專利名稱：納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種馬錢子堿制劑，特別涉及一種含有透皮促進(jìn)劑和凍干保護(hù)劑的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的透皮制劑。
背景技術(shù)：
馬錢子為一種多年生的植物，屬于馬錢科植物。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道(苗新榮等.馬錢子的臨床應(yīng)用概況，新疆中醫(yī)藥，2000，18(2)61)，馬錢子具有突出的散結(jié)消腫、通絡(luò)止痛等作用，臨床上用于治療諸如痛風(fēng)、關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等多種痛性疾病療效顯著。但同時(shí)馬錢子在臨床上的使用又受到多種因素的制約，主要表現(xiàn)在(1)毒性大，屬于國(guó)家管制使用藥品，其毒性反應(yīng)主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、以及消化道的損害，甚則危及生命；(2)劑型落后，目前馬錢子這類毒性較強(qiáng)藥物的應(yīng)用，內(nèi)服自然主要是丸、散劑，外用主要是膏劑。這些劑型存在著制備工藝落后、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)低下，質(zhì)量控制困難、穩(wěn)定性差等缺陷；(3)顆粒大、吸收少、起效慢，目前使用的馬錢子堿顆粒較粗，無(wú)論是丸散劑還是外用膏劑，都存在著吸收率低下、滲透性差、分布不均勻等弊端，既降低了療效，也使起效相對(duì)緩慢。上述的多種弊端在很大程度上限制馬錢子在臨床上的使用。針對(duì)這些問(wèn)題，如何來(lái)用先進(jìn)的加工方法，在確保療效的基礎(chǔ)上，研制出高效、速效、安全、方便的馬錢子或含有馬錢子有效成分的鎮(zhèn)痛劑型，是目前馬錢子研究的關(guān)鍵，也是人們所十分關(guān)注的課題。
研究發(fā)現(xiàn)，馬錢子鎮(zhèn)痛、抗炎的主要化學(xué)成分也是其毒性成分為從馬錢子中提取的堿(brusine，即布魯生)，(郭文生，李軍等，利用主—客體系分離馬錢子中馬錢子堿的研究，中國(guó)藥物化學(xué)雜志，1995，5(1)28～32)文獻(xiàn)報(bào)道了馬錢子中提取馬錢子堿的方法，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征，馬錢子堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下 本研究小組歷經(jīng)兩年，以馬錢子的主要藥效成分同時(shí)也是毒性成分一馬錢子堿為對(duì)象，采用納米技術(shù)成功制備出了分散、穩(wěn)定性良好的納米馬錢子堿脂質(zhì)體懸浮液。動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與常規(guī)馬錢子堿相比，納米脂質(zhì)體化不僅能夠顯著降低馬錢子堿毒性，而且也可以明顯提高其藥效，為解決馬錢子臨床應(yīng)用中存在的毒性和有效性問(wèn)題提供了一條有效途徑。但該納米馬錢子堿脂質(zhì)體懸浮液儲(chǔ)存、運(yùn)輸極不方便。為此，如何研制出既具有理想穩(wěn)定性和藥效，同時(shí)又具有使用、儲(chǔ)存、運(yùn)輸方便的新劑型是將納米馬錢子堿脂質(zhì)體進(jìn)一步推廣應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問(wèn)題是公開(kāi)一種納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑及其制備方法和應(yīng)用，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。
本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思是這樣的透皮制劑是治療痛性疾病等外傷常用的劑型，具有降低全身毒副作用、提高病變部位的濃度和延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)，而且使用方便。為此，本發(fā)明采用低溫凍干技術(shù)將納米馬錢子堿脂質(zhì)體制備成便于儲(chǔ)藏、運(yùn)輸?shù)姆蹌?。在臨床使用前，采用生理鹽水制備成納米馬錢子堿脂質(zhì)體的透皮噴霧制劑。為了提高透皮效果和納米脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，在納米馬錢子堿脂質(zhì)體中引入了透皮促進(jìn)劑和凍干保護(hù)劑。
本發(fā)明公開(kāi)的用于鎮(zhèn)痛、消炎的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉，其特征在于，組分和重量含量包括納米馬錢子堿脂質(zhì)體 40～90％透皮促進(jìn)劑 5～50％凍干保護(hù)劑 5～50％。
所說(shuō)的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的組分包括卵磷脂、膽固醇和馬錢子堿；卵磷脂∶膽固醇＝20～1，重量比；以卵磷脂和膽固醇的總重量計(jì)，馬錢子堿的重量含量為1～40％；納米馬錢子堿脂質(zhì)體的粒徑為50～1000nm。
所說(shuō)的凍干保護(hù)劑選自海藻糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、甘油或蔗糖等中的一種或其混合物；所說(shuō)的透皮促進(jìn)劑選自牛磺冰片、丙二醇、氮酮、薄荷醇、精油、磷脂、磷酸鹽、油酸、單萜或倍半萜等中的一種或其混合物；本發(fā)明還涉及一種納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑，包括治療有效量的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉和生理鹽水，在使用前將所說(shuō)的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干制劑與生理鹽水混合即可。生理鹽水中，納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉優(yōu)選的重量含量為1～40％。
