專利名稱：微生物、微生物棉餅脫毒劑及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬微生物及其產(chǎn)品的制備。
目前在我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)已發(fā)展到一定規(guī)模。但與世界上發(fā)達(dá)國(guó)家相比，人均消費(fèi)肉、蛋、奶的水平還是較低的，因而養(yǎng)殖業(yè)今后仍然需要有一個(gè)大發(fā)展。我國(guó)發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)的瓶頸在于飼料蛋白源的缺乏，據(jù)估計(jì)我國(guó)每年生產(chǎn)混合飼料在3000萬(wàn)噸以上，需植物性蛋白飼料600多萬(wàn)噸，而我國(guó)年生產(chǎn)大豆餅不足400萬(wàn)噸，形成了200萬(wàn)噸的缺口，多少年來(lái)，許多科技工作者一直在努力尋求開(kāi)辟新的飼料蛋白來(lái)源。我國(guó)是個(gè)產(chǎn)棉大國(guó)，每年可產(chǎn)棉籽餅350多萬(wàn)噸，由于棉籽餅中粗蛋白含量約在36-42％(相當(dāng)于豆餅的80％，遠(yuǎn)高于小麥、玉米和大米的蛋白質(zhì)含量)、所以眾多的科技人員早在10多年前就將它作為潛在的飼料蛋白質(zhì)源進(jìn)行開(kāi)發(fā)，但進(jìn)展卻進(jìn)展十分緩慢。進(jìn)展不快的主要原因是棉籽餅中含有毒物質(zhì)—棉酚，它能?chē)?yán)重地?fù)p傷畜、禽的消化、生殖和視力系統(tǒng)，棉酚的清除又是十分困難的，有些科技人員盡管從技術(shù)上找到多種脫酚技術(shù)，但由于成本高昂以及脫毒指標(biāo)不穩(wěn)，或其它營(yíng)養(yǎng)成份遭到破壞等原因，因而可以說(shuō)一直到1996年我國(guó)仍未找到一種可同時(shí)做到投資少、建設(shè)快、成本低、無(wú)污染、脫毒指標(biāo)穩(wěn)定，棉籽餅中營(yíng)養(yǎng)成分不破壞，還能適應(yīng)廣大農(nóng)戶的脫毒技術(shù)。
本發(fā)明的目的是研制一種價(jià)廉、物美、脫毒效果好的脫毒劑，既不需貴重設(shè)備，也不需高溫、高壓，也不用化學(xué)藥劑或添加劑，只要有5℃以上溫度，不論在盆、缸或水泥地上，均能進(jìn)行發(fā)酵脫毒，其工藝與制作饅頭相似，脫毒時(shí)間3-5天，每公斤棉餅的脫毒率為117.3-140mg，大大低于400mg/公斤的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，脫毒后粗蛋白達(dá)到49.42％(較脫毒前升高9.86％)配成全價(jià)飼料可以喂任何畜、禽。經(jīng)對(duì)比試驗(yàn)，用微生物脫毒棉餅可代替豆餅90-94％，對(duì)禽、畜的適口性良好，養(yǎng)殖畜禽均不受影響。
本發(fā)明的內(nèi)容是一種微生物，名叫文01號(hào)，它是嗜熱性側(cè)孢霉(sporotrichum thermophile)中的一種。
文01號(hào)菌種的來(lái)源及微生物特征文01號(hào)菌種是一種腐生性很強(qiáng)的霉菌，系用Co60γ射線10萬(wàn)格瑞照射“301”菌種，經(jīng)分離培養(yǎng)而成，定名為‘文01號(hào)’。在生物學(xué)系統(tǒng)中的位置為真菌門(mén)、半知菌綱、叢梗孢目、叢梗孢科、側(cè)孢霉屬、嗜熱性側(cè)孢霉種中的一個(gè)新菌種。文01號(hào)在PDA培養(yǎng)基上菌落常呈絨毯狀、顏色為白色或淺黃色，菌絲比‘301’菌絲略短，寬度為3-10μm，有很多分枝，呈管狀，每節(jié)為一個(gè)細(xì)胞，菌絲分營(yíng)養(yǎng)菌絲和生殖菌絲兩種，在生殖菌絲上著生孢子梗，在梗上側(cè)生許多分生孢子形態(tài)各異。文01號(hào)既能用菌絲繁殖，也能用分生孢子繁殖，一般24小時(shí)繁殖一代。文01號(hào)是一種中溫型菌種，適應(yīng)性很強(qiáng)，最低要求5℃，最適溫度為25-37℃，最高40-50℃，在零下10℃和短期90℃也不會(huì)全部死亡。文01號(hào)耐濕性強(qiáng)，要求培養(yǎng)基含水量在65-75％，它是一種好氣性的真菌，需氧量較大，菌絲正常的Co2含量為0.03％，菌絲生長(zhǎng)階段不需光照，在培養(yǎng)中適于中性至堿性環(huán)境，PH值為6.7-6.9，最佳碳氮比為30-40∶1，可在冷凍或干燥的條件下保藏。
糖化菌的來(lái)源及其生物特性糖化菌與301菌種同源，系1994年用Co60γ射線輻照2441菌種后的不同選系，是高溫型菌種，能分泌糖化酶，使多糖分解成單糖，它的外部形態(tài)與301菌種近似，在瓊脂培養(yǎng)基上呈絨毯狀，顏色為黃白色，菌絲比301菌種短而弱，糖化菌的一、二、三級(jí)菌種的生產(chǎn)與文01號(hào)相同，三級(jí)菌種制成后，經(jīng)晾干粉碎后即成糖化菌菌劑。
