一種新的雜萜化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及從獨(dú)活的干燥根中分離得到的一種具有治療 膜腺癌作用的祗類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 獨(dú)活為傘形科植物重齒毛當(dāng)歸AngelicapubescensMaxim,f.biserrataShanet 化an的干燥根。春初苗剛發(fā)芽或秋末莖葉枯萎時(shí)采挖，除去須根及泥沙，烘至半干，堆置 2~3天，發(fā)軟后再烘至全干。性微溫，味辛、苦，歸腎、膀脫經(jīng)。有桂風(fēng)除濕、通搏止痛、解表 之功效，臨床上主要用于治療風(fēng)寒濕搏、腰膝疼痛、風(fēng)寒挾濕表證、少陰伏風(fēng)頭痛等證。始載 于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，言其"味苦，平。主風(fēng)寒所擊，金瘡止痛，奔豚，痛疫，女子痛瘤。 服輕身耐老"。主產(chǎn)于湖北、四川、陜西、浙江等地，又稱川獨(dú)活、資丘獨(dú)活、己東獨(dú)活、恩施獨(dú) 活、肉獨(dú)活、浙獨(dú)活、績(jī)獨(dú)活、香獨(dú)活等，W根條粗壯，油潤(rùn)，質(zhì)軟，香氣濃者為佳。
[0003] 目前從各種不同品種獨(dú)活中已分離出香豆素、祗類、揮發(fā)油、有機(jī)酸和糖類等多種 化學(xué)成分。香豆素是獨(dú)活重要的活性成分。香豆素（Coumarin)是具有苯拼a-化喃酬結(jié) 構(gòu)的一類化合物。可看作是順式鄰徑基桂皮酸脫水而形成的內(nèi)酷，絕大多數(shù)在C,位有徑基 或控基，具有芳香氣味。
[0004] 現(xiàn)代研究證實(shí)，獨(dú)活具有鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛、抑制血小板聚集、抗氧化、抗衰老、抗腫 瘤、抗血管生成等藥理作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從獨(dú)活的干燥根中分離得到的一種具有治療膜腺癌作 用的祗類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得W實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將獨(dú)活的干燥根粉碎， 用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水飽 和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步驟（a) 中乙酸乙醋萃取物用大孔樹(shù)脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用75%乙醇洗脫10 個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟化）中75% 乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、20:1、10:1和1:1的二氯甲 燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（C)中組分3用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體 積比為25:1、20:1和10:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（a)中，用80%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔吸附樹(shù)脂。
[0012] 一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療膜腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療膜腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料W及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說(shuō)明】 陽(yáng)〇1引圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗(yàn)ECD值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021] 實(shí)施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來(lái)源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購(gòu)自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購(gòu)自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[002引審恪方法：（a)獨(dú)活的干燥根（IOkg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取燭LX3次）， 合并提取液，濃縮至無(wú)醇味（3L)，依次用石油酸0LX3次）、乙酸乙醋0LX3次）和水飽 和的正下醇0LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g)和正下醇 萃取物；化）步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔樹(shù)脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個(gè) 柱體積，再用75 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫 物浸膏（163g) ; (C)步驟化）中75 %乙醇洗脫浸膏用200-300目正相硅膠分離，依次用體 積比為85:1 (10個(gè)柱體積）、45:U9個(gè)柱體積）、20:1(8個(gè)柱體積）、10:1(8個(gè)柱體積）和 1:1巧個(gè)柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；(d)步驟（C)中組分3 (49g) 用200-300目正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1 (8個(gè)柱體積）、20:1 (10個(gè)柱體 積）和10:1巧個(gè)柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分 2 (31g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠ODS-C18分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶 液等度洗脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)(44mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z361. 1304,結(jié)合核磁特征可得分子式 為(：1品2〇7,不飽和度為7。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)Sh(卵m，DMS0-de，600MHz) :H-2(6. 34,S)， H-5 (3. 82,d，J= 15. 0)，H-5 (3. 15,d，J= 15. 0)，H-7 (5. 19,d，J=6.6)，H-8(4. 64,br， t，J= 9.6)，H-9 (2. 36,d，J= 12. 4)，H-9 (I. 39,d，J= 12. 4)，H-Il(4. 01，s)，H-15 (I.66， s)，37,s)，1-0H(12. 00,s)，4-0H巧.57,s)，8-0H巧.71，s)，IO-OH巧.08,s)， 11-OH化.16,s) ,3-0(? 化 87,s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) 5C(ppm,DMSO-de，125MHz) :158. 4 (C， 1-C)，98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，30. 3 (細(xì)2, 5-C)，135.I(C，6-C)， 129. 8(CH，7-C)，65. 7(CH，8-C)，46. 1(邸2,9-〇,61. 5(C，10-C)，62. 6(CH，11-C)，198. 7(C， 12-C)，114. 2(C，13-C)，121. 9(C，14-C)，21.I佩，15-C)，17.I佩，16-C)，56. 0(細(xì)3， 3-OCH3);碳原子標(biāo)記參見(jiàn)圖I。紅外光譜表明該化合物含有徑基基團(tuán)（3438cmI);此外該化 合物在374和289nm有紫外吸收，說(shuō)明含有多共輛結(jié)構(gòu)。IDNMR譜和服QC譜顯示有17個(gè) 碳信號(hào)，分別為=個(gè)甲基（包括一個(gè)甲氧基），兩個(gè)亞甲基，四個(gè)次甲基（兩個(gè)締控碳和兩 個(gè)含氧碳）W及八個(gè)季碳（分別為一個(gè)酬幾基，=個(gè)含氧締控碳，=個(gè)締控碳和一個(gè)含氧季 碳）。另外，一個(gè)締控質(zhì)子信號(hào)5冊(cè).34(1扎3，護(hù)2)，化及六個(gè)締碳信號(hào)50158.4((：，1-〇， 98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，114. 2 (C，13-C)和 121. 9 (C，14-C)，表明該化 合物含有一個(gè)五取代的苯環(huán)結(jié)構(gòu)。HMBC譜中，徑基質(zhì)子（5H12. 00,s，l-〇H)與C-1，C-2， C-13W及5C198. 7 (C，12-C)的相關(guān)性表明幾基碳（C-。）與苯環(huán)的C-13位相連，該化合物 在374和289nm的紫外吸收也驗(yàn)證了運(yùn)一結(jié)論。HMBC譜中，徑基質(zhì)子5H9. 57(lH，s，4-0H) 與5(：152.5((：，3-〇，137.6((：，4-〇和121.9((：，14-〇;甲氧基質(zhì)子5冊(cè).87(3,3-0邸3)與 C-3 ;W及H-2與C-3的相關(guān)性表明甲氧基和徑基分別位于C-3和C-4位上。剩余的10個(gè) 碳原子（去除苯環(huán)和甲氧基的屯個(gè)碳）形成了一個(gè)十元環(huán)單祗結(jié)構(gòu)。C-8位低場(chǎng)的化學(xué)位 移（5C65. 7)，W及氨原子信號(hào)[5H4. 64,1H，br，t，J= 9.細(xì)Z，H-8)]，表明C-8位連有一個(gè) 徑基。HMBC譜中H-8與C-6( 5C135. 1)，C-7 ( 5C129.8)，C-9 ( 5C46. 1)和C-IO(SC61. 5) 的相關(guān)性驗(yàn)證了上述結(jié)論。綜合氨譜、碳譜、HMBC譜和ROESY譜，W及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核 磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如圖1所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過(guò)ECD試驗(yàn)確定，理論值與實(shí) 驗(yàn)值基本一致（圖2)。 陽(yáng)0巧]實(shí)施例2:化合物（I)藥理作用試驗(yàn) [00%] -、材料和儀器
[0027] 人膜腺癌MiaPaCa-2細(xì)胞由天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所