應(yīng)終點(diǎn)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾，濾餅用水洗，濾液加入500ml水，加入150ml乙酸乙酯萃取。分層，用質(zhì)量百分濃度5%的碳酸氫鈉水溶液洗滌，水洗，飽和食鹽水洗，接著用無水硫酸鈉干燥過夜。
[0025]過濾，少量乙酸乙酯洗滌無水硫酸鈉。減壓蒸餾掉二分之一的溶劑，加石油醚至百色渾濁后靜置結(jié)晶過夜。
[0026]第二天，不能結(jié)晶出，再次減壓蒸餾至干，即有固體析出，加乙醚攪拌均勻。放置2小時(shí)后，過濾，濾餅用乙醚洗滌，濾干。于40 °C烘箱中烘干。得到20克Z-CYS (BZL) ONP。得率 74%0
[0027]MP:91.6-93.3°C，旋光:_43.2 (C=I DMF)，HPLC:97.2%。經(jīng)過核磁共振分析符合產(chǎn)物特征。相關(guān)譜圖見圖4、5、6、7。
[0028]Z-CYS (BZL) -OH 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1:
5克H-CYS (BZL)-OH溶解在I N NAOH水溶液中，用冰鹽浴降溫。于O °C以下慢慢滴加Z-CL,并且用I N NAOH水溶液維持反應(yīng)液pH值9。TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系跟蹤反應(yīng)情況，TLC觀察分析幾乎沒有副產(chǎn)物生成。40分鐘反應(yīng)結(jié)束。
[0029]實(shí)驗(yàn)2:
5克H-CYS (BZL)-OH溶解在I N NAOH水溶液中，用冰浴降溫。于10°C以下慢慢滴加Z-CL,并且用I N NAOH水溶液維持反應(yīng)液pH值9。TLC90:8:2 (三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系跟蹤反應(yīng)情況，TLC觀察分析有副產(chǎn)物生成。30分鐘反應(yīng)結(jié)束。
[0030]實(shí)驗(yàn)3:
5克H-CYS (BZL) -OH溶解在I N NAOH水溶液中，于20 °C以下慢慢滴加Z-CL，并且用IN NAOH水溶液維持反應(yīng)液pH值9。TLC 90:8:2 (三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系跟蹤反應(yīng)情況，TLC觀察分析有較多副產(chǎn)物生成。30分鐘反應(yīng)結(jié)束
通過以上三種反應(yīng)溫度的實(shí)驗(yàn)表面實(shí)驗(yàn)I的反應(yīng)溫度都優(yōu)于其它兩種反應(yīng)溫度。
[0031]后處理的實(shí)驗(yàn)。
[0032]實(shí)驗(yàn)4:
用6 N鹽酸酸化反應(yīng)液pH值3，乙酸乙酯萃取，TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系分析表明可以將雜質(zhì)一并萃取到有機(jī)相中。
[0033]實(shí)驗(yàn)5:
用6 N鹽酸酸化反應(yīng)液pH值3，乙醚萃取，TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系分析表明可以將少量一并雜質(zhì)萃取到有機(jī)相中。
[0034]實(shí)驗(yàn)6 ；
用6 N鹽酸酸化反應(yīng)液pH值5，乙酸乙酯萃取，TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系分析表面可以將少量雜質(zhì)一并萃取到有機(jī)相中。
[0035]實(shí)驗(yàn)7:
用6 N鹽酸酸化反應(yīng)液pH值3，乙醚萃取，TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系分析表面只有產(chǎn)物被萃取到有機(jī)相中。
[0036]綜合上述該反應(yīng)宜采用實(shí)驗(yàn)I的反應(yīng)方法，用實(shí)驗(yàn)7的后處理方法最佳。
[0037]Z-CYS (BZL) -ONP 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)8:
20ml THF加入50 ml的燒瓶中，磁力攪拌下加入Z-CYS(BZL)-0H，加入對硝基苯酚，冰鹽浴降溫，于O°C下，滴加DCC和THF的混合溶液，溶液呈白色渾濁狀態(tài)。TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系跟蹤反應(yīng)，TLC表面有少量的副產(chǎn)物生成。反應(yīng)結(jié)束后，過濾。濾餅用水洗，濾液加入50ml水，加入15 ml乙酸乙酯萃取，分層。經(jīng)質(zhì)量百分濃度5%碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，飽和食鹽水洗，用無水硫酸鈉干燥。
[0038]實(shí)驗(yàn)9:
