專利名稱：一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶法合成阿莫西林母液中有效成份的回收方法，特別是涉及一種通過納濾濃縮，對酶法合成阿莫西林母液中非活性側(cè)鏈D-羥基苯甘氨酸和母核6-氨基青霉烷酸的回收方法。
背景技術(shù)：
通常合成阿莫西林有兩種方法即化學(xué)合成法和酶合成法。化學(xué)法合成阿莫西林涉及較多的化學(xué)反應(yīng)步驟和苛刻的反應(yīng)條件，如-50度的低溫環(huán)境，在反應(yīng)過程中需要使用有機(jī)溶劑和化學(xué)試劑，如二氯甲烷、N，N-二甲基乙酰胺、吡啶、三乙胺、丙酮、特戊酰氯等， 對環(huán)境不友好。酶法合成阿莫西林是母核和活性側(cè)鏈在青霉素酰化酶催化的中性環(huán)境、室溫條件下，水相溶液中攪拌即可完成，大大地減少了生產(chǎn)環(huán)節(jié)，避免了有機(jī)溶劑和試劑的使用，整個過程較綠色環(huán)保。同時，在產(chǎn)品質(zhì)量上，酶法合成的阿莫西林純度高于化學(xué)法合成的產(chǎn)品，藥物安全性和藥物的穩(wěn)定性更高，因此，酶法合成的阿莫西林頗受臨床醫(yī)生和患者的青睞。正因?yàn)槿绱?，近幾年酶法阿莫西林的工藝技術(shù)越來越受到制藥企業(yè)與研究者的關(guān)注。美國專利US6048708中公開了一種酶促合成β -內(nèi)酰胺抗生素的方法，該方法使用較高濃度的抗生素母核與側(cè)鏈供體來提高母核的轉(zhuǎn)化率。一般來講，酶法合成阿莫西林，為了使母核的轉(zhuǎn)化率高，活性側(cè)鏈的供應(yīng)都是過量的，這樣，受阿莫西林合成酶水解活性的影響，側(cè)鏈的水解會產(chǎn)生一部分非活性側(cè)鏈-D-羥基苯甘氨酸，因此母液中含有相應(yīng)的非活性側(cè)鏈、母核和少量阿莫西林產(chǎn)品，酶的水解活性越高，殘余量就越大，使酶法合成阿莫西林的經(jīng)濟(jì)性大打折扣，成為阿莫西林酶法工藝產(chǎn)業(yè)化推廣的瓶頸。因此，對這些物質(zhì)的回收再利用是非常必要的。專利CN96199571介紹了抗生素母液的回收方法，其方法為通過酶水解母液中抗生素后，分解成為其起始化合物，然后通過降低PH來分離母核和?；瘎┧猱a(chǎn)物。然而在我們的實(shí)驗(yàn)中，模擬其方法處理阿莫西林母液，并不能得到其描述的效果，其原因在于在我們的酶法阿莫西林母液中，6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的濃度較低，不經(jīng)過濃縮不能實(shí)現(xiàn)結(jié)晶。因此本發(fā)明通過納濾濃縮，使6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的濃度顯著提高，從而實(shí)現(xiàn)6-氨基青霉烷酸母核和D-羥基苯甘氨酸的結(jié)晶分離。本發(fā)明涉及一種酶法阿莫西林母液中有效成份非活性側(cè)鏈和母核的回收方法，其中非活性側(cè)鏈指阿莫西林側(cè)鏈的水解產(chǎn)物D-羥基苯甘氨酸，母核為6-氨基青霉烷酸。通過回收側(cè)鏈和母核，可以間接提升酶法合成的轉(zhuǎn)化率，降低原材料的消耗，從而降低生產(chǎn)成本?；厥瞻⒛髁帜敢褐械腄-羥基苯甘氨酸、6-氨基青霉烷酸，必須要實(shí)現(xiàn)母液中阿莫西林、D-羥基苯甘氨酸、6-氨基青霉烷酸的分離，然而在化學(xué)結(jié)構(gòu)上這三種物質(zhì)均含有氨基和羧基，屬兩性化合物，三種物質(zhì)的等電點(diǎn)較為接近，因此單純依靠等電結(jié)晶達(dá)不到分離的目的。本發(fā)明涉及一種先對酶法合成阿莫西林母液進(jìn)行處理，使阿莫西林水解為6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸，再通過納濾使母液中的有效成份得到濃縮。然后再利用 6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸的濃度差異，通過等電結(jié)晶使大量D-羥基苯甘氨酸結(jié)晶分離出來。分離D-羥基苯甘氨酸后的母液主要成分是6-氨基青霉烷酸，可以直接作為6-氨基青霉烷酸的溶解液，返回酶法合成阿莫西林的源頭，直接重復(fù)利用；D-羥基苯甘氨酸經(jīng)過甲酯化，形成活性側(cè)鏈，做為阿莫西林合成的起始原料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了一種利用納濾對酶法合成阿莫西林母液中有效成份的回收方法，包括如下步驟一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其包括如下步驟(1)調(diào)節(jié)母液pH 利用堿將母液pH調(diào)節(jié)到9. 0 9. 5，堿為氨水或氫氧化鈉的任一種，將母液中的微量的結(jié)晶顆粒全部溶解，使各有效成份以鹽的形式溶解于母液中；(2)利用青霉素?