專(zhuān)利名稱(chēng)：：一類(lèi)生物堿及其制備方法與在抗腫瘤或抗菌上的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及有機(jī)化合物的
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一類(lèi)生物堿及其制備方法與在抗腫瘤或抗菌上的應(yīng)用。技術(shù)背景Mansonone類(lèi)化合物最早是從西非梧桐科植物M"n^mh"/rz^/T^樹(shù)干的心材中分離得到而得名，此類(lèi)物質(zhì)大多具有鄰醌或鄰醌前體的結(jié)構(gòu)，它作為植物抗毒素在被病菌感染的枝干中富集。已有大量研究表明Mansonone類(lèi)化合物具有抗微生物活性、抗腫瘤活性、抗氧化活性及抗HIV活性。根據(jù)電子等排原理，當(dāng)Mansonone類(lèi)化合物的羰基被亞胺基取代時(shí)，所得到的新化合物應(yīng)該與原化合物有相似的性質(zhì)和活性，而這類(lèi)新化合物的活性還未被研究過(guò)。生物堿是指存在于生物體內(nèi)的堿性含氮化合物，大多數(shù)含有含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)，有堿性、旋光性和顯著的生理活性，也是天然產(chǎn)物中一類(lèi)非常重要的化合物。已知的生物堿的生理活性主要具有以下幾方面l.具有抗腫瘤活性；2.對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)具有生理活性；3.對(duì)于心血管系統(tǒng)具有生理活性；4.具有抗菌活性；5.具有抗瘧活性。目前臨床應(yīng)用的很多藥物有很大一部分是來(lái)自于生物堿或以天然生物堿為先導(dǎo)化合物經(jīng)結(jié)構(gòu)改造而來(lái)。因此結(jié)構(gòu)中將O改為N是具有重要意義的，往往會(huì)使化合物活性產(chǎn)生很大改變或產(chǎn)生新的藥理活性。因此，可以預(yù)測(cè)以MansononeE、F為先導(dǎo)化合物設(shè)計(jì)并合成的系列新型生物堿可能會(huì)具有較好的抗菌及抗腫瘤活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一類(lèi)具有抗菌活性及抗腫瘤活性的，由Mansonone類(lèi)似物為原料合成的新型生物堿。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述生物堿的制備方法。應(yīng)用本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述生物堿在抗菌和抗腫瘤方面的1。本發(fā)明的上述目的是通過(guò)以下技術(shù)方案解決的一、本發(fā)明的生物堿，用下述通式(I)表示x一ocI)其中，R代表H、鹵素、CL4的烷基或硝基;X代表-C(CH3戶(hù)CH-或-CH2-CH2-;o<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中A為H、-OH、-^^8>^2(硫脲基)、d—4的烷氧基、d4的烷?；趸?-7元碳環(huán)?；趸籖2為H、Cw的烷基、6-7元碳環(huán)，所述的碳環(huán)基或雜環(huán)基可被羥基、鹵素、氨基和Q—3的烷基取代；R3為H、d-4的烷基、羥基、鹵素或氨基。優(yōu)選的本發(fā)明化合物是其中，R為H、甲基、Cl、Br或硝基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>，其中Ri為—OH、-NHCSNH2(硫脲基)、甲氧基、叔丁氧基、乙酰氧基或苯甲酰氧基；R2為H、甲基、乙基、苯基或芐基；R3為H或羥基。二、本發(fā)明的生物堿的制備方法本發(fā)明的生物堿是通過(guò)Mansonone類(lèi)化合物與氨或胺在適當(dāng)?shù)娜軇┘胺磻?yīng)條件下反應(yīng)合成而得，針對(duì)不同結(jié)構(gòu)的原料，其合成方法也有所不同，具體如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(1)當(dāng)Y為生物堿的制備方法如下O<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>時(shí)，具有通式(I)結(jié)構(gòu)的在有機(jī)溶劑中將式(II)化合物與RNH2反應(yīng)，得到化合物nia和nib，反應(yīng)溫度為-2010(TC。