-丙氨酸（1.22lmo1)，升溫至40 °C，滴加83.8g三氯化磷(0.610mo1)，滴加完畢后反應(yīng)4h(反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的氯化氫用水吸 收，可作他用），抽濾得液體減壓蒸餾回收二氯甲烷，反應(yīng)瓶中得到類白色固體，即產(chǎn)物 (Π);產(chǎn)物（Π)用480mL新鮮的氯仿溶解后備用。
[0036] 實(shí)施例7: 制備N(xiāo)-乙酰-β-丙氨酰氯（Π) 在10L反應(yīng)瓶中，加入7.5L三氯甲烷，2.5KgN-乙酰-β-丙氨酸（19.084mol)，1.98Kg五氯 化磷(9.542mol)，升溫至回流，反應(yīng)6h(反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的氯化氫用水吸收，可作他用），抽 濾得到液體減壓蒸餾回收三氯甲烷，反應(yīng)瓶中得到類白色固體，即產(chǎn)物（Π);產(chǎn)物（Π)用 7.5L新鮮的三氯甲烷溶解后備用。
[0037] 實(shí)施例8: 制備L-組氨酸有機(jī)硅烷保護(hù)物（ΙΠ) 在250mL反應(yīng)瓶中，加入45gL-組氨酸（0.290mol)，141g六甲基二硅氮烷（0.872mol)， 〇.13g濃硫酸，快速升溫至回流，保溫反應(yīng)3h(反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物氨氣用水吸收，可作他用），降 溫室溫，加入90mL孰仿備用。
[0038] 實(shí)施例9: 制備L-組氨酸有機(jī)硅烷保護(hù)物（ΙΠ) 在1000mL反應(yīng)瓶中，加入170gL-組氨酸（1.100111〇1)，4188三甲基氯硅烷（3.850111〇1)， 0.50g二氯亞砜，快速升溫回流，保溫反應(yīng)3h，降溫室溫，加入680mL氯仿備用。
[0039] 實(shí)施例10: 制備L-組氨酸有機(jī)硅烷保護(hù)物（ΙΠ) 在10L反應(yīng)瓶中，加入2.7KgL-組氨酸（17.419mol)，5.7Kg三甲基氯硅烷(52.486mol)，8.Og濃硫酸，升溫至回流，保溫反應(yīng)6h(反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物氨氣用水吸收，可作他用），降溫室 溫，加入8·1L孰仿備用。
[0040] 實(shí)施例11: 制備N(xiāo)-乙醜-L-肌妝粗品（IV) 在1000mL反應(yīng)瓶中，加入上述實(shí)施例8中的（ΙΠ)的氯仿溶液，降溫至-1°C，保持內(nèi)溫10 °C以內(nèi)滴加實(shí)施例5中的（Π)，滴加完畢后保溫反應(yīng)3h，滴加60mL水，升溫至30°C保溫2h，分 液，水相濃縮至油狀，加入450mL異丙醇，用氨水調(diào)pH至6.5，析出固體，烘干得產(chǎn)物（IV) 91·8g，收率119·2%，HPLC純度 > 98·8%。
[0041] 實(shí)施例12: 制備N(xiāo)-乙醜-L-肌妝粗品（IV) 在5000mL反應(yīng)瓶中，加入上述實(shí)施例9中的（ΙΠ)的氯仿溶液，降溫至-10°C，保持內(nèi)溫10 °〇以內(nèi)滴加實(shí)施例6中的（Π)，滴加完畢后保溫反應(yīng)5h，滴加360mL甲醇，升溫至40°C保溫 3h，濃縮至油狀，滴加1700mL無(wú)水乙醇，用三乙胺調(diào)pH至7.0，析出固體，烘干得產(chǎn)物（IV) 334·2g，收率113·6%，HPLC純度 > 99·8%。
[0042] 實(shí)施例13: 制備N(xiāo)-乙醜-L-肌妝粗品（IV) 在50L反應(yīng)釜中，加入上述實(shí)施例10中的（ΙΠ)的氯仿溶液，降溫至-10°C，保持內(nèi)溫10°C以內(nèi)滴加實(shí)施例7中的（Π)，滴加完畢后保溫反應(yīng)8h，滴加6Kg純水，升溫至45°C保溫5h，分 液，水相濃縮至油狀物，滴加27L甲醇，用N，N-二異丙基乙胺調(diào)pH至7.5,析出固體，烘干得產(chǎn) 品（IV) 5·2Kg，收率：111·4%，HPLC純度 > 98·8%。
[0043] 實(shí)施例14: 制備N(xiāo)-乙酰-L-肌肽成品（V) 在250mL反應(yīng)瓶中，加入90gN-乙酰-L-肌肽粗品（IV)，90g水?dāng)嚢枞芙?，加入lg活性炭， 升溫至40°C，攪拌0.5h，趁熱抽濾，濾液轉(zhuǎn)入1000mL反應(yīng)瓶中，滴加900mL無(wú)水乙醇，攪拌5h， 降溫至0°C，抽濾，濾餅用100mL無(wú)水乙醇淋洗，干燥得N-乙酰-L-肌肽成品73g，收率:94.8%， HPLC純度 2 99.5%。
[0044] 實(shí)施例15: 制備N(xiāo)-乙酰-L-肌肽成品（V) 在500mL反應(yīng)瓶中，加入330gN-乙酰-L-肌肽粗品（IV)，330mL水?dāng)嚢枞芙?，加?g活性 炭，升溫至60°C。攪拌1小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液轉(zhuǎn)入5L反應(yīng)瓶中，滴加3.3L異丙醇，攪拌10小 時(shí)，降溫至_2°C，抽濾，濾餅用300mL異丙醇淋洗，干燥得N-乙酰-L-肌肽成品312.2g，收率： 94·6%，HPLC純度 2 99·5%。
