一種胸苷磷酸化酶抑制劑的新型結(jié)晶形式及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明具體公開了5?氯?6?（1?（2?亞氨基吡咯烷基）甲基）尿嘧啶鹽酸鹽的一種新型結(jié)晶形式，并公開了該晶型的制備方法；該晶型具有易于制備、溶解性高等優(yōu)點，能夠作為胸苷磷酸化酶抑制劑用于制備治療結(jié)直腸癌的藥物。
【專利說明】
一種胸苷磷酸化酶抑制劑的新型結(jié)晶形式及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種胸苷磷酸化酶抑制劑5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽的新的結(jié)晶形式及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC)包括結(jié)腸癌和直腸癌，是最常見的惡性腫瘤 之一，其發(fā)病率和病死率在消化道惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌而位居第三。中國在全球 范圍內(nèi)屬于低發(fā)地區(qū)，但近年來我國結(jié)直腸癌發(fā)病率呈明顯上升趨勢，已成為我國發(fā)病率 上升最快的惡性腫瘤之一。
[0003] 由于結(jié)直腸癌早期癥狀不明顯及早期普查措施欠缺等原因，大部分病人在就診時 已發(fā)展至中晚期。對于中晚期結(jié)直腸癌的治療，首選方案為以化療為主的內(nèi)科治療。近年來 已有多種化療藥物上市，如安進/武田的單抗藥物％〇1：；[1311(帕尼單抗4&11；[1：111]111111&13)、拜耳 的口服抗癌新藥31：；^3作3(代8〇抑€611；[13)、賽諾菲的血管生成抑制劑2311：^口（阿伯西普、 ziv-af Iibercept)、日本大鵬制藥的抗癌藥Lonsurf (三氟尿苷/啼啶二酮鹽酸鹽、TAS-102)。其中于2014年3月上市的抗癌藥TAS-102引起業(yè)界廣泛關(guān)注，為已經(jīng)耐受或?qū)?biāo)準(zhǔn)治 療無響應(yīng)的晚期結(jié)直腸癌患者帶來福音。
[0004] 其中TAS-102主要包含三氟胸苷(FTD)和胸苷磷酸化酶抑制劑5-氯-6-(1-(2-亞氨 基吡咯烷基））尿嘧啶鹽酸鹽(TPI)兩個成分，F(xiàn)TD通過嵌入腫瘤細(xì)胞DNA達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞 生長，TPI通過抑制三氟胸苷磷酸化，維持三氟胸苷的有效血濃度，從而達(dá)到治療目的。
[0005] 化合物TPI結(jié)構(gòu)式如式I所示，開發(fā)出穩(wěn)定性高、結(jié)晶度高、適于藥物應(yīng)用的化合物 TPI的晶型意義重大，晶型會直接影響藥物的穩(wěn)定性、溶解度和生物利用度等。目前已有專 利(CN103788075A)報道了一種晶型，我們在研究中發(fā)現(xiàn)了另一種完全不同的晶型。
[0006] 式I 5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）)尿嘧啶鹽酸鹽(TPI)結(jié)構(gòu)式。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明第一方面提供一種5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽的 晶體形式，其在本發(fā)明中定義為晶型I。所述晶型I，使用Cu-Κα輻射，以2Θ角度表示的X-射線 粉末衍射，在6.591 ±0.2。，19.613±0.2。，20.669±0.2。，26.227±0.2。，27.044±0· 2。， 30.293±0.2。，32.129±0.2。，32.934±0.2。，33.583±0.2。處有特征衍射峰； 具體地，所述晶型I，使用Cu-Κα輻射，以2Θ角度表示的X-射線粉末衍射，在6.591 土 0.2°，9.265±0.2°，19.613±0.2°，20.669±0.2°，24.130±0.2°，25.681±0.2°，26.227土 0.2°，27.044±0.2°，29.797±0.2°，30.293±0.2°，32.129±0.2°，32.934±0.2°，33.583 ±0.2°，35.915±0.2°，36.961±0.2°，39.755±0.2°處有特征衍射峰； 具體地，所述晶型I，使用Cu-Ka輻射，以2Θ角度表示的X-射線粉末衍射，在6.591 土 0.2°，9·265±0·2°，11·764±0·2°，13·066±0·2°，19·157±0·2°，19·613±0·2°，20.669土 0.2°，21.521 ±0.2°，22.281 ±0.2°，23.623±0.2°，24.130±0.2°，24.835±0.2°，25.681 ±0.2°，26.227 ±0.2°，27.044 ±0.2°，28.490 ±0.2°，29.228 ±0.2°，29.797 ±0.2°， 30.293±0.2°，31.025±0.2°，32.129±0.2°，32.934±0.2°，33.583±0.2°，35.915土 0.2°，36·961±0·2°，38·952±0·2°，39·755±0·2°處有特征衍射峰； 在本發(fā)明的一個實施例中，所述晶型I，使用Cu-Ka輻射，以2Θ角度表示的X-射線粉末衍 射，具有如下的晶面間距d倌(A):
