一種絲素基生物創(chuàng)傷敷料及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種絲素基生物創(chuàng)傷敷料及其制備方法，將繭層置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得的絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干，將獲得的絲素纖維用0.1～4mol/L?NaOH溶液降解3～24h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1∶（50～200）（g/ml）；本發(fā)明運(yùn)用堿解法獲得絲素微纖維，該微纖維長(zhǎng)短均一。在不添加任何有毒化學(xué)交聯(lián)劑的情況下，制備生物創(chuàng)傷敷料，工藝簡(jiǎn)單，安全性好。本發(fā)明制備的生物創(chuàng)傷敷料的特點(diǎn)是具有高力學(xué)性能。本發(fā)明提供了一種制備高力學(xué)性能生物創(chuàng)傷敷料的方法，且該輔料具有良好生物相容性，能夠?qū)?chuàng)面進(jìn)行有效修復(fù)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種絲素基生物創(chuàng)傷敷料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于一種生物創(chuàng)傷敷料的加工工藝，特別涉及一種高力學(xué)性能敷料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]燒傷或其他原因?qū)е碌膰?yán)重皮膚創(chuàng)傷常常給病人帶來(lái)極大的痛苦，用創(chuàng)傷敷料處理創(chuàng)面是早期治療的重要步驟。理想的創(chuàng)傷敷料能夠有效地隔絕細(xì)菌和灰塵，且要求敷料具有一定的保濕性和良好的生物相容性([J]Acta Biomaterials, 2012,8(8):3049-3060)。殼聚糖是一種通過(guò)β -(I，4)糖苷鍵連接的線(xiàn)性多糖，具有良好的生物相容性、生物降解性，且無(wú)毒([J] Advanced Drug Delivery Reviews, 2010, 62 (I): 3-11)。各種形式的殼聚糖創(chuàng)傷敷料已經(jīng)廣泛開(kāi)發(fā)，如無(wú)紡布、凝膠、膜和支架([J]Biotechnology Advances, 2008, 26
(I): 1-21)。然而純的殼聚糖創(chuàng)傷敷料溶脹比高、降解快和力學(xué)性能差等缺點(diǎn)限制了其在臨床上的應(yīng)用。絲素是一種由家蠶吐絲形成的具有良好力學(xué)性能和生物相容性的天然纖維。絲素微纖維直接來(lái)源于絲素纖維，保持了絲素纖維良好的力學(xué)性能。目前還沒(méi)有將殼聚糖和絲素微纖維復(fù)合制備高力學(xué)性能生物敷料的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明旨在提供一種工藝簡(jiǎn)單、制備具有高力學(xué)性能的殼聚糖/絲素微纖維生物創(chuàng)傷敷料的方法。
[0004]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0005](I)將繭層置于質(zhì)`量分?jǐn)?shù)為0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得的絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干；
[0006](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用0.1~4mol/L NaOH溶液降解3~24h，獲得絲素懸池液，所用的浴比為1: (50~200) (g/ml)；
[0007](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌數(shù)次，棄上清，烘箱烘干后研磨，獲得絲素微纖維；
[0008](4)將殼聚糖溶解于0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為10%~100% ；
[0009](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，通過(guò)室溫風(fēng)干、冷凍干燥或真空干燥等方法制得成型材料；
[0010](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定6~48h，再用去離子水洗滌數(shù)次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0011]本發(fā)明將繭層脫膠獲得的絲素蛋白纖維，再用NaOH溶液處理，獲得絲素微纖維。將絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，通過(guò)成型加工制得生物創(chuàng)傷敷料。本發(fā)明提供了一種新型生物創(chuàng)傷敷料及其制備方法，制備工藝簡(jiǎn)單、條件溫和、且獲得的生物創(chuàng)傷敷料力學(xué)性能較優(yōu)，濕態(tài)下其彈性模量達(dá)到20.43±2.58MPa，最大彈性強(qiáng)度達(dá)到3.89±0.7IMPa0[0012]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(2)中所采用的降解處理?xiàng)l件為:lmol/L NaOH溶液處理絲素纖維為12h，所用浴比為1:100 (g/ml)。由此獲得的絲素微纖維長(zhǎng)短均一。
[0013]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(3)中所采用的去離子水洗滌次數(shù)為4次。由此能充分除去NaOH殘留，且絲素微纖維回收率最高。
[0014]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(4)中所采用的絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量比為100%。由此制得的生物創(chuàng)傷輔料彈性模量最大。
[0015]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(5)中所采用的成型方法為室溫風(fēng)干法。由此制備工藝更加簡(jiǎn)單、成本更低，生物創(chuàng)傷敷料的性能更優(yōu)。
[0016]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(6)中甲醇固定時(shí)間為24h。由此本發(fā)明制得力學(xué)性能更好的生物創(chuàng)傷敷料。
[0017]作為優(yōu)選，本發(fā)明所述步驟(6)中所采用的去離子水洗滌次數(shù)為4次。由此本發(fā)明能充分除去甲醇?xì)埩簦频玫纳飫?chuàng)傷敷料有更好的安全性能和生物相容性。
[0018]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果:
[0019]運(yùn)用堿解法獲得絲素微纖維，該微纖維長(zhǎng)短均一。在不添加任何有毒化學(xué)交聯(lián)劑的情況下，制備生物創(chuàng)傷敷料，工藝簡(jiǎn)單，安全性好。本發(fā)明制備的生物創(chuàng)傷敷料的特點(diǎn)是具有高力學(xué)性能。本發(fā)明提供了一種制備高力學(xué)性能生物創(chuàng)傷敷料的方法，且該輔料具有良好生物相容性，能夠?qū)?chuàng)面進(jìn)行有效修復(fù)。 【具體實(shí)施方式】
[0020]下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的解釋而本發(fā)明并不局限于以下實(shí)施例。
[0021]實(shí)施例1
[0022]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0023](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0024](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用0.1~4mol/L NaOH溶液降解3~24h，獲得絲素懸濁液。本發(fā)明可以將步驟(1)中的絲素纖維置于一定濃度的NaOH溶液中降解一定時(shí)間，獲得絲素微纖維:所用NaOH濃度為0.1~4mol/L，優(yōu)選為0.5~2mol/L，最佳為Imol/L;所用的浴比為1: (50~200) (g/ml)，優(yōu)選1: (75~150)，最佳為1:100 ;所用時(shí)間為3~24h,優(yōu)選6~18h,最佳為12h。
[0025](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌數(shù)次，棄上清，烘箱烘干后研磨獲得絲素微纖維。本發(fā)明可以將步驟(2)中的絲素懸濁液用去離子水洗滌I~10次，優(yōu)選3~6次,最佳為4次。
[0026](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為10%~100%，優(yōu)選為70%~100%，最佳為100%。
[0027](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。本發(fā)明可以將步驟(4)中獲得的混合溶液通過(guò)室溫風(fēng)干、冷凍干燥或真空干燥等方法，制得成型材料，優(yōu)選室溫風(fēng)干和冷凍干燥，最佳方式為室溫風(fēng)干。[0028](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定6~36h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。甲醇固定時(shí)間為6~48h優(yōu)選12~36h,最佳為24h。去離子水洗滌次數(shù)2~6次，優(yōu)選為4次。
[0029]實(shí)施例2
[0030]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0031](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0032](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用0.lmol/L NaOH溶液降解24h，獲得絲素懸濁液，所用浴比為1:50 (g/ml)。
[0033](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌I次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0034](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比例10%。
[0035](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。
[0036](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定6h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0037]實(shí)施例3
[0038]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0039](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0040](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解24h，獲得絲素懸濁液，所用浴比為1:100 (g/ml)O
[0041](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0042](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為50%。
[0043](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。
[0044](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0045]實(shí)施例4
[0046]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0047](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0048](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用4mol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用浴比為1:100 (g/ml)O
[0049](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。[0050](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比80%。
[0051](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。
[0052](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0053]實(shí)施例5
[0054]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0055](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0056](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用4mol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用浴比為1:100 (g/ml)O
[0057](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0058](4) 將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為80%。
[0059](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。
[0060](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0061]實(shí)施例6
[0062]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0063](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0064](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1:100 (g/ml)。
[0065](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0066](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為100%。
[0067](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，置于室溫條件下風(fēng)干，制得成型材料。
[0068](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩簦罱K制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0069]實(shí)施例7
[0070]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0071](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0072](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解24h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1:200 (g/ml)。