[0045]實(shí)施例16: 制備N(xiāo)-乙酰-L-肌肽成品（V) 在10反應(yīng)瓶中，加入5KgN-乙酰-L-肌肽粗品（IV)，5Kg水?dāng)嚢枞芙?，加?0g活性炭，升 溫至50°C，攪拌1小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液轉(zhuǎn)入50L反應(yīng)釜中，滴加45L甲醇，攪拌15小時(shí)，降溫至 〇°C，抽濾，濾餅用2.5L甲醇淋洗，干燥得N-乙酰-L-肌肽成品4.76Kg，收率:95.2%，HPLC純度 >99.5%。
[0046] 實(shí)施例17: 制備N(xiāo)_乙醜_L_肌妝粗品（IV) 在500mL反應(yīng)瓶中，加入無(wú)水乙醇300mL，80gN-乙酰-β-丙氨酸（0.611mol)，86.IgL-組 氨酸（0.555111〇1)，98801(：(0.582111〇1)，升溫至40°(3，反應(yīng)3小時(shí)，降溫至5°(3，抽濾，濾餅用 150mL無(wú)水乙醇淋洗，固體烘干得產(chǎn)品（IV) 145g，收率為97.9%，HPLC純度> 98.8%。
[0047] 實(shí)施例18: 制備N(xiāo)-乙酰-L-肌肽成品（V) 在250mL反應(yīng)瓶中，加入140gN-乙酰-L-肌肽粗品（IV)，140g水?dāng)嚢枞芙?，加?.5g活性 炭，升溫至50°C，攪拌0.5h，趁熱抽濾，濾液轉(zhuǎn)入2000mL反應(yīng)瓶中，滴加1400mL無(wú)水乙醇，攪 拌5h，降溫至0°C，抽濾，濾餅用150mL無(wú)水乙醇淋洗，干燥得N-乙酰-L-肌肽成品130.2g，收 率:93 · 0%，HPLC純度 2 99 · 5%。
[0048] 實(shí)施例19: 制備N(xiāo)-乙酰-β-丙氨酸（I) 在500mL反應(yīng)瓶中加入300mL醋酸丁酯，5〇g0-丙氨酸（0.562mol)，48.5g乙酰氯 (0.618mol)，升溫至55°C，反應(yīng)3小時(shí)，取樣茚三酮不顯色，降溫至0°C，攪拌1小時(shí)，抽濾得到 固體，干燥的產(chǎn)物（I)69.2g，收率為94.0%，HPLC純度2 99.3%。
[0049] 實(shí)施例20: 制備N(xiāo)-乙醜-L-肌妝粗品（IV) 在500mL反應(yīng)瓶中，加入250mL二氯甲烷，60gN-乙酰-L-β-丙氨酸（0.458mo 1)，67.6gL-組氨酸（0·436mol)，降溫至0°C，加入78·lgEDC(0·504mol)和68·0gH0BT(0·504mol)，升溫至25°C，反應(yīng)5小時(shí)，抽濾，濾餅用50mL二氯甲烷淋洗，固體干燥得產(chǎn)品（IV) 11 Og，收率94.8%。
[0050] 實(shí)施例21: 制備N(xiāo)-乙酰-L-肌肽成品（V) 在250mL反應(yīng)瓶中，加入110gN-乙酰-L-肌肽粗品（IV)，110g水，攪拌溶解，加入lg活性 炭，升溫至50°C，攪拌0.5小時(shí)，趁熱抽濾，濾液轉(zhuǎn)入2000mL反應(yīng)瓶中，滴加llOOmL無(wú)水乙醇， 攪拌6小時(shí)，降溫至5°C，抽濾，濾餅用100mL乙醇淋洗，干燥得N-乙酰-L-肌肽成品101.8g，收 率:92·5%，HPLC純度 2 99·5%。
[0051]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和 原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種N-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，該方法包括:將β-丙氨酸進(jìn)行氨乙酰 化得到Ν-乙酰-β-丙氨酸;所述Ν-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸縮合得到Ν-乙酰-L-肌肽。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述乙?；噭┡c β-丙氨酸的摩爾比為1:1-1:2,氨乙?；磻?yīng)溫度為20°C至回流，反應(yīng)完全后降溫至-10-10 °C，固液分離得到N-乙酰-β-丙氨酸，氨乙?；褂玫娜軇┻x自苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲 烷、二氯乙烷、醋酸乙酯、醋酸異丙酯或醋酸丁酯。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述Ν-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸縮合可以是： 所述Ν-乙酰-β-丙氨酸在非極性溶劑中與?；噭┓磻?yīng)得到Ν-乙酰-β-丙氨酰氯，所述 ?