專(zhuān)利名稱(chēng)：：谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明特別涉及一種谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，屬于飼料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：鋅作為動(dòng)物機(jī)體所必需的微量元素之一，參與體內(nèi)的多種代謝反應(yīng)，對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育起著重要作用。正常動(dòng)物體內(nèi)鋅的總含量約為30ppm，美國(guó)國(guó)家研究理事會(huì)(NRC)推薦仔豬飼料鋅需要量為100ppm，而豬對(duì)鋅的耐受性很強(qiáng)，可達(dá)到正常需要量的2030倍。據(jù)報(bào)道，日糧中添加3000卯m氧化鋅能顯著提高斷奶應(yīng)激仔豬體重、平均日增重和日采食量，降低料重比和斷奶后腹瀉率，有效預(yù)防仔豬斷奶應(yīng)激綜合征。研究表明，鋅的作用效果與其添加形式有一定關(guān)系，在斷奶仔豬的飼糧中添加200500ppm有機(jī)鋅促生長(zhǎng)效果相當(dāng)于20003000ppm氧化鋅。隨著高鋅日糧的普遍使用，人們開(kāi)始關(guān)注高劑量鋅對(duì)機(jī)體的毒副作用以及對(duì)環(huán)境的污染問(wèn)題。當(dāng)鋅過(guò)量時(shí)，一方面造成資源浪費(fèi)，另一方面造成機(jī)體中毒，并且鋅與銅、鐵之間亦存在著復(fù)雜的拮抗作用，任何一種在日糧中含量的改變可能會(huì)影響其他元素的吸收以及引起其互作性質(zhì)的變化，甚至?xí)绊懙秸麄€(gè)機(jī)體生理狀況的改變。飼料的鋅源開(kāi)發(fā)經(jīng)歷了三個(gè)階段。最早添加的鋅源是無(wú)機(jī)態(tài)鋅，如氧化鋅、堿式甘氨酸鋅等。大量的研究認(rèn)為，高劑量氧化鋅可促進(jìn)舌粘膜味蕾細(xì)胞迅速再生，調(diào)節(jié)食欲，抑制腸道某些有害細(xì)菌的生長(zhǎng)和延長(zhǎng)食物在消化道停留時(shí)間，保證了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在腸道的消化吸收，減少了大腸微生物的發(fā)酵而有效抑制仔豬腹瀉，從而提高日增重。Hill和Cromwell(1996)研究表明，高鋅(3000ppm氧化鋅)日糧水平對(duì)仔豬的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。隨后發(fā)現(xiàn)有機(jī)態(tài)礦物鹽較易被動(dòng)物吸收和利用，這主要包括葡萄糖酸鋅、檸檬酸鋅等。有機(jī)鋅更接近于體內(nèi)的作用形式，生物學(xué)效價(jià)要高于無(wú)機(jī)鋅。有機(jī)鋅在消化道中穩(wěn)定存在，不會(huì)與其他物質(zhì)形成阻礙吸收的復(fù)合物，能更有效地由小腸絨毛轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞上皮，然后轉(zhuǎn)化成具有生物學(xué)功能的形式。新型的第三代鋅元素添加劑主要是氨基酸螯合鋅，包括甘氨酸鋅、蛋氨酸鋅和賴氨酸鋅等，其具有良好的生物化學(xué)穩(wěn)定性，由于其位于具有五元環(huán)或六元環(huán)螯合物中心的金屬離子可通過(guò)小腸絨毛刷狀緣，因此易為動(dòng)物吸收，無(wú)毒副作用且生物學(xué)效價(jià)高于無(wú)機(jī)態(tài)鋅，成為一種較為理想的飼料添加劑。但不同的氨基酸配體的絡(luò)(螯)合鋅因?yàn)榕潴w的性質(zhì)不一添加量因鋅來(lái)源不同而差異較大，無(wú)機(jī)鋅添加量較高，有機(jī)鋅添加量相對(duì)較低，仔豬添加時(shí)期一般在斷乳后14周之內(nèi)。但不同氨基酸配體的鋅源具有不同的理化性質(zhì)，特別是水溶性、耐酸能力和油水分配系數(shù)，因?yàn)榛衔锏乃苄约澳退崮芰?huì)影響體內(nèi)的吸收動(dòng)力學(xué)過(guò)程，適宜的油水分配系數(shù)與化合物的抗菌活性有關(guān)?，F(xiàn)在臨床上常用的甘氨酸鋅和蛋氨酸鋅雖然較無(wú)機(jī)態(tài)鋅的生物利用度要高，但是其水中的溶解度高和耐酸能力差(見(jiàn)本