AS.1.807菌種的來(lái)源及其生物學(xué)特性AS.1.807菌種是一種細(xì)菌，。它能產(chǎn)生蛋白酶，1994年自科學(xué)院微生物所引入，它的各級(jí)菌種配方都是微生物所提供的。
一種微生物，其特征是嗜熱性側(cè)孢霉(sporotrichum thermophi le)中的一種，名為‘文01’號(hào)，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏號(hào)為CGMCC№0339。
一種微生物棉餅脫毒劑其特征是以‘文01’號(hào)為基礎(chǔ)，加上糖化菌和AS.1.807細(xì)菌組成的復(fù)合菌劑，它的配方為(重量百分比)(1)‘文01’號(hào)菌種 50-70％(2)糖化菌 15-20％(3)AS.1.807 15-20％一種微生物棉餅脫毒劑的制造方法，包括菌種培養(yǎng)和脫毒劑的制造，其特征在于(一)‘文01’號(hào)菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程(1)一級(jí)菌種培養(yǎng)一級(jí)菌種由最原始斜面一級(jí)菌種擴(kuò)繁而來(lái)，一支斜面菌種可擴(kuò)接30～40支一級(jí)菌種，培養(yǎng)基為PDA或麥芽汁，PH值為6.7～6.9，培養(yǎng)溫度為38°-42℃，培養(yǎng)時(shí)間為72小時(shí)。
(2)二級(jí)菌種培養(yǎng)將一級(jí)菌種接種于麥粒培養(yǎng)基上，麥粒培養(yǎng)基的制作方法是先稱取麥粒5Kg，在清水中浸泡12小時(shí)，再放入鍋內(nèi)煮沸，直至麥粒無(wú)白心為止，澇出晾干，在通風(fēng)處晾至無(wú)明水，再加入碳酸鈣15克，石膏60克，將麥粒拌勻即可，麥粒用玻璃瓶分裝，PH值為6.7～6.9，一支一級(jí)菌種可接兩瓶，培養(yǎng)溫度為38～42℃，培養(yǎng)時(shí)間為3～4天。
(3)三級(jí)菌種培養(yǎng)可用二級(jí)菌種進(jìn)行擴(kuò)繁，培養(yǎng)基仍為麥粒，一般一瓶二級(jí)種可以擴(kuò)接30～40瓶，將三級(jí)菌種從瓶?jī)?nèi)掏出，晾干后粉碎即成三級(jí)菌種。
(二)糖化菌菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程糖化菌與‘文01’號(hào)菌種同源，前者系高溫型菌種，主要分泌糖化酶，其作用是將多糖分解為單糖，培養(yǎng)溫度為43～45℃，而‘文01’號(hào)系中溫型菌種，它分泌纖維素酶，其作用是分解纖維素和半纖維素，培養(yǎng)溫度為38～42℃，一、二、三級(jí)菌種的生產(chǎn)過(guò)程和‘文01’號(hào)相同。
(三)AS.1.807菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程
AS.1.807菌種是一種細(xì)菌，它能產(chǎn)生蛋白酶，它的各級(jí)菌種生產(chǎn)配方如下(1)一級(jí)菌種培養(yǎng)基牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，葡萄糖10克，瓊脂18～20克，清水1000ml，PH值為7，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)時(shí)間3～4天。
(2)二級(jí)菌種培養(yǎng)基(液體培養(yǎng))葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，碳酸鈣3-5克，清水1000ml，PH值為7。
制成液體培養(yǎng)基后，分裝于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的壓力下滅菌1.5小時(shí)，滅菌結(jié)束后，待冷至25℃，用無(wú)菌水稀釋一級(jí)菌種，一般一支一級(jí)菌種接兩瓶，每天搖瓶3-4次，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)72小時(shí)，當(dāng)液面出現(xiàn)少許白色菌絲即可。
(3)三級(jí)菌種培養(yǎng)采用固體培養(yǎng)基，曲盤(pán)大量培養(yǎng)；米糠20％，麥夫60％，豆餅10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％。
按以上比例將料備足，用水將料拌勻，在105℃下滅菌2小時(shí)，趁熱分裝于曲盤(pán)中，在恒溫室培養(yǎng)，當(dāng)料溫降至25℃時(shí)，按干料重的10％接入液體菌種，在28-32℃培養(yǎng)，每天翻料3-4次，培養(yǎng)料用消過(guò)毒的布或纖維袋復(fù)蓋，培養(yǎng)5天，當(dāng)料面長(zhǎng)出白色菌絲，料溫降至室溫即可，將培養(yǎng)料取出烘干或陰干備用。