其中，R代表H、鹵素、Cw的烷基或硝基；X代表-C(CH3戶(hù)CH-或-012-012-;R!為H、-OH、-^^5朋2(硫脲基)、4的烷氧基、Cw的烷?；趸?、6-7元碳環(huán)酰基氧基。根據(jù)這一合成方法，可合成化合物，如表1所示(1Z)-l-(2，3-二氫-7氧代苯并[c/e]苯并吡喃-8-(7H)-亞基)硫代氨基脲、(7Z)-2，3-二氫-7-羥胺基苯并[^]苯并吡喃-8(7H)-酮、(8Z)-2,3-二氫-8-羥亞胺基苯并[刻苯并吡喃-7(8H)-酮、8(Z)-3，9二甲基-8-羥亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7(8H)-酮、(8Z)-2,3-二氫-8-甲氧基亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7(8H)-酮和(8Z)-2,3-二氫-8-乙酰氧基亞胺基苯并[刮苯并吡喃-7(8H)-酮。(2)當(dāng)Y為I時(shí)，具有通式(I)結(jié)構(gòu)的生物堿的制備方法如下(II)(IV)在有機(jī)溶劑中將式(II)化合物與R2CH2NH2反應(yīng)，得到化合物(IV)，反應(yīng)溫度為-20100。C。其中，R代表H、鹵素、C"的烷基或硝基；X代表-C(CH3戶(hù)CH-或-CH2-CH2-;R2為H、Cw的垸基、6-7元碳環(huán)，所述的碳環(huán)基可被羥基、鹵素、氨基和Cw的烷基取代。具有aCH2的胺與醌的合成反應(yīng)不是簡(jiǎn)單的脫水縮合，而是經(jīng)過(guò)了雙鍵重排、親核加成以及氧化等復(fù)雜過(guò)程，這一合成方法是文獻(xiàn)未見(jiàn)報(bào)道的。具有。CH2的胺與醌的反應(yīng)機(jī)理如下根據(jù)這一合成方法，可合成化合物。如表l所示9-苯基-4，5-二氫-6，10-二氧-8-氮雜-環(huán)戊[fl]非那烯和9-甲基-4，5-二氫-6,10-二氧-8-氮雜-環(huán)戊M非那烯。x-o(n)(vi)在有機(jī)溶劑中將式(II)化合物與NH2CH2CH2NH2反應(yīng)得到化合物(V)，反應(yīng)溫度為-2010(TC。在有機(jī)溶劑中將式(II)化合物與鄰苯二胺及取代鄰苯二胺反應(yīng)，得到化合物(VD，反應(yīng)溫度為-20勤。C。其中，R代表H、鹵素、Cw的垸基或硝基；X代表-C(CH3戶(hù)CH-或-CH2-CH2-;R3為H、Cw的烷基、羥基、鹵素或氨基。醌在與二胺的反應(yīng)中，無(wú)法得到單亞胺產(chǎn)物，從產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)可以看出，形成雙亞胺產(chǎn)物實(shí)際是一具有大共軛體系的化合物，結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定。對(duì)于化合物V，形成雙亞胺產(chǎn)物后，還需經(jīng)過(guò)一步氧化，才可以得到具有大共軛體系的產(chǎn)物，這一過(guò)程同樣也是熱力學(xué)主導(dǎo)的產(chǎn)物占優(yōu)勢(shì)。根據(jù)這一合成方法，可合成化合物如表1所示4,5-二氫異苯并吡喃[8，1-W]吩嗪、4,5-二氫異苯并吡喃[8，1:^]喹喔啉、4，5-二氫-7-異丙基異苯并吡喃[8，1^]喹喔啉、4,5-二氫-7-硝基異苯并吡喃[8，1^]喹喔啉、4，5-二氫-7-溴異苯并吡喃[8,l/g]喹喔啉、4，5-二氫-7-氯異苯并吡喃[8,1^]喹喔啉、4,5-二氫-9-羥基異苯并吡喃[8，l-"W吩嗪、4,7-二甲基異苯并吡喃[8，1-W]吩嗪、4，7-二甲基異苯并吡喃[8，1^]喹喔啉和4，7-二甲基-9-羥基異苯并吡喃[8，1-i]吩嗪。表l不同合成方法所得化合物的結(jié)構(gòu)及名稱(chēng)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>酮本發(fā)明的制備方法中所用的胺為伯胺和鄰二胺伯胺為胺基硫脲、鹽酸羥胺、芐胺或乙胺等；鄰二胺為鄰苯二胺、乙二胺或2,3-二胺基苯酚等。