更具體地，在本發(fā)明的上述實施例中，所述晶型I，使用使用Cu-Ka輻射，以2Θ角度表示 的X-射線粉末衍射具有基本如圖1所示的圖譜。
[0008] 本發(fā)明所述晶型I的熱重分析（TGA )顯示，該晶型在3 0 °C - 188 °C之間共失重 5.75%;具體地，所述晶型1的了6六圖譜在30°(：-118°(：之間失重2.95%，在118°(： - 188°(：之間 失重2.80%;更具體地，所述晶型I的熱重分析(TGA)具有基本如圖2所示的圖譜。
[0009] 本發(fā)明所述晶型I的紅外吸收光譜顯示，該晶型在±201^處具有特征吸收峰。
[0010] 進一步地，本發(fā)明所述晶型I，其特征在于，其HPLC純度2 99.0%，優(yōu)選2 99.5%。 [0011]本發(fā)明的第二方面提供一種制備5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽 酸鹽晶型I的方法，該方法包括以下步驟： (1) 將5-氯-6-( 1-( 2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽固體加入水和有機溶劑組 成的混合溶劑中，加熱攪拌至溶解，然后靜置自然降溫至析晶溫度； (2) 繼續(xù)析晶1 一2小時，過濾，洗滌，干燥，得到本發(fā)明所述的晶型I; 其中，5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽粗品與混合溶劑的質(zhì)量體 積比（單位:g/ml)為1:10~150,優(yōu)選1:10~30,更優(yōu)選1:10~20; 所述析晶溫度為O-25°C，優(yōu)選4一20°C，更優(yōu)選4一IO0C ； 混合溶劑中水與有機溶劑的體積為1:1~10，優(yōu)選1:2~8，更優(yōu)選1:2~5; 所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、甲基異丙基甲酮、四氫呋喃、甲基叔 丁基醚、乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺中的一種或多 種;優(yōu)選乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、四氫呋喃中的一種或多種。
[0012] 本發(fā)明第三方面提供一種藥物組合物，其包含5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲 基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I和任意一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑;進一步地，其還包括至 少一種其他癌癥治療劑，如三氟胸苷(FTD)。
[0013] 本發(fā)明第四方面提供5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I 在制備用于治療結(jié)直腸癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明第五方面提供本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物在制備用于治療結(jié)直腸 癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 優(yōu)選地，本發(fā)明地四、五方面所述的用于治療量結(jié)直腸癌的藥物是指三氟胸苷 (FTD)和5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽以任意配比得到的藥物，優(yōu)選 TAS-102。
[0016] 本發(fā)明中制備5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I所使用 的粗品可以參照US6494535制備或者根據(jù)制備例1制備得到。
[0017] 本發(fā)明提供的5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I具有很 好的穩(wěn)定性，X-射線粉末衍射圖譜表明，該晶型I具有優(yōu)異的結(jié)晶度，HPLC純度高，有利于產(chǎn) 品的存儲和藥物應(yīng)用;且其制備方法操作簡單，周期短，成本低，易于實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，因此 具有重要的現(xiàn)實意義。
【附圖說明】
[0018] 圖1:5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的XRD圖譜； 圖2:5-氯-6- (1 - (2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的TGA圖譜。
【具體實施方式】