發(fā)明內(nèi)容中的試驗(yàn)結(jié)果)，因此理想的氨基酸螯合鋅既有能保證其體內(nèi)的高生物利用度，此外還要具有較低的水溶性和較強(qiáng)的耐酸能力才能保證微量元素以有機(jī)態(tài)的形式到達(dá)腸道被吸收利用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用。所述的谷氨酸鋅包括谷氨酸與鋅按摩爾比2:l或l:l形成的螯合物。所述的衍生物包括(1)谷氨酸鋅與不同酸形成的不同鹽，如谷氨酸鋅的鹽酸鹽、磷酸鹽和硫酸鹽等；(2)谷氨酸成單酯后與鋅離子形成的內(nèi)絡(luò)鹽或螯合物；(3)N-氨甲酰谷氨酸及不同鹽、酰胺與鋅離子形成的螯合物或鹽；(4)以谷氨酸鋅為基礎(chǔ)形成的不同shiff堿；(5)以谷氨酸鋅為基礎(chǔ)形成的不同酰胺化合物；(6)以谷氨酸和氨基酸中的一種形成的二肽與鋅離子形成的螯合物；(7)谷氨酰胺與鋅離子形成的螯合物或鹽。所述的動(dòng)物包括各種養(yǎng)殖動(dòng)物，如豬、雞、鴨、鵝、肉牛、奶牛、羊、各種魚(yú)蝦類(lèi)、狐、貂、貉等各種人工飼養(yǎng)動(dòng)物。所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，應(yīng)用于動(dòng)物的不同生長(zhǎng)階段。所述的動(dòng)物飼料為全價(jià)配合飼料時(shí)，添加谷氨酸鋅作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑，以飼料重量為基準(zhǔn)，谷氨酸的用量以鋅元素計(jì)，其含量為50500ppm。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用效果。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)谷氨酸鋅具有低水溶性、較強(qiáng)的耐酸能力和高生物利用度，將谷氨酸鋅用作促生長(zhǎng)飼料添加劑，較其它鋅源(包括氧化鋅、堿式氯化鋅和甘氨酸鋅等)具有更高的安全性和抗菌活性，鋅離子的添加量可減少80_90%，可降低生產(chǎn)成本并減少對(duì)環(huán)境的污染、同時(shí)降低高鋅對(duì)動(dòng)物的毒副作用。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例1(1)合成谷氨酸鋅A、10X谷氨酸鈉溶液的配制稱(chēng)取100克谷氨酸鈉(化學(xué)純)溶于1000ml水中；B、14.38%硫酸鋅溶液的配制準(zhǔn)確精量143.8克七水硫酸鋅(化學(xué)純)溶于1000ml于水中;C、將10%谷氨酸鈉溶液和14.38%硫酸鋅溶液各1000ml混合，接著用NaOH溶液調(diào)節(jié)前述混合溶液的PH值調(diào)至7.0，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)，離心，取沉淀，用水懸浮離心洗滌沉淀3遍，接著IO(TC烘干至恒重，得到116.64克谷氨酸鋅，得率為96.09%。(2)對(duì)步驟(1)得到的谷氨酸鋅的谷氨酸和鋅離子的含量分別測(cè)定A、鋅離子含量的測(cè)定精確稱(chēng)取1.0克谷氨酸鋅，加水80ml，然后用0.1MHC1調(diào)pH值至2.0，攪拌至谷氨酸鋅完全溶解，用原子吸收方法測(cè)定溶液中鋅離子的含量，測(cè)得鋅離子濃度為2.776mg/ml。B、谷氨酸的含量測(cè)定精確稱(chēng)取1.0克谷氨酸鋅，加水80ml，然后用0.1MHC1調(diào)pH值至2.O，攪拌至谷氨酸鋅全部溶解后，用氨基酸分析儀測(cè)定谷氨酸的含量，測(cè)得谷氨酸的含量為6.432mg/ml。從而確定谷氨酸鋅中鋅離子和谷氨酸的摩爾比為1:l，谷氨酸鋅中結(jié)晶水含量為7.93%，因此，步驟(1)得到的谷氨酸鋅的分子結(jié)構(gòu)級(jí)為含一個(gè)結(jié)晶水的谷氨酸鋅，分子量為227。