專利名稱：吡咯并嘧啶衍生物的制備和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新型的、能有效地用作抗腫瘤藥劑的吡咯并嘧啶衍生物、涉及它的制備和應用。
葉酸是生物體內C1單元的一種載體，它由甲酸或甲醛衍生而來，在各類酶反應如核酸的生物合成、氨基酸和肽的新陳代謝作用以及甲烷的生成過程中，都起到輔酶的作用。特別是在核酸的生物合成中，葉酸在兩條路徑[即嘌呤合成路徑和胸(腺嘧啶氧核)苷合成路徑]的甲?；卸际潜夭豢缮俚?。通常葉酸需要經(jīng)兩步還原變成它的活性輔酶后才具有生物活性。已知氨甲蝶呤(縮寫為MTX)及其相關化合物能抑制從二氫葉酸向四氫葉酸的還原，這是通過與第二步中的主酶(二氫葉酸還原酶)的強烈偶合而實現(xiàn)的。這些藥物已用作抗腫瘤藥物，因為它們能干擾DNA的合成，從而導致細胞的死亡。目前，它被當作臨床治療中的主要藥物。另一方面，現(xiàn)已報道了一種新型的四氫氨甲蝶呤抗腫瘤藥劑(5，10-二反氮雜-5，6，7，8-四氫氨甲蝶呤DDATHF)，與前述藥物不同的是，它并不抑制二氫葉酸還原酶，其主要機理在于它抑制在嘌呤生物合成的初始階段所需要的甘氨酰胺核(糖酸)苷酸轉甲酰酶[JournalofMedicinalChemistry(藥物化學雜志)，28，914(1985)]。
現(xiàn)在，針對癌癥的治療正在進行多方面的研究，人們急切盼望研制出基于某種新機理的藥物，這種藥物更有效，對癌細胞有高度專一的毒性。其作用機理在于對葉酸有拮抗作用的抗腫瘤藥物劑MTX的臨床應用很廣，但由于它的毒性較強而且對塊狀(Solid)癌幾乎無效，所以其療效仍然不能令人滿意。
在上述背景情況下，本發(fā)明者的研究結果表明，新型的吡咯并嘧啶衍生物對腫瘤細胞有極為專一的毒性，且有很好的抗腫瘤效果，它構成一個完善的發(fā)明。
換言之，本發(fā)明涉及到(1)如分子式(Ⅰ)所示的化合物
式中環(huán)
是一個吡咯環(huán)或吡咯啉環(huán)，X是一個氨基或羥基，Y是一個氫原子、氨基或羥基，R是一個氫原子、氟原子、烷基、鏈烯基、或炔基，-COOR1和-COOR2獨立地代表羧基，它們可能是酯化的，n是2到4之間的一個整數(shù)，R在n個重復單元中的每個單元上都可能是不同的，也涉及到它們的鹽類。
(2)化合物(Ⅰ)或其鹽的制備方法，其特征是，以分子式(Ⅱ)表明的化合物、在它的羧基上有反應活性的衍生物及其鹽類
式中環(huán)
是一個吡咯環(huán)或吡咯啉環(huán)，X是一個氨基或羥基，Y是一個氫原子、氨基或羥基，R是一個氫原子、氟原子、烷基、鏈烯基、或炔基，n是2到4之間的一個整數(shù)，在n個重復單元中的每個單元上，R都可能不同，和一個分子式為(Ⅲ)的化合物及其鹽類能進行反應，
式中-COOR1和-COOR2獨立地代表羧基，它們可能是酯化的。
(3)如分子式(Ⅳ)所示的化合物
式中環(huán)
是一個吡咯環(huán)或吡咯啉環(huán)，X是一個氨基或羥基，Y是一個氫原子、氨基或羥基，R是一個氫原子、氟原子、烷基、鏈烯基、或炔基，-COOR3是一個可能被酯化的羧基，n是2到4的一個整數(shù)，R在n個重復單元中的每個單元上都可能是不同的，同時也涉及到該化合物的鹽類。
(4)含有化合物(Ⅰ)或其鹽類的抗腫瘤藥劑當上述分子式中X或Y是羥基時，分子式為(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)各化合物中的每一個都可能以其互變異構體的平衡混合物形式存在。下列的局部結構式表示進行互變異構作用的那部分分子結構，有關各互變異構體間的平衡說明于后。
為敘述方便，在本說明中僅就互變異構體的羥基形式和其相關的名稱進行討論，但其中包含了對應的氧代形式。
在本發(fā)明的化合物(Ⅰ)中可能存在的2個或多個不對稱中心，所有不對稱碳原子的絕對構型可能是S、R或S-R混合型，例外的是從谷氨酸衍生出來的側鏈中的不對稱碳原子的絕對構型總是S(L)型。所以，化合物(Ⅰ)可能有兩個或多個非對映異構體，如需要的話，這些非對映異構體可以用一種常規(guī)的分離和提純方法較容易地分離開。所有用常規(guī)方法能分離的非對映體都包括在本發(fā)明中。
上述各分子式中用R代表的烷基包括C1-3的烷基(即甲基、乙基、丙基、異丙基)。上述分子式中以R代表的鏈烯基包括C2-3的鏈烯基(即乙烯基、1-甲基乙烯基、1-丙烯基、烯丙基、丙二烯基)。上述分子式中用R代表的炔基包括C2-3的炔基(即乙炔基、1-丙炔基、炔丙基)。-COOR1和-COOR2和-COOR3表示的羧基(它可能被酯化)上的R1、R2、R3可以是H(此時代表羧基)，也可以是以下幾種基團(此時代表酯基)C1-5烷基、芐基(可以是取代的，最好是硝基或C1-3烷氧基取代的)或苯基(可能是取代的，最好是硝基或C1-3烷氧基取代的)。上述烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、仲戊基、新戊基和叔戊基;上述芐基包括芐基、硝基芐基、甲氧芐基等;上述的苯基包括苯基、硝基苯基、甲氧苯基等。
下面介紹本發(fā)明中的化合物(Ⅰ)的制備方法。
化合物(Ⅰ)或其鹽可由式(Ⅲ)所示的谷氨酸衍生物或其鹽與式(Ⅱ)所示的羧酸、它們的活性衍生物或其鹽發(fā)生?；频?。這種酰化反應可以在碳化二亞胺、二苯基磷?；B氮化物或二乙基偶磷氧化物(diethylphosphorocyanidate)的存在下用化合物(Ⅲ)與化合物(Ⅱ)發(fā)生酰化來實現(xiàn)?；衔?Ⅲ)相對于化合物(Ⅱ)的摩爾當量一般是1-20，最好是1-5。碳化二亞胺相對于化合物(Ⅱ)的摩爾當量一般為1-25，最好是1-5。對于碳化二亞胺，實際應用時最好用二環(huán)己基碳化二亞胺，但也可以使用其它碳化二亞胺，如二苯基碳化二亞胺、雙(甲基在鄰位)甲苯基碳化二亞胺、雙(甲基在對位)甲苯基碳化二亞胺、二叔丁基碳化二亞胺、1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺、1-環(huán)己基-3-(4-二乙氨基環(huán)己基)碳化二亞胺、1-乙基-3-(2-二乙氨基丙基)碳化二亞胺和1-乙基-3-(3-二乙氨丙基碳化二亞胺。?；磻詈迷谶m宜的溶劑中進行，這些溶劑包括水、醇(如甲醇、乙醇等)、醚(如二甲醚、二乙醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚等)、腈(如乙腈等)、酯(如乙酸乙酯等)、鹵代烴(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳等)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯等)、丙酮、硝基甲烷、吡啶、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、環(huán)丁砜以及兩種或多種上述溶劑的恰當混合物。反應一般可以在PH＝2-14范圍內進行。最好的PH范圍是6-9，反應溫度從約-10℃到所用溶劑的沸點(大約到100℃)，最好在0-50℃，反應時間為1-100小時。調節(jié)反應混合物的PH時，可根據(jù)需要向其中加酸(如氫氯酸、硫酸、磷酸、硝酸、乙酸等)、堿[如醇化鈉(如甲醇鈉或乙醇鈉)、堿金屬或堿土金屬的氫氧化物(如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、氫氧化鋇)、堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽或碳酸氫鹽(如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鋇、碳岣坪吞妓崆餑疲?、傲Pㄈ縟裝貳⑷野貳⑷掖及泛瓦拎ぃ或緩沖溶液(如磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液等)。當有促進?；磻拇呋瘎?包括堿性催化劑和酸性催化劑)存在時，更有利于酰化反應的進行。堿性催化劑包括叔胺(如脂肪族叔胺如三乙基胺;芳香族叔胺如吡啶、α-，β-或γ-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲胺基吡啶、4-(1-吡咯烷基)吡啶、二甲基苯胺和二乙基苯胺);而酸性催化劑包括路易斯酸[如無水氯化鋅、無水氯化鋁(AlCl3)、無水氯化鐵、四氯化鈦(TiCl4)、四氯化硼乙醚絡合物等]。上述催化劑中，4-二甲胺基吡啶或4-(1-吡咯烷基)吡啶在許多情況下都是優(yōu)先選用的。催化劑相對化合物(Ⅱ)的適宜用量是要能足以促進?；磻?，相對于化合物(Ⅱ)，催化劑的濃度一般為0.01-10摩爾當量，最好是0.1-1摩爾當量。用于進行?；饔玫聂人?Ⅱ)的有反應活性的衍生物(由在羧基上的反應而得到)包括(Ⅱ)的鹵化酰基(如氟化、氯化、溴化、碘化?；?、酸酐(如碘代乙酸酐、異丁酸酐)、(Ⅱ)與下列物質構成的混合酸酐單烷基碳酸酯(如單甲基碳酸酯、單乙基碳酸酯、單丙基碳酸酯、單異丙基碳酸酯、單丁基碳酸酯、單異丁基碳酸酯、單仲丁基碳酸酯、單叔丁基碳酸酯)、活性酯(如氰基甲酯(cyanomethyl ester)、羰基乙氧甲酯(carboethoxymethyl esters)、甲氧甲基酯、苯基酯、鄰-硝基苯基酯、對-硝基苯基酯、對-羰基甲氧苯基酯(P-carbomethoxyphenl ester)、對-氰基苯基酯、苯硫基酯)、酸疊氮化物，還包括與磷酸二酯(如磷酸二甲基酯、磷酸二乙基酯、磷酸二芐基酯、磷酸二苯基酯)形成的混合酸酐，與亞磷酸二酯(如亞磷酸二甲基酯、亞磷酸二乙基酯、亞磷酸二芐基酯、亞磷酸二苯基酯)形成的混合酸酐。用這樣一個有反應活性的衍生物進行?；磻獣r，所用溶劑、催化劑和反應溫度等皆與前述在碳化二亞胺存在下的酰化反應所用的相同。
為了制備化合物(Ⅰ-1)(其化合物(Ⅰ)中的-COOR1和-COOR2是羧基)，希望式(Ⅲ)中的-COOR1和-COOR2是酯基時對應的那些式(Ⅲ)表示的化合物能與化合物(Ⅱ)反應，隨后用已知的降解或催化還原方法來解酯。這種降解可以通過在堿性條件下(方法A)的水解、酸性條件下(方法B-1)的水解或無水酸性條件下(方法B-2)的水解來實現(xiàn)。方法A中用的堿包括金屬醇鹽如甲醇鈉、乙醇鈉、丁醇鈉和丁醇鉀，金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化鋇，以及胺如氨、三乙基胺和吡啶。方法B-1中用的酸包括無機酸如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸，以及有機酸如三氟乙酸、三氯乙酸、甲磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸和2-茨酮磺酸。方法B-2中所用催化劑包括無機酸如氫氯酸、氫溴酸、高氯酸、硫酸、硝酸和磷酸，以及有機酸如三氟乙酸、三氯乙酸、甲磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸和2-茨酮磺酸，還包括Lewis酸如無水氯化鋅、無水氯化鋁(AlCl3)、無水氯化銻、氯化鈷、氯化銅和三氟化硼乙醚絡合物。降解是在合適的溶劑中且從0℃到溶劑沸點的溫度范圍內進行的(優(yōu)先選用10-80℃)，反應時間從30分鐘到2天之間。方法A或方法B-1中反應所用溶劑可以是水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、1，2-亞乙基二醇、甲氧基乙醇、乙氧基乙醇、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚、吡啶、二甲基甲酰胺、二甲亞砜或環(huán)丁砜，或是這些溶劑中的二種或多種所形成的適當混合物;方法B-2中反應所用溶劑可以是乙酸乙酯、二甲基醚、二乙基醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、硝基甲烷或吡啶，或是由這些溶劑中的二種或多種所形成的適宜混合物。催化還原(方法C)反應是在適當?shù)娜軇┲?、溫度范圍?40℃到溶劑的沸點之間(最好是0-50℃)進行。所用溶劑包括水、醇(如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、仲丁醇、叔丁醇、1，2-亞乙基二醇、甲氧基乙醇、乙氧基乙醇)、羧酸酯(如乙酸甲酯、乙酸乙酯)、醚(如二甲基醚、二乙基醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯)、吡啶、二甲基甲酰胺和由這些溶劑中的二種或多種所形成的適宜混合物。用于催化反應的催化劑包括鈀、鉑、銠、和阮內鎳。加入微量的乙酸、三氟乙酸、氫氯酸或硫酸能更有利于反應的進行。