微生物脫毒劑的制造按玉米面30％，麥夫30％，棉餅35％，紅糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三種菌合成，即‘文01’號(hào)50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.80715-20％，另加水50％。
先將紅糖溶于少量水中，再加入棉餅、玉米面和麥夫，然后將水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三層發(fā)酵，在一、二層上各撒原種2％，蓋上第三層后撒原種1％，堆成饅頭狀，頂部用手抹平，打上若干通風(fēng)孔，蓋上麻袋或布保濕，經(jīng)3-4天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味即成。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)一、投資少、成本低、用微生物脫毒劑對(duì)棉餅進(jìn)行脫毒，既不用高溫、高壓或化學(xué)藥劑，更不需貴重設(shè)備，只要室溫保持5℃以上，可在農(nóng)舍的盆、缸和水泥地上均能進(jìn)行發(fā)酵脫毒，脫毒工藝與農(nóng)村作饅頭近似，一般農(nóng)民均能掌握，每公斤棉餅脫毒費(fèi)用0.1元。
二、脫毒效果好據(jù)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)品質(zhì)量檢測(cè)中心(河南山東)二處測(cè)定，脫毒前棉餅的粗蛋白為39.62％，棉酚含量為562mg/kg，脫毒后粗蛋白升至49.48％，棉酚降至117.3-140mg/kg，棉酚含量比國(guó)家飼料標(biāo)準(zhǔn)400mg/kg低260-282.7mg/kg，完全可以飼喂各種禽、畜；粗蛋白比豆餅高6.48％，根據(jù)一年多飼喂試驗(yàn)可以代替豆餅90-94％。目前每公斤豆餅值3.3元，每公斤棉餅值1.4元，每公斤差價(jià)為1.9元。從而可以大大節(jié)約原料成本。
三、適口性好經(jīng)微生物脫毒劑脫毒后，棉餅上布滿了白色菌絲，即菌體蛋白，無(wú)任何異味，禽、畜都愛(ài)吃，經(jīng)5000只種雞，20000只肉雞，13000只蛋雞，15000只肉鴨，肉豬4000多只，肉牛537頭，蛋雞產(chǎn)蛋正常，肉雞生長(zhǎng)周期縮短5-7天，肉鴨生長(zhǎng)周期縮短8-10天，種公雞性成熟略早，種蛋育雛正常，在豬牛的飼養(yǎng)上也非常成功。
微生物棉餅脫毒劑實(shí)施例實(shí)施例一先稱取棉餅100kg，加水50kg，加棉餅脫毒劑1公斤，充分?jǐn)嚢韬?，再在干凈的水泥地上堆積，在一、二層上各撒脫毒劑0.4公斤，蓋上第三層后撒脫毒劑0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通氣孔，蓋上麻袋或草簾，經(jīng)3-5天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味，經(jīng)曬干粉碎即成脫毒棉餅。
實(shí)施例二先稱取棉餅98kg，豆餅2kg，加水50kg，加棉餅脫毒劑1公斤，充分?jǐn)嚢韬?，再在大缸中堆積，在一、二層上各撒脫毒劑0.4公斤，蓋上第三層后撒脫毒劑0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通氣孔，蓋上麻袋或草簾，經(jīng)3-5天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味，經(jīng)曬干粉碎即成脫毒棉餅。
權(quán)利要求
1.一種微生物，其特征是嗜熱性側(cè)孢霉(sporotrichum thermophile)中的一種，名為‘文01’號(hào)，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏號(hào)為CGMCC№0339。
2.一種微生物棉餅脫毒劑其特征是以‘文01’號(hào)為基礎(chǔ)，加上糖化菌和AS.1.807細(xì)菌組成的復(fù)合菌劑。
3.一種微生物棉餅脫毒劑的制造方法，包括菌種培養(yǎng)和脫毒劑的制造，其特征在于(一)‘文01’號(hào)菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程(1)一級(jí)菌種培養(yǎng)一級(jí)菌種由最原始斜面一級(jí)菌種擴(kuò)繁而來(lái)，一支斜面菌種可擴(kuò)接30～40支一級(jí)菌種，培養(yǎng)基為PDA或麥芽汁，PH值為6.7～6.9，培養(yǎng)溫度為38°-42℃，培養(yǎng)時(shí)間為72小時(shí)；(2)二級(jí)菌種培養(yǎng)將一級(jí)菌種接種于麥粒培養(yǎng)基上，麥粒培養(yǎng)基的制作方法是先稱取麥粒5Kg，在清水中浸泡12小時(shí)，再放入鍋內(nèi)煮沸，直至麥粒無(wú