一種脂質(zhì)體制劑及其制備方法與應用
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，涉及一種脂質(zhì)體制劑及其制備與應用，具體涉及脂質(zhì)體?二甲雙胍?二氫卟吩e6及其制備與應用，尤其是其在腫瘤光動力治療和放療中的應用。本發(fā)明提供的脂質(zhì)體制劑(脂質(zhì)體?二甲雙胍?二氫卟吩e6制劑)由脂質(zhì)體，二甲雙胍，二氫卟吩e6組成，粒徑均一，在水中分散良好，在水中粒徑主要集中在110nm左右，可以同時裝載光敏分子以及二甲雙胍，是理想的藥物載體，具有良好的穩(wěn)定性。實驗表明本發(fā)明所述脂質(zhì)體?二甲雙胍?二氫卟吩e6制劑能夠在腫瘤的部位具有很高的富集，對降低腫瘤細胞耗氧量有持續(xù)作用，能明顯的改善腫瘤部位的乏氧狀況，產(chǎn)生良好的光動力治療以及放射治療效果。
【專利說明】
一種脂質(zhì)體制劑及其制備方法與應用
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，涉及一種脂質(zhì)體制劑及其制備與應用，具體涉及 脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6及其制備與應用，尤其是其在腫瘤光動力治療和放療中的應 用。
【背景技術】
[0002] 腫瘤(tumour)是指機體在各種致瘤因子作用下，局部組織細胞增生所形成的新生 物(neogrowth)，因為這種新生物多呈占位性塊狀突起，也稱贅生物(neoplasm)。根據(jù)新生 物的細胞特性及對機體的危害性程度，又將腫瘤分為良性腫瘤和惡性腫瘤兩大類，而癌癥 即為惡性腫瘤的總稱。與良性腫瘤相比，惡性腫瘤生長速度快，呈浸潤性生長，易發(fā)生出血、 壞死、潰瘍等，并常有遠處轉(zhuǎn)移，造成人體消瘦、無力、貧血、食欲不振、發(fā)熱以及嚴重的臟器 功能受損等，最終造成患者死亡。由于人口老齡化等原因，當前我國癌癥發(fā)病率、死亡率呈 持續(xù)增長趨勢。世界癌癥報告估計，2012年中國癌癥發(fā)病人數(shù)為306.5萬，約占全球發(fā)病人 數(shù)的五分之一;癌癥死亡人數(shù)為220.5萬，約占全球癌癥死亡人數(shù)的四分之一。今后20年，我 國癌癥的發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)還將持續(xù)上升:根據(jù)國際癌癥研究署預測，如不采取有效措施，我 國癌癥發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)到2020年將上升至400萬人和300萬人；2030年將上升至500萬人和 350萬人。
[0003] 由于惡性腫瘤生長迅速，腫瘤細胞凋亡的速度明顯低于其所對應的正常組織，故 導致腫瘤對氧及其他能量物質(zhì)如葡萄糖等的需求增加，而腫瘤組織內(nèi)的血液供應則相對不 足。而且腫瘤體積的高速膨脹，在腫瘤中的一部分腫瘤組織由于離最近的血管的距離越來 越遠故導致了腫瘤血液供應的不足，最終導致了這一部分腫瘤組織的缺氧。因此在臨床上 大部分惡性腫瘤在它的生長、發(fā)展過程中都有內(nèi)部的缺氧區(qū)域存在，并且這些缺氧區(qū)域最 終常常出現(xiàn)壞死，這些原因?qū)⑦M一步導致臨床上治療腫瘤的方法如放射治療，光動力治療 等治療療效受到一定的限制。因此降低腫瘤細胞消耗氧氣的速率，改善腫瘤的乏氧狀況將 是提高腫瘤治療效果最重要的手段之一。
[0004] 二甲雙胍(metformin，Met)(式1)廣泛應用于Π 型糖尿病、肥胖癥和多囊卵巢綜合 癥的治療，有較好的耐受性，研究發(fā)現(xiàn)使用Met治療糖尿病可以有效降低患者患癌的風險。 有報道表明二甲雙胍可以通過降低腫瘤細胞消耗氧氣的速率從而有效改善腫瘤的乏氧狀 況。通過這一途徑也可大大提高放射治療對惡性腫瘤的治療效果。然而現(xiàn)在已經(jīng)使用的二 甲雙胍改善腫瘤乏氧并且提高放射治療的途徑是通過腹腔注射二甲雙胍溶液，這種方法通 常作用時效短，注射劑量大，改善腫瘤乏氧狀況效率有限。
[0005]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術問題在于提供一種脂質(zhì)體制劑及其制備方法與應 用。本發(fā)明提供的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6的脂質(zhì)體制劑具有良好改善腫瘤乏氧的效 果，能夠產(chǎn)生良好的光動力治療以及放射治療效果。
[0007] 為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下技術方案。
[0008] -種脂質(zhì)體制劑即脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑，由脂質(zhì)體，二甲雙胍，二氫 卟吩e6組成。
