一種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及黃酮的提取。更具體地，涉及一種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]軟率獼猴桃(拉丁名:Actinidia arguta)別名:軟率子，圓率子，圓率，奇異莓，為獼猴桃科獼猴桃屬多年生木質(zhì)藤本植物，有“水果之王”的美稱(chēng)，在我國(guó)分布范圍廣泛，主要分布于東北、華北、山東、西北及長(zhǎng)江流域等地區(qū)，其中東北三省最為顯著。軟棗獼猴桃因處于開(kāi)發(fā)階段，基本為野生狀態(tài)，多呈零星分布，很少成片。果圓球形至柱狀長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)2-3cm，有喙或喙不顯著，無(wú)毛，無(wú)斑點(diǎn)，不具宿存萼片，成熟時(shí)綠黃色或紫紅色。種子縱徑約2.5_。該植物果實(shí)多汁，酸甜適口，口感獨(dú)特，富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中含有糖類(lèi)、黃酮類(lèi)、維生素、氨基酸、礦質(zhì)元素等功能活性成分，具有滋補(bǔ)強(qiáng)身、生津潤(rùn)肺等作用，對(duì)高血壓、心絞痛、高血脂等癥有一定的療效。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，軟棗獼猴桃還具有提高機(jī)體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、防治心腦血管疾病和保肝護(hù)肝等生理功能，十分具有開(kāi)發(fā)研究的意義。
[0003]黃酮類(lèi)化合物是植物中分布很廣且重要的天然產(chǎn)物，具有2-苯基色原酮結(jié)構(gòu)的化合物。黃酮類(lèi)化合物具有廣泛的生物活性，有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒，防治心血管疾病及增強(qiáng)人體免疫能力等多種生物活性?，F(xiàn)有的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)研究中，對(duì)軟棗獼猴桃的研究多集中在其人工馴化及栽培條件的研究及功能性飲品的研究上，而對(duì)于其有效成分尤其是黃酮類(lèi)物質(zhì)的工業(yè)化提取方面少有涉獵。
[0004]本發(fā)明主要研究一種適用于工業(yè)化生產(chǎn)的關(guān)于軟棗哦獼猴桃黃酮的提取方法，對(duì)獼猴桃的綜合開(kāi)發(fā)利用奠定理論基礎(chǔ)，具有重要的科研價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法。此軟棗獼猴桃黃酮的提取方法簡(jiǎn)單，提取時(shí)間短，有機(jī)試劑的消耗量低，且黃酮提取率高。
[0006]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案:
[0007]—種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法，包括如下提取步驟:
[0008]I)將新鮮軟棗獼猴桃果實(shí)洗凈、粉碎成勻漿，用石油醚密閉浸泡、過(guò)濾干燥，得殘?jiān)?br>[0009]2)將步驟I)所得殘?jiān)M(jìn)行酶解，抽濾，取可溶部分，減壓濃縮，得粗提物；
[0010]3)將步驟2)所得粗提物溶于蒸餾水中，進(jìn)行加熱、攪拌、PH調(diào)節(jié)，靜置后抽濾，留不溶物，并用蒸餾水沖洗至中性，干燥；
[0011]4)將步驟3)所得物經(jīng)HPD600大孔樹(shù)脂柱吸附洗脫，回收試劑，保留濃縮物即為提取的黃酮化合物。
[0012]優(yōu)選地，步驟I)中，所述勻漿與石油醚的體積比為1:3-1:5 ;所述浸泡時(shí)間為25_30mino
[0013]優(yōu)選地，步驟2)中，所述酶解包括:向所得殘?jiān)屑尤肜w維素酶溶液，在45-50°C水浴中加熱1-1.5h ；
[0014]優(yōu)選地，步驟2)中，所述纖維素酶溶液是指將纖維素酶溶解于磷酸緩沖鹽溶液中，纖維素酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.7% ;所述纖維素酶的與殘?jiān)馁|(zhì)量比為1:5-1:6。