(3)步驟(1)得到的谷氨酸鋅的體外抗菌活性研究①試驗(yàn)材料A、培養(yǎng)基LB液體培養(yǎng)基10g胰蛋白胨，5g酵母抽提物和10gNaCl溶于800ml雙蒸水，用1MNaOH調(diào)pH值至7.4后定容至1000mL，高壓滅菌20min;B、菌株大腸桿菌JM109、鼠傷寒沙門(mén)氏菌50772和金黃色葡萄球菌PNB14標(biāo)準(zhǔn)菌株，均購(gòu)自中國(guó)獸藥監(jiān)察所菌種保存中心；C、試管10ml帶蓋玻璃試管；D、藥物ZnO溶液0.2%(以鋅離子計(jì)，用0.01M鹽酸溶解，質(zhì)量/體積百分比濃度，下同)；甘氨酸鋅((C2H4N02)2Zn*H20)溶液0.2%(以鋅離子計(jì))；堿式氯化鋅(Zn5CL2(OH)8.H20):0.2%(以鋅離子計(jì)，用0.01M鹽酸溶解);谷氨酸鋅溶液0.2%(用匿SO溶解，以鋅離子計(jì))；②試驗(yàn)方法試管法測(cè)定氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅與谷氨酸鋅對(duì)大腸桿菌JM109、鼠傷寒沙門(mén)氏菌50772、和金黃色葡萄球菌PNB14的抗菌活性A、設(shè)12小組，每組包括12支無(wú)菌試管，編號(hào)112;每大組設(shè)三個(gè)平行，即包括三個(gè)小組；B、無(wú)菌條件下，分別加入2.0毫升LB液體培養(yǎng)基至第1到11管；C、將制備好的氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅或谷氨酸鋅待檢溶液分別加2.0毫升至第1管，將第1管混合后取2.0毫升至第3管，依次至第10管，再?gòu)牡?0管取2.0毫升丟去，第11管為不加抗藥物作陽(yáng)性對(duì)照；C、另準(zhǔn)備LB液體培養(yǎng)基管(第12管)2.0毫升不加藥物和細(xì)菌，作為陰性對(duì)照；D、第1-11管分別加入供測(cè)試的大腸桿菌JM109、鼠傷寒沙門(mén)氏菌50772和金黃色葡萄球菌PNB14，每管5.0微升菌液(菌的濃度分別約為108cfu/ml，菌齡為16-18小時(shí))；E、37t:靜止培養(yǎng)16小時(shí)，肉眼觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，不出現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最后一管中藥物濃度即是藥物對(duì)相應(yīng)細(xì)菌的最小抑菌濃度(yg/ml);陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)可見(jiàn)混濁生長(zhǎng)，陰性對(duì)照應(yīng)澄清。③試驗(yàn)結(jié)果以鋅離子計(jì)，氧化鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅對(duì)大腸桿菌JM109、鼠傷寒沙門(mén)氏菌50772、和金黃色葡萄球菌PNB14的最小抑菌濃度為400yg/ml、400yg/ml和400yg/ml(以鋅離子計(jì))，而谷氨酸鋅對(duì)大腸桿菌JM109、鼠傷寒沙門(mén)氏菌50772、和金黃色葡萄球菌PNB14的最小抑菌濃度為分別為100iig/ml、100yg/ml和100yg/ml(以鋅離子計(jì))，抗菌活性提高了4倍。表1不同鋅源化合物的抗菌活性比較研究結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(4)步驟(1)得到的谷氨酸鋅的安全性測(cè)定(大鼠LD5。測(cè)定、改進(jìn)寇氏法)①試驗(yàn)材料大鼠購(gòu)自南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體重120150克，雌雄各半。供試驗(yàn)樣品氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅和谷氨酸鋅器材注射器、灌胃針頭、鼠籠②試驗(yàn)方法A、通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)得到引起動(dòng)物OX(Dn)和100%(Dm)死亡的劑量，其中氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅和谷氨酸鋅的Dn和Dm見(jiàn)表2。表2不同鋅源化合物大鼠LD50預(yù)試驗(yàn)結(jié)果(Dn和Dm)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>B、本實(shí)驗(yàn)要求最大反應(yīng)率為100%，最小反應(yīng)率為0%，或至少反應(yīng)率接近100%或0%;組間劑量比值用根據(jù)上述各化合物的Dn和Dm值，在Dn至Dm間平均設(shè)置8個(gè)劑量，每組10只大鼠。