化合物(Ⅰ-1)的制備方法是根據(jù)-COOR1和-COOR2的種類來選擇的，當-COOR1和-COOR2是被甲基、乙基、丙基、丁基、仲丁基、苯基或取代的苯基酯化的羧基時，方法A或方法B-1較合適;當-COOR1和-COOR2是異丙基或叔丁基酯化的羧基時，方法B-2較合適;當-COOR1和-COOR2是被芐基或取代的謝セ聶然?，方法B-1或方法C較合適。當-COOR1和-COOR2彼此不同時，方法A、B-1、B-2和C則可以適當?shù)亟Y合。
下面敘述起始化合物(Ⅱ)的制備方法。
當化合物(Ⅱ)中的環(huán)
是一個吡咯環(huán)時，它可按(如)下述步驟來制備，
在上述反應式中，X、Y和R3與前述相同;Ra、Rb和Rc分別獨立地為一個氫原子、氟原子或烷基(與前述R所代表的相同);R4是一個氰基或一個以-COOR5表示的酯基;A是一個氫原子或鹵素原子(如氟、氯、溴、碘原子);B是鹵素原子(如氯、溴、碘原子)或一個可消去的基團，這個基團可容易地由羥基衍生而來(如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、對甲苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基);m是0、1或2。式-COOR5代表的酯基中的R5為C1-4烷基(如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基等)、苯基或取代苯基(如對-硝基苯基、對-甲氧苯基等)、還有芐基或取代的芐基(如對-硝基芐基、對-甲氧芐基等)。
化合物(V)有可能在兩相鄰碳之間可能脫氫的位置上脫氫并形成一個不飽和鍵。
下面將對前述各反應步驟加以詳細說明。
步驟1將化合物(Ⅴ)和化合物(Ⅵ)縮合，所得產(chǎn)物還原得到化合物(Ⅶ)。
可以采用熟知的反應(如醇醛縮合反應、Reformatsky(瑞福馬茨基)反應、Wittig(維悌希)反應等)進行縮合;通常選用在催化劑(如鎳、鈀、鉑、銠)存在下且在氫氣環(huán)境中的催化還原反應進行還原。
選擇醇醛縮合反應時，適用的堿性催化劑包括金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化鋇，包括金屬醇鹽如甲醇鈉、乙醇鈉和叔丁醇鉀、氨基金屬如氨基鈉和二異丙基氨基鋰，包括金屬氫化物如氫化鈉和氫化鉀，包括有機金屬化合物如苯基鋰和丁基鋰，還包括胺如三乙胺、吡啶、α-、β-或γ-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲胺基吡啶、4-(1-吡咯烷基)吡啶、N，N-二甲苯胺(dimethylaniline)和N，N-二乙苯胺(diethylaniline);可用的酸性催化劑包括無機酸如氫氯酸、硫酸、硝酸、磷酸和硼酸，也包括有機酸如乙二酸、酒石酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸和2-茨銅磺酸?？s合反應可采用已知的方法進行[見于Ei-I chi Negishi，Organometallics in OrganicSynnthesis(有機合成中的有機金屬化合物)，Vol.1，John Wiley & Sons，New York，Chichester，Brisbane，Toronto(1980)]，此方法是將酮轉變?yōu)閬喖坠杌眩侔褋喖坠杌言贚ewis酸存在下與乙醛或一個等價物縮合(Lewis酸包括無水氯化鋅、無水氯化鋁(AlCl3)、無水氯化鐵、四氯化鈦(TiCl4)、四氯化錫(SnCl4)、五氯化銻、氯化鈷、氯化銅、三氟化硼乙醚絡合物等);或是在胺(如三乙胺、吡啶、α-、β-或γ-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲胺基吡啶、4-(1-吡咯烷基)吡啶、N，N-二甲基苯胺、N，N-二乙基苯胺)存在下，用金屬錫基合金(metal triflate)[如二烷基硼錫(Ⅱ)基合金]處理酮以把酮轉化成烯醇鹽，接著使烯醇鹽與乙醛或一個等價物縮合。縮合反應在適宜的溶劑中且溫度范圍從-100℃到所用溶劑沸點(最好是-78到100℃)的溫度范圍內進行，反應1分鐘到3天。反應所用溶劑包括水、液態(tài)氨、醇(如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、仲丁醇、叔丁醇、乙二醇、甲氧基乙醇、乙氧基乙醇)、醚(如二甲基醚、二乙基醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚)、鹵代烴(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳)、脂族烴(如戊烷、己烷、庚烷)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯)、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、六甲基磷酰胺、環(huán)丁砜，以及它們的適宜的混合物。在Wittig(維悌希)縮合反應中，所用試劑包括金屬的氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化鋇，包括金屬醇鹽如甲醇鈉、乙醇鈉和叔丁醇鉀，包括金屬氨基化物如氨基鈉和二異丙基氨基鋰，包括金屬氫化物如氫化鈉和氫化鉀，包括有機金屬化合物如苯基鋰和丁基鋰，以及胺如三乙胺、吡啶、α-、β-或γ-甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、4-二甲胺基吡啶、4-(1-吡咯烷基)吡啶、N，N-二甲基苯胺和N，N-二乙基苯胺。反應在適當?shù)娜軇┲袦囟仍?20℃到所用溶劑沸點(最好是0到150℃)范圍內進行，反應時間從1分鐘到10天。反應所用溶劑包括液態(tài)氨、醇(如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、仲丁醇、叔丁醇、乙二醇、甲氧基乙醇、乙氧基乙醇)、醚(如二甲醚、二乙醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚)、脂族烴(如戊烷、己烷、庚烷)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯)、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、六甲基磷酰胺、環(huán)丁砜，和它們適宜的混合物。
也可采用Reformatsky(瑞福馬茨基)縮合反應、用于Reformatsky反應的試劑包括鋅、鎂、鋁和錫，反應在適當?shù)娜軇┲?、且溫度?20℃到所用溶劑沸點(最好0-150℃)的范圍內進行，反應時間從30分鐘到3天。反應所用溶劑包括醚(如二甲基醚、二乙基醚、四氫呋喃、二噁烷、一甘醇二甲醚、二甘醇二甲醚)、脂族烴(如戊烷、己烷、庚烷)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯)、以及它們的適當?shù)幕旌衔铩?br> 上面提及的催化還原的反應條件與化合物(Ⅲ)中-COOR1和-COOR2的脫酯化反應條件(方法C)相同。
起始物(Ⅴ)和(Ⅵ)可以按照文獻中所述的已知方法方便地得到[B.Neisesetal.，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.17，522(1978)]。
步驟2這一步驟是要向化合物(Ⅶ)中的活性甲撐(碳酸酯的α-位)引入一個可消除的官能團B;采用已知試劑按照已知的方法可以很容易地將該官能團引入化合物(Ⅶ)中。
步驟3在堿性條件下，把從步驟2中得到的化合物(Ⅷ)與丙二腈或氰基羧酸酯[NC-CH2COOR5;R5與前述同]縮合，以得到化合物(Ⅸ)。所用的堿、溶劑和反應條件隨采用的已知方法而確定。
步驟4當用胍處理化合物(Ⅸ)時，能在氰基上或酯基上反應，之后環(huán)閉合形成一個新的吡咯并嘧啶環(huán)。堿性條件下的閉環(huán)有助于反應順利進行。所用的堿包括金屬醇鹽如甲醇鈉、乙醇鈉和叔丁醇鉀、反應所用溶液包括甲醇、乙醇、丙醇、叔丁醇、二甲亞砜和六甲基磷酰胺。反應溫度范圍從0到150℃，最好20到100℃。反應時間從1到48小時不等。
步驟5步驟4中得到的化合物(Ⅳ-1Y＝NH2或OH)可以采用在制備化合物(Ⅰ-1)時所采用的方法使酯基[-COOR3]脫酯，從而轉變成化合物(Ⅱ-1Y＝NH2或H)。
步驟6步驟5中得到的化合物(Ⅱ-1Y＝OH)進行還原，得到化合物(Ⅱ-2Y＝H)。還原條件是已知的，用金屬氫化物(如硼化氫、鋁烷或其酸根型絡合物)進行還原較好。
步驟5和步驟6也可能以相反的順序進行。即在步驟7中，化合物(Ⅳ-1Y＝OH)進行與步驟6中相似的還原，得到化合物(Ⅳ-2Y＝H)，然后用與步驟5相近的方式，化合物在步驟8中脫酯而得到化合物(Ⅱ-2Y＝H)。脫酯反應和還原反應的先后次序可根據(jù)化合物(Ⅳ-1Y＝OH)中取代基的性質而選定。
在上述步驟6和8中，含有化合物(Ⅱ-2)和(Ⅱ-2′)的混合物或(Ⅳ-2)和(Ⅳ-2′)的混合物可被分離，或者通過選擇性還原使得合成的主要合成產(chǎn)物是化合物(Ⅱ-2)和(Ⅱ-2′)中的某一個或化合物(Ⅳ-2)和(Ⅳ-2′)中的某一個。
在化合物(Ⅱ)中，由分子式(Ⅱ-3X＝OH)表示的化合物
式中R和n的定義如前述，
可以由下述步驟得到，
上述各步驟中，R、R3、Y和n的含義同前，Z表示式RCH2CO-(式中R含義同前);表示式
(式中L是苯基、丁基或環(huán)己基，R和n的含義同前);或表示式
(式中M是乙基或苯基，R和n的含義同前。Y最好是氫。
下面闡述這些步驟。
步驟9化合物(Ⅹ)[T.Kondo et al.，Chemistry Letters(化學通訊)，419(1983)]和對位取代苯甲酸酯衍生物(Ⅺ)進行縮合(aldol反應，Wittig反應)，之后在氫氣氛下催化還原，得到化合物(Ⅻ)。對此縮合反應。步驟1中所用的反應條件、反應溫度和反應試劑同樣適用?；衔?Ⅲ)的-COOR1和-COOR2的脫酯化反應條件同樣適用對于氫氣氛下的催化還原反應。