；柑幚砩鲜瞿敢海鼓敢褐械陌⒛髁趾虳-羥基苯甘氨酸甲酯水解為D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸。(3)納濾濃縮利用青霉素?；柑幚淼纳鲜瞿敢?，隨著納濾循環(huán)的進(jìn)行，水和少量無機(jī)鹽將被透析除去，母液中有效成份D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸將被濃縮，濃度提尚；(4)等電結(jié)晶分離回收6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸利用D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸的濃度差異和等電點(diǎn)差異，通過對上述母液滴加酸，酸為鹽酸，調(diào)節(jié)pH至3. 5-5. 0，使絕大多數(shù)D-羥基苯甘氨酸以結(jié)晶的形式從母液中分離出來，從而實(shí)現(xiàn) D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸的分離。一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，使用青霉素?；柑幚砗蟮哪敢褐胁辉俸邪⒛髁?，母液中殘留阿莫西林分解為母核6-氨基青霉烷酸和非活性側(cè)鏈D-對羥基苯甘氨酸，以便于有效成份的分離回收。一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，所述步驟C3)使用納濾的方法對母液進(jìn)行濃縮，濃縮用納濾使用的膜為截留分子量為100-150道爾頓的納濾膜。 通過納濾濃縮，使母液中有效成份的濃度顯著提高，以有利于后序的結(jié)晶沉淀過程中提高 D-羥基苯甘氨酸的回收率。一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，經(jīng)過納濾濃縮后的母液，D-羥基苯甘氨酸濃度為50 60g/l。而6-氨基青霉烷酸的濃度因阿莫西林合成酶的水解活性不同，差異較大，一般為4 10g/l。一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，分離后的D-羥基苯甘氨酸可以經(jīng)過制備D-羥基苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽，再用于酶法合成阿莫西林原料；分離的母液可以直接作為原料，用于酶法合成阿莫西林。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于本發(fā)明采用納濾濃縮手段，可以使有效成分在低溫條件、無相變的濃縮富集，保護(hù)了有效成分免遭苛刻條件(比如蒸發(fā)濃縮)所帶來的破壞。利用氨水或氫氧化鈉，將母液PH調(diào)節(jié)至9. 0 9. 5，控制此等pH條件下，一方面提高酶水解效率，同時避免左旋對羥基苯甘氨酸在過堿的條件下消旋化。消旋化的對羥基苯甘氨酸無法直接供下一步使用?；厥崭患?-APA溶液無需結(jié)晶，可以直接作為6-APA溶解液，繼續(xù)補(bǔ)充6-APA， 提高了 6-APA的利用率，從而提高阿莫西林收率，阿莫西林收率優(yōu)選達(dá)到95%，更優(yōu)選達(dá)到 97%以上。對羥基苯甘氨酸高效地得到回收，回收率優(yōu)選達(dá)到85%，更優(yōu)選達(dá)到90%以上， COD排放大幅減少。納濾所得透析液可以作為酶法阿莫西林原料甲酯溶解用水，6-APA溶解用水等，從源頭減少水的使用，實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)，節(jié)能降耗，減污增效。


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其包括如下步驟(1)調(diào)節(jié)母液pH 取阿莫西林母液2000ml，高效液相色譜檢測母液中各成分的含量，檢測結(jié)果見表1。利用氨水或氫氧化鈉，將母液PH調(diào)節(jié)至9. 0 9. 5，使母液中的微量的結(jié)晶顆粒全部溶解，使各有效成份以鹽的形式溶解于母液中；(2)利用青霉素?；柑幚砩鲜瞿敢?，使母液中的阿莫西林和D-羥基苯甘氨酸甲酯水解為D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸加入青霉素酰化酶90 150g，控制溫度 15°C 25°C處理上述母液3 10小時，使母液中的阿莫西林和D-羥基苯甘氨酸甲酯水解為D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸。(3)納濾濃縮將青霉素?