如實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)相鄰劑量有重復(fù)的100%和0%反應(yīng)率時(shí)，應(yīng)將靠邊的組棄去不計(jì)，使大劑量組只有一個(gè)100%的反應(yīng)率，小劑量組也只有一個(gè)0%的反應(yīng)率；分組完畢和各組劑量算出后，分組灌服不同劑量的氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅和谷氨酸鋅；給藥后觀察7天，觀察期間逐日記錄動(dòng)物的毒性反應(yīng)情況和死亡動(dòng)物的分布。C、計(jì)算方式根據(jù)正式實(shí)驗(yàn)各組死亡率按下列公式不同鋅源化合物對(duì)大鼠的LD50和可信限(P=0.95)a、當(dāng)最小劑量組的死亡率為0%，最大劑量組的死亡率為100%時(shí)，按下列公式計(jì)算LD50:LD5。=lg—1[Xm-i(Ep_0.5)]b、當(dāng)最小劑量組的死亡率大于0X而又小于30X，或最大劑量組的死亡率小于100%而又大于70%時(shí)，可按下列校正公式計(jì)算LD5。LD5o二lg"[Xm-i(Zp3-Pm-PnLD50的豐示7隹誤S-LD50的平均可信限:LD50±4.5Sx50LD50(P=0.95);上式中，Xm為最大劑量組劑量的對(duì)數(shù)，i為相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量之差值(大劑量組減小劑量組)，Pm為最大劑量組死亡率，Pn為最小劑量組死亡率，P為各組死亡率，n為每組動(dòng)物數(shù)。D、試驗(yàn)結(jié)果以鋅離子計(jì)，大鼠對(duì)所有受試樣品的口服半數(shù)死劑量(LD50)見(jiàn)表3，結(jié)果顯示谷氨酸鋅比氧化鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅的安全性均要高。表3甘氨酸鋅、堿式氯化鋅和谷氨酸鋅對(duì)大鼠的口服半數(shù)致死量研究結(jié)果受試樣品LD50(mg/kg體重，以化合物計(jì))LD50(mg/kg體重，以鋅離子計(jì))氧化鋅18001435.5甘氨酸鋅600165.1堿式氯化鋅1500855谷氨酸鋅120003345.1(5)步驟(1)得到的谷氨酸鋅平衡溶解度的測(cè)定①試驗(yàn)材料磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、鹽酸、磷酸、五水硫酸鋅和堿式氯化鋅等均為化學(xué)純?cè)噭?。②試?yàn)方法A、緩沖液的制備配制pH值分別為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0的磷酸鹽緩沖液(PBS，O.1M)。B、平衡溶解度的測(cè)定取谷氨酸鋅分別加入pH值為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0的100mlPBS溶液中，6(TC水浴加熱并超聲至藥物不再溶解，放入水浴振蕩器中，溫度保持(37±1)°C，振搖24h;將飽和溶液離心沉淀后，用原子吸收法測(cè)定溶液中的鋅離子，來(lái)計(jì)算谷氨酸鋅的平衡溶解度；相同方法測(cè)定氧化鋅、甘氨酸鋅、堿式氯化鋅的平衡溶解度。③試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果顯示甘氨酸鋅易溶于水和酸性水溶性；而堿式氯化鋅和氧化鋅不溶于水，但在酸性條件下易溶；谷氨酸鋅水溶性低，且耐酸耐力強(qiáng)。表4谷氨酸鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅的平衡溶解度7<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>(6)步驟(1)得到的谷氨酸鋅的油水分配系數(shù)測(cè)定①試驗(yàn)材料正辛醇、谷氨酸鋅、氧化鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅②試驗(yàn)方法，以谷氨酸鋅為例，氧化鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅同樣用以下方法檢A、谷氨酸鋅在正辛醇溶液的平衡溶解度測(cè)定稱(chēng)取1克谷氨酸鋅，加入100毫升正辛醇溶液6(TC水浴加熱并超聲至藥物不再溶解，放入水浴振蕩器中，溫度保持(37±1)°C，振搖24h;將飽和溶液離心沉淀后，用原子吸收法測(cè)定溶液中的鋅離子，來(lái)計(jì)算谷氨酸鋅在正辛醇溶液中的平衡溶解度。