一種維生素b6衍生物的合成方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于藥品技術領域，尤其涉及一種維生素B6衍生物的合成方法。
【背景技術】
[0002]口服多肽蛋白類藥物主要受兩方面的局限：一是腸胃中的蛋白酶和肽酶極易降解藥物；二是該類藥物一般分子量比較大，并且在小腸上皮細胞上沒有特定的吸收途徑。針對上述限制，現(xiàn)階段有處方組成、包囊技術、大分子復合以及化學修飾等方法，用來改善多肽蛋白質類藥物口服吸收。這些方法都可以提高口服蛋白藥物的生物利用度，但各有不足。處方組成中的脂肪酸微乳會改變腸胃黏膜表面的完整性，包囊技術中的多糖類結構在吸收效率上還有待提高，大分子復合物以及化學修飾會改變多肽蛋白質類藥物的分子結構形態(tài)。維生素B6在腸壁內有特定的吸收途徑，由于其分子量比較大（135f5Da)，不能通過簡單的擴散作用被腸胃吸收。在腸胃中，維生素B6能與內生因子（intrinsic factor, IF)形成復合物，該復合物能被在小腸上皮細胞識別并吸收。被小腸上皮細胞吸收后，在血液中，IF會與維生素B6分離，并釋放維生素B6。因此，可以將維生素B6與多肽類藥物直接或者與納米載體連接，利用其吸收途徑，達到口服多肽的給藥效果。
[0003]但是與之相應的維生素B6衍生物的合成方法還不完善，合成較為困難且合成條件要求較高。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明就是針對上述問題，提供一種方便合成且合成條件要求低的一種維生素B6衍生物的合成方法。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案。
[0006]一種維生素B6衍生物的合成方法包括下步驟。
[0007](1 )、取0. 6mg維生素B6溶解于5ml DMS0中，在裝有溫度計、回流冷凝管、干燥管的500mL三頸瓶中加入新制銅粉6. 6g, 0. 103mol，喹啉72mL，N2保護反應加熱至200° C，攪拌3h ;投入4~8倍摩爾當量的⑶I ;在30°C下，超聲水浴反應半小時后，加入300ul DIEA及900ul腐胺；在301：下，超聲水浴反應2h，加入20ml乙酸乙酯終止反應，8000r/min離心5min，去上清；使用氮吹儀吹干沉淀物，得到維生素B6-羰基-腐胺的合成樣品；
(2)、冰浴下將三乙胺1.8mL，12.8mmol緩慢滴入8mL丙酮中，溶液澄清，再加入11. 0g, 3. 2mmol和戊二酸酐1. 37g, 12mmol，使反應溫度保持在15oC，攪拌，將樣品溶解在甲醇溶液中，濃度為5mg/ml ;使用娃膠粒徑為5um-10um的玻璃基薄板層析，薄板的娃膠層厚度為3mm ;薄板裁制成5cm*10cm的規(guī)格，置于110°C的烘箱中鼓風活化干燥12h ;將45%的正丁醇、30%的異丙醇、25%去離子水按對應的體積比混合均勻，并加入2%的氨水溶液，配制層析液；在30°C下，層析分離lh后，計算各組分的Rf值；
(3)、將5um-10um的硅膠粉于110°C，高溫活化12h;取45ml正丁醇、30ml異丙醇、25ml60去離子水置于平底燒瓶中混合，洗脫前，加入2%的氨水混合靜置5min，得到硅膠柱層析洗脫液；稱取干燥的合成樣品，溶解于未加入氨水的洗脫液，濃度為10mg/ml ;稱取
3.8g 75um-100um的娃膠粉,加入研缽中，再加入13ml的正丁醇溶液，攪勻并裝入層析柱中，形成lcm*5cm的硅膠層析柱；取1ml樣品上樣，上樣后立即洗脫，因為維生素B6及其衍生物呈現(xiàn)顯著的紅色，所以直接根據洗脫液的顏色分別收集；洗脫后，收集各分離組分，既得。