本發(fā)明的納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉的制備方法包括如下步驟在含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液中加入凍干保護(hù)劑和透皮促進(jìn)劑，混合溶液冷凍干燥，凍干溫度為0～-60℃，得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉；含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液中，納米馬錢子堿脂質(zhì)體的重量濃度為0.4～36％；其中納米馬錢子堿脂質(zhì)體40～90％透皮促進(jìn)劑5～50％凍干保護(hù)劑5～50％。
含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液的制備方法如下將馬錢子堿、卵磷脂和膽固醇溶于有機(jī)溶劑中，在20～60℃的溫度下，減壓揮去有機(jī)溶劑，成膜，10～70℃下真空干燥，然后加入含有表面活性劑和緩沖液的水溶液，保持pH為6.0～8.5，溶脹0.1～3小時(shí)，用超聲波超聲粉碎5～100min，即獲得含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液；所說(shuō)的有機(jī)溶劑選自氯仿、正己烷、二氯甲烷、乙酸丙酯、三氯乙烯、 甲基異丁基甲酮、四氯乙烯、三氯甲烷、甲苯、1，2一二氯乙烷、乙酸丁酯、異丁醇、乙苯、對(duì)二甲苯、間二甲苯、乙酸戊酯、鄰二甲苯、異戊醇或正戊醇中的一種；所說(shuō)的表面活性劑選自吐溫、Span、十六烷基三甲基溴化胺、N，N一二甲基甲酰胺、聚乙二醇、石油磺酸鹽、烷基芳基磺酸鹽、芳基烷基磺酸鹽、烷基和烯基磺酸鹽、聚氧乙烯醚磺酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽或多環(huán)芳烴磺酸鹽縮合物中的一種；含有表面活性劑和緩沖液的水溶液中，表面活性劑的重量濃度為0.01～10mg/ml；所說(shuō)的緩沖液選自磷酸鹽緩沖液；卵磷脂∶膽固醇＝20～1，重量比；以卵磷脂和膽固醇的總重量計(jì)，馬錢子堿的重量含量為1～40％；
本發(fā)明的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑可用于治療痛風(fēng)、關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等，將納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑噴涂于患者的疼痛部位，每日1～5次，劑量一般為3～60mg/kg體重，具體可根據(jù)患者的年齡、性別和病情由醫(yī)師決定。
采用本發(fā)明的方法制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑，為一種成分分散穩(wěn)定性良好的納米脂質(zhì)體。它克服納米馬錢子堿脂質(zhì)體懸浮液儲(chǔ)存、運(yùn)輸極不方便、穩(wěn)定性不好的缺陷，既具有理想穩(wěn)定性和藥效，同時(shí)又具有使用、儲(chǔ)存、運(yùn)輸方便的優(yōu)點(diǎn)。動(dòng)物試驗(yàn)表明，與常規(guī)馬錢子制劑相比，所制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體毒性降低，同時(shí)其鎮(zhèn)痛效果顯著提高，是解決馬錢子臨床應(yīng)用中存在的毒性和療效問(wèn)題的有效措施?？捎糜谕达L(fēng)、關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等多種痛性疾病的治療，病療效顯著，起效快，吸收率高、滲透性好。
具體實(shí)施例方式
下面將結(jié)合實(shí)例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但這些實(shí)例并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液的制備稱取60mg馬錢子堿、450mg氫化卵磷脂和150mg膽固醇共溶于20ml氯仿，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，在40℃的水浴溫度下，轉(zhuǎn)速為150r/min，減壓蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑成膜，室溫下真空干燥12小時(shí)。然后加入20ml濃度為9mg/ml的吐溫80的水溶液和40ml的磷酸鹽緩沖液，充分溶脹半小時(shí)，再經(jīng)水浴超聲10min，再用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)在一定功率下超聲20min，即得帶白色乳光的馬錢子堿脂質(zhì)體，其中馬錢子堿的含量為1mg/ml，馬錢子堿脂質(zhì)體的含量為11mg/ml。脂質(zhì)體粒徑為200nm。
超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)為一種通用設(shè)備，如上海之信儀器有限公司公司生產(chǎn)的型號(hào)為JYD-900的超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)。
實(shí)施例2納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉的制備在60ml含有11mg/ml馬錢子堿脂質(zhì)體的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮液中加入40mg的?；潜?0mg葡萄糖，將上述混合溶液放于真空冷凍干燥機(jī)中于-50℃下干燥24h，即得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉。該粉劑性能穩(wěn)定，便于長(zhǎng)期儲(chǔ)藏，運(yùn)輸方便，在生理鹽水中易分散。
