一種嘧啶衍生物及其制備方法與用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種嘧啶衍生物及其制備方法與用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 5-氟尿啼啶（5-fluoro_2, 4(1H, 3H)pyrimidinedione，5_FU)是一種傳統(tǒng)、經(jīng)典的 化療藥物，廣泛應(yīng)用于頭頸部腫瘤、消化系統(tǒng)腫瘤及乳腺癌等腫瘤的化療；然而，作為一種 單體類核苷類藥物，5-氟尿嘧啶存在代謝快、毒副作用大、半衰期短等缺點(diǎn)，往往需要加大 藥物用量和/或增加給藥頻次，才能達(dá)到較為理想的治療效果。
[0003] 目前，已報(bào)道的5-氟尿嘧啶的載體材料主要有：脂肪族聚酯類聚合物、殼聚糖、氰 基丙烯酸正丁酯、撲啉類化合物、磺胺嘧啶、葡萄糖醛酸類糖苷、半乳糖、偕二磷酸等（1、馬 寶花王少華王宏張娜.5-氟尿嘧啶納米級(jí)給藥系統(tǒng)研究進(jìn)展.藥學(xué)專論，2009年，第18卷， 第17期.2、李楠陳曦梁蓉梅江婉雍小蘭.5-氟尿嘧啶靶向衍生物的研究進(jìn)展.現(xiàn)代生物醫(yī) 學(xué)進(jìn)展，2011年，第11卷第13期.）
[0004]目前，未見有本發(fā)明式I所示的化合物或其晶型、鹽作為藥物載體的相關(guān)報(bào)道，特 別是，未見有本發(fā)明式I所示的化合物或其晶型、鹽作為5-氟尿嘧啶等單體類核苷類藥物 或載體的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種作為藥物載體的嘧啶衍生物。
[0006] 本發(fā)明提供的式I所示的化合物或其晶型、鹽：
[0007]
[0008]其中，&選自氫、鹵素、C:~(：(；烷基、C:~(：(；烷氧基、氨基或取代的氨基，R2~R4 分別或同時(shí)選自氫、堿金屬、C 6烷基。
[0009]進(jìn)一步的，&選自氨基或C廣C6烷基取代的氨基，R2~R4分別或同時(shí)選自氫、鋰、 鈉、鉀。
[0010] 進(jìn)一步的，所述的化合物為：
[0011]
[0012] 進(jìn)一步的，所述的化合物為1-(P-L-呋喃核糖）-5_氨基-嘧啶并[4,5_d]嘧 啶-2,4(1H，3H)-二酮。
[0013]本發(fā)明還提供了上述式I所示化合物的制備方法。
[0014]本發(fā)明提供的一種式I所示化合物的制備方法，所述的制備方法包括以下步驟：
[0015]a、l-(2'，3'，5' -0-乙?；?0-L-呋喃核糖）-5_氨基-嘧啶并[4,5-d]嘧 啶-2, 4 (1H，3H)-二酮與M0R5/R50H溶液，于70°C~80°C反應(yīng)20分鐘~30分鐘，得到反應(yīng) 液；
[0016] 其中，M選自鋰、鈉、鉀、銣、銫或鈁；馬選自甲基、乙基、丙基、丁基或戊基；
[0017] 1_(2'，3'，5' -0-乙?；?f3-L-呋喃核糖）-5_氨基-嘧啶并[4,5-d]嘧 啶-2, 4 (1H，3H)-二酮與M0R5的摩爾比1 :3~5 ;M0R5/R50H溶液的濃度為0? 1M~0? 5M;
[0018]b、對(duì)步驟a所得反應(yīng)液進(jìn)行分離、純化，得到1_( 0 -L-咲喃核糖）-5-氨基-啼啶 并[4, 5-d]嘧啶-2, 4 (1H，3H)-二酮。
[0019]進(jìn)一步的，步驟b中，對(duì)步驟a所得反應(yīng)液進(jìn)行分離、純化的方法為：將步驟a所得反應(yīng)液冷卻至室溫，加入冰醋酸，過濾，得到固體，洗滌，干燥，即得1- ( 0 -L-呋喃核 糖）-5-氨基-嘧啶并[4, 5-d]嘧啶-2, 4 (1H，3H)-二酮。
[0020] 上述的化合物或其晶型、鹽作為藥物載體的應(yīng)用。
[0021] 進(jìn)一步的，所述的藥物為單體類核苷類藥物或寡聚核苷酸類藥物。
[0022] 進(jìn)一步的，所述的單體類核苷類藥物選自5-氟尿啼啶、硫鳥噪呤、奈拉濱、氯法他 濱、替加氟、阿糖胞苷、地西他濱、齊多夫定、扎西他濱、阿昔洛韋、阿德福韋酯中的任意一種 或兩種以上；所述的寡聚核苷酸類藥物選自siRNA、反義寡聚核苷酸中的任意一種或兩種。