；阜蛛x出去，使用截留分子量為100-150道爾頓的納濾膜，納濾濃縮上述母液，隨著納濾循環(huán)的進(jìn)行，水和少量無機(jī)鹽將被透析除去，母液中有效成份D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸將被濃縮，濃度提高，濃縮后母液體積為470ml， 各物質(zhì)濃度檢測結(jié)果見表1。(4)等電結(jié)晶分離回收6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸對濃縮后的母液滴加鹽酸，調(diào)節(jié)PH至5.0，使絕大多數(shù)D-羥基苯甘氨酸以結(jié)晶的形式從母液中分離出來，析出的晶體經(jīng)高效液相色譜檢測，純度可達(dá)到95%以上，結(jié)晶后的母液中各物質(zhì)濃度檢測結(jié)果見表1。D-對羥基苯甘氨酸晶體干燥后得到23. 86g干粉，回收率為94. 23%。( 經(jīng)高效液相色譜檢測分離D-羥基苯甘氨酸后的母液含有6-氨基青霉烷酸，可以直接作為6-氨基青霉烷酸的溶解液，用于酶法合成阿莫西林，套用后酶法阿莫西林收率達(dá)到95. 7% (以新投入的6-APA計算)。表1母液中各成分液相檢測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，其包括如下步驟(1)調(diào)節(jié)母液PH利用堿將母液PH調(diào)節(jié)到9. 0 9. 5，將母液中的微量的結(jié)晶顆粒全部溶解，使各有效成份以鹽的形式溶解于母液中；(2)利用青霉素?；柑幚砩鲜瞿敢?，使母液中的阿莫西林和D-對羥基苯甘氨酸甲酯水解為D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸將。(3)納濾濃縮利用青霉素?；柑幚淼纳鲜瞿敢?，隨著納濾循環(huán)的進(jìn)行，水和少量無機(jī)鹽將被透析除去，母液中有效成份D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸將被濃縮，濃度提尚；(4)等電結(jié)晶分離回收6-氨基青霉烷酸和D-羥基苯甘氨酸通過對上述母液滴加酸， 調(diào)節(jié)PH至3. 5-5. 0，使絕大多數(shù)D-羥基苯甘氨酸以結(jié)晶的形式從母液中分離出來，從而實(shí)現(xiàn)D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸的分離。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，所述步驟(1)所提到的堿為氨水或氫氧化鈉的任一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，使用青霉素?；柑幚砗蟮哪敢褐袣埩舭⒛髁址纸鉃槟负?-氨基青霉烷酸和非活性側(cè)鏈D-羥基苯甘氨酸，以便于有效成份的分離回收。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，所述步驟C3)使用納濾的方法對母液進(jìn)行濃縮，濃縮用納濾使用的膜為截留分子量為100-150道爾頓的納濾膜。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，經(jīng)過納濾濃縮后的母液，D-羥基苯甘氨酸濃度為50 60g/l。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法，其特征在于，所述步驟的酸為鹽酸。
7.一種利用納濾回收酶法阿莫西林母液中的D-羥基苯甘氨酸可以制備D-羥基苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽的用途，也再用于酶法合成阿莫西林的原料。
8.一種利用納濾回收酶法阿莫西林分離的母液可以直接作為原料，用于酶法合成阿莫西林。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用納濾回收酶法合成阿莫西林母液中有效成份的方法，其包括如下步驟(1)調(diào)節(jié)母液pH；(2)利用青霉素?；杆饽敢褐械陌⒛髁?，使母液中僅存在D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸(6-氨基青霉烷酸)；(3)納濾獲得濃縮的母液；(4)等電結(jié)晶分離回收D-羥基苯甘氨酸和6-氨基青霉烷酸(6-氨基青霉烷酸)。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，針對某些水解活性較高的阿莫西林合成酶，可以提高非活性側(cè)鏈的循環(huán)利用率，從而使酶法合成阿莫西林更具經(jīng)濟(jì)性。
文檔編號C07D499/42GK102392060SQ20111029096
公開日2012年3月28日 申請日期2011年9月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月16日
發(fā)明者喬文慶, 劉利紅, 劉振濤, 蓋來兵, 陳順記 申請人:石藥集團(tuán)中潤制藥(內(nèi)蒙古)有限公司