗增殖活性作出進(jìn)一步評(píng)價(jià)。將細(xì)胞株暴露于化合物3507增加的濃度中72小時(shí)后的細(xì)胞存活率是采用MTS存活率試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行測(cè)定。細(xì)胞存活率是通過(guò)對(duì)照(單獨(dú)媒介物)與劑量響應(yīng)曲線(xiàn)進(jìn)行歸一化，且相對(duì)抑制濃度(IC₅₀)值是通過(guò)Graph Pad Prism 6來(lái)確定。

表3.化合物3507對(duì)一系列體癌細(xì)胞的抗增殖活性

本發(fā)明化合物對(duì)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的影響

化合物3504、3507和3516破壞整個(gè)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的效能(圖1)和特定靶向作用于包含Tpm3.1的肌動(dòng)蛋白微絲(圖2)，是通過(guò)體外微絲破壞試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

簡(jiǎn)言之，將SK-N-SH神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞接種于1800細(xì)胞/孔的384Perkin Elmer高含量成像“視圖”孔板中，并在處理前培育24小時(shí)。然后，細(xì)胞由0-40μM的受試化合物處理(1:2于10點(diǎn)劑量響應(yīng)連續(xù)稀釋)。處理24h后，細(xì)胞被4％多聚甲醛(PBS)固定，并用Triton-X-100進(jìn)行滲透化和用488-Atto-Phallodin染色，并通過(guò)DAPI來(lái)可視觀察肌動(dòng)蛋白微絲束和細(xì)胞核，或使用γ9d(羊多克隆，1:100)，隨后使用488-共軛第二抗體(1:1000)和DAPI來(lái)分別可視觀察包含Tpm3.1的微絲束和細(xì)胞核。單一平面圖像是通過(guò)使用20x目標(biāo)的Perkin Elmer Opera共聚焦顯微鏡來(lái)得到。每一條件下視圖的十二領(lǐng)域均被成像。而后將成像導(dǎo)出，并且組織和細(xì)胞內(nèi)激動(dòng)蛋白微絲數(shù)量的變化，是通過(guò)CSIRO開(kāi)發(fā)的線(xiàn)性特征檢測(cè)算法來(lái)進(jìn)行數(shù)量測(cè)定。所述算法發(fā)現(xiàn)“山脊線(xiàn)”或“峰”是在局部像素強(qiáng)度的細(xì)胞成像中。所述這些“山脊線(xiàn)”與肌動(dòng)蛋白微絲束相對(duì)應(yīng)，以此來(lái)定量每個(gè)細(xì)胞中微絲的數(shù)量。

數(shù)據(jù)表明，化合物3504、3507和3516以劑量依賴(lài)方式，并均可破壞整個(gè)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架和包含Tpm3.1的肌動(dòng)蛋白微絲。

為了證明本發(fā)明化合物可損害Tpm3.1的功能，化合物3507對(duì)Tpm3.1調(diào)節(jié)的激動(dòng)蛋白微絲解聚作用的影響，是通過(guò)良好表征的基于芘的肌動(dòng)蛋白微絲解聚作用試驗(yàn)(Broschat，1990；Kostyukova和Hitchcock，2004)來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。所述試驗(yàn)小結(jié)和基本原理如下所示：為了促進(jìn)解聚作用，芘標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白微絲是采用下述所指出終點(diǎn)的臨界濃度來(lái)進(jìn)行稀釋(0.5μM，由Pollard等人規(guī)定，1986)。熒光下降是通過(guò)隨著時(shí)間推移，肌動(dòng)蛋白單體的分裂來(lái)進(jìn)行測(cè)定的。從而證實(shí)，在Tpm3.1的存在下，肌動(dòng)蛋白解聚作用的比率在顯著減少(Bonello 2013)。因此，任何化合物作用并影響Tpm3.1的功能，將使Tpm3.1在肌動(dòng)蛋白解聚作用上的保護(hù)作用無(wú)效。

對(duì)于所有單獨(dú)的F-肌動(dòng)蛋白解聚作用試驗(yàn)，Tpm3.1的人同源物包衣的F-肌動(dòng)蛋白被作為比較對(duì)照。簡(jiǎn)言之，在稀釋微絲之前，Tpm3.1用F-肌動(dòng)蛋白預(yù)孵化20分鐘，使Tpm3.1聚合物適當(dāng)組裝。不出所料，在飽和量的Tpm3.1存在下，F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白解聚作用的初始速率(V₀)顯著慢于包含Tpm3.1的肌動(dòng)蛋白微絲(圖3A和C，p<0.0001)。

而后，單獨(dú)的F-肌動(dòng)蛋白和用Tpm3.1包衣的F-肌動(dòng)蛋白的解聚作用，是在受試化合物存在下，通過(guò)比較解聚作用初始速率來(lái)測(cè)定的。如上所述，在被加至肌動(dòng)蛋白微絲中之前，Tpm3.1在50μM化合物3507中預(yù)孵化。在化合物3507存在下，Tpm3.1聚合和保護(hù)肌動(dòng)蛋白的能力被損害，且解聚速率與F-肌動(dòng)蛋白無(wú)明顯差異(圖3B和D)。所述這些數(shù)據(jù)表明，化合物3507可以作用并損害Tpm3.1的功能。

