以水為溶劑從何首烏藥材中制備二苯乙烯苷凍干粉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種從何首烏藥材中制備二苯乙締巧(2,3,5，少-四徑基二苯乙締-2- Ο-β-D-葡萄糖巧，簡(jiǎn)稱二苯乙締巧)凍干粉的制備方法，屬于天然活性產(chǎn)物制備方法的技術(shù) 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 何首烏為寥科植物何首烏(Polygonum mult if lorum Thunb)的干燥塊根，是我國(guó) 名貴中藥材。按其炮制方法不同又有生首烏和制首烏之分。生首烏味苦、甘、澀，性平，具有 潤(rùn)腸、解毒和截追之功;制首烏味苦、甘、澀，性溫，具有補(bǔ)肝、腎，益精血，壯筋骨，烏須發(fā)之 效。
[0003] 何首烏主要含Ξ類有效成分，二苯乙締巧類，蔥釀?lì)惣熬酆匣ㄇ嗨?。二苯乙締巧?何首烏中主要有效成分，是一類具有顯著藥理活性的水溶性成分，其主要代表成分二苯乙 締巧，也是何首烏藥材質(zhì)量控制的成分。
[0004] 二苯乙締巧主要生理功效為：1、抗衰老作用，2、醒腦益智提高記憶力作用，3、保肝 作用，4、降血脂作用，5、舒張血管和抑制動(dòng)脈粥樣硬化作用，6、烏發(fā)作用。
[0005] 目前已知二苯乙締巧類有四種結(jié)構(gòu)類似的化合物，提取分離含量為98% W上難度 大，現(xiàn)有技術(shù)中主要有聚酷胺分離法;高壓液相制備分離法;乙醇提取堿調(diào)pH有機(jī)溶劑萃取 再經(jīng)酸化有機(jī)溶劑萃取法等。除高壓液相制備分離法外，要獲得二苯乙締巧純品較為困難。 如W二苯乙締巧四種結(jié)構(gòu)類似的化合物為例，結(jié)構(gòu)和溶解度等相差無(wú)幾，所W獲得操作簡(jiǎn) 單，工藝步驟少，產(chǎn)品收率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)的工藝流程，確實(shí)困難。
[0006] 二苯乙締巧:分子式:C20也2〇9，分子量:406.38
[0007] 結(jié)構(gòu)式為：
[000引


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的是提供一種制備高純度二苯乙締巧凍干粉的方法。
[0010] 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種W水為溶劑從何首烏藥材中制備二苯乙締 巧凍干粉的方法，其特征在于，包括：
[0011] 第一步:將何首烏根洗凈，切片，曬干，粉碎為何首烏粉；
[0012] 第二步:將第一步得到的何首烏粉用水超聲提取至少一次，過濾合并提取液；
[0013] 第Ξ步：將得到的提取液用化學(xué)純的正下醇在分液容器中萃取至少一次，分出正 下醇萃取液，在水浴ο~70°c下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器回收溶劑，得到含水溶性成分的提取物；
[0014] 第四步:將第Ξ步得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙醋溶解，點(diǎn)于層析用娃 膠制備板上，驚干，置于層析缸內(nèi)用展開劑展開，取出，驚干，置波長(zhǎng)為254nm的紫外燈下檢 視，刮取紫色巧光色帶，收集，將所得的收集物與乙醇溶液混合，超聲溶解，過濾，回收乙醇， 獲得二苯乙締巧純品；
[0015] 第五步:將第四步獲得的二苯乙締巧純品用水溶解，置于凍干機(jī)內(nèi)，冷凍成固體， 抽真空將水分升華干燥成白色無(wú)定型二苯乙締巧凍干粉。
[0016] 優(yōu)選地，所述的第二步中，何首烏和水的用量比為lg:10mL(W/V)，超聲頻率為 40曲Z-60曲Z，超聲功率為150W-200W，超聲時(shí)間為20min-40min。
[0017] 優(yōu)選地，所述的第Ξ步中，提取液和正下醇的體積比為1:1。
[0018] 優(yōu)選地，所述的第四步中，含水溶性成分的提取物和醋酸乙醋的體積比為lg:10mL (W/V)。
[0019] 優(yōu)選地，所述的第四步中的層析用硅膠制備板為GF254硅膠板，所用的展開劑為醋 酸乙醋、甲醇和水的混合物，醋酸乙醋、甲醇和水的體積比為30:2:1。
[0020] 優(yōu)選地，所述的第四步中的乙醇溶液的體積濃度為85%，收集物和乙醇溶液的比 例為 lg:3mL(W/V)。
[0021] 優(yōu)選地，所述的第四步中的超聲溶解的溫度為0-30°C，超聲頻率為40kHz-60kHz， 超聲功率為150w-200w，超聲時(shí)間為5分鐘。