本發(fā)明的制備方法中，所述的有機(jī)溶劑是指能溶解反應(yīng)物且不影響胺與鄰醌反應(yīng)的溶劑，可以是醇類(lèi)、鹵代烴類(lèi)、腈類(lèi)、醚類(lèi)、芳烴類(lèi)、DMF、DMSO中一種或幾種的混合物。優(yōu)選為醇類(lèi)，其中以甲醇和乙醇效果最好。本發(fā)明的制備方法中，反應(yīng)溫度優(yōu)選535X:，最佳是室溫反應(yīng)。對(duì)本發(fā)明的生物堿還可采用一些常規(guī)的方法如濃縮、干燥和收集等。如在減壓條件下濃縮、在真空下干燥等。這些技術(shù)都是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。對(duì)本發(fā)明的生物堿進(jìn)行抗菌活性測(cè)試，結(jié)果發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的新型生物堿對(duì)耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)和革蘭氏陽(yáng)性菌具有顯著的抑制活性，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞毒活性。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果l.本發(fā)明的生物堿具有較好的抗菌和抗腫瘤活性；2.本發(fā)明的生物堿的制備方法中，具有aCH2的胺與醌的合成方法雖然收率不高，但步驟簡(jiǎn)單，而且現(xiàn)有技術(shù)中，在正常情況下是難以通過(guò)簡(jiǎn)單的方法構(gòu)建如此復(fù)雜的雜環(huán)體系的，因此，本發(fā)明的制備方法對(duì)于構(gòu)建具有復(fù)雜環(huán)系的生物堿具有重要意義。具體實(shí)施方式本實(shí)施例中提到的原料WJ-lWJ-6可參考文獻(xiàn)(Shi-LiangHuang.SyntheticCommunications.2006，36(18),2667-2684)進(jìn)行合成。WJ-1WJ-2WJ-3WJ-4WJ-5WJ-6實(shí)施例14,5-二氫異苯并吡喃[8，l-"W吩嗪的合成向50mL圓底燒瓶中加入200mg(lmmol)WJ-l，220mg(2mmo1)鄰苯二胺，15mL甲醇。室溫?cái)嚢?，大量固體不溶，得黑紅色濁液。補(bǔ)加5mL甲醇，仍不能全溶。反應(yīng)18h后，體系變?yōu)槌壬珴嵋?，壁上附著黃色固體。點(diǎn)板，無(wú)原料剩余。過(guò)濾，用甲醇洗滌濾出物，得淺黃色粉末狀固體202.1mg，產(chǎn)率為67.8%。iHNMR(300MHz,CDC13，5，ppm)S3.34(2H，t，/=5.3Hz)，4.56(2H，t，/=5.3Hz)，7.34(1H，s)，7.54(1H,d,/=7.5Hz)，7.79(3H，m)，8.20(1H，d,/=7.8)，8.30(1H，d,/=8.4)，9.25(1H,d,8.0).ESI-MSm/z273[M+1]+實(shí)施例2化合物4,5-二氫異苯并吡喃[8，1-/5]喹喔啉的合成向50圓底燒瓶中加入250mg(1.25mmol)WJ-l，225.3mg(3.75mmo1)乙二胺，30mL甲醇。室溫?cái)嚢鑜h，點(diǎn)板，反應(yīng)完全。濃縮后過(guò)硅膠柱純化，得白色略帶膚色粉末200mg，收率為72.1%。iHNMR(300MHz，CDC13,S，ppm)S3.36(2H，t,/=5.3Hz)，4.54(2H，t，J:5.3Hz)，7.35(1H，s),7.52(1H，d，J:7.3Hz)，7.74(1H,dd，7=7.8Hz)，8.78(2H，d,/:15.5Hz),9.07(1H，d，J=8.4Hz).ESI-MS:m/z223[M+1]+實(shí)施例37-異丙基-4,5-二氫異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉的合成除原料改為WJ-3和乙二胺外，其余步驟與實(shí)施例2的合成方法相同，得到產(chǎn)物7-異丙基-4,5-二氫異苯并吡喃[8，1-/g]喹喔啉。