嘧啶酰胺衍生物及其鹽的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域,具體涉及通式(Ⅰ)所示的嘧啶酰胺衍生物或其藥學上可接受的鹽,這些化合物的制備方法,含有這些化合物的藥物制劑及藥物組合物,以及這些化合物在制備治療和/或預防病毒感染的藥物中的用途。X如說明書中所定義。
【專利說明】
嘧啶酰胺衍生物及其鹽
技術領域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域,具體涉及嘧啶酰胺衍生物或其藥學上可接受的鹽,這 些化合物的制備方法,含有這些化合物的藥物制劑及藥物組合物,以及這些化合物在制備 治療和/或預防病毒感染的藥物中的用途。
【背景技術】
[0002] 流感是一種由流感病毒引起的急性病毒性呼吸道傳染病,嚴重危害人類健康。歷 史上流感有過幾次大規(guī)模流行,以1918年的流感流行最為嚴重,其死亡人數達到2000多萬, 且死亡者多數為15~45歲的青壯年。目前,流感的威脅依然存在,據統(tǒng)計,全世界平均每年 有50~100萬人死于流感。
[0003] 目前針對流感的治療藥物主要有兩大類:一類是20世紀60年代發(fā)現的M2型離子通 道抑制劑,以金剛烷胺為代表,只對甲型流感病毒有預防和治療作用;一類是神經氨酸酶抑 制劑,對甲型和乙型流感病毒均有效,包括扎那米韋、奧司他韋、帕拉米韋和辛酸拉尼米韋。 然而耐藥菌株的大量出現限制了這兩類藥物的廣泛應用。因此,亟需尋找具有新的作用機 制的抗流感藥物。
[0004] 流感病毒RNA聚合酶在流感病毒生命周期中發(fā)揮重要的作用,且高度保守,具有復 制酶活性及核酸內切酶活性,成為抗流感病毒藥物的理想靶點。法匹拉韋是由日本富山化 學工業(yè)株式會社研究的流感病毒RNA聚合酶抑制劑,用于治療流感,臨床上效果顯著,于 2014年4月在日本獲批上市。
[0005] 除了流感病毒,法匹拉韋對其它病毒也可以發(fā)揮作用,比如沙粒病毒、白蛉熱病 毒、漢坦病毒、黃病毒、腸道病毒、甲病毒、西方馬腦炎病毒、副粘病毒、呼吸道合胞病毒和諾 和病毒等。埃博拉病毒也和流感病毒類似,都是RNA病毒,所以法匹拉韋有可能阻礙埃博拉 病毒在細胞內增殖,從而遏制感染。埃博拉今年爆發(fā)以來,已經致西非2500人感染,1000多 人已經死亡,目前尚無有效應對埃博拉病毒的藥物。所以,美國衛(wèi)生部門正準備加速審批是 否用法匹拉韋開展抗埃博拉病毒臨床試驗。
[0006] 法匹拉韋水溶性較低,對于制劑和給藥造成了很大的局限性,嚴重影響臨床使用 效果。再者,較差的水溶性會使制劑在存儲和/或運輸過程中有結晶析出,從而導致藥物臨 床應用的安全性存在隱患。目前報道了很多改善法匹拉韋水溶性的方法,例如成鹽后制成 無定型凍干制劑,但是工藝繁瑣、耗時長,非常不便利。
[0007] 本發(fā)明人對法匹拉韋進行了研究,發(fā)現了法匹拉韋的前體藥物,即法匹拉韋磷酸 酯以及磷酸酯鹽,成功解決了法匹拉韋的水溶性低的技術難題。而且,法匹拉韋磷酸酯以及 磷酸酯鹽具有良好的藥代動力學性質,更有利于臨床的使用。
【發(fā)明內容】
[0008] 本發(fā)明將法匹拉韋與磷酸形成磷酸酯或磷酸酯鹽,能夠有效改善法匹拉韋的溶解 度低的弊端,具有良好的藥代動力學,經腸胃或腸胃外給藥,到達人體之后,經過酶或非酶 作用,迅速轉化為活性化合物法匹拉韋從而發(fā)揮抗病毒功效。
[0009] 本發(fā)明提供的技術方案如下:
[0010] 方案1.式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽:
[0012] 父選自-卩〇(〇!1)2、-?0(01〇(0-]\11+)、-?0(0-]\11+)(0-]\12 +)或-?0(0-)2.02+,]\11+和]\12+分別 是藥學上可接受的一價陽離子,D 2+是藥學可接受的二價陽離子。
[0013] 方案2.方案1中式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽:
