一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和川陳皮素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提取物分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及的是一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和)11陳皮素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]脂溶性柑橘生物類黃酮主要指的是柑橘類特有的多甲氧基類黃酮類(PMFs)，其具有比一般類黃酮更強的抗癌活性。多甲氧基黃酮類的配基如川陳皮素(nobiletin)、橘皮素(又叫紅橘素，tangeretin)和甜橙黃酮(sinensetin)，盡管原料含量很低，但因為具有比一般類黃酮更強的生理活性，因而更加引人關(guān)注。目前，已明確它的抑制腫瘤效果要比一般類黃酮類要強得多，經(jīng)考證，主要原因是多甲氧基類黃酮類呈脂溶性，更易于接近并浸透至腫瘤細胞而起作用。具體來說，川陳皮素(nobiletin)具有抗血細胞凝集、抗血栓形成、抗癌、抗真菌、抗炎、抗過敏、抗膽堿酯酶和抗癲癇作用，碳水化合物代謝促進劑；而橘皮素(tangeretin)具有抗真菌作用，體外可抑制亞性腫瘤細胞增殖，可抑制嗜堿性細胞組胺釋放，對于平滑肌的收縮亦有抑制作用。由于兩種成分的作用機理不一樣，因此需要進行分離使用。
[0003]而在工業(yè)化使用中，對于多甲氧基黃酮來說，一般要求其單一成分含量大于95%。目前，多數(shù)廠家均是使用柑橘(Citrus aurantium L.)自然生理落果，然后經(jīng)乙醇提取、樹脂分離、乙醇再精制的方法進行加工生產(chǎn)，提取物是多甲氧基黃酮混合物，提取物的含量在50%以內(nèi)，且還需要通過樹脂吸附分離才達到50%，要想得到單一成分高含量(>95%)，還需要多種有機溶劑進行多次分離精制才能達到。因此，其生產(chǎn)過程非常復(fù)雜，生產(chǎn)成本極高，難以實現(xiàn)大批量生產(chǎn)，并且因為是混合物，因而質(zhì)量上也難以得到市場認可。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和川陳皮素的方法，其可實現(xiàn)多甲氧基黃酮單一成分(橘皮素和川陳皮素)的分離，并且所分離的單一成分含量均大于95%。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明基于同一發(fā)明構(gòu)思下，分別提供了從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和川陳皮素的方法，如下所述:
分離橘皮素的方法其包括以下步驟:
(1)將枳實或陳皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入濃度為30?50%的第一有機溶劑，并于80?90 V的回流條件下，對粉碎原料進行回流提取2?3h，得到提取液；
(2)再次加入濃度為30?50%的第一有機溶劑混合，然后再于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行提取2?3h，得到二次提取液，并與第一次提取液進行合并；
(3 )回收提取液，得到柑橘黃酮混合物粗浸膏；
(4)將粗浸膏與清水混合均勻，粗浸膏與清水體積比為I: I，得到混合液，然后加入混合液10?15倍體積的第二有機溶劑，并于室溫條件下攪拌、萃取2?3h，得到水層及有機層；
(5)分出水層及有機層，并將有機層液回收，得到浸膏；
(6)在浸膏中加入濃度為50%?70%的第三有機溶劑進行溶解，然后加入活性炭;所述第三溶劑和活性炭的質(zhì)量分別為浸膏質(zhì)量的5?8倍和0.2-0.4倍；
(7)于75?85°C的回流條件下，對混合物進行提取2?3h，獲得的提取液經(jīng)冷卻、過濾后，得到濾液及活性炭濾渣，然后對濾液進行真空濃縮，得到二次浸膏；
(8)在二次浸膏中加入濃度為90%?95%的乙醇進行溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后得到橘皮素;所述乙醇的質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍。
[0006]作為優(yōu)選，所述第一有機容積為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一種;所述第二有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一種;所述第三有機溶劑為甲醇或乙醇。
[0007]分離川陳皮素的方法其包括以下步驟:
(1)將枳實或陳皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入濃度為30?50%的第一有機溶劑，并于80?90 V的回流條件下，對粉碎原料進行回流提取2?3h，得到提取液；