步驟10在酸性條件下處理化合物(Ⅻ)可以消除異丙氧甲基對3-位上的保護而得到化合物(ⅩⅢ)。在化合物(Ⅲ)(方法B-1和方法B-2)上的-COOR1和-COOR2的脫酯反應中所用的條件、溶劑和溫度同樣適用于此反應。
步驟11
步驟10中得到的化合物(ⅩⅢ)用已知的方法脫氫，可容易地將其轉變成化合物(Ⅳ-3Y＝H)。
步驟12步驟11中得到的化合物(Ⅳ-3Y＝H)脫酯后能得到化合物(Ⅱ-3)。在化合物(Ⅲ)(方法A、B-1、B-2和C)上的-COOR1和-COOR2脫酯反應中所詳述的反應條件、所用溶劑和溫度范圍同樣適用于該反應。步驟10和12可以以任意的順序進行，得到相應的產(chǎn)物，但最后都可以得到目的化合物(Ⅱ-3)。該順序可按照化合物(Ⅻ)、(ⅩⅢ)和(Ⅳ-3)的取代基的性質作適當安排。由此得到的化合物(Ⅱ-3)(如果需要的話)可以按照文獻報道的在嘧啶環(huán)的置換反應轉變成化合物(Ⅱ-2)。[參見ProteinNucleic acid Enzyme Extra Issue，Chemical synthesis of nucleic acids(核酸的化學合成)，Kyoritsu Shuppan(1968)]。
除化合物(Ⅱ-3)之外，其它化合物(其中X是羥基)也可以進行前述的置換反應，得到相應的化合物(其中X是氨基)。
在步驟1-12中和起始物(Ⅴ)和(ⅩⅢ)的制備中所采用的反應、試劑和反應條件都是已知的并在下述文獻中有詳細說明。[參見J.F.W.Mcomine，ProtectiveGroupsinOrga-nicChemistry(有機化學中的保護基團)，PlenumPress，LondonandNewYork(1973)];[Pine，Hendrikson，Ha-mmond，OrganicChemistry(有機化學)(4thedition)[Ⅰ]-[Ⅱ]，HirokawaShoten(1982)];和[M.FieserandL.Fieser，ReagentsforOrganicSynthesis(有機合成用試劑)，Vol.1-10，Wiley-Interscience，NewYork，Lonndon，SydneyandToronto(1969-1982)]。
本發(fā)明中化合物的中間體和化合物(Ⅰ)可以用常規(guī)分離和提純方法(如濃縮、溶劑萃取、色譜法和重結晶)從反應混合物中分離出來。
本發(fā)明中的化合物(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅲ)可能形成鹽類。這些鹽用已知方法制備，例如堿式或酸式鹽以及季式鹽。堿式鹽包括堿金屬、堿土金屬、無毒的金屬、銨和優(yōu)先地用C1-3烷基或乙醇取代的銨、如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、鋁、鋅、銨、三甲基銨、三乙基銨、吡啶鹽和優(yōu)先地用C1-3烷基或乙醇取代的吡啶鹽。酸式鹽包括無機酸鹽(其中無機酸有氫氯酸、硫酸、硝酸、磷酸和硼酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸和2-茨酮磺酸)。季式鹽包括甲基溴化物、甲基碘化物、甲磺酸甲酯、甲基苯磺酸甲酯和對-甲苯磺酸甲酯。同樣，化合物(Ⅰ)、(Ⅱ)和(Ⅳ)也能形成兩性離子。
下列化合物是本發(fā)明的化合物(Ⅰ)的一些例子N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2-氨基-4-羥基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2-氨基-4-羥基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[2-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[2-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸二乙酯、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、
N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1，1-二乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2，2-二乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-烯丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-烯丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-(丙烯-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-(丙烯-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙炔基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙炔基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-炔丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-炔丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-(丙炔-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-(丙炔-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙烯基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-烯丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-烯丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-(丙烯-1-基)]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、
N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-(丙烯-1-基)]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-乙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-炔丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-炔丙基丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-1-(丙炔-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、N-｛4-[3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-(丙炔-1-基)丙基]苯甲酰｝-左旋-谷氨酸、效果本發(fā)明的化合物(Ⅰ)對于老鼠的各類腫瘤細胞[P388、L1210、L5178Y、B16黑素瘤、Metha、Lewis肺癌、5180肉瘤、艾氏(Ehrlich)癌、Colon38)和人類的各類腫瘤細胞(HL60、KB、Lu65)，都有很好的抗腫瘤效果，它們可以減小由溫血動物攜帶的腫瘤(黑素瘤、肉瘤、腫大細胞瘤、癌、瘤(neoplasia)等]并且可以延長攜帶腫瘤的溫血動物的壽命。
下面敘述了可以說明本發(fā)明的化合物(Ⅰ)的醫(yī)藥療效的結果。
下面敘述的實施例中得到的化合物對KB細胞的抑制生長作用(IC50)是用下面的方法測定的。
用常規(guī)方法制備的人類鼻咽癌KB細胞(1×104個細胞/毫升)接種于96個微量池培養(yǎng)皿(microwell plate)的每個池中(每個池中0.1ml)，在37℃、5%CO2的條件下靜置培養(yǎng)24小時。將在10%MEM(Nissus Pharmaceutical Co.，Ltd.)中的由實施例中得到的一種化合物的溶液加入上述培養(yǎng)物中，并在37℃、5%CO2的條件下再培養(yǎng)72小時。然后將培養(yǎng)物取出，再加入0.1ml由甲基噻唑基四唑(MTT)(Dojindo Laboratories)在10%MEM中形成的溶液(1.0mg/ml)，并在37℃下培養(yǎng)4小時。最后加入0.1ml 10%SDS溶液(Wako純化學試劑)，在37℃下再培養(yǎng)24小時。測定590nm的吸光度，化合物的IC50值定義為使細胞數(shù)目比未處理的對照組中細胞數(shù)目減少50%所需要的該化合物的濃度。結果見表1。
表1試驗化合物 IC50(μg/ml)實施例4的化合物0.003實施例6的化合物0.08實施例16的化合物0.0006另外，下面敘述表明本發(fā)明化合物(Ⅰ)的醫(yī)藥療效的結果。
下面介紹的實施例14中得到的化合物對HL-60和HEL細胞的抑制細胞生長作用(IC50)是用下述方法測定的。
(1)人的血癌細胞HL-60(2×105個細胞/ml)懸浮在含有本發(fā)明化合物的GIT培養(yǎng)介質(Wako純化學試劑)中，在96個微池培養(yǎng)皿的每個池中加入0.2ml此懸浮液并進行接種。經(jīng)在37℃、5%CO2的條件下靜置培養(yǎng)68小時后，加入1μCi(微居里)[3H]-胸苷(5Ci/mmol)，混合物再培養(yǎng)4小時。為了測定胸苷在細胞中的滲入情況，不溶于酸的片段收集在玻璃過濾器上，這種片段的放射性活性用閃爍計數(shù)器測量。所述化合物的IC50值定義為使?jié)B入到細胞中的放射性活性減少到未經(jīng)處理的對照組的50%時，所需要的該化合物的濃度。
(2)人類胎兒正常的肺成纖維細胞(Lung fibroblasts)HEL(1×104個細胞/ml)懸浮在MEM培養(yǎng)介質(Nippon流速實驗室)中，在96個微池培養(yǎng)皿的每個池中加入0.1ml此懸浮液并進行接種。經(jīng)在37℃、5%CO2的條件下靜置培養(yǎng)24小時之后，將含本發(fā)明化合物的MEM培養(yǎng)介質加入其中，該混合物再培養(yǎng)72小時。此介質被含1μg/mlMTT(甲基噻唑基四唑)(Dojindo Laborato-ries)的介質所置換，向其中加入0.1ml 100%SDS(Wako純化學試劑)，并培養(yǎng)過夜。用Multiscan(Titertec Co.)測定590nm處的吸光度，與未處理的對照組的吸光度比較以確定培養(yǎng)物的IC50值。結果見表2。
表2試驗化合物HL-60HEL(μg/ml)(μg/ml)實施例14的化合物0.04＞20.0如上述結果所示，化合物(Ⅰ)能有效地抑制KB和HL-60的細胞生長，但是它們對HEL無毒。本發(fā)明的化合物(Ⅰ)及其鹽毒性低，有顯著的抗腫瘤作用。所以含化合物(Ⅰ)或其鹽的制劑可用作治療溫血動物、尤其是哺乳動物(如老鼠、小鼠、貓、狗、兔子等)的抗腫瘤藥劑。