[0009] 本發(fā)明所述脂質(zhì)體制劑中的二甲雙胍包裹于脂質(zhì)體中心的親水區(qū)，疏水的二氫卟 吩e6裝載在脂質(zhì)體的疏水區(qū)域。
[0010] 本發(fā)明所述脂質(zhì)體制劑可以有效的在腫瘤部位富集并緩慢釋放二甲雙胍，從而在 較低的注射劑量下達到長時并且有效改善腫瘤的乏氧狀況的目的。此外，光敏分子二氫卟 吩e6(式2)的存在使得所述脂質(zhì)體制劑可以有效地應用于光動力治療中。因此，這種脂質(zhì) 體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑可以有效應用于提高腫瘤的光動力治療以及放射治療療效 中。
[0011
[0012] 按照本發(fā)明，在一些實施方案中，所述脂質(zhì)體制劑中，所述脂質(zhì)體由二棕櫚酰磷脂 酰膽堿(DPPC)，膽固醇(CH)，磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)組成。
[0013] 在一些實施方案中，本發(fā)明所述的脂質(zhì)體制劑，其粒徑為100~160nm。在一些實施 例中，其粒徑為100~160nm〇
[0014] 本發(fā)明還提供的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的制備方法，將二棕櫚酰磷脂 酰膽堿(DPPC)、膽固醇(CH)、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)和二氫卟吩e6溶解于三氯 甲烷溶液中，氮氣吹干，加入二甲雙胍溶液攪拌后進行脂質(zhì)體擠膜。
[0015] 其中，所述二甲雙胍溶液由二甲雙胍溶于磷酸鹽緩沖液中制得。
[0016] 優(yōu)選的，所述二甲雙胍溶液中二甲雙胍的濃度為10mg/mL。
[0017] 在一些實施方案中，本發(fā)明所述脂質(zhì)體制劑的制備方法中所述二棕櫚酰磷脂酰膽 堿、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、膽固醇、二氫卟吩e6的摩爾比為6:0.5:4:1。
[0018] 按照本發(fā)明，在一些實施方案中，所述脂質(zhì)體制劑的制備方法中制得的所述脂質(zhì) 體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑得粒徑為100~160nm。
[0019]實驗表明，利用本發(fā)明制備的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑，對小鼠通過尾 靜脈注射，并由熒光成像技術對其進行監(jiān)測。發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑能夠 在腫瘤的部位具有很高的富集。注射24h后由于二甲雙胍的緩慢釋放，對降低腫瘤細胞耗氧 量有持續(xù)作用，采用光聲成像以及免疫熒光染色的方法發(fā)現(xiàn)腫瘤部位的乏氧狀況得到明顯 的改善。改善后的小鼠腫瘤在放射治療的作用下其生長速率得到有效的控制。同時，由于其 載有光動力治療用的光敏分子二氫卟吩e6,在661nm波長激光照射下能產(chǎn)生單線態(tài)氧從而 破壞腫瘤細胞，該制劑還可以有效的應用于光動力治療中。二甲雙胍有效改善腫瘤的乏氧 后，光動力治療的效果顯著增強。
[0020] 因此本發(fā)明還提供了所述脂質(zhì)體制劑(脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑)在制 備降低腫瘤細胞耗氧量、提高腫瘤含氧量的藥物中的應用。
[0021] 進一步的，還提供了所述脂質(zhì)體制劑(脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑)在制備 腫瘤光動力治療和放療中藥物中的應用。
[0022] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明提供了一種脂質(zhì)體制劑及其制備方法與應用。本發(fā)明提 供的脂質(zhì)體制劑(脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑）由脂質(zhì)體，二甲雙胍，二氫卟吩e6組 成，粒徑均一，在水中分散良好，在水中粒徑主要集中在IlOnm左右，可以同時裝載光敏分子 以及二甲雙胍，是理想的藥物載體，具有良好的穩(wěn)定性。實驗表明本發(fā)明所述脂質(zhì)體-二甲 雙胍-二氫卟吩e6制劑能夠在腫瘤的部位具有很高的富集，對降低腫瘤細胞耗氧量有持續(xù) 作用，能明顯的改善腫瘤部位的乏氧狀況，產(chǎn)生良好的光動力治療以及放射治療效果。
【附圖說明】
[0023] 為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施例或現(xiàn) 有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。