[0073](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0074](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為60%。
[0075](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，冷凍干燥，制得成型材料。
[0076](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0077]實(shí)施例8
[0078]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0079](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0080](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1:100 (g/ml)。
[0081](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌4次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0082](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為100%。
[0083](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，冷凍干燥，制得成型材料。
`[0084](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定12h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩簦罱K制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0085]實(shí)施例9
[0086]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0087](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0088](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1:50 (g/ml)。
[0089](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌6次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0090](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為80%。
[0091](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，冷凍干燥，制得成型材料。
[0092](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定24h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0093]實(shí)施例10
[0094]本實(shí)施例生物創(chuàng)傷敷料的制備方法依次包括如下步驟。
[0095](I)稱(chēng)取IOg剪碎的繭層于0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干。
[0096](2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用lmol/L NaOH溶液降解12h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為1:100 (g/ml)。
[0097](3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌6次，棄上清，烘箱烘干后研磨，制得絲素微纖維。
[0098](4)將0.4g殼聚糖溶解于20ml0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻。其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為50%。
[0099](5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，冷凍干燥，制得成型材料。
[0100](6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定34h，然后用去離子水洗滌4次除去甲醇?xì)埩?，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
[0101]最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的幾個(gè)具體實(shí)施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開(kāi)的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，`均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，具體步驟如下: (1)將繭層置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的Na2CO3沸水溶液中脫膠兩次，每次30min，獲得的絲素纖維，用去離子水沖洗后烘箱烘干； (2)將步驟(1)中獲得的絲素纖維用0.1~4mol/L NaOH溶液降解3~24h，獲得絲素懸濁液，所用的浴比為I: (50~200) (g/ml)； (3)將步驟(2)中獲得的絲素懸濁液用去離子水洗滌數(shù)次，棄上清，烘箱烘干后研磨，獲得絲素微纖維； (4)將殼聚糖溶解于0.3mol/L乙酸溶液中，然后將步驟(3)中獲得的絲素微纖維添加到殼聚糖溶液中，混合均勻，其中絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量的比為10%~100%; (5)將步驟(4)中獲得的混合溶液置于模具中攤開(kāi)，通過(guò)室溫風(fēng)干、冷凍干燥或真空干燥等方法制得成型材料； (6)將步驟(5)獲得的成型材料用甲醇固定6~48h，再用去離子水洗滌數(shù)次除去甲醇 殘留，最終制得生物創(chuàng)傷敷料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中所采用的降解處理?xiàng)l件為:lmol/L NaOH溶液處理絲素纖維為12h,所用浴比為l:100(g/ml)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中所采用的去離子水洗滌次數(shù)為4次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中所采用的絲素微纖維質(zhì)量占?xì)ぞ厶琴|(zhì)量比為100%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中所采用的成型方法為室溫風(fēng)干法。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中甲醇固定時(shí)間為24h。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲素基生物創(chuàng)傷敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中所采用的去離子水洗滌次數(shù)為4次。
【文檔編號(hào)】A61L15/28GK103705970SQ201310733669
【公開(kāi)日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月10日
【發(fā)明者】朱良均, 施李楊, 許宗溥, 楊明英, 張海萍 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)