專利名稱：新的抗癌活性化合物及其提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從海洋生物提取有生物活性的化合物，具體地說是從海洋生物羅氏海盤車中提取新的抗癌活性化合物。3β-0-{3-0-甲基-β-D-吡喃木糖1-(1→3)-0-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-0-β-D-吡喃金納糖-(1→2)-O-β-D-吡喃木糖1}-16-β-乙酰基-23S-乙?；?海參毒素-7-烯(compound1)。和3β-O-{3-O-甲基-β-p-吡喃木糖1-(1→3)-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-O-β-D-吡喃金納糖-(1→2)-O-β-D-吡喃木糖1}-16-β-乙?；?海參毒素-7-烯(compound2)。并提供了一種提取方法。
背景技術(shù)：
羅氏海盤車(Asterias rollentoni Bell)俗稱海星，五角星，是海星綱棘皮動(dòng)物之一。從海星中分離到大量的甾體皂苷。腦苷，神經(jīng)酰胺。甾醇等化合物；另有報(bào)道，從該品種提取的總皂苷對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍有較強(qiáng)的愈合作用。我們從該品種中得到兩個(gè)三萜皂苷，具有較強(qiáng)的抗癌活性，到目前為止，化合物1是未見報(bào)道的新化合物，化合物2是一個(gè)新的天然產(chǎn)物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于利用中國(guó)海洋藥物資源，尋找新的抗癌活性化合物，為研究開發(fā)新的抗癌藥物提供先導(dǎo)化合物。
本發(fā)明是以中國(guó)東海海域大量生長(zhǎng)的羅氏海盤車為原料，經(jīng)溶劑多次提取和多種色譜方法分離，得到一種新的三萜皂苷和一個(gè)新的天然產(chǎn)物，采用了質(zhì)譜。核磁共振等光譜技術(shù)，確定了該化合物的結(jié)構(gòu)。
該化合物的結(jié)構(gòu)如下 R1＝3-O-methyl-β-D-xyl- (1→3)-O-β-D-glu- (1→4)-O-β-D-qui-(1→2)-O-β-D-xylCompound 1 R2＝OAcCompound 2 R2＝H
該化合物體外抗腫瘤活性由深圳中藥及天然藥物研究中心測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果化合物1和化合物2體外抗癌試驗(yàn)結(jié)果(最低有效濃度)

具體實(shí)施例方式實(shí)驗(yàn)方法采用臺(tái)盼蘭排染法，于96孔板中加入1.2×105/ml濃度的人腫瘤懸浮細(xì)胞(HepG2，NCI-H460)加入不同濃度的化合物1或化合物2，作用72小時(shí)后用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)。實(shí)驗(yàn)證明，上述化合物具有較強(qiáng)的抗癌活性，可在制備抗癌藥物中應(yīng)用。
本發(fā)明所用的原料來自連運(yùn)港海域，也可采用其他海域的羅氏海盤車，用新鮮采集的樣品凍干粉碎，用10倍量70％乙醇溫浸三次，和并提取液，減壓回收至干，殘留物用水混懸，分別用石油醚。乙酸乙酯，正丁醇萃取，和并乙酸乙酯萃取部分，減壓回收至干。經(jīng)多次硅膠柱色譜，sephadexLH-20凝膠柱色譜，最后經(jīng)高效液相純化，得單體化合物，得率分別為百萬分之二(化合物1)和百萬分之一(化合物2)。
物理常數(shù)光譜數(shù)據(jù)如下化合物1白色，無定型粉末，CHCl3-MeOH(1∶1)；mp 213-215℃；分子式C57H90O24(positive HRFABMS 1182.359，calcd.for C57H90O24Na，1181.5730)ESIMS(positive)m/z1181.8，1034.0，1017.9；ESIMS(negative)m/z1194.7，1157.8，1115.8；1H and13C NMRTable 1 and Table 2.
化合物2白色，無定型粉末，chloroform-MeOH(1∶1)；mp 202-202℃；Molecular formula C55H88O22(positive HRFABMS 1123.652，calcd.for C55H88O22Na，1123.5728)ESIMS(positive)m/z1123.9，ESIMS(negative)m/z1135.8，1099.8；1H and13C NMRTable 1 and Table 2.
表11H and13C NMR data for aglycone in C5D5N


Chemical shifts(ppm)are relative to internal TMS表21H and13C NMR data for g1ycone in C5D5N


Chemical shifts(ppm)are relative to internal TMS
權(quán)利要求
1.新的抗癌活性化合物，它是從海洋生物羅氏海盤車中提取分離的三萜皂苷，其特征在于它具有如下結(jié)構(gòu) R1＝3-O-methyl-β-D-xyl-(1→3)-O-β-D-glu-(1→4)-O-β-D-qui-(1→2)-O-β-D-xylCompound 1 R2＝OAcCompound 2 R2＝H
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新的抗癌活性化合物，其特征在于所提取的三萜皂苷化合物可在抗癌藥物中應(yīng)用。
3.一種如權(quán)利要求1所述的新的抗癌活性化合物的制備方法，其特征在于將新鮮采集的羅氏海盤車凍干粉碎，用10倍量70％乙醇溫浸三次，和并提取液，減壓回收至干，殘留物用水混懸，分別用石油醚.乙酸乙酯，正丁醇萃取，和并乙酸乙酯萃取部分，減壓回收至干。經(jīng)多次硅膠柱色譜，sephadexLH-20凝膠柱色譜，最后經(jīng)高效液相純化，得單體化合物，得率分別為百萬分之二化合物1和百萬分之一化合物2。
全文摘要
本發(fā)明涉及從海洋生物羅氏海盤車中提取新的抗癌活性化合物。它具有如下結(jié)構(gòu)，用新鮮采集的樣品凍干粉碎，用10倍量乙醇溫浸三次，和并提取液，減壓回收至干，殘留物用水混懸，分別用石油醚.乙酸乙酯，正丁醇萃取，和并乙酸乙酯萃取部分，減壓回收至干.經(jīng)多次硅膠柱色譜，凝膠柱色譜，最后經(jīng)高效液相純化，得單體化合物。該化合物可用于制備抗癌藥物。
文檔編號(hào)C07J71/00GK1699401SQ20051004627
公開日2005年11月23日 申請(qǐng)日期2005年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月18日
發(fā)明者裴月湖, 詹永成, 李文, 沙沂 申請(qǐng)人:沈陽藥科大學(xué)