一種聯(lián)芐類化合物及其提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設及油茶葉中的聯(lián)節(jié)類物質(zhì)提取領(lǐng)域，具體而言，設及一種油茶葉提取物 中的聯(lián)節(jié)類化合物及其提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 油茶(Camellia oleifera Abel)別名茶巧樹、油茶樹，為山茶屬茶科(Theaceae) 植物，是世界四大木本油料之一，主要分布在中國云南、廣西、廣東等省份，是中國特有的純 天然高級油料作物。油茶研究大多著眼于油茶仁、油茶巧、茶巧油、油茶殼或其種質(zhì)資源，對 油茶葉的綜合利用研究較少，每年四五月間打葉產(chǎn)生的大批落葉造成了很大的資源浪費。 油茶葉的開發(fā)利用可W充分利用廢棄資源，提高油茶的綜合利用效率，提高油茶主產(chǎn)區(qū)農(nóng) 民的經(jīng)濟收入。油茶葉含有脂肪、蛋白質(zhì)、還原糖、酸、氨基酸、茶皂素、葉綠素 W及聯(lián)節(jié)類化 合物等成分，其微量元素和Ve含量高于一些常見水果。
[0003] 聯(lián)節(jié)類化合物是一種生物活性很強的物質(zhì)，具有抗氧、抗自由基、抑菌保鮮，防癌、 防骨質(zhì)疏松，清除亞硝酸鹽等作用，隨著天然產(chǎn)物研究的發(fā)展，人們對油茶葉聯(lián)節(jié)類化合物 組份、其功效作用及利用價值開展了深入的研究，但是現(xiàn)有技術(shù)從油茶葉中提取的聯(lián)節(jié)類 物質(zhì)多屬于混合物，多種化合物并存，成分不明確雜質(zhì)也比較多，不純凈，不利于油茶葉提 取物的廣泛利用和市場化。
[0004] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種聯(lián)節(jié)類化合物，克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的諸多技 術(shù)問題，其為一種新型的單一化合物，純度高，成分明確，無任何雜質(zhì)，屬于首次從油茶葉中 提取并純化得到，現(xiàn)有技術(shù)中沒有任何相關(guān)記載，具有開拓性的意義，提高了聯(lián)節(jié)類物質(zhì)的 附加值，更利于針對性的進行市場化應用，具有廣泛的市場應用價值。
[0006] 本發(fā)明的第二目的在于提供一種該聯(lián)節(jié)類化合物的提取方法，該提取方法具有易 操作，簡單方便，無需配備專業(yè)人員操作也可實現(xiàn)，節(jié)省人力物力，前后步驟銜接緊密，提取 操作條件溫和，所需化學試劑便宜易得，通過特定的提取操作條件的摸索獲得了一種新型 化合物，為后續(xù)提取制備提供了可參考的工藝路線，非常具有借鑒價值。
[0007] 為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用W下技術(shù)方案：
[000引本發(fā)明實施例提供了一種油茶葉提取物中的聯(lián)節(jié)類化合物，該聯(lián)節(jié)類化合物的化 學名稱為二氨白襲蘆醇-4'-0-[6"'-0-(4""-甲基沒食子酷基）]-β-0-化喃葡萄糖巧，為二 氨白襲蘆醇巧的一種衍生物，分子量為558，化學結(jié)構(gòu)式為：
[0009]
[0010] 本發(fā)明實施例掲示的運種化合物是首次從油茶葉中分離提取出來的，現(xiàn)有技術(shù)中 還沒有過任何相關(guān)報道，具有開拓性的意義。關(guān)于油茶葉的提取研究之所W運么受關(guān)注，是 因為油茶葉中含有脂肪、蛋白質(zhì)、還原糖、酸、氨基酸、茶皂素、葉綠素 W及聯(lián)節(jié)類化合物等 營養(yǎng)成分，其微量元素和Ve含量也高于一些常見水果，更進一步的油茶葉中的聯(lián)節(jié)類物質(zhì) 含量豐富，聯(lián)節(jié)類化合物是一種生物活性很強的物質(zhì)，具有抗氧、抗自由基、抑菌保鮮，防 癌、防骨質(zhì)疏松，清除亞硝酸鹽等作用，直接提取濃縮后可W更加強化其保健價值，尤其本 發(fā)明提取出的運種具有特定結(jié)構(gòu)的聯(lián)節(jié)類化合物，其應用價值經(jīng)過進一步開發(fā)研究會更具 商業(yè)價值，值得更廣泛的開發(fā)利用起來。
[0011] 在本發(fā)明中，提取得到的提取物中，該新型的聯(lián)節(jié)類化合物的純度可W達到95% W上，更優(yōu)可W達到98% W上，只有少量的雜質(zhì)，得到的物質(zhì)很純，不像現(xiàn)有技術(shù)中大部分 是多種聯(lián)節(jié)類物質(zhì)形成的混合物，純度高的單一物質(zhì)相比于混合物，會更加提高其應用價 值。
[0012] 本發(fā)明除了針對該新型的聯(lián)節(jié)類化合物從化學名稱、化學結(jié)構(gòu)式、分子量等方面 予W確認，還提供了該化合物的提取方法，包括如下步驟：
[0013] (A)將油茶葉經(jīng)過熱提取、濃縮得到濃縮液，過D101大孔樹脂吸附完成后，依次用 蒸饋水、20-30wt %乙醇、75-80wt %乙醇溶液洗脫；
[0014] (B)將采用75-80wt%乙醇溶液洗脫得到的洗脫液進行硅膠層析，流動相采用二氯 甲燒-甲醇，每400-500mL為一個單位收集洗脫液，對第10個單位的洗脫液進行繼續(xù)分離提 取得到多化合物提取液；