B、渦旋時(shí)間考察取質(zhì)量濃度為400mgL—1的谷氨酸鋅正辛醇溶液(被水相飽和后的正辛醇)0.5ml，加入被正辛醇飽和后的0.lmolL—1鹽酸溶液5ml，分別渦旋5、10、20、45、60min，10000rmin—1離心2min，取正辛醇層用原子吸收方法測(cè)定正辛醇中鋅離子的含量；確定最適的渦旋時(shí)間。C、油水分配系數(shù)測(cè)定取谷氨酸鋅的正辛醇溶液(已被水相飽和)0.5ml作為油相，加入水_緩沖溶液(被正辛醇飽和)5ml作為水相，渦旋min(根據(jù)步驟2的結(jié)果定)，10000rmin—1離心2min，取上層的油相0.lml用原子吸收方法測(cè)定鋅離子濃度，計(jì)算谷氨酸鋅在油相和水相中的分布情況，計(jì)算油水分分配系數(shù)(P)=Po/Pw。③試驗(yàn)結(jié)果在水中的溶解度甘氨酸鋅最高，堿式氯化鋅和谷氨酸次之，而氧化鋅最低。在正辛醇溶液中谷氨酸鋅的溶解度最高，甘氨酸鋅和堿式氯化鋅次之，而氧化鋅最低。計(jì)算各化合物的油水分配系數(shù)可知氧化鋅和谷氨酸鋅的油水分配系數(shù)較高，而堿式氯化鋅和甘氨酸鋅的油水分配系數(shù)較低(表5)?；衔镉退峙湓礁?，則其脂溶性越強(qiáng)，其抗菌活性相對(duì)也高。雖然氧化鋅的油水分配系數(shù)較高，但其耐酸能力較差，因此在體內(nèi)則會(huì)影響其抗菌活性。表5谷氨酸鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅的平衡溶解度<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>①試驗(yàn)材料試驗(yàn)動(dòng)物60頭斷奶仔豬，廣東民豐種豬場(chǎng)提供。飼料不含任何抗菌藥物的303型豬用全價(jià)配合飼料，廣東民豐畜牧發(fā)展有限公司飼料廠特制。受試樣品谷氨酸鋅、氧化鋅、甘氨酸鋅和堿式氯化鋅②試驗(yàn)方法A、不同劑量谷氨酸鋅對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)作用效果比較研究60頭斷奶仔豬如表6分組，每組10頭。各組在飼料中添加不同的生長(zhǎng)促進(jìn)劑后，自由采食，統(tǒng)計(jì)斷奶后15天各試驗(yàn)組試驗(yàn)豬的增重及飼料報(bào)酬，篩選谷氨酸鋅作為豬用生長(zhǎng)促進(jìn)劑的最適劑量，并比較氧化鋅與谷氨酸鋅對(duì)豬的促生長(zhǎng)效應(yīng)的差異。表6不同濃度谷氨酸鋅肉豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)分組<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*:不同生長(zhǎng)促進(jìn)劑的使用濃度是以化合物中的鋅離子計(jì)。B、不同鋅源的化合物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)效果比較研究50頭斷奶仔豬如表5分組，每組10頭。各組在飼料中添加不同鋅源的生長(zhǎng)促進(jìn)劑后，自由采食，統(tǒng)計(jì)斷奶后15天各試驗(yàn)組試驗(yàn)豬的增重及飼料報(bào)酬，并比較谷氨酸鋅與不同鋅源化合物對(duì)豬的促生長(zhǎng)效應(yīng)的差異。表7不同鋅源化合物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)的分組<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*:不同生長(zhǎng)促進(jìn)劑的使用濃度是以化合物中的鋅離子計(jì)。