20ml THF加入50 ml的燒瓶中，磁力攪拌下加入Z-CYS (BZL)-0H，加入對硝基苯酚，于20°C下，滴加DCC和THF的混合溶液，溶液呈白色渾濁狀態(tài)。TLC 90:8:2(三氯甲烷:甲醇:冰醋酸)體系跟蹤反應(yīng)，TLC表面有大量的副產(chǎn)物生成。反應(yīng)結(jié)束后，過濾。濾餅用水洗，濾液加入50ml水，加入15ml乙酸乙酯萃取，分層。經(jīng)質(zhì)量百分濃度5%碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，飽和食鹽水洗，用無水硫酸鈉干燥。
[0039]通過上述實(shí)驗(yàn)可知實(shí)驗(yàn)8的溫度更加適合該反應(yīng)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種醫(yī)藥中間體N A -Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法，其特征是包括以下步驟: 步驟一，制備Z-CYS (BZL) -OH:將H-CYS (BZL) -OH溶解在氫氧化鈉水溶液中，用冰鹽浴降溫至0°C下，滴加Z-CL，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)抽濾將液相用石油醚萃取，再加乙酸乙酯，用鹽酸酸化分層，萃取，再洗滌、干燥，蒸餾至無結(jié)晶析出，將結(jié)晶溶于碳酸鈉水溶液中，加入乙醚或乙酸乙酯，再加入鹽酸酸化，再洗滌，干燥，蒸餾得到Z-CYS (BZL) -OH ; 步驟二，制備Z-CYS (BZL) ONP:磁力攪拌下在THF加入Z-CYS (BZL) -0H,加入對硝基苯酚；用冰鹽浴降溫后于0°C下，加入DCC和THF混合溶液，反應(yīng)結(jié)束后，過濾水洗，再加入乙酸乙酯萃?。环謱?，用碳酸氫鈉水溶液洗滌，水洗，飽和食鹽水洗，接著用無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，乙酸乙酯洗滌無水硫酸鈉，減壓蒸餾，加石油醚至百色渾濁后靜置結(jié)晶過夜，無結(jié)晶析出時(shí)過濾，烘干得到Z-CYS (BZL) ONP。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)藥中間體NA-Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法，其特征是所述步驟一反應(yīng)需要調(diào)節(jié)pH值，反應(yīng)時(shí)pH為9，反應(yīng)結(jié)束時(shí)，pH為7，再調(diào)節(jié)到pH為9。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)藥中間體NA-Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法，其特征是所述步驟一中，鹽酸酸化條件是:6 N鹽酸酸化pH值3。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)藥中間體NA-Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法，其特征是所述所述碳酸鈉水溶液和碳酸氫鈉水溶液的質(zhì)量百分濃度為5%。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)藥中間體NA-Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法，其特征是所述步驟一中，將結(jié)晶溶于碳酸鈉水溶液后加入乙醚。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種半胱氨酸中間體的制備方法，特別涉及NΑ-Z-S-芐基-L-半胱氨酸-4-硝基苯酯的合成方法。主要結(jié)合解決現(xiàn)有技術(shù)沒有一種可用于工業(yè)合成該化合物的有效方法。本發(fā)明合成方法包括以下步驟：步驟一，將H-CYS(BZL)-OH溶解在氫氧化鈉水溶液中，用冰鹽浴降溫至0℃下，滴加Z-CL，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)后處理得到Z-CYS(BZL)-OH；步驟二，磁力攪拌下在THF加入Z-CYS(BZL)-OH，加入對硝基苯酚；用冰鹽浴降溫后于0℃下，加入DCC和THF混合溶液，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)后處理得到最終產(chǎn)品。
【IPC分類】C07C319/20, C07C323/58
【公開號】CN105001131
【申請?zhí)枴緾N201510460252
【發(fā)明人】徐紅巖, 顏行, 孫雪峰
【申請人】吉爾生化（上海）有限公司, 上海吉爾多肽有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年7月31日