專利名稱：一種酶法制備l-二氫乳清酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶法制備L- 二氫乳清酸(I)的方法。
背景技術(shù)：
L-二氫乳清酸，結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于包括下列步驟 O以氰酸鹽、L-天冬氨酸或者L-天冬氨酸鹽為原料，在堿性條件下進(jìn)行反應(yīng)，形成N-氨甲酰-L-天冬氨酸，氰酸鹽與L-天冬氨酸或者L-天冬氨酸鹽的摩爾比為f I. 4:1 ； 2)以二氫乳清酸酶或含有二氫乳清酸酶的菌體為催化劑，在弱酸性條件下，催化步驟I)得到的N-氨甲酰-L-天冬氨酸環(huán)合得到含L-二氫乳清酸的溶液；3)將所得含L-二氫乳清酸的溶液分離，濃縮，結(jié)晶，獲得L- 二氫乳清酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟I)中，所述的L-天冬氨酸鹽為L-天冬氨酸的鈉、鉀鹽中的任意一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟I)中，所述的氰酸鹽為氰酸鈉或氰酸鉀。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟I)中，所述的堿性條件為PH8. 5^10. O。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟2)中，所述的菌體為大腸桿菌K-12 ;所述的二氫乳清酸酶為含有二氫乳清酸酶基因pET-22b (+) -DHO-his質(zhì)粒的重組菌株疋co7iRosetta (DE3)所表達(dá)、純化的二氫乳清酸酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟2)中，所述的弱酸性條件為ρΗ2. (Γ4. O。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的酶法制備L-二氫乳清酸的方法，其特征在于步驟2)中，二氫乳清酸酶或含有二氫乳清酸酶的菌體與N-氨甲酰-L-天冬氨酸的重量比為I: f 80。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種酶法制備L-二氫乳清酸的方法。該方法包括下列步驟采用氰酸鹽和L-天冬氨酸及其鹽為原料，在堿性條件下進(jìn)行反應(yīng)，形成N-氨甲酰-L-天冬氨酸；以二氫乳清酸酶或含有二氫乳清酸酶的菌體為催化劑，在弱酸性條件下，催化N-氨甲酰-L-天冬氨酸環(huán)合制備L-二氫乳清酸；將所得二氫乳清酸酶轉(zhuǎn)化溶液經(jīng)分離，濃縮，結(jié)晶得L-二氫乳清酸。本方法采用二氫乳清酸酶催化N-氨甲酰-L-天冬氨酸制備L-二氫乳清酸，原料制備、反應(yīng)體系簡單，產(chǎn)物分離容易，避免了化學(xué)合成方法中原料的難以獲取的缺點，二氫乳清酸酶活性高、反應(yīng)時間短。
文檔編號C12P17/12GK102787147SQ20121031699
公開日2012年11月21日 申請日期2012年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月31日
發(fā)明者周佳棟, 姚琴, 張煜, 曹飛, 武紅麗, 黃榮醒 申請人:南京工業(yè)大學(xué)