[0024] 圖1示實施例2脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的透射電鏡圖；
[0025] 圖2示實施例2脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑在水中的粒徑分布；其中， 表示脂質(zhì)體-二氫卟吩e6(Ce6-Lip〇S〇me)制劑在水中的粒徑;_表示脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6(Met-Ce6_Liposome)制劑在水中的粒徑；
[0026] 圖3示實施例2脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的紫外吸收效果圖；其中，^表 示脂質(zhì)體-二氫卟吩66(〇66-1^口0801116)制劑的紫外吸收 ;〃〃表示脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟 吩e6(Met-Ce6_Liposome)制劑的紫外吸收；
[0027] 圖4不實施例3不同溶液經(jīng)661nm的激光照射后單線態(tài)氧的含量;其中，其中，表 示二氫卟吩e6 (Free-Liposome)經(jīng)66 Inm的激光照射后產(chǎn)生單線態(tài)氧的量;示脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6(Met-Ce6_Liposome)制劑經(jīng)661nm的激光照射后產(chǎn)生單線態(tài)氧的量； .**^_示脂質(zhì)體-二氫卟吩e6 (Ce6-Liposome)經(jīng)661nm的激光照射后產(chǎn)生單線態(tài)氧的量; 示水(Water)經(jīng)661nm的激光照射后產(chǎn)生單線態(tài)氧的量；示二甲雙胍(Free Met)經(jīng)66Inm 的激光照射后產(chǎn)生單線態(tài)氧的量；
[0028] 圖5示實施例4小鼠注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑后的血液循環(huán)；
[0029] 圖6示實施例4小鼠注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫撲吩e6制劑后，不同時間點在腫瘤 部位的富集情況；
[0030]圖7不實施例4小鼠主要器官中焚光的分布；
[0031] 圖8示實施例5小鼠注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑后，不同時間點用光聲 成像測得的腫瘤部位的血氧飽和度的變化；
[0032] 圖9示對圖8中腫瘤部位血氧飽和度信號值的定量分析；
[0033] 圖10示實施例6免疫熒光染色的方法對小鼠腫瘤部位乏氧狀況改善的檢測；
[0034] 圖11示實施例7不同分組的小鼠腫瘤在光動力治療后腫瘤的生長曲線；其中包括 對照組(沒有進行光動力治療）（Control)，注射二甲雙胍和二氫卟吩e6 2小時后進行光動 力治療組(Free Ce6+Met 2h);注射二甲雙胍和二氫卟吩e6 24小時后進行光動力治療組 (Free Ce6+Met 24h);注射脂質(zhì)體-二氫卟吩進行光動力治療組(Ce6_Liposome);注射脂質(zhì) 體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑后進行光動力治療組(Met-Ce6_Liposome);
[0035] 圖12示不同分組的小鼠腫瘤在放射治療后腫瘤的生長曲線；其中包括對照組(沒 有進行放射治療）（C〇ntr 〇l);只進行放射治療組(RT);注射脂質(zhì)體-二甲雙胍制劑后進行放 射治療組（Met-Ce6-Liposome+RT);
【具體實施方式】
[0036] 下面將結(jié)合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述， 顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的 實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都 屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0037] 為了進一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合具體實施例
[0038] 實施例1、脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的制備