③試驗(yàn)結(jié)果A、不同劑量谷氨酸鋅對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)作用效果比較研究谷氨酸鋅對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)作用效果呈現(xiàn)劑量相關(guān)性在的飼養(yǎng)試驗(yàn)過(guò)程中，高劑量的氧化鋅組(2500ppm)表現(xiàn)出明顯的促生長(zhǎng)作用，試驗(yàn)期間的平增均重較不給生長(zhǎng)促進(jìn)劑對(duì)照組提高11.83%，飼料報(bào)酬降低0.216。不同劑量組的谷氨酸鋅均表現(xiàn)出不同程度的促生長(zhǎng)效應(yīng)，其中250ppm與500ppm劑量組的促生長(zhǎng)效果與2500卯m的氧化鋅組相近，結(jié)果提示250卯m的谷氨酸鋅可以代替2500卯m的氧化鋅。表8谷氨酸鋅對(duì)豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>B、不同鋅源的化合物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)效果比較研究不同鋅源的化合物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)效應(yīng)有明顯差異。在飼養(yǎng)試驗(yàn)過(guò)程中，高劑量的氧化鋅組(2500ppm)和堿式氯化鋅組(2500ppm)均表現(xiàn)出明顯的促生長(zhǎng)作用，相對(duì)陰性對(duì)照組而言，試驗(yàn)期間增重提高9.28%和7.74%，飼料報(bào)酬也分別提高0.204和0.203。250ppm的谷氨酸鋅的促生長(zhǎng)效果與氧化鋅相當(dāng)，試驗(yàn)期間的增重較陰性對(duì)照組提高了9.80%飼料報(bào)酬提高了0.207;但甘氨酸鋅組的促生長(zhǎng)效果不明顯，與陰性對(duì)照組的增重相比差異不顯著。綜合考慮促生長(zhǎng)效果、安全性、毒副作用及環(huán)境污染等問(wèn)題，谷氨酸鋅應(yīng)是氧化鋅理想的替代品用于動(dòng)物的促生長(zhǎng)。表9谷氨酸鋅對(duì)豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)施例2不同谷氨酸鋅的衍生物對(duì)動(dòng)物的促生長(zhǎng)效果試驗(yàn)(1)不同谷氨酸鋅的衍生物的制備A、谷氨酸鋅鹽酸鹽稱(chēng)取100克ZnCl2和137.3克谷氨酸鈉，分別溶于1000ml水中，攪拌均勻至完全溶解后，將二者混合，用0.1M鹽酸溶液將混合溶液的pH值調(diào)至4.0，加熱并連續(xù)攪拌反應(yīng)，收獲結(jié)晶烘干至恒重。取產(chǎn)物用1克加水溶解并定容至100ml，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)、氯離子(莫爾法)和谷氨酸(氨基酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為2.692mg/ml，氯離子含量為1.470mg/ml，谷氨酸的含量為6.005mg/ml，由此可以推斷所得的晶體為谷氨酸鋅與鹽酸按摩爾比1:l形成的谷氨酸鋅鹽酸鹽。B、谷氨酸甲酯鋅螯合物的制備稱(chēng)取100克ZnS047H20和115.6克谷氨酸甲酯，分別溶于1000ml水中，攪拌均勻至完全溶解后，將二者混合，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)味pH值至7.0，離心收集沉淀，并用水離心洗滌三次后IO(TC烘干至恒重。取1克產(chǎn)物用0.01MHC1溶液完全溶解后定容至100ml水，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為1.613mg/ml，谷氨酸的含量為7.941mg/ml，由此可以推斷所得的產(chǎn)物是由谷氨酸甲酯與鋅離子按摩爾比2:l形成的帶一分子結(jié)晶水的螯合物。C、N-氨甲酰谷氨酸鋅的制備稱(chēng)取100克ZnS047H20和68.8克N-氨甲酰谷氨酸，分別溶于1000ml水中，攪拌均勻至完全溶解后，將二者混合，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)味pH值至7.0，離心收集沉淀，并用水離心洗滌三次后IO(TC烘干至恒重。