[0022] 優(yōu)選地，所述的第四步還包括:將二苯乙締巧純品和二苯乙締巧對(duì)照品分別用醋 酸乙醋溶解后，點(diǎn)于同一硅膠GF254板上，在波長(zhǎng)為254nm的紫外燈下檢視，在同一位置顯相 同的紫色斑點(diǎn)。
[0023] 優(yōu)選地，所述的第Ξ步中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的壓力為O.OSMpa。
[0024] 本發(fā)明利用二苯乙締巧類和其他成分在溶劑中溶解度不同進(jìn)行分離提純。第一步 用水除去脂溶性成分，分離獲得60%極性較大的二苯乙締巧成分;第二步正下醇萃取獲得 水溶性80% W上的二苯乙締巧成分;第Ξ步經(jīng)過硅膠薄層制備板層析分離獲得98% W上的 二苯乙締巧成分，因?yàn)槎揭揖喦伤苄暂^大難結(jié)晶，W及該成分對(duì)人體有特殊的生理作 用，所W第四步極性大的二苯乙締巧成分通過冷凍干燥，制備為凍干粉供臨床制備制劑使 用。
[0025] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
[00%]經(jīng)過數(shù)次數(shù)公斤實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明工藝流程少，穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便，二苯乙締巧含量 明確，純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，運(yùn)些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可W對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，運(yùn)些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
[0028] 實(shí)施例1
[0029] -種W水為溶劑從何首烏藥材中制備二苯乙締巧凍干粉的方法，具體步驟為：
[0030] (1)將新鮮何首烏根化g，洗凈，切片，曬干，置粉碎機(jī)中粉碎為粗粉，約4kg;
[0031] (2)將上述何首烏粉置于塑料桶中加入自來(lái)水超聲提取，何首烏粉和水的用量比 為lg:10mL(W/V)，超聲頻率為40kHz，超聲功率為150W，超聲40分鐘，每批次何首烏粉超聲2 次，過濾，合并提取液；
[0032] (3)將提取液用化學(xué)純的正下醇在分液容器中進(jìn)行萃取，提取液和正下醇按1:1的 體積比例，共進(jìn)行2次萃取，分出的正下醇萃取液在水浴70°C、壓力為O.OSMpa的條件下，用 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器回收正下醇，得到含水溶性成分的提取物；
[0033] (4)將含水溶性成分的提取物用醋酸乙醋溶解，含水溶性成分的提取物和醋酸乙 醋的體積比為lg:l〇mL(W/V)，點(diǎn)于層析用硅膠制備板上(硅膠GF254板），分布成帶狀，驚干， 置于層析缸中，用展開劑(醋酸乙醋、甲醇和水的混合物，醋酸乙醋、甲醇和水的體積比為30 :2:1)展開，取出，驚干，置波長(zhǎng)為254nm的紫外燈下檢視，刮取紫色巧光色帶，收集于玻璃容 器內(nèi)，將所得的收集物與體積濃度為85%的乙醇溶液混合，收集物和乙醇溶液的比例為Ig; 3mL(W/V)，超聲溶解5分鐘，超聲頻率為40kHz，超聲功率為150w，溫度50°C，過濾，減壓蒸饋 回收乙醇，獲得二苯乙締巧純品，將二苯乙締巧純品和二苯乙締巧對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢 定研究院110844-201411)分別用醋酸乙醋溶解后，點(diǎn)于同一硅膠GF254板上，在波長(zhǎng)為 254nm的紫外燈下檢視，在同一位置顯相同的紫色斑點(diǎn)。
[0034] (5)將獲得的二苯乙締巧純品5g用lOmL水溶解，置于實(shí)驗(yàn)型凍干機(jī)內(nèi)，-20°C冷凍 成固體，抽真空至真空度為-〇.〇9MPaW將水分升華干燥成白色無(wú)定型二苯乙締巧凍干粉， 產(chǎn)品得率為0.8%，用甲醇溶解后進(jìn)行HPLC檢測(cè)，純度為98 % dHPLC的具體條件為:C18150 X 4.6nm色譜柱，流動(dòng)相：乙臘-水(體積比17:83)，流速：Iml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm。
[0035] 所得二苯乙締巧凍干粉的結(jié)構(gòu)鑒別：淺棟色無(wú)定型粉末，i r*後L將"（C， 0.0835，Me2C0)〇mamaxnm(loge) :213(4.41) ,3.09(4.43)，322(4.44