[0039] 將DPPC、DSPE-PEG、CH、Ce6按照摩爾比為6:0.5:4:1的比例稱取后，溶于三氯甲烷 溶液中，用氮氣將三氯甲烷溶液吹干。稱取二甲雙胍溶于磷酸鹽緩沖液中制備lOmg/mL的二 甲雙胍溶液并將制備的溶液加入脂質(zhì)體-二氫卟吩e6中，在65°C水浴中攪拌30分鐘后，將制 備的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑擠膜。
[0040] 實施例2、脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的性質(zhì)檢測
[0041] 對實施例1制得的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑進行定性檢測，分別進行透 射電鏡檢測，動態(tài)光散射、紫外吸收。
[0042]其中，對透射電鏡檢測的結(jié)果如圖1所示，結(jié)果顯示，實施例1制得的脂質(zhì)體-二甲 雙胍-二氫卟吩e6制劑在水中呈單分散狀態(tài)分布，表明本發(fā)明制得的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二 氫卟吩e 6制劑的粒徑均一，在水中分散良好。
[0043]對動態(tài)光散射檢測的結(jié)果如圖2所示，結(jié)果顯示，實施例1制得的脂質(zhì)體-二甲雙 胍-二氫卟吩e6制劑在水中粒徑主要集中在IlOnm左右。
[0044]紫外吸收檢測結(jié)果如圖3所示，結(jié)果顯示，實施例1制得的脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫 卟吩e6制劑在232納米處有二甲雙胍的特征吸收峰，在404nm和660nm處有二氫卟吩e6的特 征吸收峰。
[0045] 實施例3、脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的光動力活性檢測
[0046] 配制脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫撲吩e6制劑水溶液，經(jīng)661nm的激光照射，檢測單線態(tài) 氧含量，分別設立對照組:Ce6水溶液、脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6水溶液、水、脂質(zhì)體-二 氫卟吩e6水溶液、二甲雙胍水溶液。結(jié)果見圖4。
[0047]圖4結(jié)果顯示，含有光敏分子二氫卟吩e6的溶液在激光照射后皆產(chǎn)生了單線態(tài)氧， 可以作為光動力治療劑。
[0048] 實施例4、脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑注射進小鼠后在小鼠的體內(nèi)行為
[0049] 將脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑通過尾靜脈注射到小鼠體內(nèi)，在不同時間點 取小鼠血液20yL，加入細胞裂解液溶解后測熒光，根據(jù)熒光的值定量分析出脂質(zhì)體-二甲雙 胍-二氫卟吩e6在不同時間點在小鼠血液中的含量，結(jié)果如圖5顯示。
[0050] 圖5結(jié)果顯示脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑具有較長的血液循環(huán)時間。
[0051 ]將脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑通過尾靜脈注射到小鼠體內(nèi)，在小動物成像 系統(tǒng)(CRI)上進行在不同的時間點進行實時采集圖片，觀察脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6 制劑在腫瘤部位的富集量，結(jié)果見圖6和圖7。選用的激發(fā)光源是661nm，曝光時間是100ms。
[0052]圖6和圖7結(jié)果顯示隨著時間的推移，腫瘤區(qū)域脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑 的熒光信號逐漸增強，其在腫瘤部位的富集隨時間增加。24小時后將小鼠主要器官取出后 分析器官的熒光強度，發(fā)現(xiàn)腫瘤部位的熒光強度明顯高于其他主要器官，表明脂質(zhì)體-二甲 雙胍-二氫卟吩e6制劑在腫瘤部位的富集可以達到較高的水平。
[0053]實施例5、小鼠腫瘤乏氧改善的檢測
[0054] 將含有相同二甲雙胍濃度的二氫卟吩e6,二甲雙胍水溶液通過尾靜脈注射到小鼠 體內(nèi)，通過光聲成像檢測不同時間點腫瘤含氧血紅蛋白與血紅蛋白在850nm和750nm處的吸 收來檢測腫瘤內(nèi)部乏氧狀況的改善，結(jié)果見圖8和圖9。
[0055] 圖8和圖9結(jié)果顯示，相比較于注射單純的二甲雙胍溶液，注射脂質(zhì)體-二甲雙胍制 劑的小鼠腫瘤部位的光聲信號增強表明腫瘤的乏氧狀況改善明顯，脂質(zhì)體-二甲雙胍制劑 中的二甲雙胍具有緩釋性質(zhì)因而可以長時有效的改善腫瘤的乏氧狀況。