取1克產(chǎn)物用0.01MHC1溶液完全溶解后定容至100ml水，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為2.407mg/ml，谷氨酸的含量為5.4451mg/ml，由此可以推斷所得的產(chǎn)物是由N-氨甲酰谷氨酸與鋅離子按摩爾比1:l形成的帶一分子結(jié)晶水的螯合物。D、谷氨酰胺鋅的制備稱(chēng)取100克ZnS047H20和209.4克谷氨酰胺，分別溶于1000ml水中，攪拌均勻至完全溶解后，將二者混合，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)味pH值至7.0，離心收集沉淀，并用水離心洗滌三次后IO(TC烘干至恒重。取1克產(chǎn)物用0.01MHC1溶液完全溶解后定容至100ml水，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)和谷氨酰胺(氨基酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為1.791mg/ml，谷氨酸的含量為7.989mg/ml，由此可以推斷所得的產(chǎn)物是由N-氨甲酰谷氨酸與鋅離子按摩爾比2:1形成的帶一分子結(jié)晶水的螯合物。E、賴氨酰谷氨酸鋅的制備稱(chēng)取100克ZnS047H20和98.6克賴氨酰谷氨酸，分別溶于1000ml水中，攪拌均勻至完全溶解后，將二者混合，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)味pH值至7.0，離心收集沉淀，并用水離心洗滌三次后IO(TC烘干至恒重。取1克產(chǎn)物用0.01MHC1溶液完全溶解后定容至100ml水，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)、賴氨酸和谷氨酸(氨基11酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為1.826mg/ml，賴氨酸含量4.102mg/ml，谷氨酸的含量為4.130mg/ml，由此可以推斷所得的產(chǎn)物是由賴氨酰谷氨酸與鋅離子按摩爾比1:l形成的帶一分子結(jié)晶水的螯合物。F、水楊醛谷氨酸鋅(谷氨酸鋅shiff堿)的制備0.02mmo1氫氧化鉀溶于1000mL蒸餾水中.滴加到500mL含0.02mmol谷氨酸鈉和0.02mmo1水楊醛乙醇溶液中，在水浴8(TC下，攪拌反應(yīng)2h，然后加入1000ml含0.02mmolZnS047H20水溶液，調(diào)節(jié)pH至7.0，繼續(xù)反應(yīng)8h，冷卻過(guò)濾收集沉淀并烘干至恒重。取1克產(chǎn)物用0.01MHC1溶液完全溶解后定容至100ml水，測(cè)定溶液中鋅離子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析儀)的含量。結(jié)果鋅離子濃度為1.835mg/ml，谷氨酸的含量為4.200mg/ml，由此可以推斷所得的產(chǎn)物是由水楊醛谷氨酸與鋅離子按摩爾比l:1形成的帶一分子結(jié)晶水的螯合物。(2)谷氨酸鋅衍生物對(duì)動(dòng)物促生長(zhǎng)效果的研究①試驗(yàn)材料試驗(yàn)動(dòng)物90頭斷奶仔豬廣東民豐種豬場(chǎng)提供；飼料不含任何抗菌藥物的303型豬用全價(jià)配合飼料，廣東民豐畜牧發(fā)展有限公司飼料廠特制；受試樣品谷氨酸鋅、步驟(1)制備的六種谷氨酸鋅衍生物(谷氨酸鋅鹽酸鹽、谷氨酸甲酯鋅螯合物、N-氨甲酰谷氨酸鋅、谷氨酰胺鋅、賴氨酰谷氨酸鋅和水楊醛谷氨酸鋅)、ZnO。②試驗(yàn)方法90頭斷奶仔豬如表9分組，每組10頭。各組在飼料中添加不同的生長(zhǎng)促進(jìn)劑(見(jiàn)表IO)后，自由采食，統(tǒng)計(jì)斷奶后15天各試驗(yàn)組試驗(yàn)豬的增重及飼料報(bào)酬，并比較ZnO與谷氨酸鋅或其衍生物對(duì)豬的促生長(zhǎng)效果的差異。表10不同谷氨酸鋅衍生物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)分組<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*:不同生長(zhǎng)促進(jìn)劑的使用濃度是以化合物中的鋅離子計(jì)。③谷氨酸鋅衍生物對(duì)肉豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果實(shí)施例1中的試驗(yàn)結(jié)果已證實(shí)250ppm的谷氨酸鋅鋅源與2500卯m的氧化鋅鋅源有相當(dāng)?shù)拇偕L(zhǎng)作用。