[0023]本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，所述的藥物組合物是以上述的化合物或其晶 型、鹽為載體，加上藥物、藥學(xué)上常用的輔料或輔助性成分制備得到的制劑。
[0024]進(jìn)一步的，所述的藥物為單體類核苷類藥物或寡聚核苷酸類藥物。
[0025]進(jìn)一步的，所述的單體類核苷類藥物選自5-氟尿啼啶、硫鳥噪呤、奈拉濱、氯法他 濱、替加氟、阿糖胞苷、地西他濱、齊多夫定、扎西他濱、阿昔洛韋、阿德福韋酯中的任意一種 或兩種以上；所述的寡聚核苷酸類藥物選自siRNA、反義寡聚核苷酸中的任意一種或兩種。
[0026]進(jìn)一步的，所述的單體類核苷類藥物為5-氟尿嘧啶。
[0027] 本發(fā)明化合物1自組裝形成粒徑均一的納米顆粒SNNP，具有良好的藥物包裹能 力，體內(nèi)外毒性低，具有良好的生物相容性及安全性，非常適合用作藥物載體；本發(fā)明化合 物1的SNNP作為藥物載體，顯著提高了單體類核苷類藥物和/或寡聚核苷酸類藥物的治療 效果，具有良好的緩釋作用，增強(qiáng)藥物的治療效果，降低藥物用量和給藥頻次，提高藥物的 生物利用度，減輕藥物的毒副作用，具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值；同時(shí)，本發(fā)明的制備方法，具 有收率高、純度高、能耗低、步驟少、操作簡(jiǎn)便、成本低、環(huán)保、安全等優(yōu)點(diǎn)，非常適合產(chǎn)業(yè)上 的應(yīng)用。
[0028] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0029] 以下通過實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0030] 圖1為本發(fā)明化合物1自組裝單核苷納米顆粒的SEM和DLS圖。
[0031] 圖2為本發(fā)明化合物1自組裝單核苷納米顆粒包裹5-氟尿嘧啶后的SEM和DLS 圖。
[0032] 圖3為MTT法檢測(cè)SNNP對(duì)正常細(xì)胞NOK-SI、H0K和口腔鱗癌細(xì)胞HSC-3、SCC-9的 毒性作用；SNNP濃度：0yg?ml、100yg?ml\200yg?ml、300yg?ml\400yg?ml\ 500yg?ml\實(shí)驗(yàn)均重復(fù)三次，結(jié)果表示為均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差。
[0033] 圖4為對(duì)不同器官通過腹腔注射不同濃度的化合物1自組裝單核苷納米顆粒后的 蘇木精和伊紅染色測(cè)定圖（H&E)。
[0034]圖5為5-氟尿啼啶瘤內(nèi)給藥與化合物1自組裝單核苷納米顆粒裝載5-氟尿啼啶 瘤內(nèi)給藥對(duì)腫瘤的治療效果對(duì)比：A、B、C為不同濃度用藥后的腫瘤生長(zhǎng)曲線；D為小鼠體重 變化曲線；E為腫瘤平均重量；F為腫瘤直觀圖。
【具體實(shí)施方式】
[0035] 本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購(gòu)買市售產(chǎn)品獲得。
[0036] 1_(2'，3'，5' -0-乙酰基-0-L-呋喃核糖）_5_氨基-嘧啶并[4,5_d]嘧 啶-2, 4 (1H，3H)-二酮通過市購(gòu)獲得，或者采用以下方法制備得到：