實(shí)施例3納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉的制備在60ml含有11mg/ml馬錢子堿脂質(zhì)體的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮液中加入50mg的氮酮和40mg甘露醇，將上述混合溶液放于真空冷凍干燥機(jī)中于-40℃下干燥20h，即得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉。該粉劑性能穩(wěn)定，便于長(zhǎng)期儲(chǔ)藏，運(yùn)輸方便，在生理鹽水中易分散。
實(shí)施例4納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉的制備在30ml含有11mg/ml的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮液中加入250mg的丙二醇和250mg甘露醇，將上述混合溶液放于真空冷凍干燥機(jī)中于-45℃下干燥15h，即得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉。該粉劑性能穩(wěn)定，便于長(zhǎng)期儲(chǔ)藏，運(yùn)輸方便，在生理鹽水中易分散。
實(shí)施例5在10ml含有11mg/ml的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮液中加入50mg的薄荷醇和50mg海藻糖，將上述混合溶液放于真空冷凍干燥機(jī)中于-45℃下干燥15h，即得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉。該粉劑性能穩(wěn)定，便于長(zhǎng)期儲(chǔ)藏，運(yùn)輸方便，在生理鹽水中易分散。
將用此方法制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉分散在310g的生理鹽水中，即獲得納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑，分散容易，性能穩(wěn)定。
實(shí)施例6對(duì)實(shí)施例5制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑進(jìn)行效果評(píng)價(jià)1.評(píng)價(jià)方法(1)急性毒性試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，18～22g，清潔級(jí)(復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。
試驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為普通馬錢子堿水懸浮液組、納米馬錢子堿噴霧劑組。
實(shí)驗(yàn)方法采用胃腸道給藥，即口服灌胃(ig)。灌胃前，動(dòng)物隔夜禁食12h，不禁水，以避免胃內(nèi)容物影響藥物的吸收而干擾試驗(yàn)結(jié)果。小鼠灌胃0.4ml/10g(體重)。
在預(yù)實(shí)驗(yàn)所獲得0％和100％致死量范圍內(nèi)，選擇分組并確定各劑量組組距。給藥當(dāng)日，尤其是給藥后4h內(nèi)應(yīng)嚴(yán)密觀察并記錄，然后每日上、下午各1次，連續(xù)觀察7天，記錄動(dòng)物死亡情況，死亡時(shí)間。
采用改良寇氏法公式計(jì)算LD50LD50＝log-1[xm-i(∑P-0.5)]xm最大劑量組劑量的對(duì)數(shù)值 P各組動(dòng)物死亡率，用小數(shù)表示i相鄰兩組劑量高劑量與低劑量之比的對(duì)數(shù)值∑P各組動(dòng)物死亡率之總和， n每組動(dòng)物數(shù)Sx50=i×(ΣP-ΣP2)/(n-1)]]>
Sx50logLD50的標(biāo)準(zhǔn)誤x50＝logLD50LD50的95％可信限＝log-1(x50±1.96Sx50)LD50的平均可信限＝LD50±(LD50的95％可信限的高限-低限)/2(2)鎮(zhèn)痛效果評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同上實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(生理鹽水)；陽(yáng)性對(duì)照組(云南白藥酊)；空白脂質(zhì)體組納米馬錢子堿脂質(zhì)體噴霧劑組；馬錢子堿與空白脂質(zhì)體機(jī)械混合組；馬錢子堿磷酸鹽溶液組。
采用經(jīng)典醋酸致痛-扭體法評(píng)價(jià)鎮(zhèn)痛效果。實(shí)驗(yàn)前24h，用硫化鈉給小鼠腹部脫毛，脫毛面積3×3cm2，備用。于每組動(dòng)物腹部脫毛區(qū)涂抹不同受試藥物，空白對(duì)照組涂抹等量生理鹽水，共給藥3次，每次間隔10min，末次給藥20min后各組小鼠腹腔注射0.9％醋酸溶液(0.1ml/10g)，觀察20min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)，記錄，并計(jì)算藥物的鎮(zhèn)痛百分率。
鎮(zhèn)痛百分率＝(對(duì)照組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù))/對(duì)照組平均扭體次數(shù)×100％2.評(píng)價(jià)結(jié)果(1)急性毒性試驗(yàn)以馬錢子堿的水懸液為對(duì)照，采用急性毒性試驗(yàn)研究制備納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑的LD50，并記錄動(dòng)物的死亡時(shí)間。結(jié)果如下表1。
表1.馬錢子堿的LD50和動(dòng)物死亡時(shí)間

由上表1可見(jiàn)，與馬錢子堿水懸液相比，納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑的LD50增加，動(dòng)物死亡時(shí)間延長(zhǎng)。