當用作抗腫瘤藥劑時，化銜錚á瘢┘捌溲慰梢鑰詵部梢苑淺ξ肝?，因磻Z強梢允欠勰?、颗粒、片剂、胶膿u⑺┘梁駝爰粒強砂賜ǔ５姆椒ǎ佑茫ㄈ紓┮窖顯市淼母承渭?、辅剂和稀蕡D晾粗票?。剂量根据动捂|⒓膊?、症椎A⒒銜錆陀靡┓絞蕉 如對于上述的溫血動物每天的口服劑量是每公斤體重服用本發(fā)明的藥物2.0-100mg，非腸胃吸收為1.0-50mg/kg，注射可能是肌肉注射、腹膜間注射、皮下或靜脈注射。
用熟知的方法制備這些制劑。對于上述口服制劑的制備，例如片劑是采用粘合劑[羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙(烯)二醇(macrogol)等]、分散劑(如淀粉、羧基甲基纖維素鈣等)和潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石等)加上抗腫瘤化合物結合而成的。
非腸胃吸收的制劑的制備例如針劑的制備，是將滲透劑(如莆萄糖、D-山梨醇、D-甘露糖醇、氯化鈉等)、殺菌劑(芐醇、氯丁醇、對-羥基苯甲酸甲酯、對-羥基苯甲酸丙酯等)和緩沖液(如磷酸鹽緩沖液、乙酸鈉緩沖液等)與抗腫瘤化合物進行適當?shù)慕Y合實現(xiàn)的。
制備片劑的一個示例過程包括以下步驟把1.0-25mg本發(fā)明的化合物、100-500mg乳糖、50-100mg玉米淀粉和約5-20mg羥丙基纖維素混合起來(這是一片藥劑的通常組成)、造粒、與玉米淀粉和硬脂酸鎂混合并制片，使每片重約100-500mg，直徑約3-10mm。藥片可用丙酮和乙醇的混合物涂漬(此混合物中含有的鄰苯二甲酸的羥丙甲基纖維素酯(約10-20mg/片)和蓖麻油(0.5-2mg)的濃度約為5-10%)，得到表面涂敷的腸溶的藥片。
針劑的制備過程示例如下把約2.0-50mg本發(fā)明化合物的一種鈉鹽溶于含有約2ml生理鹽水的安瓿瓶中，將瓶中溶液封住，在110℃消毒此瓶30分鐘，或是向該安瓿瓶中加入約2ml含10-40mg甘露糖醇或山梨醇的消毒蒸餾水，冷凍干燥并密封此瓶。需要用這種冷凍干燥了的化合物做皮下、靜脈或肌肉注射時，打開安瓿瓶，用生理鹽水溶解里面的藥劑，使活性化合物的濃度約為1.0-25mg/ml。
下列參比例和實施例將更具體地闡述本發(fā)明。
參比例15-[4-(甲酸叔丁酯基)苯基]戊酸甲酯的制備在氬氣氛中，將25克鉀加到820ml干燥的叔丁醇中，加熱回流至全部溶解。將此溶液冷卻到20℃，加入300ml乙醚，隨后緩慢加入由63.93克巴豆酸甲酯和71.0克4-甲酰苯甲酸叔丁酯在300ml叔丁醇-乙醚(叔丁醇∶乙醚＝2∶1)中形成的溶液，在此過程中保持內部溫度為10℃。同溫度下攪拌2小時之后，再加入750ml1N硫酸氫鉀水溶液(伴有冷卻)，使PH值調節(jié)到4。該溶液用乙醚萃取，先用水洗，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌，并減壓蒸去溶劑。得到的剩余物溶于100ml乙酸乙酯中，向它加入15克含鈀5%的Pd-C催化劑(恩格哈德公司制造)，并在3.92bar(4Kg/cm)氫氣壓力及室溫下劇烈攪拌3小時。濾去催化劑，減壓蒸去溶劑后，向剩余物中加入200ml干燥的甲醇、30毫克4-(N，N-二甲胺)吡啶和250ml二氯甲烷，然后在0℃下向該溶液緩慢滴加由132克1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺在250ml二氯甲烷中形成的溶液。在室溫下攪拌18小時之后，將混合物冷卻到0℃;向它加入30ml乙酸，先在0℃攪拌30分鐘，再在室溫下攪拌30分鐘。所得沉淀過濾除去，在減壓下把濾液濃縮至干，向剩余物加入100ml乙酸乙酯，并在0℃下放置2小時，所得沉淀再次過濾除去。濾液在減壓下濃縮，剩余物用柱色譜法(擔體硅膠，100g;展開溶劑乙醚∶己烷＝1∶15→1∶5)提純，得到59.7克目標化合物。
沸點(Bp)145-155℃/0.2-0.3mmHgIR(Neat)2980，2950，1740，1712，1605cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.40-1.75(4H，m)，1.55(9H，s)，2.15-2.45(2H，m)，2.50-2.75(2H，m)，3.62(3H，s)，7.16(2H，d，J＝8Hz)，7.85(H，d，J＝8Hz).
參比例25-〔4-(甲酸叔丁酯基)-苯基〕-2-碘代戊酸甲酯的制備在氬氣氛下，將24.5mmol丁基鋰在15.3ml己烷中形成的溶液 ℃下加入到由2.48克二異丙胺在100ml四氫呋喃中形成的溶液中，并攪拌10分鐘，然后在-78℃向該溶液中滴加由6.53克在參比例1中得到的化合物與50ml四氫呋喃形成的溶液，滴加時間持續(xù)30分鐘。攪拌30分鐘后，繼續(xù)加入由5.66克碘與30ml四氫呋喃形成的溶液，并繼續(xù)攪拌20分鐘。將所得溶液的溫度在30分鐘內恢復到0℃，再滴加30ml1N的硫酸氫鉀水溶液，在調節(jié)其pH值至4后，該溶液用乙醚萃取。有機層先用1N碳酸鉀水溶液洗滌，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌，繼而用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸去溶劑后得到的剩余物采用柱色譜法提純(乙醚∶己烷＝1∶9)，得到4.736克目標化合物。
IR(Neat)2990，2905，1744，1718，1612cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.45-1.80(2H，m)，1.58(9H，s)，1.80-2.16(2H，m)，2.69(2H，t，J＝7Hz)，3.72(2H，s)，4.30(1H，t，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
參比例35-〔4-(甲酸叔丁酯基)苯基〕-2-(二氰甲基)戊酸甲酯的制備在用水冷卻的情況下，將由3.37克丙二腈與8ml二甲亞砜形成的溶液加到由1.356克氫化鈉與8ml二甲亞砜形成的懸浮液中，攪拌15分鐘。向所得溶液滴加由4.736克在參比例2中得到的化合物與12ml二甲亞砜形成的溶液，并在室溫下攪拌1小時;在0℃下向該溶液加入45ml1N的硫酸氫鉀水溶液，隨后用乙醚萃取。得到的醚層用水洗滌后用無水硫酸鎂干燥，跟著在減壓條件下蒸發(fā)掉溶劑。所得剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠，200克;展開溶劑醋酸乙酯∶己烷＝1∶5)，得到3.33克目標化合物。
IR(Neat)2970，2930，2252 1740，1713，1608cm-11H-NMR(CDCl3)δ1.60-2.05(4H，m)，1.48(9H，s)，2.70(2H，brt，J＝7Hz)，2.90-3.15(1H，m)，3.82(3H，s)，4.04(1H，d，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.92(2H，d，J＝8Hz).
參比例44-〔3-(2-氨-7-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧代吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-氧代-2-丙烯基〕苯甲酸甲酯的制備1.7克2-氨-7-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧代吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-甲酰醛(Carbaldehyde)被懸浮在33ml甲醇-四氫呋喃混合物中(10∶1)，向該懸浮液加入甲醇鈉的甲醇溶液(相當于6.25毫摩爾，3.75ml)以使其溶解。然后加入2.23克4-甲酯苯基乙酮(4-methoxycarbonylactophenone)，并在室溫下攪拌15小時。沉淀物用過濾的辦法收集、用少量甲醇和乙醚洗滌、干燥，可得到2.02克黃色針狀的目標化合物。
IR(KBr)3480，3350，1710，1680，1620，1550，1375，1280，1210，1110，1060，775.cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.23(6H，d，J＝6Hz)，3.93(3H，s)，3.80-4.07(1H，m)，5.15(2H，s)，5.63(2H，s)，6.92(1H，s)，7.10-7.40(5H，m)，7.73(1H，d，J＝15Hz)，8.13(4H，s)，8.60(1H，d，J-15Hz).
參比例54-〔3-(2-氨-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧代-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸甲酯的制備2.01克在參比例4中得到的化合物被溶解在350ml甲醇-四氫呋喃(3∶4)混合物中，向該溶液添加8ml1N的鹽酸和4克含鈀10%的Pd-c催化劑(由恩格哈德公司制造)，并在氫氣氛下催化還原48小時。濾去催化劑，中和濾液、減壓蒸發(fā)去掉溶劑后，得到的剩余物用硅膠柱色譜法分離和提純(載體100克;展開溶劑含乙醇2-4%的氯仿)，得到0.68克無色粉末狀目標化合物。
IR(KBr)3210，2980，1725，1625，1580，1510，1435，1275，1175，1100，1060cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝6Hz)，1.19(3H，d，J＝6Hz)，1.50-2.13(4H，m)，2.70(2H，t，J＝7.5Hz)，3.07-3.77(3H，m)，3.80-4.60(1H，m)，3.87(3H，s)，5.03 and 5.57(2H，ABq)，7.21(2H，d，J＝7.5Hz)，7.91(2H，d，J＝7.5Hz).
參比例64-〔3-(2-氨-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-丙基〕苯甲酸甲酯的制備0.66克在參比例5中制得的化合物溶解在31.5ml干燥的四氫呋喃中，然后向該溶液中加入78.3ml0.21N的溴化氫二氯甲烷溶液，并在室溫下攪拌20小時。然后加入3倍于它的體積的正庚烷，產(chǎn)生的沉淀物用過濾法收集，得到0.59克目標化合物的二氫溴化物，它是一種無色粉末。
IR(KBr)3290，3030，2950，1720，1690，1680 1620，1480，1350，1275，1100，1035，760cm-1.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.83(4H，broad)，2.65(2H，t，J＝7.5Hz)，3.07-3.37(2H，m)，3.50-3.77(1H)，m)，3.82(3H，s)，7.33(2H，d，J＝7.5Hz)，7.86(2H，d，J＝7.5Hz).