[0037] 將AT堿基（5-氨基-嘧啶并[4, 5-d]嘧啶-2, 4 (1H，3H)-二酮，參考文 itjt：M.Pan,ff.Hang,X.Zhao,H.Zhao,P.Deng,Z.Xing,Y.QingandY.He,Org.Biomol. Chem.，2011，9, 5692.)加入60mlHMDS中，在140°C下攪拌大約2-3分鐘，隨后加入1.2ml TMSC1，回流狀態(tài)下反應(yīng)48小時(shí)，直到反應(yīng)變?yōu)槌吻逋该鳡顟B(tài)。然后，減壓下旋蒸得到硅烷 化喊基中間廣物。在常溫下加入糖基供體（1，2,3,5_0_四乙醜基-0-L-咲喃核糖），在冰 浴條件下加入lml催化劑三氟甲磺酸三甲基硅酯，使用薄層層析監(jiān)測(cè)，反應(yīng)完全后加入飽 和NaHC03水溶液終止反應(yīng)；加入二氯甲烷萃取有機(jī)相（80mlX3)，合并有機(jī)相并用無水硫 酸鈉干燥，旋干后用柱層析進(jìn)行分離，得到白色的粉末狀化合物。將化合物再次溶于六甲 基二硅烷胺中，加入催化劑二甲苯，然后在140°C下回流反應(yīng)直至變澄清，旋蒸除去多余的 HMDS和二甲苯。將硅烷化后的產(chǎn)物溶于無水乙腈，在室溫下加入催化劑TMSOTf，然后回流 反應(yīng)兩小時(shí)左右。待反應(yīng)完后，用飽和NaHCOj#止反應(yīng)，然后用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相 后用無水似2304干燥，旋干后用娃J3父柱分尚即可得到1- (2'，3'，5' -〇-乙酰基-0 -L-咲喃 核糖）-5-氨基-嘧啶并[4, 5-d]嘧啶-2, 4 (1H，3H)-二酮（產(chǎn)率為80 %，純度為99 % )。
[0038]:HNMR(DMS0-d6, 400MHz) : 8 2. 01-2. 10 (9H,t, 30Ac), 4. 30-4. 42 (3H,m, 4r -H, 5r -H2), 5. 54-5.SedH^' -H), 5. 65-5. 67 (1H, 2r -H), 6. 25-6. 29 (1H, 1r -H), 8. 60 (s, 1H,CH )，9. 05-9. 08 (1H，d，NH)，9. 13-9. 16 (1H，NH)，10. 85 (s，1H，NH)。
[0039]13CNMR(DMS0-d6, 400MHz) : 8 20. 71, 20. 80, 20. 91,63. 28, 66. 40, 68. 06, 69. 89, 73 .01, 78. 56,157. 86, 162. 19, 162. 60,162. 91，163. 26,169. 53,169. 75, 170. 34。
[0040]HRMS(ESI)calculatedfor(M-H)/z:436. 1103,found:436. 1102。
[0041] 實(shí)施例1、1-(P-L-呋喃核糖）-5-氨基-嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2,4(1H，3H)_二 酮（化合物1)
[0042]
[0043] 其中，Ac表示乙?；?。
[0044] 將1_(2'，3'，5' -0-乙酰基-f3-L-呋喃核糖）_5_氨基-嘧啶并[4,5_d]嘧 啶-2, 4 (1H, 3H)-二酮 120mg溶于 10mL0. 1MNaOMe/MeOH，在 75°C條件下反應(yīng) 20 分鐘，待 冷卻至室溫（25°C)后，用稀釋后的冰醋酸中和，有沉淀物產(chǎn)生，過濾，沉淀物用甲醇洗三 次，水洗一次，真空干燥后得到白色粉末1- ( 0 -L-呋喃核糖）-5-氨基-嘧啶并[4, 5-d]嘧 啶-2, 4 (1H，3H)-二酮（70mg，產(chǎn)率為 82 %，純度為 99 % )。
[0045] 1- (-L-呋喃核糖）-5-氨基-嘧啶并[4, 5-d]嘧啶-2, 4 (1H，3H)-二酮：
[0046]蟲NMR(DMS0-d6, 600MHz) :S3. 55-3. 63 (1H，m，5，-H)，3. 76-3. 79 (1H，m，5' -Hp) ，3.92-3.96(lH，m，4，-H)，4.07-4.09(lH，3'-H)，4.13-4.15(lH，2，-H)，5.09-5.11(lH，5，-0H)，5.26-5.30(t，lH，3' -0H)，5.55-5.58(lH，d，2' -0H)，6.14-6.16(1H，1' -H)，8.85(1H， s，CH)，8. 91 (1H,s,NH)，8. 98 (1H,s,NH)，10. 82 (s, 1H,NH)。
[0047]13CNMR(DMS0-d6, 600MHz) : 8 59. 96, 6