(2)再次加入濃度為30?50%的第一有機溶劑混合，然后再于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行提取2?3h，得到二次提取液，并與第一次提取液進行合并；
(3 )回收提取液，得到柑橘黃酮混合物粗浸膏；
(4)將粗浸膏與清水混合均勻，粗浸膏與清水體積比為I: I，得到混合液，然后加入混合液10?15倍體積的第二有機溶劑，并于室溫條件下攪拌、萃取2?3h，得到水層及有機層；
(5)分出水層及有機層，并將有機層液回收，得到浸膏；
(6)在浸膏中加入濃度為50%?70%的第三有機溶劑進行溶解，然后加入活性炭;所述第三溶劑和活性炭的質(zhì)量分別為浸膏質(zhì)量的5?8倍和0.2-0.4倍；
(7)于75?85°C的回流條件下，對混合物進行提取2?3h，獲得的提取液經(jīng)冷卻、過濾后，得到濾液及活性炭濾渣；
(8 )在活性炭濾渣中加入濃度為30%?50%的乙醇進行溶解，溶解液經(jīng)冷卻、過濾、回收乙醇后，得到二次浸膏；
(9)在二次浸膏中加入濃度為90%?95%的乙醇進行回流溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后得到川陳皮素;所述乙醇的質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍。
[0008]與上述一樣，優(yōu)選地，所述第一有機溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一種;所述第二有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一種;所述第三有機溶劑為甲醇或乙醇。
[0009]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
(I)本發(fā)明利用提取橙皮苷的原料，通過使用有機溶劑提取得到柑橘黃酮混合物浸膏，然后再根據(jù)橘皮素和川陳皮素這兩個成分在不同溶劑中的溶解差異進行分離，其所獲得的浸膏經(jīng)溶劑萃取、回收再溶劑分離精制后，便可分別得到單一成分的川陳皮素及橘皮素，并且經(jīng)測量，二者的含量均大于95%。本發(fā)明無需通過樹脂分離，而是只需要通過調(diào)整溶劑濃度及使用條件就能達到分離、純化的目的，并且在這過程中只需進行一次分離精制。因此，本發(fā)明不僅工藝簡單、成本低廉，而且非常適合工業(yè)化大生產(chǎn)，真正做到了技術(shù)與成本之間的相對平衡。
[0010](2)目前，中國的柑橘自然生理落果年產(chǎn)量可達20000噸以上，原料中多甲氧基黃酮含量最高可達6?10%。，而本發(fā)明具有產(chǎn)品提取效率高的優(yōu)點，利用本發(fā)明所提供的工藝，每年可得川陳皮素及橘皮素分別為30噸和25噸，每噸售價在400萬元，年可實現(xiàn)2億銷售，且產(chǎn)品目前全部銷售到歐美日等發(fā)達國家，可以說，本發(fā)明很好地結(jié)合了中國自然地理環(huán)境的優(yōu)勢，最大程度地實現(xiàn)了產(chǎn)品的大規(guī)模量產(chǎn)，從而不僅滿足市場的實際需要，而且為國家創(chuàng)收了不小的外匯。
【具體實施方式】
[0011]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明，本發(fā)明的方式包括但不僅限于以下實施例。
實施例
[0012]本發(fā)明提供了一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和川陳皮素的方法，其中，分離橘皮素的方法如下:
(1)將枳實或陳皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入濃度為30?50%的第一有機溶劑，并于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行回流提取2?3h，得到提取液;本實施例中，第一有機溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一種；
(2)再次加入濃度為30?50%的第一有機溶劑混合，然后再于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行提取2?3h，得到二次提取液，并與第一次提取液進行合并；
(3 )回收提取液，得到柑橘黃酮混合物粗浸膏；
(4)將粗浸膏與清水混合均勻，粗浸膏與清水體積比為I: I，得到混合液，然后加入混合液10?15倍體積的第二有機溶劑，并于室溫條件下攪拌、萃取2?3h，得到水層及有機層;本實施例中，第二有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一種；
(5)分出水層及有機層，并將有機層液回收，得到浸膏；