iHNMR(300MHz,CDC13，S,ppm)S1.20(6H，t,J=8)，2.12(3H，s)，3.42(1H，m),6.79(lH,s)，7.25(1H，d，/=6.8Hz)，7.56(1H，t，J^7.6Hz)，8.75(1H，d,J-7.0Hz)，8.79(1H,d/=10Hz)，8.81(1H，d，J^10Hz).ESI-MS:265[M+l]+實(shí)施例47-硝基-4，5-二氫異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉的合成除原料改為WJ-4和乙二胺外，其余步驟與實(shí)施例2的合成方法相同，得到產(chǎn)物7-硝基-4，5-二氫異苯并吡喃[8,1^]喹喔啉。iHNMR(300MHz，d6-DMSO，S，ppm)S3.31(2H，t,/=6Hz)，4.75(2H，t,/=6Hz)，7.70(1H,d，/=7.5Hz)，7.81(1H，d，J:7.5Hz)，7.88(1H，m).8.85(1H，d，/=8,5Hz)，9.10(1H,d,/=8.5Hz).ESI-MS:268[M+l]+實(shí)施例57-溴-4，5-二氫異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉的合成除原料改為WJ-5和乙二胺外，其余步驟與實(shí)施例2的合成方法相同，得到產(chǎn)物7-溴-4，5-二氫異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉。iHNMR(300MHz，d6-DMSO，5，ppm)S3.26(2H，t，/=6Hz),4.68(2H，t，/=6Hz)，7.63(1H，d，/=7.2Hz),7.68(1H，d,/=7.2Hz)，7.75(1H，m).8.71(m，d，/=8Hz)，8.85(1H，d，/=8Hz).ESI-MS:301[M+l]+實(shí)施例67-氯-4，5-二氫異苯并吡喃[8，1-^]喹喔啉的合成除原料改為WJ-6和乙二胺外，其余步驟與實(shí)施例2的合成方法相同，得到產(chǎn)物7-氯-4，5-二氫異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉。iHNMR(300MHz，d6-DMSO，S,ppm)S3.35(2H，t，/=6Hz)，4.70(2H,t,J:6Hz),7.68(1H，d，J=7.8Hz),7.71(1H，d，/=7.8Hz)，7.81(1H，m).8.80(1H,d,/=8.5Hz),9.01(1H,d，/=8.5Hz).ESI曙MS:257[M+l]+實(shí)施例7化合物4，5-二氫-9-羥基異苯并吡喃[8,l-i]吩嗪合成向50mL圓底燒瓶中加入lOOmg(0.5mmol)WJ-1，15mL甲醇，得橙色濁液。加入186.21mg(1.5mmol)2，3—二氨基苯酚，濁液變?yōu)辄S褐色。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，體系逐漸變?yōu)辄S色，并有固體析出。反應(yīng)12h后析出大量黃色固體，點(diǎn)板，無(wú)原料剩余。抽濾，用甲醇洗滌，干燥后得深黃色固體63mg，產(chǎn)率為43.8%。iHNMR(300MHz,CDC13，S，ppm)S3.32(2H，t，/=5.3Hz)，4.54(2H，t，J:5.3Hz)，7.22(1H，s),7.52(1H，d，/=6.3Hz)，7.72(2H，m)，7.76(1H，d，《/=8.3Hz)，8.13(1H，s)，9.20(1H，d，J:7.7Hz).ESI-MS:289[M+1]+實(shí)施例8化合物(lZ)-l-(2,3-二氫-7氧代苯并[&]苯并吡喃-8-(7H)-亞基)硫代氨基脲的合成向50rnL圓底燒瓶中加入lOOmg(0.5mmol)WJ-1，136.7mg(1.5mmol)硫代氨基脲，15mL甲醇，得橙紅色濁液，原料不全溶。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4h，濁液顏色加深，點(diǎn)板有原料剩余。繼續(xù)反應(yīng)2.5h，有大量不溶物生成，點(diǎn)板仍有原料剩余。繼續(xù)反應(yīng)18h，停止反應(yīng)。抽濾，用甲醇洗滌，得棕褐色粉末130mg。