[0014] 父選自-卩0(0!〇2、-?0(01〇(0-]\11+)、-?0(0-]\11+)(0-]\12 +)或-?0(0-)2.02+,]\11+和]\12+分別 獨立的選自Li+、Na+、K+或(4R)N+,每個R獨立的選自氫或&―4烷基;D 2+選自Mg2+、Ca2+、Ba2+。
[0015] 方案3.方案2中式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽:
[0016] X選自-P0(0H)2、-P0(0H)(0-Mi+h-PCKO-Mi+KO-Μ/)』,和 M2+分別獨立的選自 Li+、 Na+、K+。
[0017] 方案4.方案3中式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽:
[0018] X選自-P0(OH) 2、-P0(0H) (0-Mi+)、-P0(0-Μι+) (0-M2+),Μι+和M2+分別為Na+。
[0019] 方案5.如下所述的化合物:
[0022] 本發(fā)明式(I)化合物的"藥學上可接受的鹽"是指式(I)化合物中存在的酸性官能 團(例如-C00H、-OH、-P03等)與適當的無機或者有機陽離子(堿)形成的鹽,包括與堿金屬或 堿土金屬形成的鹽、銨鹽,以及與含氮有機堿形成的鹽;以及式(I)化合物中存在的堿性官 能團(例如-NH 2等)與適當的無機或者有機陰離子(酸)形成的鹽,包括與無機酸、有機酸形 成的鹽。
[0023] 本發(fā)明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽,可以與一種或多種藥用載體制成藥 學上可接受的藥物制劑,以口服、腸胃外等方式施用于需要這種治療的患者。口服給藥時, 可以與常規(guī)的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、稀釋劑等制成常規(guī)的固體制劑,如片劑、膠 囊劑、丸劑、顆粒劑等;用于腸胃外給藥時,可制成注射劑,包括注射液、注射用無菌粉末與 注射用濃溶液。制成注射劑時,可采用現有制藥領域中的常規(guī)方法生產,配制注射劑時,可 以不加入附加劑,也可根據藥物的性質加入適宜的附加劑。
[0024] 本發(fā)明化合物的施用量和施用頻率可以根據臨床醫(yī)生或藥師的判斷考慮例如以 下的一些因素而作出調整:患者的年齡、體重、待治療病征的嚴重性。一般而言,以單次劑量 或分劑量給予患者的本發(fā)明化合物的日劑量可為50mg~5000mg,優(yōu)選100~2000mg,更優(yōu)選 500~1000mg 〇
[0025] 本發(fā)明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽,可以與一種或多種其他抗病毒藥物 制成藥物組合物,所述的其他抗病毒藥物包括阿昔洛韋、奧司他韋、扎那米韋、培拉米韋、拉 尼米韋、更昔洛韋、阿糖腺苷、膦甲酸、干擾素、金剛烷胺、利巴韋林。
[0026] 本發(fā)明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽,在制備治療和/或預防病毒感染的藥 物中的用途,所述的病毒感染包括病毒性呼吸道感染、流行性感冒、流行性腮腺炎、脊髓灰 質炎、病毒性胃腸炎、病毒性肝炎、麻疹、風疹、幼兒急疹、水痘、帶狀皰疹、天花、狂犬病、口 蹄疫、病毒性結膜炎、病毒性角膜炎、病毒性腦炎、病毒性出血熱,優(yōu)選流行性感冒和病毒性 出血熱。
[0027] 本發(fā)明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽的優(yōu)點:
[0028] 法匹拉韋因為溶解度差導致制劑難度大,進一步導致動物體內藥代動力學性質 差,而本發(fā)明化合物具有非常好的溶解性,方便給藥以及制劑的配置,可以保證制劑在存儲 和/或運輸過程的穩(wěn)定性,降低臨床應用的安全隱患。本發(fā)明化合物具有良好的藥代動力學 特征,進入體內之后,迅速轉化為原藥,發(fā)揮藥理活性。
[0029] 以下進一步闡述本發(fā)明化合物的有益效果,本發(fā)明其它化合物與試驗中所列舉的 部分本發(fā)明化合物具有相同的有益效果,但不應將此理解為本發(fā)明化合物僅具有下列有益 效果。