參比例7N-〔4-〔3-(2-氨-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸二乙酯的制備1.47克在參比例6中得到的化合物懸浮在60ml四氫呋喃中，向該懸浮液加入120ml0.1N的氫氧化鈉水溶液，并在室溫下攪拌21小時。然后該溶液用60ml0.1N的氫氯酸中和，并在減壓下濃縮至干燥。得到的剩余物懸浮于112.5ml干燥的N，N-二甲基甲酰胺中，并加入2.88克左旋-谷氨酸二乙酯鹽酸化物(diethylL-glutamatehydrochloride)、1.295ml二苯基磷酰疊氮化物和2.52ml三乙胺，回復到室溫并連續(xù)攪拌63小時。過濾除去產(chǎn)生的沉淀物，濾液在減壓下濃縮至干燥。剩余物采用硅膠柱色譜法作分離-提純處理(載體100克;展開溶劑含氨6.9%的氯仿∶乙醇＝1∶20→1∶10)，得到1.12克無色粉末狀目標化合物。
IR(KBr)3330，2930，1740，1670，1640，1570，1540，1440，1375，1300，1200，1095，1020cm-1.
1H-NMR(CDCl3-CD3OD)δ1.20(3H，t，J＝7.5Hz)，1.27(3H，t，J＝7.5Hz)，1.47-1.83(4H，m)，2.0-2.36(2H，m)，2.37-2.50(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7.5Hz)，3.10-3.37(2H，m)，3.53-3.80(1H，m)，3.96-4.33(4H，q x 2，J＝7.5Hz)，4.60-4.87(1H，m)，7.25(2H，d，J＝9Hz)，7.75(2H，d，J＝9Hz).
參比例84-〔3-(2-氨基-7-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧基吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-氧代-2-丙烯基〕苯甲酸甲酯的制備1.7克2-氨基-7-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧基吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-甲酰醛被懸浮在33ml甲醇-四氫呋喃混合物(10∶1)中，向該懸浮液中加入3.75ml甲醇鈉的甲醇溶液(相當于6.25mM)使其溶解。然后，加入2.23克4-甲酯苯基乙酮并在室溫下攪拌15小時。沉淀物用過濾法收集，用少量甲醇和乙醚洗滌、干燥，可得到2.02克黃色針狀的目標化合物。
IR(KBr)3480，3350，1710，1680，1620，1550，1375，1280，1210，1110，1060，775cm-11H-NMR(CDCl3)δ1.23(6H，d，J＝6Hz)，3.93(3H，s)，3.80-4.07(1H，m)，5.15(2H，s)，5.63(2H，s)，6.92(1H，s)，7.10-7.40(5H，m)，7.73(1H，d，J＝15Hz)，8.13(4H，s)，8.60(1H，d，J＝15Hz).
參比例94-〔3-(2-氨基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧代-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸甲酯的制備2.01克在參比例8中制得的化合物溶庠 50ml甲醇-四氫呋喃混合物(3∶4)中，向該溶液中加入8ml1N的鹽酸和4克含鈀10%的Pd-c催化劑(由恩格哈德公司制造)，并在氫氣氛中催化還原48小時。濾去催化劑、中和濾液、減壓蒸去溶劑后，得到的剩余物經(jīng)硅膠柱色譜法分離和提純(載體100克;展開溶劑含乙醇2-4%的氯仿)，得到0.68克無色粉末狀目標化合物。
IR(KBr)3210，2980，1725，1625，1580，1510，1435，1275，1175，1100，1060cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝6Hz)，1.19(3H，d，J＝6Hz)，1.50-2.13(4H，m)，2.70(2H，t，J＝7.5Hz)，3.07-3.77(3H，m)，3.80-4.06(1H，m)，3.87(3H，s)，5.03 and 5.57(2H，ABq)，7.21(2H，d，J＝7.5Hz)，7.91(2H，d，J＝7.5Hz).
參比例104-〔3-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸甲酯的制備0.66克在參比例9中得到的化合物溶解在31.5ml干燥的四氫呋喃中，向該溶液中加入78.3ml0.21N氫溴酸的二氯甲烷溶液，在室溫下攪拌20小時。加入三倍于所形成溶液體積的正己烷，產(chǎn)生的沉淀物用過濾法收集，得到0.59克目標產(chǎn)物的二氫溴化物，它是一種無色粉末。
IR(KBr)3290，3030，2950，1720，1690，1680，1620，1480，1350，1275，1100，1035，760cm-1.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.83(4H，broad)，2.65(2H，t，J＝7.5Hz)，3.07-3.37(2H，m)，3.50-3.77(1H，m)，3.82(3H，s)，7.33(2H，d，J＝7.5Hz)，7.86(2H，d，J＝7.5Hz).
參比例114-〔2-(2-氨基-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧基吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-乙烯基〕苯甲酸甲酯的制備由2.04克2-氨基-7-芐基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧基吡咯代〔2，3，-d〕嘧啶-5-甲酰醛和84ml干燥甲醇形成懸浮液，向該液加入3.24克對-甲酸甲酯(基)芐基三苯基溴化鏻并攪拌。然后加入甲醇鈉的甲醇溶液(相對于鈉基準為6.6mM)并在室溫下攪拌1.5小時，得到一種黃色針狀物。用過濾法收集該針狀物、用甲醇洗滌后再用乙醚洗滌、干燥，得到1.49克目標化合物(順式)。母液用硅膠柱色譜法提純(載體100克;展開溶劑醋酸乙酯-己烷，1∶4→1∶3)，得到0.9克目標化合物的順-反式混合物，它為一種黃色粉末。
順式IR(KBr)3340，3220，2980，1715，1690，1625，1600，1530，1430，1280，1175，1105，1060，995cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.20(6H，d，J＝6Hz)，3.87(3H，s)，3.80-4.07(1H，m)，5.14(2H，s)，5.32(2H，s)，5.60(2H，s)，6.77(1H，s)，7.10-7.37(5H，m)，7.43(2H，s)，7.50(2H，d，J＝9Hz)，7.95(2H，d，J＝9Hz).
參比例124-〔2-(2-氨基-3-異丙氧甲基-4(3H)-氧代-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲酸甲酯的制備使1.6克在參比例11中得到的化合物進行如參比例9中所述的反應，得到0.62克目標化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝6Hz)，1.20(3H，d，J＝6Hz)，1.47-2.0(1H，m)，2.10-2.43(1H，m)，2.65(2H，t，J＝9Hz)，2.97-3.60(3H，m)，3.73-4.07(1H，m)，3.90(3H，s)，4.47(2H，s)，5.30(1H，d，J＝12Hz)，5.60(1H，d，J＝12Hz)，7.13-7.50(7H，m)，7.92(1H，d，J＝9Hz).
參比例134-〔2-(2-氨基-4-羥基-7H-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲酸甲酯的制備使1.25克在參比例12中得到的化合物進行如參比例10中所述的反應，得到0.51克目標化合物。
IR(KBr)3400，3300，2920，1740，1710，1680，1640，1600，1570，1435，1310，1280，1110，1020cm-1.
1H-NMR(DMSO-d6/D2O)δ1.53-2.27(2H，m)，2.70(2H，t，J＝9Hz)，3.00-3.26(2H，m)3.47-3.63(1H，m)，3.83(3H，s)，7.35(2H，d，J＝9Hz)，7.85(2H，d，J＝9Hz)
參比例145-〔4-(甲酸叔丁酯基)-苯基〕戊酸甲酯的制備在氬氣氛下，加熱回流3小時，使25克鉀完全溶解于820ml干燥的叔丁醇中。該溶液冷卻至20℃后，向它加入300ml乙醚、然后緩慢地加入由63.93克巴豆酸甲酯和71.0克4-甲酰苯甲酸叔丁基酯溶于300ml叔丁醇-乙醚混合物(2∶1)所形成的溶液，在該過程中保持內部溫度為10℃。
得到的混合物在10℃攪拌2小時，然后邊冷卻邊加入750ml1N的硫酸氫鉀水溶液，以調節(jié)其pH值至4。用乙醚萃取后，醚層用飽和氯化鈉溶液洗滌，溶劑在減壓下蒸去。得到的剩余物溶解于100ml醋酸乙酯中，加入15克含鈀5%的Pd-C催化劑(恩格哈德公司制造)，在3.92bar氫壓(4kg/cm2)和室溫下劇烈攪拌3小時。濾去催化劑、減壓蒸去溶劑后，再加入200ml干燥的甲醇、30毫克4-(N，N-二甲氨基)吡啶和250ml二氯甲烷，然后在0℃向形成的溶液緩慢滴加由132克1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺溶于250ml二氯甲烷中所形成的溶液。在室溫下攪拌18小時后，混合物被冷卻至0℃。加入30ml醋酸，混合物在0℃攪拌30分鐘，然后回復到室溫下再攪拌30分鐘。濾去產(chǎn)生的沉淀物，濾液在減壓下濃縮至干燥，向剩余物加入100ml醋酸乙酯后，將它在0℃下靜置2小時，并再濾去產(chǎn)生的沉淀物。濾液在減壓下濃縮，剩余物經(jīng)柱色譜法提純(載體500克硅膠;展開溶劑乙醚-己烷，1∶15至1∶5)，得到59.7克目標化合物。
Bp.145-155℃/0.2-0.3mmHg.
IR(Neat)2980，2950，1740，1712，1605cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.40-1.75(4H，m)，1.55(9H，s)，2.15-2.45(2H，m)，2.50-2.75(2H，m)，3.62(3H，s)，7.16(2H，d，J＝8Hz)，7.85(H，d，J＝8Hz).