[0056] 實施例6、免疫熒光染色檢測腫瘤乏氧狀況的改善
[0057]將含有相同二甲雙胍濃度的脂質(zhì)體-二甲雙胍制劑，二甲雙胍水溶液通過尾靜脈 注射到小鼠體內(nèi)，2小時以及24小時后分別向兩組小鼠腹腔注射0.Smg/只乏氧熒光探針 Hypoxyprobe?(pimonidazoIe hydrochloride)，90分鐘后將小鼠腫瘤切下后冷凍切片染 色，結(jié)果見圖10。
[0058]圖10共聚焦顯微鏡的圖片表明，相比較于對照組，只注射單純二甲雙胍的小鼠腫 瘤切片存在明顯的乏氧區(qū)（綠色信號)表明其乏氧狀況改善并不顯著。相反的，注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑的小鼠腫瘤切片中綠色信號值明顯減少表明其乏氧區(qū)明顯減 少，腫瘤乏氧狀況有較為可觀的改善。
[0059]實施例7、腫瘤的光動力治療
[0060]將帶有乳腺癌腫瘤的小鼠分為五組，其中包括第一組對照組(沒有進行光動力治 療），第二組注射二甲雙胍和二氫卟吩e6 2小時后進行光動力治療組;第三組注射二甲雙胍 和二氫卟吩e6 24小時后進行光動力治療組;第四組注射脂質(zhì)體-二氫卟吩進行光動力治療 組;第五組注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑后進行光動力治療組;對小鼠進行相應 的治療后，測量其腫瘤的生長，結(jié)果見圖7。
[0061]結(jié)果表明，相比較對照組，第二組和第三組的腫瘤生長沒有得到抑制，第四組腫瘤 的生長得到了部分抑制，而第五組的腫瘤生長則得到了有效的抑制。表明脂質(zhì)體-二甲雙 胍-二氫卟吩e6制劑中二甲雙胍的緩釋有效改善了腫瘤的乏氧狀況從而有效提高光動力治 療效果。
[0062]實施例8、腫瘤的放射治療
[0063] 將帶有乳腺癌腫瘤的小鼠分為3組，其中包括第一組對照組(沒有進行放射治療）， 第二組只接受放射治療組，第三組注射脂質(zhì)體-二甲雙胍-二氫卟吩e6制劑后進行放射治療 組。對小鼠進行相應的治療后，測量其腫瘤的生長，結(jié)果見圖12。
[0064] 結(jié)果表明，相比較對照組，進行放射治療后小鼠腫瘤都有一定的抑制，但是由于腫 瘤乏氧的存在，第二組小鼠的治療效果受到一定的限制。第三組小鼠腫瘤的治療由于腫瘤 的乏氧狀況得到了明顯的改善，因而其治療效果得到了顯著的提升。
【主權(quán)項】
1. 一種脂質(zhì)體制劑，由脂質(zhì)體，二甲雙胍，二氫卟吩e6組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述脂質(zhì)體由二棕櫚酰磷脂酰膽 堿，膽固醇，磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇組成。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的脂質(zhì)體制劑，其特征在于，粒徑為100~160nm。4. 權(quán)利要求1-3任意一項所述脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，將二棕櫚酰磷脂酰 膽堿(DPPC)、膽固醇(CH)、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)和二氫卟吩e6溶解于三氯甲 烷溶液中，氮氣吹干，加入二甲雙胍溶液攪拌后進行脂質(zhì)體擠膜。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，所述二甲雙胍溶液由二甲 雙胍溶于磷酸鹽緩沖液中制得。6. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，所述二甲雙胍溶液中 二甲雙胍的濃度為10mg/mL。7. 根據(jù)權(quán)利要求4-6任意一項所述脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，所述二棕櫚酰 磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、膽固醇、二氫卟吩e6的摩爾比為6:0.5:4:1。8. 根據(jù)權(quán)利要求4-7任意一項所述脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，粒徑為100~ 160nm〇9. 權(quán)利要求1-3任意一項所述的脂質(zhì)體制劑在制備降低腫瘤細胞耗氧量、提高腫瘤含 氧量的藥物中的應用。10. 權(quán)利要求1-3任意一項所述的脂質(zhì)體制劑在制備腫瘤光動力治療和放療中藥物中 的應用。
【文檔編號】A61P35/00GK106075444SQ201610564739
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月18日
【發(fā)明人】劉莊, 宋雪嬌
【申請人】蘇州大學