收率95%.iHNMR(300MHz，d6-DMSO，S,ppm)53.05(2H,t,/=5.3Hz)，4.27(2H,t，〉5,4Hz),6.10(1H，s)，7.51(1H，t，/=6.9Hz)，7.62(1H，d，</=6.2Hz)，8.01(IH,d，/=7.45Hz).EI-MS:274[M+1]+實(shí)施例9化合物(7Z)-2，3-二氫-7-羥胺基苯并[剩苯并吡喃-8(7H)-酮和(8Z)-2,3-二氫-8-羥亞胺基苯并[刮苯并吡喃-7(8H)-酮的合成向50mL的圓底燒瓶中加入100mg(0.5mmo1)WJ-1,15mL甲醇，得橙紅色濁液。加入104mg(1.5mmol)鹽酸羥胺后，固體逐漸溶解，顏色變暗至紅褐色。室溫?cái)嚢?TLC監(jiān)控反應(yīng)至基本無(wú)原料剩余。濃縮，用CHCl3/NaHC03溶液提取。以氯仿甲醇=45:1為洗脫劑過(guò)常壓柱分得土黃色固體(HW-32-1)40mg，收率37.2%。黃色固體(HW-32-l)50mg，收率46.5%(7Z)-2，3-二氫-7-羥胺基苯并[&]苯并吡喃-8(7H)-酮。iHNMR(300MHz,CDC13，5，ppm)S3.15(2H,t，/=5,2Hz)，4.53(2H:t，/=5.8Hz)，6.03(1H，s)，7.29(1H,d，/=7.4Hz)，7.52(1H，dd，/=7.6,7.8Hz)，8.19(1H，d,/=7.9Hz).EI-MS:215[M]+(8Z)-2，3-二氫-8-羥亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7,-酮:JHNMR(300MHz，d6-DMSO，S,ppm)53.04(2H，t,/=5.3Hz)，4.30(2H，t，J-5.3Hz),6.37(1H，s)，7.51(1H,t，J=7.4Hz)，7.58(1H,d，J=7.0Hz)，7.89(1H,d,/=7.1Hz).EI-MS:215岡+實(shí)施例10化合物9-苯基-4，5-二氫-6，10-二氧-8-氮雜-環(huán)戊M非那烯的合成向50mL圓底燒瓶中加入100mg(0.5mmol)WJ-l，15mL甲醇，醌不全溶，得橙紅色濁液。加入O.llmL(lmmol)芐胺，體系立即變未棕褐色，且逐漸透明，顏色加深。65"C攪拌反應(yīng)2.5h，溶液顏色變?yōu)闇\棕褐色，點(diǎn)板仍有少量原料剩余。繼續(xù)反應(yīng)lh，顏色變淺后又逐漸加深，有不溶物析出，點(diǎn)板，基本無(wú)原料剩余。抽濾，甲醇洗滌，得淺棕灰色粉末19mg，另將母液濃縮后，過(guò)柱純化得淺黃色粉末50mg.產(chǎn)率為34.7%。iHNMR(500MHz，CDC13，S，ppm)S3.28(2H，t，/=5.7Hz)，4.45(2H，t，J:5.7Hz)，7.23(1H,d，/=7.0Hz)，7.31(IH，s)，7.53(3H,m)，7.57(IH，d,風(fēng)lHz)，8.12(1H,d，J=8.3Hz)，8.31(2H，m).ESI-MS:288[M+1]+實(shí)施例11化合物9-甲基-4，5-二氫-6，10-二氧-8-氮雜-環(huán)戊M非那烯的合成在50圓底燒瓶中加入100mg(0.5mmol)WJ-l，15甲醇，得橙紅色濁液。加入200^L(lmmol)乙胺醇溶液后，醌迅速溶解，體系由橙紅色濁液變?yōu)榧t褐色清液。TLC監(jiān)控反應(yīng)至基本無(wú)原料剩余。濃縮。以氯仿甲醇=50:1為洗脫劑，過(guò)柱純化得微紅色油狀物12mg，收率10.7%。'HNMR(500MHz，CDC13,S，ppm)52.72(3H，s),3.26(2H，t,/=5.7Hz)，4.42(2H，t，/=5.7Hz)，7.20(1H，s)，7.20(1H，d，/=7.0Hz)，752(1H，dd，/=8.3，8.2Hz)，7.99(1H，d，/=8.3Hz).EI-MS:225網(wǎng)+實(shí)施例12化合物4,7-二甲基異苯并吡喃[8，l-i]吩嗪的合成在50圓底燒瓶中加入66mg(0.292mmo1)WJ-2，以15ml甲醇溶解后，加入63.1mg(0.6mmol)鄰苯二胺，室溫?cái)嚢瑁w系逐漸變渾，TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)24h仍未完全，補(bǔ)加鄰苯二胺50mg(0.462mmo1)，繼續(xù)攪拌，回流反應(yīng)40h后基本結(jié)束，抽濾，甲醇洗滌干燥，得橙紅色固體50mg。收率57.4%。