[0030] 實驗例1本發(fā)明化合物的溶解性實驗
[0031] 目的根據中國藥典2010年版二部凡例,用目測法觀察本發(fā)明化合物及對照藥的溶 解情況,并計算溶解度。
[0032] 測試物本發(fā)明化合物1,按照實施例方法1制備所得;對照藥法匹拉韋(北京澳合研 究院有限公司)
[0033]方法及結果
[0034] 1、ρΗ=9·0緩沖液配置
[0035] 稱取氯化鉀1.5g與硼酸1.24g,加入0.2mol/L氫氧化鈉溶液41.6mL和適量水,溶解 后再加水稀釋至400mL,搖勻,即得。
[0036] 2、對照藥法匹拉韋溶解度測定
[0037] 取對照藥法匹拉韋樣品4.90mg,加 pH= 9.0緩沖液30ul,振搖,不溶,再加50ul,振 搖,不溶,再加50ul,振搖,不溶,再加100ul,振搖,不溶,再加100ul,振搖,不溶,再加100ul, 振搖,不溶,再加1 〇〇u 1,振搖,不溶,再加100u 1,振搖,不溶,再加100ul,振搖,粉末溶解,顆 粒不溶,再加1 〇〇u 1,振搖,不溶,再加100u 1,振搖,不溶,再加50u 1,振搖,不溶,再加40u 1,振 搖,不溶,再加30ul,振搖,不溶,再加20ul,振搖,不溶,再加20ul,振搖,目測溶液澄清,樣品 已溶解,計算得到法匹拉韋的溶解度為4.6mg/ml。
[0038] 3、本發(fā)明化合物1溶解度測定
[0039] 取本發(fā)明化合物1樣品5 . Olmg,加 pH = 9.0緩沖液20μ1,振搖,不溶,再加20μ1,振 搖,不溶,再加20μ1,振搖,溶解,目測溶液澄清,樣品已溶解,計算得到本發(fā)明化合物1的溶 解度為 83.5mg/mL。
[0040] 4、實驗結果
[0041] 藥典2010年版二部關于溶解度的規(guī)定,上述方法所測得溶解度換算之后結果如 下:
[0043] 極易溶解系指溶質lg(ml)能在溶劑不到lml中溶解;
[0044] 易溶系指溶質lg(ml)能在溶劑1~不到10ml中溶解;
[0045] 溶解系指溶質lg(ml)能在溶劑10~不至Ij30ml中溶解;
[0046] 略溶系指溶質lg(ml)能在溶劑30~不到100ml中溶解;
[0047] 微溶系指溶質lg(ml)能在溶劑100~不至IjlOOOml中溶解;
[0048] 極微溶解系指溶質lg(ml)能在溶劑1000~不到10000ml中溶解;
[0049] 幾乎不溶或不溶系指溶質lg(ml)在溶劑10000ml中不能完全溶解。
[0050]實驗結論
[0051] 根據上述標準,本發(fā)明化合物1的溶解度屬于溶解,而對照藥屬于微溶,本發(fā)明化 合物溶解度是對照藥的約18倍。由此可見,本發(fā)明化合物1比對照藥具有良好的溶解度,差 異顯著。
[0052] 實驗例2本發(fā)明化合物的大鼠藥代動力學實驗
[0053] 供試品:本發(fā)明化合物1,自制,其化學名稱和制備方法見制備實施例。
[0054]受試動物:雄性SD大鼠,3只/給藥劑量/供試品,體重220-240g/只。
[0055]供試品溶液制備:
[0056] 0.2mol/LNa0H配制:稱取氫氧化鈉400mg,加入50ml純化水,超聲溶解,渦旋混勻。 [0057] pH9 · 0的緩沖鹽溶液:稱取0 · 75g氯化鉀與0 · 62g硼酸,加入20 · 8ml 0 · 2mol/LNa0H 液和適量純化水,溶解后加水稀釋至200ml,搖勻。
[0058]本發(fā)明化合物1靜脈注射(iv)給藥配制:稱取化合物75.13mg加入1.094ml pH9.0 的緩沖鹽溶液溶解,過0.22μπι濾膜后成澄清透明的溶液。
[0059]對照藥法匹拉韋靜脈注射(iv)給藥配制:稱取化合物30.02mg加入2ml ρΗ9.0的緩 沖鹽溶液,振搖,不溶,過0.22μπι濾膜后成澄清透明的溶液。
[0060]實驗方法
[0061 ]將供試品藥液按照下表方法進行給藥:
[0062]
[0063] 采血:
[0064] 采集時間點:藥后0.083h,0.25h,0.5h,lh,2h,4h,6h,8h,24h,30h.