參比例155-〔4-(甲酸丁酯基)-苯基〕-2-碘代戊酸甲酯的制備在氬氣氛、0℃下，將由24.5mmol丁基鋰和15.3ml己烷形成的溶液加入到由2.48克二異丙基胺溶于100ml四氫呋喃所形成的溶液中，并攪拌10分鐘。在-78℃向該溶液中滴加由6.53克在參比例14得到的化合物溶于50ml四氫呋喃形成的溶液，該過程持續(xù)30分鐘。攪拌30分鐘后，再加入由5.66克碘溶于30ml四氫呋喃所形成的溶液，并繼續(xù)攪拌20分鐘。用30分鐘使它升溫至0℃，然后滴加30ml1N的硫酸氫鉀水溶液，將pH值調到4，接著用乙醚萃取。其有機層用1N的碳酸鉀水溶液洗滌，再用飽和氯化鈉溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。經(jīng)減壓蒸去溶劑，得到的剩余物用柱色譜法提純(載體100克硅膠，乙醚-己烷為1∶9)，可得到4.736克目標化合物。
IR(Neat)2990，2905，1744，1718，1612cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.45-1.80(2H，m)，1.58(9H，s)，1.80-2.16(2H，m)，2.69(2H，t，J＝7Hz)，3.72(2H，s)，4.30(1H，t，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
參比例165-〔4-(甲酸叔丁基酯基)-苯基〕-2-(二氰甲基)戊酸甲酯的制備1.356克氫化鈉與8ml二甲亞砜形成一懸浮液，在冰冷卻下向該液加入由3.37克丙二腈溶于8ml二甲亞砜所形成的溶液，并攪拌15分鐘。向該溶液中滴加由4.736克在參比例15中制得的化合物溶于12ml二甲亞砜所形成的溶液，所得混合物在室溫下攪拌1小時。然后在0℃加入45ml1N硫酸氫鉀水溶液，隨后用乙醚萃?。翌U巡閿盟吹硬⒂夢匏蛩崦靖稍鎩＞躚拐羧ト薌梁螅Ｓ轡鎘彌追ㄌ崠浚ㄔ靨澹汗杞海 00克，醋酸乙酯-己烷1∶5)，得到3.33克目標化合物。
IR(Neat)2970，2930，2252，1740，1713，1608cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.60-2.05(4H，m)，1.48(9H，s)，2.70(2H，brt，J＝7Hz)，2.90-3.15(1H，m)，3.82(3H，s)，4.04(1H，d，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.92(2H，d，J＝8Hz).
參比例175-〔4-(甲酸叔丁基酯基)-苯基〕己酸乙酯的制備19.90克4-乙酰基苯甲酸叔丁酯溶于200ml苯-乙醚-四氫呋喃混合物(3∶3∶2)中形成溶液，將11.81克鋅懸浮于該液中，在加熱攪拌的同時，緩慢地向該懸浮液加入17.44克4-溴代巴豆酸乙酯，然后加入約20毫克碘。得到的混合物在一油浴上(60-70℃)加熱回流1小時，然后再加入3.00克4-溴代巴豆酸乙酯，混合物繼續(xù)加熱回流15分鐘。將它冷卻到室溫后，該反應混合物加入到500ml水中，加入醋酸以調節(jié)pH值至4.9并用乙醚萃取。萃取相用5%氨水洗滌并用無水硫酸鎂干燥。
經(jīng)減壓蒸去溶劑后得到的剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠300克;展開溶劑醋酸乙酯-己烷1∶5)，可得到目標化合物。
IR(Neat)3480，2975，1720，1700，1650，1605cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.20(3H，t，J＝7Hz)，1.53(12H，s)，2.64(2H，d，J＝7Hz)，2.67(1H，brs)，3.63(3H，s)，4.08(2H，q，J＝7Hz)，5.80(1H，d，J＝15Hz)，6.80(1H，dt，J＝15Hz，7Hz)，7.45(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
22.3克己烯酸乙酯衍生物(ethylhexenatederivative)完全溶解在200ml乙醇-醋酸混合物(20∶1)中，向它加入5.0克含鈀5%的Pd-C催化劑，然后劇烈攪拌115小時。用硅藻土濾去Pd-C，并減壓蒸去溶劑后，將其剩余物減壓蒸發(fā)，得到15.66克無色油狀目標化合物。
Bp.162-165℃/0.3mmHgIR(Neat)2980，2940，1735，1710，1607，848cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.20(3H，t，J＝7Hz)，1.23(3H，d，J＝6Hz)，1.30-1.80(4H，m)，1.58(9H，s)，2.24 10(2H，brt，J＝6Hz)，2.77(1H，dq，J＝6Hz，6Hz)，4.08(2H，q，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
參比例185-〔4-(甲酸叔丁酯基)苯基〕-2-碘代己酸乙酯的制備將6.41克在參比例17中得到的化合物進行如參比例2中所述的反應，可得到3.90克目標化合物。
IR(Neat)2980，2940，1738，1715，1610，850cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.23(3H，t，J＝7Hz)，1.23(2H，d，J＝7Hz)，1.40-1.95(4H，m)，1.60(9H，s)，2.75(1H，dq，J＝6Hz，6Hz)，4.15(2H，q，J＝7Hz)，4.18(1H，t，J＝7Hz)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
參比例195-〔4-(甲酸叔丁酯基)-苯基〕-2-(二氰甲基)-己酸乙酯的制備將3.90克在參比例18中得到的化合物進行如參比例3所述的反應，得到3.19克目標化合物。
IR(Neat)2980，2930，2250，1735，1710，1605，847cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.26(1.5H，t，J＝7Hz)，1.26(3H，d，J＝7Hz)，1.27(1.5H，t，J＝7Hz)，1.35-1.80(4H，m)，1.58(9H，s)，2.50-3.08(2H，m)，4.00(1H，dd，J＝8Hz，4Hz)，4.22(1H，q，J＝7Hz)，4.23(1H，q，J＝7Hz)，7.18(2H，d，J＝8Hz)，7.92(2H，d，J＝8Hz).
實施例14-〔3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備2.35克叔丁醇鉀和1.07克鹽酸胍與10ml叔丁醇形成溶液，在氬氣氛下向該溶液中加入由3.33克在參比例3中制得的化合物溶于30ml叔丁醇所形成的溶液，加熱回流20小時。向該反應混合物再加入434毫克叔丁醇鉀和370毫克鹽酸胍，并繼續(xù)加熱回流8小時。冷卻該反應混合物，加入到約10ml1N硫酸氫鉀水溶液并調節(jié)混合物的pH值至9。用四氫呋喃-氯仿混合物萃取后，減壓蒸去溶劑，用柱色譜法提純所得剩余物(載體硅膠100克;展開溶劑二氯甲烷∶乙醇＝15∶1→在一個分液漏斗中與濃氨水混合后的二氯甲烷∶乙醇＝15∶1)，得到1.90克目標化合物。
IR(KBr)3430，3360，1710，1627，1583，1432cm-1.
1H-NMR(CDCl3-Me2SO-d6)δ1.15-1.73(2H，m)，1.55(9H，s)，1.73-2.10(2H，m)，2.61(2H，t，J＝7Hz)，3.35(1H，t，J＝6Hz)，5.40(2H，brs)，5.51(2H，brs)，6.30(1H，brs)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.29(2H，d，J＝8Hz).
實施例24-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備575毫克在實施例1中得到的化合物溶于6ml四氫呋喃形成溶液，在0℃下向該溶液中加入由7.5mmol甲硼烷-四氫呋喃復合物溶于7.5ml四氫呋喃所形成的溶液，攪拌4.5小時。向該反應混合物加入6ml醋酸-甲醇混合物(1∶1)，并在室溫下攪拌15小時。減壓蒸去溶劑，剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠30克;展開溶劑二氯甲烷∶乙醇＝100∶6→100∶7→100∶8→10∶1→8∶1)，得到263毫克目標化合物。
IR(KBr)3335，3180，2975，2935，1710，1607，1287，1163，1110cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.54(9H，s)，1.77-1.90(2H，m)，2.68(2H，t，J＝8Hz)，2.72(2H，t，J＝8Hz)，5.54(2H，brs)，6.11(2H，brs)，6.45(1H，s)，7.33(2H，d，J＝8Hz)，7.82(2H，d，J＝8Hz)，10.51(1H，s).
實施例3N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸二乙酯的制備向381毫克在實施例2中制得的化合物中加入3ml三氟醋酸，混合物在室溫下攪拌3小時。減壓下蒸去三氟醋酸，在70℃下減壓干燥，所得剩余物和由748毫克左旋谷氨酸二乙酯鹽酸化物(diethylL-glutamatehydrochl-oride)溶于4mlN，N-二甲基甲酰胺所形成的溶液中，在0℃下加入一個由858毫克二苯基磷?；B氮化物(diphe-nylphosphorylazide)與4mlN，N-二甲基甲酰胺形成的溶液，然后在相同溫度下再滴加由631毫克三乙胺與4mlN，N-二甲基甲酰胺形成的溶液。在0℃攪拌30分鐘再在室溫攪拌63小時，濾去沉淀物。減壓蒸去溶劑后，剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠20克;展開溶劑在一個分液漏斗中與濃氨水混合后的二氯甲烷→與濃氨水混合后的二氯甲烷∶乙醇＝
40∶1→30∶1)，得到260毫克目標化合物。
IR(KBr)3330，3160，1735，1632，1575，1540，1500，1200cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.17(3H，t，J＝7Hz)，1.20(3H，t，J＝7Hz)，1.80-2.20(4H，m)，2.44(2H，t，J＝7Hz)，2.68(2H，t，J＝7Hz)，2.72(2H，t，J＝7Hz)，4.05(2H，q，J＝7Hz)，4.11(2H，q，J＝7Hz)，4.35-4.50(1H，m)，5.34(2H，s)，5.91(2H，s)，6.42(1H，s)，7.31(2H，d，J＝8Hz)，7.80(2H，d，J＝8Hz)，8.66(1H，d，J＝8Hz)，10.51(1H，s).
實施例4N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸的制備250毫克在實施例3中制得的化合物溶于7ml四氫呋喃-水混合物(1∶1)中，然后向該液中加入2.52ml1N的氫氧化鈉水溶液，混合物在室溫下攪拌1.5小時。在減壓下將該溶液濃縮至3ml，然后用微孔過濾器濾去產(chǎn)生的不溶性物質。濾液冷卻至0℃后加入0.5ml醋酸，并用過濾法收集產(chǎn)生的結晶，用冰水徹底洗滌。結晶在70℃減壓干燥，得到201毫克白色晶體狀的目標化合物。
IR(KBr)3340，3200，2940，1660-1630，1540，1500，1397cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.75-2.20(4H，m)，2.35(2H，t，J＝7Hz)，2.68(2H，t，J＝7Hz)，2.71(2H，t，J＝7Hz)，4.30-4.47(1H，m)，5.53(2H，brs)，6.15(2H，s)，6.46(1H，s)，7.31(2H，d，J＝8Hz)，7.81(2H，d，J＝8Hz)，8.48(1H，d，J＝8Hz)，10.51(1H，s).
實施例5N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸二乙酯的制備將200毫克在實施例1中制得的化合物進行如實施例3所述的反應，得到164毫克目標化合物。
IR(KBr)3355，3230，2995，2990，1740，1638，1595，1590cm-1.