本實(shí)施例中250卯m的谷氨酸鋅鋅源(組3)和2500卯m的氧化鋅鋅源(組2)較對(duì)照組的平均增重分別提高了11.36%和10.63%，料肉比也分別降低了0.273和0.261，再次證實(shí)了在飼料配制過(guò)程中250卯m的谷氨酸鋅鋅源可以替代2500卯m的氧化鋅鋅源。此外，谷氨酸鋅的各種衍生物與谷氨鋅有相當(dāng)?shù)拇偕L(zhǎng)效果(表ll)，結(jié)果提示谷氨酸鋅的衍生物與谷氨酸鋅有相當(dāng)?shù)纳飳W(xué)效應(yīng)。表11不同谷氨酸鋅衍生物對(duì)豬的促生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果組別動(dòng)物數(shù)量(只)存活率(%)平均增重(kg)相對(duì)增重率(％)總增重(kg)總耗料(kg)料肉比1101003.7610037.681.42.1652101004.19111.4441.980.61.9243101004.22112.2442.281.01.9194101004.20111.714280.61.9185101004.18111.1741.880.41.9246101004.16110.6441.680.01.9227101004.12109.5841.279.01.9178101004.26113.3042.681.31.9089101004.20111.714281.01.929上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。1權(quán)利要求谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述的谷氨酸鋅為谷氨酸與鋅按摩爾比2:i或i:i形成的螯合物。3.根據(jù)權(quán)利要求i所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述的衍生物包括(1)谷氨酸鋅與酸形成的鹽；(2)谷氨酸成單酯后與鋅離子形成的內(nèi)絡(luò)鹽或螯合物；(3)N-氨甲酰谷氨酸及鹽、酰胺與鋅離子形成的螯合物或鹽；(4)以谷氨酸鋅為基礎(chǔ)形成的Shiff堿；(5)以谷氨酸鋅為基礎(chǔ)形成的酰胺化合物；(6)以谷氨酸和氨基酸中的一種形成的二肽與鋅離子形成的螯合物；(7)谷氨酰胺與鋅離子形成的螯合物或鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述的動(dòng)物為養(yǎng)殖動(dòng)物。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述谷氨酸鋅或其衍生物應(yīng)用于動(dòng)物的各個(gè)生長(zhǎng)階段。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述的飼料為全價(jià)配合飼料時(shí)，添加谷氨酸鋅作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑，以飼料重量為基準(zhǔn)，谷氨酸鋅的用量以鋅元素摩爾數(shù)計(jì)，含量為50500ppm。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種谷氨酸鋅或其衍生物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)飼料添加劑的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)谷氨酸鋅具有低水溶性、較強(qiáng)的耐酸能力和高生物利用度，將谷氨酸鋅用作促生長(zhǎng)飼料添加劑，較其它鋅源，如氧化鋅、堿式氯化鋅和甘氨酸鋅等，具有更高的安全性和抗菌活性，鋅離子的添加量可減少80～90％，可降低生產(chǎn)成本并減少對(duì)環(huán)境的污染、同時(shí)降低高鋅對(duì)動(dòng)物的毒副作用。文檔編號(hào)A23K1/16GK101785534SQ20101012263公開(kāi)日2010年7月28日申請(qǐng)日期2010年3月12日優(yōu)先權(quán)日2010年3月12日發(fā)明者彭險(xiǎn)峰,覃宗華申請(qǐng)人:廣州英賽特生物技術(shù)有限公司