iHNMR(300MHz，CDC13，5，ppm)S2.03(3H，s)，2.65(3H，s)，6.89(lH,s)，7.30(1H，d，J:7.4Hz),7.72(3H,m)，8.22(2H，m),9.05(1H，d，J=7.6Hz).ESI-MS:299[M+1]+實(shí)施例13化合物4，7-二甲基異苯并吡喃[8，1-/^]喹喔啉的合成向50rnL圓底燒瓶中加入85mg(0.367mmol)WJ-2,15rnL甲醇，超聲溶解得紫色溶液。加入67.74mg(1.127mmo1)乙二胺后溶液泛紅，室溫下攪拌反應(yīng)有固體析出。移至4(TC水浴攪拌1.5h，體系完全變?yōu)榧t褐色，點(diǎn)板已無(wú)原料剩余。濃縮，以氯仿甲醇=35:1洗脫，過(guò)柱純化，得淡黃色固體13mg。收率14.3%。iHNMR(300MHz，CDC13,S，ppm)S2.02(3H，s)，2.59(3H,s)，6.89(lH,s)，7.21(1H，d，J-6.8Hz)，7.61(1H，t,J二7.6Hz)，8.70(1H，d，/=7.0Hz)，8.81(1H，dJ=10Hz)，8.83(1H，d,/=10Hz).ESI-MS:249[M+l]+實(shí)施例14化合物4，7-二甲基-9-羥基異苯并吡喃[8，l-i]吩嗪的合成向50mL圓底燒瓶中加入80mg(0.354mmol)WJ-2，15rnL甲醇，186.21mg(1.5mmol)2，3—二氨基苯酚。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，有黑色固體析出。反應(yīng)16.5h后點(diǎn)板，仍有原料剩余。轉(zhuǎn)置4(TC水浴加熱，反應(yīng)19h后點(diǎn)板，已完全反應(yīng)，體系呈紅褐色。抽濾，用大量甲醇洗滌，干燥后得咖啡色固體22mg，產(chǎn)率為19.8%。iHNMR(300MHz，CDC13，5，ppm)S2.05(3H，s),2.66(3H,s)，6.92(1H，s)，7.18(1H，d,^6.0Hz)，7.73(1H，d,/=6.7Hz)，7.71(3H，m)，8.12(1H，s)，8.97(IH,d,/:7.7Hz).ESI-MS:315[M+l]+實(shí)施例15化合物8(Z)-3，9二甲基-8-羥亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7(8印-酮的合成向50圓底燒瓶中加入100mg(0.442mmo1)WJ-2，92.12mg(1.326mmo1)鹽酸羥胺，以15甲醇溶解，體系很快變?yōu)樽霞t色。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4h，有固體析出，點(diǎn)板仍有原料剩余，補(bǔ)加鹽酸羥胺30mg(0.432mmo1)。繼續(xù)反應(yīng)3h后點(diǎn)板，已完全反應(yīng)。抽濾，用甲醇洗滌，紅外干燥后的棕紅色固體26mg，收率25.5%。1HNMR(300MHz,CDC13,5，ppm)51.98(3H，s)，2.09(3H，s)，7.04(1H,s)，7.32(1H，d，/=6.6Hz)，7.58(1H,t，/=7.4Hz)，8.21(1H，d，/=7.8Hz).EI-MS:241[M]+實(shí)施例16化合物(8Z)-2,3-二氫-8-甲氧基亞胺基苯并[刺苯并吡喃-7(8H)-酮的合成向5mL圓底燒瓶中加入21.511^(0.111111101)化合物(82)-2，3-二氫-8-羥亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7(8H)-酮，2mlTHF，冷至5'C加入硫酸二甲酯63mg(0.5mmol)和含20mg(0.5mmo1)NaOH的水溶液100ul，5°C下反應(yīng)1小時(shí)，常溫下反應(yīng)2小時(shí)，濃縮，氯仿提取，水洗，柱層分離純化，得到黃色固體llmg。iHNMR(300MHz,d6-DMSO，S，ppm)S3.10(2H，t，7=5.5Hz)，3.42(3H，s),4.26(2H,t，J=5.5Hz),6.23(1H，s)，7.62(1H，t，7=7.4Hz),7.47(1H，d,/=7.0Hz)，7.95(1H，d，/=7.0Hz).ESI-MS:230[M+1]+實(shí)施例17化合物(8Z)-2，3-二氫-8-乙酰氧基亞胺基苯并[&]苯并吡喃-7(8H)-酮的合成向5mL圓底燒瓶中加入21.5mg(0.1mmol)化合物HW-32-2，lml氯仿，冷至5。