1H-NMR(CDCl3/Me2SO-d6)δ1.20(3H，t，J＝7Hz)，1.25(3H，t，J＝7Hz)，1.25-2.70(11H，m)，3.25-3.45(1H，m)，4.05(2H，q，J＝7Hz)，4.15(2H，q，J＝7Hz)，4.38-4.68(1H，m)，5.63(2H，brs)，5.66(2H，brs)，
7.16(2H，d，J＝8Hz)，7.76(2H，d，J＝8Hz)，8.39(1H，d，J＝8Hz)，10.50(1H，s).
實施例6N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸的制備將112毫克在實施例5中制得的化合物進行如實施例4所述的反應，得到60毫克目標化合物。
IR(KBr)3350，3210，2950，1730，1660，1630cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.20-1.56(2H，m)，1.65-2.20(4H，m)，2.35(2H，t，J＝7Hz)，2.50-2.65(2H，m)，3.25-3.35(1H，m)，4.32-4.46(1H，m)，5.90(2H，brs)，6.00(2H，brs).7.22(2H，d，J＝8Hz)，7.78(2H，d，J＝8Hz)，8.52(1H，d，J＝8Hz)，10.45(1H，s).
實施例7N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸二乙酯的制備150毫克在參比例7中制得的化合物溶解于22.5ml乙醇中，向它加入450毫克含鈀10%的Pd-C催化劑(恩格哈德公司制造)和2滴醋酸，并在室溫下劇烈攪拌62.5小時。濾去催化劑，濾液濃縮至干燥，所得剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠10克;展開溶劑含5%乙醇的氯仿)，得到33毫克目標化合物。
IR(KBr)3340，2940，1740，1680，1670，1630，1540，1440，1380，1340，1210，1100，1020，860cm-1.
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ1.20(3H，t，J＝6Hz)，1.28(3H，t，J＝6Hz)，1.87-2.36(4H，m)，2.40-2.57(2H，m)，2.60-2.87(4H，m)，3.96-4.37(4H，q x 2，J＝6Hz)，4.56-4.90(1H，m)，6.37(1H，s)，7.23(2H，d，J＝7.5Hz)，7.71(2H，d，J＝7.5Hz).
實施例8N-〔4-〔3-(2-氨-4-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰基〕-左旋-谷氨酸的制備27毫克在實施例7中制得的化合物溶解于2.16ml四氫呋喃-水混合物(1∶1)中，向它加入0.189ml1N氫氧化鈉水溶液，并在室溫下攪拌2.5小時。蒸去大部分四氫呋喃，在冰冷卻下加入0.189ml醋酸并攪拌。產(chǎn)生的沉淀物用過濾法收集并干燥，得到19毫克目標化合物。
IR(KBr)3400，3300，2950，1700，1650，1540，1510，1400，1340，1240，1080，1020cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.80-2.17(4H，m)，2.23-2.40(2H，m)，2.53-2.83(4H，m)，4.27-4.56(1H，m)，6.33(1H，s)，7.27(2H，d，J＝7.5Hz)，7.78(2H，d，J＝7.5Hz).
實施例94-〔3-(2，4-二氨-6-氧代-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備2.35克叔丁醇鉀和1.07克鹽酸胍溶于10ml叔丁醇中形成溶液，在氬氣氛下向它加入由3.33克在參比例16中制得的化合物溶于30ml叔丁醇所形成的溶液，并加熱回流20小時。向該反應混合物中再加入434毫克叔丁醇鉀和370毫克鹽酸胍，繼續(xù)加熱回流8小時。冷卻該反應混合物，向它加入約10ml1N硫酸氫鉀水溶液，調節(jié)其pH值至9。經(jīng)四氫呋喃-氯仿混合物萃取后，減壓蒸去溶劑，得到的剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠100克;二氯甲烷-乙醇15∶1，在分液漏斗中與濃氨水混合后的二氯甲烷-乙醇15∶1)，得到1.90克目標化合物。
IR(KBr)3430，3360，1710，1627，1583，1432cm-1.
1H-NMR(CDCl3/Me2SO-d6)δ1.15-1.73(2H，m)，1.55(9H，s)，1.73-2.10(2H，m)，2.61(2H，t，J＝7Hz)，3.35(1H，t，J＝6Hz)，5.40(2H，brs)，5.51(2H，brs)，6.30(1H，brs)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.29(2H，d，J＝8Hz).
實施例104-〔3-(2，4-二氨-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備430毫克在實施例9中得到的化合物在10ml四氫呋喃中形成溶液，向它加入由16.8mmol硼烷-四氫呋喃復合物在10ml四氫呋喃中形成的溶液，該混合物加熱回流4小時。經(jīng)冷卻后，反應混合物被加入到冰水中，并在pH＝2時(通過加入1N鹽酸調節(jié))劇烈攪拌3分鐘，然后在pH＝10.5(通過加入2N的碳酸鉀水溶液來調節(jié))劇烈攪拌5分鐘。反應混合物用四氫呋喃-氯仿混合物萃取。減壓蒸去溶劑，剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠20克;二氯甲烷-乙醇30∶1→15∶1在分液漏斗中與濃氨水混合后的二氯甲烷-乙醇20∶1)，得到114毫克目標化合物。
IR(KBr)3375，3325，3190，2970，2930，1712，1603cm-1.
1H-NMR(CDCl3/Me2SO-d6)δ1.45-2.15(4H，m)，1.57(9H，s)，2.65(2H，t，J＝7Hz)，3.00-3.28(2H，m)，3.44-3.70(1H，m)，4.85(2H，brs)，4.90(2H，brs)，5.30(1H，brs)，7.19(2H，d，J＝8Hz)，7.80(2H，d，J＝8Hz).
實施例11N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-左旋-谷氨酸二乙酯的制備1.47克在參比例10中制得的化合物懸浮在60ml四氫呋喃中，向它加入120ml0.1N的氫氧化鈉水溶液，該混合物在室溫下攪拌21小時。然后該溶液用60ml0.1N的鹽酸中和，并在減壓條件下濃縮至干。剩余物懸浮在112.5ml干燥的N，N-二甲基甲酰胺中，然后向它加入2.88克左旋-谷氨酸二乙酯鹽酸化物、1.295ml二苯基磷酰疊氮化物和2.52ml三乙胺。該混合物恢復到室溫，并持續(xù)攪拌63小時。濾去產(chǎn)生的沉淀物，濾液在減壓下濃縮至干。將剩余物在硅膠色譜柱上作分離-提純處理(載體100克;展開溶劑含氨6.9%的乙醇-含氨6.9%的氯仿，1∶20-1∶10)，得到1.12克無色粉末狀目標化合物。
IR(KBr)3330，2930，1740，1670，1640，1570，1540，1440，1375，1300，1200，1095，1020cm-1.
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ1.20(3H，t，J＝7.5Hz)，1.27(3H，t，J＝7.5Hz)，1.47-1.83(4H，m)，2.00-2.36(2H，m)，2.37-2.50(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7.5Hz)，3.10-3.37(2H，m)，3.53-3.80(1H，m)，3.96-4.33(4H，qx2，J＝7.5Hz)，4.60-4.87(1H，m)，7.25(2H，d，J＝9Hz)，7.75(2H，d，J＝9Hz).
實施例12N-〔4-〔2-(2-氨-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲?！?左旋-谷氨酸二乙酯的制備將0.315克在參比例13中制得的化合物進行如實施例11所述的相同反應，得到0.247克目標化合物。
IR(KBr)3310，2990，1740，1730，1690，1640，1570，1530，1440，1375，1330，1300，1240，1200，1090，1010，850cm-1.
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ1.22(3H，t，J＝7.5Hz)，1.30(3H，t，J＝7.5Hz)，1.53-2.87(8H，m)，3.13-3.90(3H，m)，4.00-4.43(4H，qx2，J＝7.5Hz)，4.57-4.90(1H，m)，7.25(2H，d，J＝9Hz)，7.72(2H，d，J＝9Hz).
實施例13N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?左旋-谷氨酸二乙酯的制備94毫克在實施例10中制得的化合物溶解在1ml三氟醋酸中，并在室溫下攪拌3小時。減壓蒸去溶劑，70℃下減壓干燥剩余物，將該剩余物與304毫克左旋-谷氨酸二乙酯溶于2mlN，N-二甲基甲酰胺形成混合物，在0℃下向該混合物加入由350毫克二苯基磷酰疊氮溶于1.5mlN，N-二甲基甲酰胺形成的溶液，然后同樣在0℃下再滴加由180毫克三乙胺溶于1.5mlN，N-二甲基甲酰胺形成的溶液。在0℃攪拌30分鐘并在室溫攪拌78小時后，減壓蒸去溶劑。得到的剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠20克;在一個分液漏斗中與濃氨水混合后的二氯甲烷→與濃氨水混合后的二氯甲烷-乙醇40∶1→30∶1)，得到88毫克目標化合物。
IR(KBr)3350，2990，2945，1740，1610，1540，1508，1438cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.23(H，q，J＝7Hz)，1.43-1.80(3H，m)，1.85-2.77(7H，m)，2.95-3.30(2H，m)，3.58(1H，t，J＝11Hz)，4.07(2H，q，J＝7Hz)，4.20(2H，q，J＝7Hz)，4.25(1H，brs)，4.63-4.83(1H，m)，4.68(1H，brs)，7.00-7.23(1H，m)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，7.67(2H，d，J＝8Hz).
實施例14N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-左旋-谷氨酸的制備1.05克在實施例11中制得的化合物溶解于63ml四氫呋喃-水混合物(2∶1)中，向它加入7.35ml氫氧化鈉水溶液，并在室溫下攪拌2.5小時。蒸去四氫呋喃，濾去少量不溶物，向濾液中加入7.35ml醋酸，用過濾法收集產(chǎn)生的沉淀物。用水洗滌沉淀物并干燥，得到0.85克無色粉末狀目標化合物。
IR(KBr)3340，2930，1690，1630，1540，1440，1300，1080，850cm-1.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20-1.80(4H，m)，1.87-2.17(2H，m)，2.23-2.40(2H，m)，2.50-2.77(2H，m)，2.83-3.20(2H，m)，3.30-3.63(1H，m)，4.23-4.53(1H，m)，7.26(2H，d，J＝9Hz)，7.77 H，d，J＝9Hz).