(2)鎮(zhèn)痛效果分別以生理鹽水、云南白藥酊為空白對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組，研究空白脂質(zhì)體組、納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑組、馬錢子堿與空白脂質(zhì)體機(jī)械混合組以及馬錢子堿磷酸鹽溶液組對(duì)醋酸致扭體的鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果如下表2。
表2.馬錢子堿不同劑型對(duì)醋酸致扭體的鎮(zhèn)痛效果比較

與空白對(duì)照組相比**P＜0.01；與納米馬錢子堿脂質(zhì)體組相比##P＜0.01由表2可見(jiàn)，同空白對(duì)照組相比，空白納米脂質(zhì)體對(duì)對(duì)醋酸致小鼠扭體幾乎無(wú)抑制作用；而納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑對(duì)醋酸致小鼠扭體有顯著的抑制作用，且療效顯著優(yōu)于未經(jīng)脂質(zhì)體包裹的普通馬錢子堿和馬錢子堿與空白納米脂質(zhì)體機(jī)械混合組(P＜0.01)。
由此可見(jiàn)，采用本發(fā)明方法制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑，不僅儲(chǔ)存、運(yùn)輸方便，而且使用方便，同時(shí)還降低了馬錢子堿的毒性，提高馬錢子堿的藥效，是一種較理想的馬錢子堿制劑，有望在臨床上獲得應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.一種納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉，其特征在于，組分和重量含量包括納米馬錢子堿脂質(zhì)體 40～90％透皮促進(jìn)劑 5～50％凍干保護(hù)劑 5～50％所說(shuō)的納米馬錢子堿脂質(zhì)體的組分包括卵磷脂、膽固醇和馬錢子堿；卵磷脂∶膽固醇＝20～1，重量比；以卵磷脂和膽固醇的總重量計(jì)，馬錢子堿的重量含量為1～30％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉，其特征在于，納米馬錢子堿脂質(zhì)體的粒徑為50～1000nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉，其特征在于，所說(shuō)的凍干保護(hù)劑選自海藻糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇、甘油或蔗糖中的一種或其混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉，其特征在于，所說(shuō)的透皮促進(jìn)劑選自牛磺冰片、丙二醇、氮酮、薄荷醇、精油、磷脂、磷酸鹽、油酸、單萜或倍半萜中的一種或其混合物。
5.一種納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑，包括權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的治療有效量的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉和生理鹽水，將納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉分散在生理鹽水中。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑，其特征在于，納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉在噴霧制劑中所占的重量含量為1～40％。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干噴霧制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟在含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液中加入凍干保護(hù)劑和透皮促進(jìn)劑，混合溶液冷凍干燥，冷凍溫度為0～-60℃，即得納米馬錢子堿脂質(zhì)體的凍干粉。
8.含有納米馬錢子堿脂質(zhì)體的懸浮水溶液中，納米馬錢子堿脂質(zhì)體的重量濃度為0.4～36％。
9.權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮凍干粉制備在治療痛風(fēng)、關(guān)節(jié)炎或跌打損傷藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種納米馬錢子堿脂質(zhì)體透皮噴霧制劑及其制備方法和應(yīng)用。該制劑由含有一定比例的透皮促進(jìn)劑和凍干保護(hù)劑的納米馬錢子堿脂質(zhì)體凍干粉和生理鹽水按照一定的比例混合而成。本發(fā)明的制劑，為一種成分分散穩(wěn)定性良好的納米脂質(zhì)體。它克服納米馬錢子堿脂質(zhì)體懸浮液儲(chǔ)存、運(yùn)輸極不方便、穩(wěn)定性不好的缺陷，既具有理想穩(wěn)定性和藥效，同時(shí)又具有使用、儲(chǔ)存、運(yùn)輸方便的優(yōu)點(diǎn)。動(dòng)物試驗(yàn)表明，與常規(guī)馬錢子制劑相比，所制備的納米馬錢子堿脂質(zhì)體毒性降低，同時(shí)其鎮(zhèn)痛效果顯著提高，是解決馬錢子臨床應(yīng)用中存在的毒性和療效問(wèn)題的有效措施?？捎糜谕达L(fēng)、關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等多種痛性疾病的治療，病療效顯著，起效快，吸收率高、滲透性好。
文檔編號(hào)A61K31/475GK1698612SQ20051002651
公開(kāi)日2005年11月23日 申請(qǐng)日期2005年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月7日
發(fā)明者劉昌勝, 袁媛, 楊柏燦 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué)