四氫異喹啉-3-羧酸修飾的targd七肽、其合成、抗血栓活性和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了通式I代表的3種抗血栓擬肽，提供了它們的分子模擬方法，提供了它們的制備方法，提供了它們對糖蛋白IIb/IIIa和P-選擇素表達的抑制作用，提供了它們的抗血小板聚集作用，進一步提供了它們在大鼠血栓形成模型上的抗血栓作用。因而本發(fā)明提供了通式I代表的3種抗血栓擬肽作為抗血栓劑的臨床應(yīng)用前景。式中AA代表Ser或Val或Phe殘基。
【專利說明】四氫異喹啉-3-羧酸修飾的TARGD七肽、其合成、抗血栓活性和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及3種新型抗血栓擬肽，涉及它們的分子模擬方法，涉及它們的制備方法，涉及它們對糖蛋白Ilb/IIIa和P-選擇素表達的抑制作用，涉及它們的抗血小板聚集作用，進一步涉及它們在大鼠血栓形成模型上的抗血栓作用。因而本發(fā)明涉及3種新型抗血栓擬肽作為抗血栓劑的臨床應(yīng)用前景。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]在全球范圍內(nèi)，血栓性疾病的發(fā)病率和死亡率都居首位。血栓患者體內(nèi)的血栓有兩種，一種是由血小板通過纖維蛋白原與白血球交聯(lián)構(gòu)成的血栓，另一種是由血小板通過纖維蛋白原與血小板交聯(lián)構(gòu)成的血栓。
[0003]P-選擇素以溶解型P-選擇素和不溶型P-選擇素兩種形態(tài)存在。在血小板活化狀態(tài)下，不溶型P-選擇素從血小板內(nèi)膜層快速移動到活化的血小板的表面表達并被切割為溶解型P-選擇素進入血液循環(huán)。溶解型P-選擇素介導(dǎo)形成大量穩(wěn)定的由血小板通過纖維蛋白原與白血球交聯(lián)構(gòu)成的血栓。抑制不溶型P-選擇素表達并被切割為溶解型P-選擇素是設(shè)計抗血栓藥物的重要靶點。
[0004]血小板被激活時糖蛋白Ilb/IIIa外化，與纖維蛋白原結(jié)合，使血小板通過纖維蛋白原與血小板交聯(lián)構(gòu)成血栓。研究糖蛋白Ilb/IIIa與纖維蛋白原α鏈及纖維蛋白原Y鏈的結(jié)合方式，確定了 RGDS，RGDV和RGDF是血小板聚集過程中導(dǎo)致纖維蛋白原被糖蛋白Ilb/IIIa識別并與纖 維蛋白原結(jié)合的關(guān)鍵序列。采用RGDF或RGDS或RGDV的相關(guān)序列占據(jù)血小板活化狀態(tài)下糖蛋白Ilb/IIIa上纖維蛋白原的結(jié)合位點是發(fā)明抗血栓藥物的重要手段。
[0005]因為現(xiàn)有的抗血栓藥物設(shè)計或單純性針對P-選擇素或單純性針對糖蛋白IIb/Illa，還因為單一地抑制溶解型P-選擇素介導(dǎo)的由血小板通過纖維蛋白原與白血球交聯(lián)構(gòu)成的血栓或單一地抑制糖蛋白Ilb/IIIa介導(dǎo)的血小板通過纖維蛋白原與血小板交聯(lián)構(gòu)成的血栓都得不到滿意的臨床療效。
[0006]為適應(yīng)臨床要求，發(fā)明人提出發(fā)展可同時針對兩種血栓的新型抗血栓劑。在分析了 P-選擇素的結(jié)構(gòu)，定義了它的活性口袋和確定了可與活性口袋對接的3S-四氫異喹啉-3-羧酸的基礎(chǔ)上，發(fā)明人運用分子建模技術(shù)設(shè)計了合乎要求的可抑制糖蛋白Ilb/IIIa和P-選擇素表達的三種新型擬肽，N-[(3S)-1，2，3，4-四氫異喹琳 _3_ 甲酸基]-Thr-Arg-Gly-Asp (Ser)-Ser, N-[ (3S) -1, 2, 3,4-四氧異喧琳-3-甲?；鵠-Thr-Arg-Gly-Asp(Val)-Val 和 N_[(3S)-1，2，3，4-四氫異喹啉 _3_ 甲?；鵠-Thr-Arg-Gly-Asp(Phe)-Phe。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的第一個內(nèi)容是通式I代表的三種新型擬肽，式中AA代表Ser或Val或Phe。
[0008]
【權(quán)利要求】
1.通式I代表的3種擬肽，式中AA代表Ser或Val或Phe殘基。

2.制備權(quán)利要求1的通式I代表的三種擬肽的方法，該方法由以下步驟構(gòu)成: 1)在甲醛存在下L-Phe在濃鹽酸中合成為(3S)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸； 2)在NaOH水溶液中用(Boc)OJf(3S)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸轉(zhuǎn)化為(3S) -N-Boc-l, 2, 3,4-四氫異喹啉 _3_ 羧酸； 3)在無水THF中，在二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和N-羥基苯并三唑(HOBt)存在下將(3S) -N-Boc-l, 2, 3,4-四氫異喹啉 _3_ 羧酸與 Thr-OBzl 縮合為 N_[ (3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；鵠-Thr-OBzl ； 4)在2NNaOH水溶液中將N_[ (3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫異喹啉_3_甲酰基]-Thr-OBzI 皂化為 N-[(3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫異喹啉 _3_ 甲?；鵠-Thr ； 5)采用液相方法從C端向N端逐步接肽制備HCl.Ala-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl)-OBzI ; 6)在無水THF中，在DCC和HOBt存在下N-[ (3S) -N-Boc-1，2，3，4-四氫異喹啉_3_甲?；鵠-Thr 與 HCl.Ala-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -OBzl 縮合為 N_[ (3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫!異喧琳 _3_ 甲酸基]-Thr-Ala-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-OBzl ； 7)在2NNaOH水溶液中將N-[(3S)-N-Boc-1，2，3，4-四氫異喹啉_3_甲?；鵠-Thr-AIa-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-OBzl 皂化為 N_[ (3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲酰基]-Thr-Ala-Arg (NO2)-Gly-Asp ； 8)在無水THF中，在DCC和HOBt存在下N-[(3S)-N-Boc-1，2，3，4-四氫異喹啉_3_甲酸基]-Thr-Ala-Arg(NO2) -Gly-Asp 與 Ser (Bzl) -OBzl 或 Val-OBzl 或 Phe-OBzl 縮合為N-[(3S) -N-Boc-1，2，3,4-四氫異喹啉-3-甲酰基]-Thr-Ala-Arg (NO2) -Gly-Asp [Ser (Bzl)-OBzl]-Ser (Bzl) -OBzl 或 N_[ (3S) -N-Boc-l, 2, 3,4-四氫異喹啉-3-甲酰基]-Thr-Ala-Arg (NO2)-Gly-Asp(Val-OBzl)-Val-OBzI]- (Val-OBzl)-Val-OBzl 或 N_[(3S)-N-Boc-l,2,3，4-四氧異喧琳-3-甲酸基]-Thr-Ala-Arg (NO2)-Gly-Asp (Phe-OBzl)-Phe-OBzl ； 9)在三氟乙酸溶液中用三氟甲磺酸脫去N-[(3S)-N-Boc-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-甲?；鵠-Thr-Ala-Arg (NO2) -Gly-Asp [Ser (Bzl) -OBzlJ-Ser (Bzl) -OBzl 或N-[(3S) -N-Boc-l, 2, 3,4-四氫異喹啉-3-甲?；鵠-Thr-Ala-Arg(NO2) -Gly-Asp (Val-OBzD-Val-OBzl 或 N_[ (3S)-N-Boc-l，2，3，4-四氫異喹啉 _3_ 甲?；鵠-Thr-Ala-Arg (NO2)-Gly-Asp (Phe-OBzl)-Phe-OBzl 的保護基生成 N_[ (3S)-1，2，3，4-四氫異喹啉 _3_ 甲酸基]-Thr-Ala-Arg-Gly-Asp (Ser)-Ser 或 N_[ (3S)-1, 2, 3,4-四氧異喧琳-3-甲酸基]-Thr-Ala-Arg-Gly-Asp (Val) -Val 或 N_[ (3S) -1,2,3,4-四氧異喧琳-3-甲酸基]-Thr-Ala-Arg-Gly-Asp(Phe)-Phe。
3.權(quán)利要求1的通式I代表的3種擬肽對糖蛋白Ilb/IIIa和P-選擇素表達的抑制作用。
4.權(quán)利要求1的通式I代表的3種擬肽的抗血小板聚集作用。
5.權(quán)利要求1的通式I代表的3種擬肽的抗血栓作用。
6.權(quán)利要求1 的3種抗血栓擬肽在制備抗血栓藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P7/02GK103450343SQ201210181076
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2012年6月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月1日
【發(fā)明者】趙明, 彭師奇, 吳建輝, 王玉記, 楊國棟 申請人:首都醫(yī)科大學(xué)