實施例15N-〔4-〔2-(2-氨基-4-羥基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲?！?左旋-谷氨酸的制備將0.195克在實施例12中制得的化合物進行如實施例14所述的反應，得到0.153克目標化合物。
IR(KBr)3250，2900，1650，1580，1440，1300，1090cm-1.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.43-1.76(1H，m)，1.98(2H，t，J＝7.5Hz)，1.80-2.10(1H，m)，2.13-2.40(2H，m)，2.67(2H，t，J＝9Hz)，2.90-3.23(2H，m)，3.33-3.60(1H，m)，4.10-4.43(1H，m)，7.28(2H，d，J＝9Hz)，7.75(2H，d，J＝9Hz).
實施例16N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?左旋-谷氨酸的制備將41毫克在實施例13中制得的化合物進行如實施例14所述的反應，得到32毫克目標化合物。
IR(KBr)3700-2350，3215，1690-1620，1540cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.02-1.85(4H，m)，1.85-2.83(6H，m)，2.90-3.30(2H，m)，3.55(1H，t，J＝11Hz)，4.15-4.45(1H，m)，6.38(2H，brs)，6.77(2H，brs)，6.90(1H，brs)，7.22(2H，d，J＝8Hz)，7.74(2H，d，J＝8Hz)，8.22(1H，d，J＝7Hz).
實施例174-〔3-(2，4-二氨基-6-羥基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備將3.18克在參比例19中制得的化合物進行如實施例1所述的反應，得到2.61克目標化合物。
IR(KBr)3360，3235，2975，2700，1715，1625，1584，1438，1290，1163，1118，848cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.14(3H，d，J＝7Hz)，1.20-1.50(2H，m)，1.54(9H，s)，1.55-1.80(1H，m)，1.80-2.05(1H，m)，2.60-2.78(1H，m)，3.20-3.30(1H，m)，5.86(2H，brs)，5.96(2H，brs)，7.25(2H，d，J＝8Hz)，7.81(2H，d，J＝8Hz)，10.42(1H，s).
實施例184-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕-苯甲酸叔丁酯(A)和4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基-丙基〕苯甲酸叔丁酯(B)的制備2.00克在實施例17中制得的化合物在25ml四氫呋喃中形成懸浮液，向該液中加入一個由40.3mmol硼烷-四氫呋喃絡合物溶于40.3ml四氫呋喃所形成的溶液。攪拌10分鐘后，將該混合物冷卻到室溫并繼續(xù)攪拌5小時。向該反應混合物中添加40ml醋酸-甲醇混合物(1∶1)，該混合物在室溫下攪拌18小時。減壓蒸去溶劑后的剩余物用柱色譜法提純(載體硅膠100克;展開溶劑二氯甲烷-乙醇＝20∶1→25∶2，然后用二氯甲烷-乙醇(含氨6%))，得到目標化合物(A)579毫克，(B)1.214克。
(A)IR(KBr)3350，3200，2980，2940m，1714，1650，1608，1290，1163，1115，848cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.31(3H，d，J＝7Hz)，1.60(9H，s)，1.94(2H，dt，J＝8Hz，8Hz)，2.40-2.60(2H，m)，2.85(1H，tq，J＝7Hz，7Hz)，4.50-5.50(4H，br)，6.46(1H，s)，7.27(2H，d，J＝8Hz)，7.96(2H，d，J＝8Hz)，9.20(1H，brs).
(B)IR(KBr)3340，3195，2980，2935，1715，1607，1430，1295，1163，1115，847cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.18(2.25H，d，J＝7Hz)，1.19(0.75H，d，J＝7Hz)，1.23-1.42(2H，m)，1.45-1.65(2H，m)，1.54(9H，s)，2.64-2.70(1H，m)，2.90-3.08(2H，m)，3.30-3.50(1H，m)，5.43(4H，s)，5.95(0.25H，s)，6.00(0.75H，s)，7.32(2H，d，J＝8Hz)，7.82(2H，d，J＝8Hz).
實施例19N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕-苯甲?！?左旋-谷氨酸二乙酯的制備將實施例18中制得的化合物(A)581毫克進行如實施例3所述的反應，得到640毫克目標化合物。
IR(KBr)3375，3200，2975，2930，1738，1608，1430，1200，1008，853cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.17(3H，t，J＝7Hz)，1.18(3H，d，J＝7Hz)，1.19(3H，t，J＝7Hz)，1.26-1.44(2H，m)，1.44-1.63(2H，m)，1.90-2.20(2H，m)，2.44(2H，t，J＝7Hz)，2.63-2.80(1H，m)，2.90-3.08(2H，m)，3.30-3.50(1H，m)，4.05(2H，q，J＝7Hz)，4.11(2H，q，J＝7Hz)，4.37-4.50(1H，m)，5.36(2H，s)，5.37(2H，s)，5.87(0.25H，s)，5.91(0.75H，s)，7.30(2H，d，J＝8Hz)，7.80(2H，d，J＝8Hz)，8.66(1H，d，J＝8Hz).
實施例20N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸的制備將600毫克在實施例19中得到的化合物進行如實施例4所述的反應，得到508毫克目標化合物。
IR(KBr)3350，3200，1690，1680-1610，1635，1530，1400，1300，853cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.20(3H，d，J＝7Hz)，1.25-1.65(4H，m)，1.87-2.20(2H，m)，2.30(2H，t，J＝7Hz)，2.60-2.80(1H，m)，3.00-3.20(2H，m)，3.42-3.60(1H，m)，4.22-4.40(1H，m)，6.20-5.08(5H，m)，7.28(2H，d，J＝8Hz)，7.78(2H，d，J＝8Hz)，8.28-8.36(1H，m).
實施例21N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸的制備將540毫克在實施例18中制得的化合物(B)進行如實施例3所述的反應，得到556毫克目標化合物。
IR(KBr)3340，3180，2935，1735，1640，1610，1580，1200，1095，1018，850cm-1.
1H-NMR(CDCl3)δ1.23(3H，t，J＝7Hz)，1.30(3H，d，J＝7Hz)，1.31(3H，t，J＝7Hz)，1.80-2.05(4H，m)，2.15-2.57(4H，m)，2.83(1H，tq，J＝7Hz，7Hz)，4.12(2H，q，J＝7Hz)，4.25(2H，q，J＝7Hz)，4.68(2H，brs)，4.75-4.87(1H，m)，4.92(2H，brs)，6.43(1H，s)，7.26
(2H，d，J＝8Hz)，7.37(1H，dd，J＝7Hz，3Hz)，7.77(2H，d，J＝8Hz)，8.81(1H，brs).
實施例22N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯代〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲?；?左旋-谷氨酸的制備將533毫克在實施例21中制得的化合物進行如實施例4所述的反應，得到436毫克目標化合物。
IR(KBr)3350，3205，1650，1640，1540，1400，850cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)δ1.25(3H，d，J＝7Hz)，1.73-2.20(4H，m)，2.35(3H，t，J＝8Hz)，2.40-2.68(2H，m)，2.85(1H，tq，J＝7Hz，7Hz)，4.32-4.45(1H，m)，5.54(2H，brs)，6.06(2H，brs)，6.38(1H，s)，7.33(2H，d，J＝8Hz)，7.83(2H，d，J＝8Hz)，8.49(1H，d，J＝8Hz)，10.45(1H，s).
實施例23將在實施例14中得到的化合物(每片50毫克)、乳糖(每片250毫克)、玉米淀粉(每片51毫克)和羥丙基纖維素L(每片9毫克)按常規(guī)方法混和并制粒。將這種顆粒、玉米淀粉(每片8毫克)和硬脂酸鹽(每片2毫克)進行混合，并按常規(guī)方法成片，得到片劑(每片370毫克)。
實施例24在實施例14中制得化合物的鈉鹽10克溶解在1l生理鹽水中。用一個微型過濾器過濾該溶液，并以每等分2.2ml分裝在安瓿中，在110℃滅菌30分鐘。這些安瓿可作皮下、靜脈或肌肉注射的針劑。
實施例255克在實施例14中得到的化合物的鹽酸鹽和10克甘露糖醇溶解于1l蒸餾水中，在用一個無菌濾器(bacterialfilfer)過濾后，將該溶液以每等分2ml分裝在安瓿中。將這些安瓿置于一個冷凍干燥器中干燥并封口，故此能得到在使用前其內含物溶解了的安瓿(制劑)。用于注射前，打開安瓿并將里面的藥劑溶解在(如)2ml生理鹽水中。
權利要求
1.如下式表示的化合物的一種制備方法，
其中，環(huán)
是一個吡咯環(huán)或吡咯啉環(huán)，X是一個氨基或羥基，Y是一個氫原子、一個氨基或一個羥基，R是一個氫原子、一個氟原子、一個烷基基團、一個鏈烯基或一個炔基，-COOR3是一個能被酯化的羥基，n是2到4之間的一個整數(shù)，R代表的基團在n個重復單元的每個單元中可以是不同的，還包括該化合物的鹽的制備方法，它包括將下式表示的化合物
其中環(huán)
、X、Y、R和n與上面的定義相同、或者該式化合物在羧基基團上的活性衍生物或它的一種鹽與用下式表示的一種化合物或它的一種鹽起反應，
其中，-COOR1和-COOR2的意義與以前的定義相同。
2.依照權利要求1的方法，其特征是，環(huán)A是一個吡咯環(huán)或吡咯啉環(huán)。
3.依照權利要求1的方法，其特征是，X是一個氨基。
4.依照權利要求1的方法，其特征是，X是一個羥基。
5.依照權利要求1的方法，其特征是，Y是一個氫原子。
6.依照權利要求1的方法，其特征是，Y是一個氨基或一個羥基。
7.依照權利要求1的方法，其特征是，R是一個氫原子。
8.依照權利要求1的方法，其特征是，R是一個氟原子、一個烷基、一個鏈烯基或一個炔基。
9.依照權利要求8的方法，其特征是，烷基基團具有1至3個碳原子，鏈烯基或炔基基團有2至3個碳原子。
10.依照權利要求1的方法，其特征是，-COOR1和-COOR2獨立地代表羧基。
11.依照權利要求1的方法，其特征是，-COOR1和-COOR2獨立地代表酯化了的羧基基團。
12.依照權利要求1的方法，其特征是，n等于3。
13.依照權利要求1的方法，其特征是，n等于2或4。
全文摘要
下式表示的化合物、及該化合物的鹽類具有很好的抗腫瘤效果，它們能用作哺乳動物的抗腫瘤劑，
文檔編號C07D487/04GK1037513SQ8910168
公開日1989年11月29日 申請日期1989年3月24日 優(yōu)先權日1988年3月24日
發(fā)明者秋元浩, 飛高武憲, 三輪哲生 申請人:武田藥品工業(yè)株式會社