[0015]優(yōu)選地，步驟3)中，所述粗提物與蒸餾水的質(zhì)量比為1:6-1:8 ;所述加熱溫度為50-55。。。
[0016]優(yōu)選地，步驟3)中，所述PH調(diào)節(jié)包括:向攪拌后混合均勻的溶液中加入石灰乳，至溶液PH值為8-9，抽濾后，將殘留物如前重復(fù)操作一次，合并兩次所得濾液；再向?yàn)V液中加入HCl，至濾液PH值為5-6。
[0017]優(yōu)選地，步驟3)中，所述靜置的時(shí)間為12_15h。
[0018]優(yōu)選地，步驟4)中，所述洗脫是指先用體積分?jǐn)?shù)為35%的乙醇作為洗脫劑，進(jìn)行洗脫，接取餾分；再使用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇作為洗脫劑，對(duì)餾分繼續(xù)洗脫。
[0019]優(yōu)選地，步驟4)中，所述洗脫時(shí)洗脫劑流速為2-2.5mL/min。
[0020]優(yōu)選地，步驟4)中，黃酮化合物的提取率大于97%。
[0021]本發(fā)明一種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法，選用特定的提取方法及提取條件，可有效的提高黃酮的提取率。首先選用石油醚浸泡磨成勻漿的軟棗獼猴桃果實(shí)，萃取出其中的葉綠素等小極性的物質(zhì)，再通過(guò)酶解法，加入纖維素酶來(lái)對(duì)細(xì)胞壁進(jìn)行分解。先用石油醚進(jìn)行萃取可有效的促進(jìn)纖維素酶的分解作用，除去極性較小的雜質(zhì)成分，從而可以更好的分離出軟棗獼猴桃果實(shí)的有效成分。再選用堿提酸沉得粗提物，本方法為物理反應(yīng)，可避免與所提取的有效成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致其成分改變。最后經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附洗脫，吸附洗脫依次選用兩種不同濃度的乙醇進(jìn)行，可有效的去除雜質(zhì)，起到對(duì)總黃酮純化的作用。
[0022]本發(fā)明的有益效果如下:
[0023]本發(fā)明軟棗獼猴桃黃酮的提取方法，采用酶解法及堿提酸沉的方法進(jìn)行提取，可有效的減少提取過(guò)程中有機(jī)試劑的消耗量，使得提取成本降低。
[0024]本發(fā)明黃酮的提取選用了特定的提取方法及提取條件，使得黃酮的提取率高。
[0025]本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，易于操作，適用于工業(yè)生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0026]為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說(shuō)明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0027]實(shí)施例1
[0028]—種軟棗獼猴桃黃酮的提取方法，提取方法如下:
[0029]將新鮮軟棗獼猴桃果實(shí)洗凈、粉碎磨成勻漿后，加入其3倍體積量的石油醚，密閉浸泡25min后，快速過(guò)濾，去掉濾液，得到殘?jiān)?br>[0030]向所得殘?jiān)屑尤肜w維素酶溶液，纖維素酶溶液是指將纖維素酶溶解于磷酸緩沖鹽溶液中，纖維素酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.7%，纖維素酶的添加量與殘?jiān)馁|(zhì)量比為1:5。并在45°C水浴中加熱lh，抽濾，取溶液部分，減壓濃縮得濃縮物粗提物為軟棗獼猴桃含黃酮化合物的有效成分；
[0031]將上述所得粗提物溶解于其6倍質(zhì)量的蒸餾水中，加熱至50°C，攪拌均勻后加入石灰乳，至溶液PH值為8，抽濾后，將殘留物如前重復(fù)操作一次，合并兩次所得濾液；再向?yàn)V液中加入HC1，至濾液PH值為5，靜置12h后，抽濾，保留不溶物，并將其用蒸餾水沖洗至中性，干燥；
[0032]將上述所得提取物經(jīng)HPD600大孔樹(shù)脂柱吸附，并先用體積分?jǐn)?shù)為35%的乙醇作為洗脫劑，進(jìn)行洗脫，流速為2mL/min，接取餾分；再使用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇作為洗脫劑，對(duì)餾分繼續(xù)洗脫，流速為2mL/min。回收吸附洗脫后的試劑，得到濃縮物軟棗獼猴桃黃酮