[0008]作為一種優(yōu)選方案，取0. 2mg維生素B6溶解于5ml DMS0中，投入6倍摩爾當量的CDI ;在301：下，超聲水浴反應半小時后，加入300ul DIEA及900ul腐胺。
[0009]本發(fā)明有益效果：
本發(fā)明建立了維生素B6-羰基-腐胺的合成和檢測方法，通過羰基唑類化合物活化維生素120 B6的核糖5-0H，再與腐胺反應生成維生素B6-羰基-腐胺。通過超聲水浴輔助反應進行，該反應合成所需要的時間大幅度減少。通過TLC檢測維生素B6-羰基-腐胺的合成產物，顯示目的產物的灰度值占比超過80%，說明該合成方法可以較好的得到目的產物。最后，通過硅膠柱層析對合成產物進行了分離純化，純化后目的產物在TLC檢測中的灰度值占比超過95%，說明通過硅膠柱層析成功將維生素B6-羰基-腐胺的合成產物進行了分離純化。
【具體實施方式】
[0010]一種維生素B6衍生物的合成方法包括下步驟。
[0011](1)、取0.6mg維生素B6溶解于5ml DMS0中，在裝有溫度計、回流冷凝管、干燥管的500mL三頸瓶中加入新制銅粉6. 6g, 0. 103mol，喹啉72mL，N2保護反應加熱至200° C，攪拌3h ;投入4~8倍摩爾當量的⑶I ;在30°C下，超聲水浴反應半小時后，加入300ul DIEA及900ul腐胺；在301：下，超聲水浴反應2h，加入20ml乙酸乙酯終止反應，8000r/min離心5min，去上清；使用氮吹儀吹干沉淀物，得到維生素B6-羰基-腐胺的合成樣品；
(2)、冰浴下將三乙胺1.8mL，12.8mmol緩慢滴入8mL丙酮中，溶液澄清，再加入
11.Og, 3. 2mmol和戊二酸酐1. 37g, 12mmol，使反應溫度保持在15oC，攪拌，將樣品溶解在甲醇溶液中，濃度為5mg/ml ;使用娃膠粒徑為5um-10um的玻璃基薄板層析，薄板的娃膠層厚度為3mm ;薄板裁制成5cm*10cm的規(guī)格，置于110°C的烘箱中鼓風活化干燥12h ;將45%的正丁醇、30%的異丙醇、25%去離子水按對應的體積比混合均勻，并加入2%的氨水溶液，配制層析液；在30°C下，層析分離lh后，計算各組分的Rf值；
(3)、將5um-10um的硅膠粉于110°C，高溫活化12h;取45ml正丁醇、30ml異丙醇、25ml60去離子水置于平底燒瓶中混合，洗脫前，加入2%的氨水混合靜置5min，得到硅膠柱層析洗脫液；稱取干燥的合成樣品，溶解于未加入氨水的洗脫液，濃度為10mg/ml ;稱取
3.8g 75um-100um的娃膠粉,加入研缽中，再加入13ml的正丁醇溶液，攪勻并裝入層析柱中，形成lcm*5cm的硅膠層析柱；取1ml樣品上樣，上樣后立即洗脫，因為維生素B6及其衍生物呈現(xiàn)顯著的紅色，所以直接根據洗脫液的顏色分別收集；洗脫后，收集各分離組分，既得。
[0012]取(λ 2mg維生素B6溶解于5ml DMS0中，投入6倍摩爾當量的CDI ;在30°C下，超聲水浴反應半小時后，加入300ul DIEA及900ul腐胺。
[0013]維生素B6分子式為C63H88CoN14014P，對應分子質量為135?a ;維生素B6-羰基-腐胺的分子式為C68H98CoN16015P，對應分子質量為1469Da。⑶I是咪唑的衍生物，其咪唑結70構中具有一個閉合的大31鍵，且其中一個N原子的未成鍵的sp2軌道上有一對孤對電子。CDI在與不同官能團的反應過程中表現(xiàn)出不同的活性，相對于仲醇，