一種載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域，特別涉及一種載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)皮膚因高溫燙傷或燒傷時，傷口組織暴露，產(chǎn)生膿血，為細(xì)菌提供了濕潤的生存環(huán)境，傷口很難自愈。理想的燒傷創(chuàng)面敷料應(yīng)具有以下特點:1.具有良好的生物相容性；2.屬于半閉合或閉合性質(zhì)；3.可以在創(chuàng)面上形成良好的透水、透氣功能；4.能為創(chuàng)面創(chuàng)造一個微濕、微酸、低氧環(huán)境。目前國內(nèi)已有的敷料材料主要包括普通植物纖維，羧甲基纖維素類，殼聚糖；但普遍存在產(chǎn)品種類和功能單一、沒有形成系列產(chǎn)品、功能性缺陷等諸多問題，因此有必要研宄開發(fā)新型燒傷敷料并賦予其優(yōu)異的性能和臨床功效。
[0003]細(xì)菌纖維素(Bacterial cellulose，BC)是由一定的微生物(主要為細(xì)菌)產(chǎn)生的細(xì)胞外纖維素，木醋桿菌(Acetobacter xylinum)是目前生產(chǎn)細(xì)菌纖維素的主要用菌。細(xì)菌纖維素的微纖維直徑只有40-60 nm，是自然界中天然存在的精細(xì)納米材料，具有獨特的性質(zhì):(1)具有高化學(xué)純度和高結(jié)晶度；(2)具有很強(qiáng)的持水能力，未經(jīng)干燥的細(xì)菌纖維素持水能力達(dá)1000%以上，冷凍干燥后持水能力仍達(dá)600% ; (3)具有較高的生物相容性和生物可降解性，自然環(huán)境中，在酸性、微生物以及纖維素酶催化等條件下可以最終降解成單糖等小分子物質(zhì)；(4)纖維直徑在0.01-0.1 m之間，彈性模量為一般植物纖維的數(shù)倍至十倍以上，并且抗拉強(qiáng)度高；(5)細(xì)菌纖維素生物合成時具有可調(diào)控性，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件，可得到化學(xué)性質(zhì)有差異的細(xì)菌纖維素。目前，細(xì)菌纖維素在食品、聲音振動膜、造紙、醫(yī)學(xué)材料等方面具有廣泛的應(yīng)用。細(xì)菌纖維素雖然具有很多優(yōu)異的性能，但其自身沒有抗菌性，對傷口愈合的促進(jìn)效果不明顯，影響了細(xì)菌纖維素的應(yīng)用和發(fā)展。
[0004]海藻酸鈉是從褐藻類的海帶或馬尾藻中提取的一種天然高分子材料，具有促進(jìn)傷口愈合、保濕、生物相容性好、可被人體吸收等功能。應(yīng)用在醫(yī)用輔料上的一般是海藻酸的鈣鹽，當(dāng)其與傷口膿血接觸后，會形成一層濕潤的水凝膠，為傷口提供的潮濕的愈合環(huán)境，對創(chuàng)面起到保護(hù)作用，并通過刺激傷口巨噬細(xì)胞的活化來增強(qiáng)創(chuàng)面抗治病微生物的防御能力，并且避免了傳統(tǒng)輔料在更換時與傷口粘連引起二次感染，有效地促進(jìn)了傷口愈合。此夕卜，研宄表明，海藻酸鈉可以有效地控制藥物的釋放，在慢性傷口的治療領(lǐng)域有很廣闊的應(yīng)用前景。但單獨應(yīng)用時黏附性較差、脆性大、力學(xué)性能差，使其應(yīng)用受到限制。
[0005]磺胺啼啶銀(Silver Sulfadiazine)別名燒傷寧，為預(yù)防、治療燒傷創(chuàng)面感染的常用藥物，遇液體后可分解為磺胺嘧啶及銀離子，磺胺嘧啶通過對膿液中PABA (對氨苯甲酸)競爭性作用抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成；銀離子能與細(xì)菌體內(nèi)脫氧核糖核酸相結(jié)合起到抗菌作用?；前粪奏ゃy抗菌譜廣，對多數(shù)革蘭陽性菌和陰性菌有良好的抗菌活性，并可促進(jìn)創(chuàng)面干燥、結(jié)痂及愈合，用于預(yù)防和治療II度、III度燒傷或者燙傷繼發(fā)的創(chuàng)面感染。目前臨床多將其與醫(yī)用輔料等結(jié)合制成軟膏涂抹傷口處，存在著涂抹不均勻、刺激創(chuàng)面、滲透性差、容易污染變質(zhì)、易粘連等缺點，不利于傷口愈合。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]發(fā)明目的:針對現(xiàn)有技術(shù)中存在問題，本發(fā)明的目的是提供一種載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的制備方法，將磺胺嘧啶銀，細(xì)菌纖維素與海藻酸鈉進(jìn)行復(fù)合，原料得到100%利用，制備的復(fù)合材料復(fù)合抗菌敷料具有良好的滲透性、生物相容性、吸水和保水性、力學(xué)性能和抗菌性，既彌補(bǔ)了細(xì)菌纖維素、海藻酸鈉和磺胺嘧啶銀材料單獨使用時的不足，又保持了各自獨特的優(yōu)異性質(zhì)，在醫(yī)用輔料領(lǐng)域有很大的應(yīng)用潛力。
[0007]技術(shù)方案:為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
一種載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的制備方法，包括以下操作步驟:
1)將活化后的細(xì)菌纖維素生產(chǎn)菌接入種子培養(yǎng)基培養(yǎng)，再按照5-10%的接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，充分混合均勻后，放置在30 ± 2 °C恒溫培養(yǎng)箱中，靜置發(fā)酵1-2周，獲得細(xì)菌纖維素濕膜；