[0019] 下面通過具體的制備實施例進一步說明本發(fā)明，但是，應(yīng)當(dāng)理解為，這些實施例僅 僅是用于更詳細(xì)具體地說明只用，而不應(yīng)理解為用于以任何形式限制本發(fā)明。雖然為事項 本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然盡可能詳細(xì)描 述。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)清楚，在下文中，如果未特別說明，本發(fā)明所用材料和操作方法是 本領(lǐng)域公知的，反應(yīng)在室溫條件下進行，其中所述室溫一般指15-35°C，優(yōu)選20-30°C，更 優(yōu)選20-25 °C。
[0020] 本發(fā)明所用的檢測儀器： (I)X-射線粉末衍射儀 儀器型號：D8 Advance X-ray Diffractometer 測試方法:將研細(xì)后的樣品（IOOmg)填在玻璃板凹槽里，用載玻片將其平面與玻璃面掛 齊平后，將樣品置于D8 Advance X-ray Diffractometer X-射線粉末衍射分析儀中，使用 40kV、40mA的銅X-射線源，掃描范圍為3~40° (2Θ)，掃描速度4V分鐘，掃描時間9min。掃描誤 差通常為±0.2° (2Θ)。
[0021] (2)TGA熱重分析儀 儀器型號：NETZSCH TG209C 測試方法:將重IOmg的樣品置于具有小針孔的密閉鋁盤中，在30°C下保持平衡，然后以 10°C/min的掃描速率加熱至250°C。干燥氮氣被用作吹掃氣體。
[0022] 制備例1:5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽的制備 a. 5-氯-6-氯甲基尿啼啶的制備：
50g 6-氯甲基尿嘧啶、150ml乙酸加入250ml燒瓶中，常溫攪拌下逐滴滴加38ml磺酰氯， TLC檢測原料反應(yīng)完畢后，冰浴下滴加200ml水，滴加完畢后抽濾得白色固體，濾餅水洗3次， 每次30ml，50°C鼓風(fēng)干燥得白色中間體I粗品54.0 g，產(chǎn)率88.6 %。
[0023] ESI-MS (m/z): [M+H]+ 195.0; 1HNMR (500MHz, DMS〇-d6, δρρπι): 4.47 (S, 2H), 11.52 (S, 1H), 11.66 (S, 1Η)〇
[0024] b. 5-氯-6-( 1-( 2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽的制備：
250ml三口燒瓶中加入200ml DMF，攪拌下依次加入20g中間體I、25g 2-氨基吡咯烷鹽酸 鹽、21g乙醇鈉，常溫攪拌反應(yīng)18小時，減壓抽濾得淺棕色濾餅，濾餅加入60ml水中，乙酸調(diào) 節(jié)pH值至7,再次減壓抽濾濾餅，將濾餅溶于100ml lmol/L HCl水溶液，加熱至60°C溶解濾 餅，向澄清液中加入Ig活性炭，60°C下攪拌30 min，減壓抽濾除去活性炭，攪拌條件下滴加 600ml丙酮，降溫攪拌析晶1.5h，減壓抽濾，濾餅用3ml丙酮:水6:1混合溶劑淋洗，50°C鼓風(fēng) 干燥得TBMD粗品。上述粗品在60 °C下攪拌溶于水(5ml/g)中，向溶液中滴加丙酮(30ml/g)， 固體開始析出，降至室溫后繼續(xù)攪拌析晶1.5h，減壓抽濾，濾餅用3ml丙酮：水6:1混合溶劑 淋洗，50°C鼓風(fēng)干燥得白色TBMD精品17.5 g，產(chǎn)率70.2 %。
[0025] ESI-MS (m/z): [M+H-HC1]+ 243.1; 1HNMR (500MHz，DMS〇-d6，δρρπι): 2.01 - 2.07 (m, 2H), 2.86-2.89 (t, 2H), 3.58-3.60 (t, 2H), 4.80 (S, 2H), 9.67 (S, 1H), 9.91 (S, 1H) , 11.52 (S, 1H), 11.67 (S, 1Η)〇
[0026] 實施例1:5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的制備 將1.0 g制備例1方法得到的固體產(chǎn)品加入到5. Oml水和5. Oml乙醇組成的混合溶劑中， 加熱攪拌至溶解，然后攪拌下1.5~2小時內(nèi)降至室溫20°C左右，靜置析晶2小時，過濾，洗滌， 干燥，得到0.52 g白色結(jié)晶狀標(biāo)題所述晶型I，產(chǎn)率52.0 %，HPLC純度99.9%; 經(jīng)檢測，其X-射線粉末衍射圖如圖1所示，熱重分析(TGA)如圖2所示。
[0027] 實施例2:5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的制備 將1.0 g制備例1方法得到的固體產(chǎn)品加入到5. Oml水和10.0 ml乙醇組成的混合溶劑中， 加熱攪拌至溶解，然后攪拌下1.5~2小時內(nèi)降至室溫20°C左右，靜置析晶2小時，過濾，洗滌， 干燥，得到0.66 g白色結(jié)晶狀標(biāo)題所述晶型I，產(chǎn)率66.0 %，HPLC純度99.9%; 經(jīng)檢測，其X-射線粉末衍射圖與圖1基本一致，熱重分析(TGA)與圖2基本一致。