)白心為止，澇出晾干，在通風(fēng)處晾至無(wú)明水，再加入碳酸鈣15克，石膏60克，將麥粒拌勻即可，麥粒用玻璃瓶分裝，PH值為6.7～6.9，一支一級(jí)菌種可接兩瓶，培養(yǎng)溫度為38～42℃，培養(yǎng)時(shí)間為3～4天；(3)三級(jí)菌種培養(yǎng)可用二級(jí)菌種進(jìn)行擴(kuò)繁，培養(yǎng)基仍為麥粒，一般一瓶二級(jí)種可以擴(kuò)接30～40瓶，將三級(jí)菌種從瓶?jī)?nèi)掏出，晾干后粉碎即成三級(jí)菌種；(二)糖化菌菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程糖化菌與‘文01’號(hào)菌種同源，前者系高溫型菌種，主要分泌糖化酶，其作用是將多糖分解為單糖，培養(yǎng)溫度為43～45℃，而‘文01’號(hào)系中溫型菌種，它分泌纖維素酶，其作用是分解纖維素和半纖維素，培養(yǎng)溫度為38～42℃，一、二、三級(jí)菌種的生產(chǎn)過(guò)程和‘文01’號(hào)相同；(三)AS.1.807菌種生產(chǎn)的工藝過(guò)程AS.1.807菌種是一種細(xì)菌，它能產(chǎn)生蛋白酶，它的各級(jí)菌種生產(chǎn)配方如下(1)一級(jí)菌種培養(yǎng)基牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，葡萄糖10克，瓊脂18～20克，清水1000ml，PH值為7，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)時(shí)間3～4天；(2)二級(jí)菌種培養(yǎng)基(液體培養(yǎng))葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，碳酸鈣3-5克，清水1000ml，PH值為7；制成液體培養(yǎng)基后，分裝于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的壓力下滅菌1.5小時(shí)，滅菌結(jié)束后，待冷至25℃，用無(wú)菌水稀釋一級(jí)菌種，一般一支一級(jí)菌種接兩瓶，每天搖瓶3-4次，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)72小時(shí)，當(dāng)液面出現(xiàn)少許白色菌絲即可；(3)三級(jí)菌種培養(yǎng)采用固體培養(yǎng)基，曲盤(pán)大量培養(yǎng)；米糠20％，麥夫60％，豆餅10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％；按以上比例將料備足，用水將料拌勻，在105℃下滅菌2小時(shí)，趁熱分裝于曲盤(pán)中，在恒溫室培養(yǎng)，當(dāng)料溫降至25℃時(shí)，按干料重的10％接入液體菌種，在28-32℃培養(yǎng)，每天翻料3-4次，培養(yǎng)料用消過(guò)毒的布或纖維袋復(fù)蓋，培養(yǎng)5天，當(dāng)料面長(zhǎng)出白色菌絲，料溫降至室溫即可，將培養(yǎng)料取出烘干或陰干備用；(四)微生物脫毒劑的制造按玉米面30％，麥夫30％，棉餅35％，紅糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三種菌合成，即‘文01’號(hào)50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.807 15-20％，另加水50％；先將紅糖溶于少量水中，再加入棉餅、玉米面和麥夫，然后將水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三層發(fā)酵，在一、二層上各撒原種2％，蓋上第三層后撒原種1％，堆成饅頭狀，頂部用手抹平，打上若干通風(fēng)孔，蓋上麻袋或布保濕，經(jīng)3-4天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味即成。
全文摘要
本發(fā)明屬微生物及其產(chǎn)品的制備。它是以“文01”號(hào)為基礎(chǔ),再加上糖化菌和細(xì)菌AS.1.807組成的復(fù)合菌劑,簡(jiǎn)稱微生物棉餅脫毒劑,脫毒工藝與作饅頭相似,脫毒前每公斤棉餅含棉酚562ppm,粗蛋白為39.62%,脫毒后每公斤棉餅棉酚殘留量為140ppm,比國(guó)家飼料標(biāo)準(zhǔn)400ppm低260ppm,可以代替90%以上的豆餅喂任何禽、畜;若全面推廣微生物脫毒棉餅將立即緩解我國(guó)飼料蛋白的緊張狀態(tài)。
文檔編號(hào)A23J1/14GK1189536SQ9810082
公開(kāi)日1998年8月5日 申請(qǐng)日期1998年2月18日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月18日
發(fā)明者何策熙, 肖文琳, 何琳 申請(qǐng)人:何策熙