本發(fā)明化合物對(duì)細(xì)胞因子釋放的影響

對(duì)化合物3507、3520、3534和3538抑制細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-21、IL-17A和IL-23釋放的效能在體外進(jìn)行評(píng)價(jià)(表4和5)。簡(jiǎn)言之，人外周血單核細(xì)胞(PBMCs)從人外周血通過(guò)Histopaque密度梯度離心法分離得到。將新鮮分離的PBMCs接種于50,000細(xì)胞株/孔的96-孔半?yún)^(qū)板中。PBMCs按劑量給予受試化合物(以10μM、1μM和0.1μM)，然后在37℃、5％CO₂下孵育2小時(shí)。為了刺激細(xì)胞因子IFN-γ、IL-21、IL-17A和IL-23的釋放，將PBMCs用50ng/mL的佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)和1μg/mL的離子霉素進(jìn)行處理，從而刺激TNF-α和IL-6的釋放，將PBMCs用100ng/mL來(lái)自革蘭氏陰性菌的脂多糖(LPS)進(jìn)行處理。然后將PBMCs在37℃、5％CO₂下，進(jìn)一步孵育6小時(shí)，收集細(xì)胞上清液，采用均相時(shí)間分辨熒光法(HTRF)并根據(jù)制造商說(shuō)明書(shū)進(jìn)行分析。細(xì)胞因子從所述PBMCs釋放是采用Perkin Elmer ENVISION 2104酶標(biāo)儀分別設(shè)定在615nm和665nm進(jìn)行捕捉的。細(xì)胞毒性的分析是在相似條件下使用按劑量給予相同受試化合物的100,000PBMCs的96-孔板，在2小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)有或沒(méi)有PMA和離子霉素進(jìn)行刺激，顯示的任何發(fā)生的小細(xì)胞消亡，均足以說(shuō)明在每六個(gè)實(shí)驗(yàn)中觀察到的對(duì)細(xì)胞因子釋放的抑制。

表4.本發(fā)明化合物對(duì)一系列細(xì)胞因子的抑制活性

表5.本發(fā)明化合物對(duì)一系列細(xì)胞因子的抑制活性

化合物3507的耐受性和體內(nèi)藥效

化合物3507的體內(nèi)藥效是通過(guò)神經(jīng)母細(xì)胞瘤異種移植模型CHLA20進(jìn)行評(píng)價(jià)的。CHLA20腫瘤是通過(guò)在裸鼠右側(cè)皮下注射1.0x10⁷腫瘤細(xì)胞，從而在無(wú)胸腺裸鼠中建立。當(dāng)腫瘤體積達(dá)到～200-400mm³時(shí)，對(duì)動(dòng)物開(kāi)始給藥。將動(dòng)物(～n＝5+)隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。化合物3507按劑量每天以150mg/kg通過(guò)腹腔內(nèi)注射(IP)30％w/v磺丁基-β-環(huán)糊精(Captisol，包含環(huán)糊精的制劑)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行給藥。通過(guò)18天治療后，發(fā)現(xiàn)化合物3507相較媒介物對(duì)照，具有良好的耐受性，并能顯著減慢腫瘤生長(zhǎng)(圖4)。

還對(duì)化合物3507在人黑色素瘤(A375)異種移植模型的體內(nèi)藥效進(jìn)行了評(píng)價(jià)。A375腫瘤是通過(guò)在小鼠右側(cè)區(qū)域皮下注射約五百萬(wàn)腫瘤細(xì)胞，從而在雌性Foxn-1nu/nu無(wú)胸腺裸鼠中建立。當(dāng)腫瘤體積達(dá)到130-150mm³時(shí)，將所述動(dòng)物隨機(jī)分成四組，(n＝8或12只動(dòng)物/組)，以便所有組別的平均腫瘤體積相同。組別1給予媒介物(30％w/v Dexolve-7的無(wú)菌水)，每周靜脈注射兩次，組別2按劑量60mg/kg給予3507/Dexolve-7，每周靜脈注射兩次。腫瘤和體重一周測(cè)定兩或三次。此外，在整個(gè)研究期間，每天監(jiān)測(cè)小鼠的臨床狀況。在整個(gè)研究期間，采用化合物3507處理后的動(dòng)物的體重與對(duì)照組相當(dāng)，表明化合物3507有良好的耐受性(圖5A)。與神經(jīng)母細(xì)胞瘤的研究一致，采用化合物3507治療14天后，發(fā)現(xiàn)黑色素瘤腫瘤生長(zhǎng)顯著減少了～60％，相較媒介物對(duì)照(圖5B)。

參考文獻(xiàn)

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