[0028] 實施例3:5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的制備 將1.0 g制備例1方法得到的固體產(chǎn)品加入到5. Oml水和15. Oml乙醇組成的混合溶劑中， 加熱攪拌至溶解，然后攪拌下1.5~2小時內(nèi)降至室溫20°C左右，靜置析晶2小時，過濾，洗滌， 干燥，得到0.73 g白色結(jié)晶狀標(biāo)題所述晶型I，產(chǎn)率73.0 %，HPLC純度99.9%; 經(jīng)檢測，其X-射線粉末衍射圖與圖1基本一致，熱重分析(TGA)與圖2基本一致。
[0029] 實施例4:5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽晶型I的制備 將1.0 g制備例1方法得到的固體產(chǎn)品加入到5. Oml水和15. Oml異丙醇組成的混合溶劑 中，加熱攪拌至溶解，然后攪拌下1.5~2小時內(nèi)降至室溫20°C左右，靜置析晶2小時，過濾，洗 滌，干燥，得到〇. 76 g白色結(jié)晶狀標(biāo)題所述晶型I，產(chǎn)率76.0 %，HPLC純度99.9%; 經(jīng)檢測，其X-射線粉末衍射圖與圖1基本一致，熱重分析(TGA)與圖2基本一致。
【主權(quán)項】
1. 一種5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基）尿嘧啶鹽酸鹽的晶型I，其特征在于，使 用Cu-Κα輻射，以2Θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜在6.591 ±0.2°，9.265±0.2°，11.764 ±0.2°，13.066 ±0.2°，17.065 ±0.2°，18.016 ±0.2°，19.157 ±0.2°，19.613 ±0.2°， 20.669±0.2°，21.521±0.2°，22.281±0.2°，23.623±0.2°，24.130±0.2°，24.835土 0.2°，25.681±0.2°，26.227±0.2°，27.044±0.2°，28.490±0.2°，29.228±0.2°，29.797 ±0.2°，30.293 ±0.2°，31.025 ±0.2°，32.129 ±0.2°，32.934 ±0.2°，33.583 ±0.2°， 35.915±0.2。，36.332±0.2。，36.961±0.2。，38.952±0.2。，39.755±0.2。處有特征衍射 峰。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的晶型I，其特征在于，使用Cu-Ka輻射，以2Θ角度表示的X-射線 粉末衍射圖譜具有如下的晶面間距d值(A):3. 根據(jù)權(quán)利要求1 一2-項所述的晶型I，其特征在于，所述晶型I的熱重分析(TGA)圖譜 在30 °C -188 °C之間共失重5.75%;具體地，所述晶型I的TGA圖譜在30°C - 118 °C之間失重 2.95%，在118°(：-188°(：之間失重2.80%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1 一3任一項所述的晶型I，其特征在于，其HPLC純度2 99.0%，優(yōu)選2 99.5%〇5. -種制備權(quán)利要求1 一4任一項所述的晶型I的方法，該方法包括以下步驟： (1) 將5-氯-6-( 1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽固體加入水和有機溶劑組 成的混合溶劑中，加熱攪拌至溶解，然后靜置自然降溫至析晶溫度； (2) 繼續(xù)析晶1 一2小時，過濾，洗滌，干燥，得到本發(fā)明所述的晶型I。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙 酮、丁酮、甲基異丙基甲酮、四氫呋喃、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙腈、N，N-二 甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺中的一種或多種，優(yōu)選乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、 四氫咲喃中的一種或多種。7. -種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1 一4任一項所述的晶型I和任意一種或多種藥學(xué) 上可接受的賦形劑;進一步地，其還包括至少一種其他癌癥治療劑，如三氟胸苷(FTD)。8. 權(quán)利要求1 一4任一項所述的晶型I在制備用于治療結(jié)直腸癌的藥物中的應(yīng)用。9. 權(quán)利要求7所述的藥物組合物在制備用于治療結(jié)直腸癌的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求8-9任一項所述用于治療結(jié)直腸癌的藥物為三氟胸苷(FTD)和5-氯-6-(1-(2-亞氨基吡咯烷基）甲基)尿嘧啶鹽酸鹽以任意配比得到的藥物，優(yōu)選TAS-102。
【文檔編號】A61K31/7072GK105859691SQ201610214538
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月7日
【發(fā)明人】季世春, 周雯, 莫冬萍, 李先哲, 丁菲
【申請人】揚子江藥業(yè)集團南京海陵藥業(yè)有限公司, 南京海陵中藥制藥工藝技術(shù)研究有限公司