2)將細(xì)菌纖維素濕膜清洗后通過機(jī)械方法打漿成均相懸浮液；
3)配制濃度為l_4wt%的海藻酸鈉溶液；
4)將細(xì)菌纖維素均漿與海藻酸鈉溶液混合，磁力攪拌混合均勻后，在避光條件下加入磺胺嘧啶銀，繼續(xù)攪拌至磺胺嘧啶銀完全分散，得到混合凝膠；
5)將混合凝膠超聲處理3-5min進(jìn)行脫泡，然后分別取0.1-0.5mL加入到48或24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿模具中；
6)配制2-5%的CaCl2溶液，將該溶液置于微孔噴壺中，向模具中凝膠表面噴灑，待凝膠表面交聯(lián)固化后，將CaCl2S液倒入模具中，固化1-5小時；
7)取出復(fù)合凝膠，用去離子水反復(fù)清洗干凈，用濾紙吸掉表面水分，-80- -40°C冷凍干燥后得載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料。
[0008]所述的菌種為醋酸菌屬中的木醋桿菌。
[0009]所述的細(xì)菌纖維素均相懸浮液濃度為50_100g/L。
[0010]所述的細(xì)菌纖維素均漿與海藻酸鈉溶液的質(zhì)量比為1~4:1。
[0011]在混合磺胺嘧啶銀過程中采用冰浴和避光的條件，防止磺胺嘧啶銀變質(zhì)。
[0012]磺胺嘧啶銀的質(zhì)量比為0.008%-0.1%。
[0013]均相混合液的過濾是在-0.08 MPa至-0.1MPa下的減壓過濾。
[0014]所述的制備方法所獲得的載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料。
[0015]有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點是:
(I)本發(fā)明所獲得的載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料，克服了細(xì)菌纖維素不具有抗菌性，海藻酸鈉黏著性差、脆性大等問題，具有良好的生物相容性、抗菌性和力學(xué)性能，使敷料完好的貼附在傷口上，具有殺菌、消炎、止血、止痛減少感染和促進(jìn)傷口加速愈合等功效。
[0016](2)本發(fā)明所獲得的載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料，是以細(xì)菌纖維素和海藻酸鈉復(fù)合材料作為基底呈超精細(xì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，與其他高分子材料如殼聚糖、明膠等相比較，在力學(xué)性能、透氣性、親水性和持水性等方面均具有顯著的提高。
[0017](3)為傷口愈合提供了良好的潮濕環(huán)境，容易更換，避免了二次創(chuàng)傷。
[0018](4)本發(fā)明所獲得的載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料，有很好的緩釋能力，當(dāng)敷料與傷口的膿血接觸時，其中的Ca2+與膿血中的Na +發(fā)生離子交換，敷料形成一層濕潤的水凝膠，使磺胺嘧啶銀釋放到創(chuàng)面；與其他工藝如噴涂技術(shù)等相比較，本發(fā)明是以細(xì)菌纖維素和海藻酸鈉復(fù)合材料作為藥物磺胺嘧啶銀的載體材料，磺胺嘧啶銀均勻的分散在載體材料的表面和內(nèi)部，可使被承載的藥物緩慢釋放，同時抗菌輔料可根據(jù)傷口的大小和創(chuàng)傷程度，有效地控制釋放速度和釋放量，增強(qiáng)磺胺嘧啶銀的效能，促進(jìn)傷口的愈合，減少病人的疼痛。
[0019](5)本發(fā)明的制備過程不涉及有毒化學(xué)試劑和高溫，過程簡單、綠色、易操作，可工業(yè)化生產(chǎn)，在醫(yī)用輔料領(lǐng)域有很大的應(yīng)用潛力。
【附圖說明】
[0020]圖1分別為細(xì)菌纖維素/海藻酸鈉復(fù)合材料(a和b)和實施例1載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料(c和d)的SEM圖片；圖a和c為放大2000倍的SEM照片，圖b和d為放大5000倍的SEM照片；
圖2是細(xì)菌纖維素/海藻酸鈉復(fù)合材料和載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的FT-1R圖；圖中，a為細(xì)菌纖維素/海藻酸鈉復(fù)合材料的FT-1R圖，b為載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料的FT-1R圖，c為磺胺嘧啶銀的FT-1R圖；
圖3是細(xì)菌纖維素/海藻酸鈉復(fù)合材料(a，c和e)和載磺胺嘧啶銀復(fù)合抗菌敷料(b，d和f)抑菌圈的照片；其中，a和d是大腸桿菌(Escherichia coli)，b和e是白色念珠菌(Candida albicans)，c 和 f 是金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)0
【具體實施方式】
[0021]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，但本發(fā)明不受這些實施例的限制。
[0022]實施例1
將酵母提取物(5g/L)、葡萄糖(5g/L)、磷酸二氫鉀(lg/L)、七水合硫酸鎂(15g/L)和蛋白胨(5g/L)分別配制成10mL的種子培養(yǎng)基和200mL的發(fā)酵培養(yǎng)基，無須調(diào)節(jié)pH值。將種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基放入滅菌鍋中，溫度為121°C、壓強(qiáng)為0.1MPa，滅菌20分鐘，待培養(yǎng)液