一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法，以補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用黃曲霉ATCC3089和雅致小克銀漢霉CICC4025為生物催化劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取和硅膠分離與純化后得到在補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚A環(huán)C2”,C3”位點(diǎn)形成兩個(gè)羥基的衍生物，本方法工藝步驟簡單、安全性高、反應(yīng)高效專一，本發(fā)明不僅克服了目前二氫黃酮類化合物衍生物化學(xué)制備方法中反應(yīng)效率低、大量使用有機(jī)溶劑、產(chǎn)物分離純化困難等問題，而且，制備得到的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚的羥基化衍生物是結(jié)構(gòu)新穎的新化合物，對(duì)正常細(xì)胞有一定的促進(jìn)增殖作用，表現(xiàn)出一定的抗腫瘤活性，水中的溶解度也有所增加。
【專利說明】一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物制藥及醫(yī)藥工程領(lǐng)域，尤其是一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法。
【背景技術(shù)】
[0002]補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚(Bavachinin)是一種二氫黃酮類化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是在二氫黃酮骨架的A環(huán)7號(hào)位取代了一個(gè)甲氧基，A環(huán)6號(hào)位取代了一個(gè)異戊烯基。研究表明，該化合物具有抗氧化、抗細(xì)菌、抗真菌、抗炎、抗腫瘤、退熱性、止痛等多種生物和藥理活性。目前主要從天然植物Psoralea corylifolia中分離得到,但由于較低的分離和純化效率，生產(chǎn)成本較高，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用受到極大限制。因此，通過結(jié)構(gòu)修飾和改造獲得結(jié)構(gòu)多樣的新化合物，是提高該化合物生物利用度的重要方法。
[0003]對(duì)于二氫黃酮類化合物，羥基基團(tuán)的存在和位點(diǎn)與它的藥理活性密切相關(guān)。但利用化學(xué)方法制備這類芳香族化合物的羥基化衍生物需要經(jīng)過多個(gè)步驟，反應(yīng)效率較低。由于C-H轉(zhuǎn)化為C-OH的反應(yīng)是許多芳香族化合物氧化代謝的關(guān)鍵特征，因此，可以通過微生物轉(zhuǎn)化法實(shí)現(xiàn)這類化合物的一步羥基化。
[0004]目前，尚無利用微生物菌種制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的生物合成方法的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物及合成方法，本方法具有反應(yīng)條件溫和、易于控制、無污染、目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)率高、分離純化過程簡單、成本低廉、安全性高等優(yōu)點(diǎn)`。
[0006]本發(fā)明實(shí)現(xiàn)目的的技術(shù)方案如下:
[0007]一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物，結(jié)構(gòu)式如下:
[0008]
【權(quán)利要求】
1.一種補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物，其特征在于，結(jié)構(gòu)式如下:

2.一種制備權(quán)利要求1所述補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:以補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚為底物，采用黃曲霉ATCC3089或雅致小克銀漢霉CICC4025為生物催化劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)，獲得在補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚A環(huán)C2”，C3”位點(diǎn)形成兩個(gè)羥基的衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:步驟如下: ⑴生物催化劑的制備:無菌水制備濃度為IO5-1O8個(gè)/ml的生物催化劑的孢子懸浮液，以5%-15%的接種量接種于新鮮的發(fā)酵培養(yǎng)基中，26-30°C，120-200r/min培養(yǎng)12_48h，得到菌體發(fā)酵液； ⑵轉(zhuǎn)化反應(yīng):向菌體發(fā)酵液中投入溶解的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚，26-30°C，120-2001./min培養(yǎng)24-120h后終止反應(yīng)； ⑶產(chǎn)物的提取與精制:轉(zhuǎn)化反應(yīng)結(jié)束后，抽濾，分離菌絲體和發(fā)酵液，分別用有機(jī)溶劑萃取菌絲體和發(fā)酵液，合并萃取液，干燥，減壓濃縮，濃縮后用硅膠色譜柱分離獲得補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:將步驟⑶獲得的產(chǎn)物是利用有機(jī)溶劑通過重結(jié)晶得到補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚在A環(huán)C2’，C3’位點(diǎn)形成兩個(gè)羥基的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的純品。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述黃曲霉ATCC3089發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成g/L:葡萄糖5_30，玉米漿5_10，NaNO31-2, KH2PO41-2, K2HP042_3，MgSO40.5-1, FeSO40.02-1, KC10.5-1, ρΗ7.0-8.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述雅致小克銀漢霉CICC4025發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基組成g/L:葡萄糖5-30，玉米漿5-35，(NH4)2S042-8,酵母粉 1-4，ρΗ4.0-6.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚投入的終濃度為:0.01-0.lg/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述的用于萃取處理的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、正丁醇、甲醇或乙酸丁酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物的方法，其特征在于:所述用于重結(jié)晶的有機(jī)溶劑為石油醚、丙酮、正己烷、乙腈或甲醇。
10.權(quán)利要求1所述的補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚羥基化衍生物作為制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103724309SQ201310733691
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年12月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月23日
【發(fā)明者】王敏, 駱健美, 申雁冰, 梁奇坤, 鄭宇 , 王家明 申請(qǐng)人:天津科技大學(xué)