(6)在浸膏中加入濃度為50%?70%的第三有機溶劑進行溶解，然后加入活性炭;所述第三溶劑和活性炭的質(zhì)量分別為浸膏質(zhì)量的5?8倍和0.2-0.4倍;本實施例中，第三有機溶劑為甲醇或乙醇；
(7)于75?85°C的回流條件下，對混合物進行提取2?3h，獲得的提取液經(jīng)冷卻、過濾后，得到濾液及活性炭濾渣，然后對濾液進行真空濃縮，得到二次浸膏；
(8)在二次浸膏中加入濃度為90%?95%的乙醇進行溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后得到橘皮素;所述乙醇的質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍。
[0013]而分離川陳皮素的方法，則是將上述步驟(7)中濾出的活性炭濾渣，用濃度為30%?50%的乙醇進行溶解，溶解液經(jīng)冷卻、過濾、回收乙醇后，得到二次浸膏。而后，在二次浸膏中加入質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍、且濃度為90%?95%的乙醇進行回流溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后，即可得到川陳皮素。
[0014]下面以一個實例對本發(fā)明的技術(shù)效果進行說明，該實例分離得到的橘皮素和川陳皮素含量均大于95%。
[0015]將100kg枳實或陳皮粉碎，然后加入3000?5000L、濃度為30?50%的甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮及正丁醇任意一種溶劑，在80?90°C回流提取2?3小時，放下提取液，再加入3000?5000L、濃度為30?50%的甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮及正丁醇任意一種溶劑，在80?90°C回流提取2?3小時，放下提取液合并第一次提取液。
[0016]回收提取液，得到粗浸膏(為投料量的0.2倍)，然后按粗浸膏體積加入I倍體積的清水混合均勻，并向混合液中加入混合液體積10?15倍的乙酸乙酯、石油醚、丙酮及正丁醇任意一種溶劑，然后于室溫下攪拌萃取2?3小時分層，放下水層及有機層，并回收有機層液，得到浸膏(為投料量的0.1倍)，浸膏中加入質(zhì)量5?8倍、濃度為50?70%的甲醇或乙醇溶劑進行溶解，然后再加入質(zhì)量0.2?0.4倍活性炭，在80 V回流提取2?3小時，并對溶液進行冷卻和過濾，得到濾液及活性炭濾渣。
[0017]而后，將濾液進行真空濃縮，得到浸膏，浸膏中加入質(zhì)量3?5倍、濃度為95%的乙醇溶解過濾，濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、過濾、干燥，得到橘皮素2.5kg，含量大于95%。
[0018]而濾出的活性炭濾渣，則用30?50%的乙醇溶解，并進行冷卻、過濾，濾液回收乙醇，得到浸膏，浸膏中加入質(zhì)量3?5倍、濃度為95%濃度乙醇回流溶解，并過濾，濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、過濾、干燥，得到川陳皮素3kg，含量大于95%。
[0019]本發(fā)明通過設(shè)計一種新型的分離工藝，很好地從柑橘黃酮提取物中分離出了含量均超過95%的橘皮素和川陳皮素，從而大幅滿足了工業(yè)化的生產(chǎn)要求。本發(fā)明突破了現(xiàn)有技術(shù)的束縛，提高了產(chǎn)品的提取和分離效率，因而技術(shù)進步十分明顯，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
[0020]上述實施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施方式之一，不應(yīng)當(dāng)用于限制本發(fā)明的保護范圍，凡在本發(fā)明的主體設(shè)計思想和精神上作出的毫無實質(zhì)意義的改動或潤色，其所解決的技術(shù)問題仍然與本發(fā)明一致的，均應(yīng)當(dāng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將枳實或陳皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入濃度為30?50%的第一有機溶劑，并于80?90 V的回流條件下，對粉碎原料進行回流提取2?3h，得到提取液； (2)再次加入濃度為30?50%的第一有機溶劑混合，然后再于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行提取2?3h，得到二次提取液，并與第一次提取液進行合并； (3 )回收提取液，得到柑橘黃酮混合物粗浸膏； (4)將粗浸膏與清水混合均勻，粗浸膏與清水體積比為I: I，得到混合液，然后加入混合液10?15倍體積的第二有機溶劑，并于室溫條件下攪拌、萃取2?3h，得到水層及有機層； (5)分出水層及有機層，并將有機層液回收，得到浸膏； (6)在浸膏中加入濃度為50%?70%的第三有機溶劑進行溶解，然后加入活性炭;所述第三溶劑和活性炭的質(zhì)量分別為浸膏質(zhì)量的5?8倍和0.2-0.4倍； (7)于75?85°C的回流條件下，對混合物進行提取2?3h，獲得的提取液經(jīng)冷卻、過濾后，得到濾液及活性炭濾渣，然后對濾液進行真空濃縮，得到二次浸膏； (8)在二次浸膏中加入濃度為90%?95%的乙醇進行回流溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后得到橘皮素;所述乙醇的質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素的方法，其特征在于，所述第一有機容積為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一種。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素的方法，其特征在于，所述第二有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一種。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素的方法，其特征在于，所述第三有機溶劑為甲醇或乙醇。5.—種從柑橘黃酮提取物中分離川陳皮素的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將枳實或陳皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入濃度為30?50%的第一有機溶劑，并于80?90 V的回流條件下，對粉碎原料進行回流提取2?3h，得到提取液； (2)再次加入濃度為30?50%的第一有機溶劑混合，然后再于80?90°C的回流條件下，對粉碎原料進行提取2?3h，得到二次提取液，并與第一次提取液進行合并； (3 )回收提取液，得到柑橘黃酮混合物粗浸膏； (4)將粗浸膏與清水混合均勻，粗浸膏與清水體積比為I: I，得到混合液，然后加入混合液10?15倍體積的第二有機溶劑，并于室溫條件下攪拌、萃取2?3h，得到水層及有機層； (5)分出水層及有機層，并將有機層液回收，得到浸膏； (6)在浸膏中加入濃度為50%?70%的第三有機溶劑進行溶解，然后加入活性炭;所述第三溶劑和活性炭的質(zhì)量分別為浸膏質(zhì)量的5?8倍和0.2-0.4倍； (7)于75?85°C的回流條件下，對混合物進行提取2?3h，獲得的提取液經(jīng)冷卻、過濾后，得到濾液及活性炭濾渣； (8 )在活性炭濾渣中加入濃度為30%?50%的乙醇進行溶解，溶解液經(jīng)冷卻、過濾、回收乙醇后，得到二次浸膏； (9)在二次浸膏中加入濃度為90%?95%的乙醇進行回流溶解，并過濾，所得濾液經(jīng)冷卻、結(jié)晶、二次過濾、干燥后得到川陳皮素;所述乙醇的質(zhì)量為二次浸膏質(zhì)量的3~5倍。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離川陳皮素的方法，其特征在于，所述第一有機溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一種。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離川陳皮素的方法，其特征在于，所述第二有機溶劑為乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一種。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種從柑橘黃酮提取物中分離川陳皮素的方法，其特征在于，所述第三有機溶劑為甲醇或乙醇。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種從柑橘黃酮提取物中分離橘皮素和川陳皮素的方法，主要過程為：將枳實或陳皮粉碎，加第一有機溶劑回流提取，得第一次提取液；再次加入第一有機溶劑回流提取，得二次提取液，并與第一次提取液合并；回收提取液，得粗浸膏；加清水混合，得混合液，加第二有機溶劑萃取，得水層及有機層；回收有機層液，得浸膏；加第三有機溶劑及活性炭；提取混合物，提取液經(jīng)冷卻、過濾得濾液及活性炭濾渣，濾液真空濃縮得二次浸膏；加乙醇溶解，并經(jīng)分離精制后得橘皮素；同時，活性炭濾渣用乙醇溶解，并經(jīng)冷卻、過濾、回收乙醇得二次浸膏；加乙醇回流溶解，并經(jīng)分離精制后得川陳皮素。本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)難以獲得高含量多甲氧基黃酮單一成分的問題。
【IPC分類】C07D311/40, C07D311/30
【公開號】CN105712965
【申請?zhí)枴緾N201610039230
【發(fā)明人】周傳武
【申請人】綿陽迪澳藥業(yè)有限公司