一種補骨脂二氫黃酮甲醚c環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法，步驟為，以補骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用雷斯青霉ATCC?10490為生物催化劑進行轉(zhuǎn)化反應，經(jīng)有機溶劑萃取和硅膠分離與純化后得到在補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應的衍生物。該方法工藝步驟簡單、安全性高、反應高效專一。本發(fā)明不僅克服了目前二氫黃酮類化合物衍生物化學制備方法中反應效率低、大量使用有機溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問題。而且，制備得到的補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物是結構新穎的新化合物，對正常細胞有一定的促進增殖作用，具有和底物相當或者更好的抗腫瘤活性。
【專利說明】一種補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物制藥及醫(yī)藥工程領域，尤其是一種補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法。
【背景技術】
[0002]補骨脂二氫黃酮甲醚(Bavachinin)是一種二氫黃酮類化合物，其化學結構是在二氫黃酮骨架的A環(huán)7號位取代了一個甲氧基，A環(huán)6號位取代了一個異戊烯基。研究表明，該化合物具有抗氧化、抗細菌、抗真菌、抗炎、抗腫瘤、退熱性、止痛等多種生物和藥理活性。目前主要從天然植物Psoralea corylifolia中分離得到,但由于較低的分離和純化效率，生產(chǎn)成本較高，導致其臨床應用受到極大限制。因此，通過結構修飾和改造獲得結構多樣的新化合物，是提高該化合物生物利用度的重要方法。
[0003]二氫黃酮類化合物的結構修飾和改造工作中，還原反應的發(fā)生及其發(fā)生的位點與它的藥理活性密切相關。目前二氫黃酮類化合物還原產(chǎn)物的化學制備方法具有反應效率低、大量使用有機溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問題。[0004]目前尚無利用微生物菌種制備補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物的生物制備方法的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種目標產(chǎn)物產(chǎn)率高、分離純化過程簡單、成本低廉、無污染的補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物及生物制備方法。
[0006]本發(fā)明實現(xiàn)目的技術方案如下:
[0007]—種補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物，結構式如下:
[0008]
【權利要求】
1.一種補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物，其特征在于，結構式如下:
2.一種制備權利要求1所述的補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物的方法，其特征在于:以補骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用雷斯青霉(Penicillium raistrickii) ATCC10490為生物催化劑進行轉(zhuǎn)化反應，獲得在補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應的衍生物。
3.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于:具體步驟如下: ⑴生物催化劑的制備:制備濃度為IO5-1O8個/ml的雷斯青霉(Penicilliumraistrickii) ATCC 10490的孢子懸浮液，以5%_15%的接種量接種于新鮮的發(fā)酵培養(yǎng)基中，26-30°C，120-200r/min培養(yǎng)24_60h，得到菌體發(fā)酵液； ⑵轉(zhuǎn)化反應:向菌體發(fā)酵液中投入已經(jīng)溶解的補骨脂二氫黃酮甲醚，26-30°C，120-200r/min，培養(yǎng)24_120h后終止反應； ⑶產(chǎn)物的提取與精制:轉(zhuǎn)化反應結束后，抽濾，分離菌絲體和發(fā)酵液，分別用有機溶劑萃取菌絲體和發(fā)酵液，合并萃取液，干燥，減壓濃縮，濃縮后用硅膠色譜柱分離獲得補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物。
4.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于:分離獲得的補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物是利用有機溶劑通過重結晶得到在補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基發(fā)生還原反應的衍生物的純品。
5.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于:所述用于重結晶的有機溶劑為石油醚、丙酮、正己烷、乙腈或甲醇。
6.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成 g/L:葡萄糖 5-30，玉米漿 5-15，NaNO31-3, KH2PO40.5-2, K2HPO41-3, MgSO40.2-1,FeSO40.01-0.03，KC10.2-1, ρΗ7.0-8.0。
7.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述補骨脂二氫黃酮甲醚投入的終濃度為:0.01-0.lg/L。
8.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述步驟⑵中溶解補骨脂二氫黃酮甲醚的有機溶劑為乙醇、甲醇、二甲基亞砜或二甲基甲酰胺。
9.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述的用于萃取處理的有機溶劑為乙酸乙酯、正丁醇、甲醇或乙酸丁酯。
10.一種權利要求1所述的補骨脂二氫黃酮甲醚C環(huán)羰基還原產(chǎn)物用于制備抗腫瘤藥物的應用。
【文檔編號】A61K31/353GK103724310SQ201310733711
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月23日 優(yōu)先權日:2013年12月23日
【發(fā)明者】駱健美, 申雁冰, 王敏, 梁奇坤, 王家明, 鄭宇
申請人:天津科技大學