技術(shù)特征：

1.一種用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的引物，其特征在于，包括以下序列：

上游引物：5'-TTGATTTGTCAGCAGGACCA-3'；

下游引物：5'-GAGAGTTTCACAGCATGGACTG-3'。

2.一種用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)處理提取間充質(zhì)干細(xì)胞總RNA，并反轉(zhuǎn)錄合成cDNA；

(2)以步驟(1)所得cDNA為模板，采用權(quán)利要求1所述的引物擴(kuò)增K-ras基因特異片段；

(3)回收純化擴(kuò)增片段，克隆培養(yǎng)，得到質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系為T(mén)otal RNA 0.1ng～5μg、Oilgo(dT)1μl、5×Reaction Buffer 4μl、RiboLock RNase inhibitor(20U/μl)1μl、10mMdNTP MIX 2μl、RevertAid M-Mil V RT(200U/μl)1μl、nuclease-free Water補(bǔ)足20μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件為42℃，60min，70℃，5min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述擴(kuò)增體系為PrimeSTAR Max Premix 25μl、Primer F 3μl、Primer R 3μl、cDNA 100～150ng、nuclease-free Water補(bǔ)足20μl。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述擴(kuò)增反應(yīng)條件為階段1：95℃，2min:；階段2：95℃，30s；階段3：60℃，15s；階段4：72℃，15s；階段5：返回到階段2，循環(huán)29次；階段6：72℃，5min。

7.權(quán)利要求2～6任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品。

8.權(quán)利要求7所述的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品在定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品在定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的應(yīng)用，其特征在于，采用質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的方法為：

(1)測(cè)量質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品濃度，并根據(jù)拷貝數(shù)計(jì)算公式計(jì)算其拷貝數(shù)；

(2)以10倍濃度為梯度稀釋質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品，采用權(quán)利要求1所述的引物對(duì)不同濃度的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行PCR檢測(cè)，得到不同濃度質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的Ct值，并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)處理提取間充質(zhì)干細(xì)胞總RNA，并反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，再以cDNA為模板，采用權(quán)利要求1所述的引物進(jìn)行PCR檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的Ct值，再根據(jù)步驟(2)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出待測(cè)樣品中K-ras基因的表達(dá)量。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品在定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的應(yīng)用，其特征在于，步驟(2)和步驟(3)中所述PCR反應(yīng)體系為20μl，包括FAST Universal 2X qPCR Master Mix 10μl、Primer F 0.8μl、Primer R 0.8μl、template 1μl、ROX-low 0.4μl、nuclease-free Water補(bǔ)足20μl。

11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品在定量檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞中K-ras基因表達(dá)量的應(yīng)用，其特征在于，步驟(2)和步驟(3)中所述PCR檢測(cè)反應(yīng)條件為階段1：95℃，3min；階段2：95℃，3s；階段3：60℃，30s；階段4：返回階段2，39個(gè)循環(huán)。