；噭┡cΝ-乙酰-β-丙氨酸的摩爾比為0.5:1-1.5:1，?；瘻囟葹?0°C至回流； 所述L-組氨酸與有機(jī)硅烷在酸的催化下反應(yīng)得到有機(jī)硅烷保護(hù)的L-組氨酸，所述有機(jī) 硅烷與L-組氨酸的摩爾比為1.5:1-4.0:1; 將所述有機(jī)硅烷保護(hù)的L-組氨酸與N-乙酰-β-丙氨酰氯縮合得到有機(jī)硅烷保護(hù)的N-乙 酰-L-肌肽，加極性溶劑脫去保護(hù)基，經(jīng)分離和純化得到Ν-乙酰-L-肌肽。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述酰化試劑選自 三光氣、二氯亞砜、光氣、三氯化磷、五氯化磷或三氯氧磷。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述L-組氨酸與有 機(jī)硅烷在酸的催化下回流反應(yīng)，所述酸選自濃硫酸、二氯亞砜、十二烷基磺酸鈉或?qū)妆交?酸;所述酸與L-組氨酸的摩爾比為0.001:1-0.010:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述有機(jī)硅烷為六 甲基二硅胺烷、三甲基氯硅烷或其組合。7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述極性溶劑選自 水、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮或四氫呋喃。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的Ν-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述分離過(guò)程為:如 果極性溶劑含水，則分液，取水相濃縮;如果極性溶劑不含水，則直接濃縮;在濃縮液中加入 有機(jī)沉淀劑和堿性溶劑進(jìn)行沉淀，調(diào)節(jié)pH至5.5-8，固液分離得到Ν-乙酰-L-肌肽粗品，所述 有機(jī)沉淀劑選自異丙醇、乙醇或甲醇，所述堿性試劑選自氨、氨水、三乙胺、吡啶、咪唑或N， N-二異丙基乙胺。9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的N-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述N-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸縮合，可以是： 所述Ν-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸在縮合劑的作用下進(jìn)行縮合得到Ν-乙酰-L-肌肽，所 述Ν-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸的摩爾比為1:1-1.5:1，所述縮合劑與L-組氨酸的摩爾比為 1:1-2:1，縮合反應(yīng)的溫度為-15-50°C。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的N-乙酰-L-肌肽的制備方法，其特征在于，所述縮合劑選自0-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯、1-羥基苯并三唑、2-(7-偶氮苯并三氮唑）-N，N，N'，N'_ 四甲基脲六氟磷酸酯、二環(huán)己基碳二亞胺、N，N'_羰基二咪唑、N，N-二異丙基乙胺、2-氯-1， 二甲基氯化咪唑啉鐵或卜(3-二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種N-乙酰-L-肌肽的制備方法，屬于醫(yī)藥中間體技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括：將β-丙氨酸進(jìn)行氨乙?；玫絅-乙酰-β-丙氨酸；所述N-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸縮合得到N-乙酰-L-肌肽。其中，N-乙酰-β-丙氨酸在非極性溶劑中與?；噭┓磻?yīng)得到N-乙酰-β-丙氨酰氯，L-組氨酸與有機(jī)硅烷在酸的催化下反應(yīng)得到有機(jī)硅烷保護(hù)的L-組氨酸；再將有機(jī)硅烷保護(hù)的L-組氨酸與N-乙酰-β-丙氨酰氯縮合得到有機(jī)硅烷保護(hù)的N-乙酰-L肌肽，加極性溶劑脫去保護(hù)基，經(jīng)分離和純化得到N-乙酰-L-肌肽?；蛘逳-乙酰-β-丙氨酸與L-組氨酸在縮合劑的作用下進(jìn)行縮合得到N-乙酰-L-肌肽。
【IPC分類】C07D233/64
【公開(kāi)號(hào)】CN105461632
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610000411
【發(fā)明人】李健雄, 張銳, 婁明, 汪黎明, 雷玉平
【申請(qǐng)人】湖北泓肽生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2016年1月4日