尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]癌癥的早期發(fā)現(xiàn)，尤其在腫瘤自然生長史的臨床前階段發(fā)現(xiàn)，是降低腫瘤發(fā)病率和癌癥死亡率的關(guān)鍵。尿液中單羥酚衍生物屬于癌癥病理性代謝產(chǎn)物，比其他腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)的更早，該類檢測試劑成為目前市場開發(fā)的熱點(diǎn)。目前此類試劑均為含汞試劑，在應(yīng)用上雖有一定效果，但仍然有不足之處，首先，大量配制試劑時(shí)，汞及濃酸對生產(chǎn)人員產(chǎn)生傷害，試劑在消費(fèi)使用后造成環(huán)境重金屬污染；第二，該類試劑檢測結(jié)果假陽性偏高，原因是，它不能區(qū)分游離的單羥酚衍生物和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的含酚核氨基酸，即檢測時(shí)存在蛋白質(zhì)干擾。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的就是提供一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，該方法制備的檢測試劑對環(huán)境無污染，使用安全，檢測準(zhǔn)確度高。
[0004]本發(fā)明的尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，包括以下步驟:
1、顯色劑磷鎢酸試劑溶液，稱取鎢酸鈉80g-100g，溶于蒸餾水500ml-700ml中，加85%磷酸50ml-60ml，回流煮沸4.8-5.2小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰90g_150g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?br> 2、緩沖溶液pH5.3-5.7，按pH值要求，配制乙酸鹽緩沖溶液100ml，或磷酸鹽緩沖溶液1000ml,置2-8°C冷藏保存?zhèn)溆茫?br> 3、將顯色劑磷鎢酸試劑溶液與緩沖溶液按體積比1:1混合均勻，即為成品，置2-8°C冷藏保存?zhèn)溆谩?br>[0005]本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚衍生物檢測試劑，使用方法:取尿樣Iml于試管中，加入本試劑3ml，搖勻后置酒精燈上加熱至微沸，觀察上清液顏色，與比色板對照，藍(lán)色和深藍(lán)色為陽性。
[0006]本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚衍生物檢測試劑，用于人群癌癥篩查，具有操作簡便、無痛無創(chuàng)、結(jié)果迅速、成本低廉，易于推廣普及，能做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，降低腫瘤發(fā)病率。
[0007]本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚衍生物檢測試劑，檢測各類已確診的惡性腫瘤患者305例，陽性258例，陽性符合率84.6% ;用本試劑篩查一般人群436例，陽性9例，陽性率為2.1%，特異性為97.9% ;同時(shí)，用市場上同類含汞試劑檢測相同人群，得到陽性48例，陽性率為11%，特異性為89%。
【具體實(shí)施方式】
[0008]實(shí)施例1: 一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑由顯色劑磷鎢酸試劑溶液和緩沖溶液按體積比1:1混合成2000ml:
1、顯色劑磷媽酸試劑溶液，稱取媽酸鈉80g，溶于蒸饋水500ml中，加85%磷酸50ml，回流煮沸5小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰90g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?br> 2、緩沖溶液pH5.4，按pH值要求，配制乙酸鈉溶液/乙酸溶液組成的乙酸鹽緩沖溶液1000ml，乙酸鹽緩沖溶液由2mol/L乙酸鈉溶液833.3ml加2mol/L乙酸溶液166.7ml混合而成，置2-8 °C冷藏保存?zhèn)溆谩?br>[0009] 實(shí)施例2:
一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑由顯色劑磷鎢酸試劑溶液和緩沖溶液按體積比1:1混合成2000ml:
1、顯色劑磷媽酸試劑溶液，稱取媽酸鈉100g，溶于蒸饋水700ml中，加85%磷酸60ml，回流煮沸5小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰150g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?br> 2、緩沖溶液pH5.7，按pH值要求，配制磷酸二氫鈉溶液/磷酸氫二鈉溶液組成的磷酸鹽緩沖溶液1000ml，磷酸鹽緩沖溶液由0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液935ml加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液65ml混合而成，置2-8 °C冷藏保存?zhèn)溆谩?br>【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，其特征在于:它包括以下步驟: (1)、顯色劑磷媽酸試劑溶液，稱取媽酸鈉80g-100g，溶于蒸饋水500ml-700ml中，加85%磷酸50ml-60ml，回流煮沸4.8-5.2小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰90g_150g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫? (2)、緩沖溶液pH5.3-5.7，按pH值要求，配制乙酸鹽緩沖溶液1000ml，或磷酸鹽緩沖溶液1000ml，置2-8°C冷藏保存?zhèn)溆茫? (3)、將顯色劑磷鎢酸試劑溶液與緩沖溶液按體積比1:1混合均勻，即為成品，置2-8°C冷減保存?zhèn)溆谩?.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，其特征在于:乙酸鹽緩沖溶液由乙酸鈉溶液、乙酸溶液組成。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，其特征在于:磷酸鹽緩沖溶液由磷酸二氫鈉溶液、磷酸氫二鈉溶液組成。
【專利摘要】一種尿液單羥酚衍生物檢測試劑的制備方法，包括以下步驟：顯色劑磷鎢酸試劑溶液配制、緩沖溶液配制，然后將顯色劑磷鎢酸試劑溶液與緩沖溶液按體積比1:1混合均勻置2-8℃冷藏保存?zhèn)溆谩Ｊ褂梅椒ǎ喝∧驑?ml于試管中，加入本試劑3ml，搖勻后置酒精燈上加熱至微沸，觀察上清液顏色，與比色板對照，藍(lán)色和深藍(lán)色為陽性。本發(fā)明的制備方法所得的尿液單羥酚衍生物檢測試劑，用于人群癌癥篩查，具有操作簡便、無痛無創(chuàng)、結(jié)果迅速、成本低廉，易于推廣普及，能做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，降低腫瘤發(fā)病率。
【IPC分類】G01N21/78
【公開號】CN105158246
【申請?zhí)枴緾N201510660462
【發(fā)明人】王春, 李潤慈
【申請人】智優(yōu)生物科技（上海）有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年10月14日