[001引（C)將多化合物提取液進行硅膠層析，流動相采用二氯甲燒-甲醇，每40-50mL為一 個單位收集洗脫液，對第3個單位的洗脫液進行繼續(xù)分離提取即得目標化合物。
[0016] 本發(fā)明實施例的提取方法是專口針對本發(fā)明的特定化合物而設計的，每一個步驟 均需要按照本發(fā)明的方案進行操作，不能缺少任何一個步驟，也不能顛倒前后步驟的順序， 更不能采用其他操作方法替換本發(fā)明的任一操作步驟，尤其是本發(fā)明的提取方法中設及的 各個操控參數(shù)，需要控制在適宜的范圍內(nèi)，比如(A)步驟中，需要采用不同溶劑進行洗脫，并 且由于目標化合物存在于75-80wt %乙醇溶液洗脫得到的洗脫液中，因此針對運部分洗脫 液進行進一步一系列的提取操作，可見發(fā)明人在設計整個提取方法中均是有目的性的一步 步進行操作的，是需要付出大量的創(chuàng)造性勞動的，才能最終提取得到目標化合物。
[0017] 步驟(A)中，油茶葉在過柱子之前先要經(jīng)過熱提取、濃縮等預處理操作，油茶葉熱 提取的溫度最好控制在70-80°C，更優(yōu)為75°C，如果溫度太高可能會破壞油茶葉中的營養(yǎng)成 分，因此要注意溫度的控制，另外熱提取之前先將油茶葉粉碎成60目W上的粉狀;優(yōu)選地， 熱提取采用50wt%W上的乙醇為溶劑進行提取，粉碎成粉狀有利于提取操作的順利進行。
[0018] 在本發(fā)明的步驟(B)中，75-80wt%乙醇溶液洗脫得到的洗脫液先進行濃縮干燥 后，溶解于二氯甲燒-甲醇中，再進行硅膠層析，其中硅膠層析過程中所用的硅膠目粒度控 制在200-300目，W提高提取效率，二氯甲燒-甲醇的體積比最好控制在10:1-1:3,層析時每 400-500mL為一個單位收集洗脫液，一般是每500mL收集為一個流份，收集大概24個組份，對 其中Ξ個組分進行細分，分別是排號為第2、10、23運Ξ個組分，由于本發(fā)明的目標化合物存 在于第10個單位的洗脫液中，針對第10組分進一步分離提取，實際進行操作時，一般為對第 10個單位的洗脫液進行液相色譜檢測后，根據(jù)檢測結(jié)果采用甲醇-水溶液進行洗脫得到多 化合物提取液，液相色譜檢測為DAC制備色譜分離并得到色譜圖，甲醇-水恒定洗脫得到了 Ξ個單體化合物W及一個含多個化合物的復雜組分，將運個復雜組分溶解于一定比例的二 氯甲燒-甲醇中，繼續(xù)硅膠層析。其中，甲醇-水溶液的質(zhì)量百分比濃度為60-65%。
[0019] 優(yōu)選地，步驟(C)中，第3個單位的洗脫液利用半制備液相色譜檢測后，根據(jù)檢測結(jié) 果采用乙臘-水溶液進行洗脫分離得到目標化合物。其中，乙臘-水溶液的質(zhì)量百分比濃度 最好為20-30 %，優(yōu)選為25 %。
[0020] 更優(yōu)選的，步驟(C)中的硅膠層析過程中所用的硅膠目粒度控制在200-300目，W 提高提取效率，獲得更加純凈的物質(zhì)。
[0021] 現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
[0022] (1)本發(fā)明提供的新型的油茶葉提取物中的聯(lián)節(jié)類化合物，純度高，成分明確，無 任何雜質(zhì)，屬于首次從油茶葉中提取并純化得到，現(xiàn)有技術(shù)中沒有任何相關(guān)記載，具有開拓 性的意義，提高了聯(lián)節(jié)類物質(zhì)的附加值，更利于針對性的進行市場化應用，具有廣泛的市場 應用價值；
[0023] (2)對于上述聯(lián)節(jié)類化合物本發(fā)明提供的提取方法具有易操作，簡單方便，無需配 備專業(yè)人員操作也可實現(xiàn)，節(jié)省人力物力，前后步驟銜接緊密，提取操作條件溫和的優(yōu)點， 當然本發(fā)明提供的提取方法只是較優(yōu)的一種方法，對于現(xiàn)有技術(shù)中任何一種提取方法只要 得到具有本發(fā)明特定結(jié)構(gòu)的化合物，均在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
【附圖說明】
[0024] 為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，W下將對實施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。
[0025] 圖巧本發(fā)明實施例一中的80wt %乙醇洗脫液的HPLC圖譜；
[0026] 圖2為本發(fā)明實施例一中的第10個單位的洗脫液的DAC制備色譜分離圖譜；
[0027] 圖3為本發(fā)明實施例一中的第Ξ個流份的液相色譜圖；
[0028] 圖4為本發(fā)明實施例一中的目標化合物的離子圖、色譜圖和質(zhì)譜圖；
[0029] 圖5為本發(fā)明實施例一中的目標化合物的iH-NMR圖譜；
[0030] 圖6為本發(fā)明實施例二中的目標化合物的UC-NMR圖譜；
[0031] 圖7為本發(fā)明實施例二中的目標化合物的H-H COSY圖譜；
[0032] 圖8為實施例二中的目標化合物的HSQ幻普圖圖譜；
[0033] 圖9為本發(fā)明實施例二中的目標化合物的HMBC圖譜。
【具體實施方式】
[0034] 下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會 理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可W通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
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