[0065]每個時間點通過尾靜脈采取100yL左右全血,加入到肝素鈉抗凝管里,高速離心機 中8000轉/分鐘離心6min分離血漿,血漿于-80 °C冰箱凍存。
[0066] 血漿樣品分析:
[0067] 采用蛋白沉淀法,取20μυ??衆(zhòng),加入300yL內標(含Tobutamide 100ng/ml的乙腈溶 液),1000轉/分鐘渦旋5min,加入300yL的水,禍旋5分鐘后,12000轉/分鐘離心5min,取上清 液50yL,再加入150yL水,渦旋混勻,LC-MS/MS分析。
[0068] 表1 SD大鼠 PK評價結果(iv)
[0069]
[0070] AUCiast代表藥時曲線下面積0-t;
[0071] 由上述結果可以看出,本發(fā)明化合物具有較好的溶解度,利于給藥和代謝,在大鼠 體內轉化成原藥法匹拉韋后,暴露量比直接給藥法匹拉韋顯著提高,可以有效的避開溶解 度差、PK性質不好的缺點,成藥性更好。
【具體實施方式】
[0072] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】,對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。
[0073] 實施例1 3-氨基甲?;?5-氟吡嗪-2-基磷酸二鈉(化合物1)的制備
[0074] 1.二芐基(3-氨基甲?;?5-氟吡嗪-2-基)磷酸酯的制備
[0076] 在10mL的兩口瓶中加入N,N-二甲基甲酰胺(5mL)和6-氟-3-羥基吡嗪-2-甲酰胺 (200mg,1 .27mmol),在氮氣保護下,室溫向反應體系中分批加入NaH(60%,203mg, 5.08mmol),然后攪拌1小時,分批加入四芐基二磷酸酯(820mg,1.52mmol)。加畢繼續(xù)室溫攪 拌3小時。過濾得固體,粗產物通過中壓制備純化(流動相:CH 3CN,H20,1 %NH4HC03),收集組 分并冷凍干燥,得到產物192mg(產率為36 % ),為黃色的固體。
[0077] 2.3-氨基甲?;?5-氟吡嗪-2-基磷酸二鈉的制備
[0079] 在50mL的茄型瓶中加入二芐基(3-氨基甲酰基-5-氟吡嗪-2-基)磷酸酯(192mg, 0.46mmol)和二氯甲烷(20mL),室溫攪拌滴加三甲基溴硅烷(280mg,1.84mmol),然后室溫攪 拌4小時。反應混合物減壓濃縮,得到的殘余物溶于乙醚(50mL),并攪拌10分鐘,濾除不溶固 體,有機相轉移到另一只lOOmL的三口瓶中降溫至0°C,向混合物中滴加氫氧化鈉(40mg)的 水(30mL)溶液,分去有機相,水相冷凍干燥得104mg(產率為80 % )黃色的固體。
[0080] LC-M: (ES,m/z): [M-44] - = 236.0
[0081 ] H-NMR: (300MHz,D20,ppm): δ7 · 860-7 · 887 (d,J = 8 · 1Hz,1H) ·
【主權項】
1. 式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽:其中, X選自-PO(OH) 2、-PO(OH) (0-Mi+)、-PO(0-Mi+) (0-M2+)或-PO(0-) 2 · D2+,Mi+和M2+分別是藥 學上可接受的一價陽離子,D2+是藥學可接受的二價陽離子。2. 權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽: 父選自-卩0(011)2、-?0(011)(0-]\11+)、-?0(0-]\11+)(0-]\12 +)或-?0(0-)2.02+,]\11+和]\12+分別獨立 的選自Li+、Na+、K+或(4R) N+,每個R獨立的選自氫或&―4烷基;D2+選自Mg2+、Ca 2+、Ba2+。3. 權利要求2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽: X選自-PO (OH) 2、-PO (OH) (0-Mi+)、-PO (0-Mi+) (0-M2+),Mi+和M2+分別獨立的選自 Li+、Na+、K + O4. 權利要求3所述的化合物或其藥學上可接受的鹽: X選自-PO(OH)2、-PO(OH) (0-Ml+)、-PO(0-Mi+) (0-M2+),Mi+和M2+分別為Na+〇5. 如下所述的化合物:6. 藥物制劑,含有權利要求1~5任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽以及一種 或多種藥用載體。7. 藥物組合物,含有權利要求1~5任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽以及一 種或多種其他抗病毒藥物,所述的其他抗病毒藥物包括阿昔洛韋、奧司他韋、扎那米韋、培 拉米韋、拉尼米韋、更昔洛韋、阿糖腺苷、膦甲酸、干擾素、金剛烷胺、利巴韋林。8. 權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備治療和/或預防病毒感染的 藥物中的用途,所述的病毒感染包括病毒性呼吸道感染、流行性感冒、流行性腮腺炎、脊髓 灰質炎、病毒性胃腸炎、病毒性肝炎、麻疹、風疹、幼兒急疹、水痘、帶狀皰疹、天花、狂犬病、 口蹄疫、病毒性結膜炎、病毒性角膜炎、病毒性腦炎、病毒性出血熱。9. 權利要求8所述的病毒性感染為流行性感冒和病毒性出血熱。
【文檔編號】A61P31/22GK105884827SQ201510990316
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2015年12月24日
【發(fā)明人】吳永謙
【申請人】山東軒竹醫(yī)藥科技有限公司