C加入三乙胺60ul和16ul乙酰氯，5。C下反應(yīng)30min，常溫下反應(yīng)1小時(shí)，5%碳酸鈉水溶液洗滌，再水洗，濃縮后柱層分離純化，得到淺黃色固體llmg。iHNMR(300MHz，d6-DMSO，5，ppm)52.10(3H，s)，3.08(2H，t，J=6Hz)，4.30(2H,t，/=6Hz)，6.28(1H，s)，7.60(1H，t，/:7.5Hz)，7.44(1H，d，/=7.0Hz)，7.82(1H，d，/=7.0Hz).ESI-MS:258[M+1]+實(shí)施例18體外抗菌實(shí)驗(yàn)樣品由本實(shí)驗(yàn)室自行制備，對(duì)照品青霉素和萬(wàn)古霉素由市場(chǎng)直接購(gòu)得。實(shí)驗(yàn)菌株金黃色葡萄球菌(OS啤^y/ococc船5"m厶取/oe^^cA，ATCC25923)、解硫胺素芽孢桿菌04"eMWm》aa7/M;ym/g^"朋:y,ATCC9999)、枯草芽孢桿菌(5acz7/wj"6ftfo，ATCC21332)、耐藥金葡萄球菌(Afef/u'cz7/zVzr&y&to"f5"^^Ay/ococc"jaw/^"j，MRSA)為臨床分離菌株。最小抑菌濃度(MIC)的測(cè)定方法采用瓊脂稀釋法將化合物對(duì)半稀釋成8個(gè)濃度梯度制成抑菌液，接種細(xì)菌后，于37。C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果。菌落被完全抑制的最小稀釋度抑菌液濃度即為該樣品對(duì)受試菌的MIC。體外抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2、3所示表2具有大共軛體系的化合物對(duì)四種陽(yáng)性菌的抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表3具有單亞胺基團(tuán)的化合物對(duì)四種陽(yáng)性菌的抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>如表2、3所示，它們中某些化合物，如HW-32-l與HW-32-2在抗耐藥金葡菌中活性與萬(wàn)古霉素接近，說(shuō)明耐藥菌對(duì)本類(lèi)化合物依然敏感。這在臨床應(yīng)用上具有重要意義。實(shí)施例19抗腫瘤活性測(cè)試人乳腺癌細(xì)胞(MCF-1)，白血病細(xì)胞(K562)由中山大學(xué)腫瘤研究所傳代保株。以MTT法測(cè)試化合物的抗腫瘤活性，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的相應(yīng)細(xì)胞株的細(xì)胞懸液(經(jīng)0.25%胰蛋白酶消化使細(xì)胞脫落)0.5-1.0xi05/ml，分裝于96孔培養(yǎng)板中，195^1/孔，培養(yǎng)24h，待細(xì)胞貼壁后，分別加入5pl相應(yīng)不同濃度的藥物或試液，實(shí)驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照組(生理鹽水)、溶劑對(duì)照組(加入2XDMSO使終濃度為0.57。。)和6個(gè)不同濃度給藥組。每組設(shè)4個(gè)平行孔。置恒溫5%C02培養(yǎng)箱37°C培養(yǎng)48小時(shí)，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束前4小時(shí)每孔加入20plMTT液(5mg/ml)，4小時(shí)后吸棄培養(yǎng)液，每孔加入O.lmlDMSO，平板搖床震搖5min待結(jié)晶溶解后置酶聯(lián)檢測(cè)儀，于570nm波長(zhǎng)測(cè)各孔的OD值，按下列公式求生長(zhǎng)抑制率，并用BlisS法求出半數(shù)抑制濃度IC50。藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制率=(l-用藥組平均OD值/對(duì)照組平均OD值)X100%。通過(guò)對(duì)的體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)測(cè)試了化合物的抗腫瘤活性。結(jié)果如表4、5所示表4具有鄰醌結(jié)構(gòu)和具有大共軛結(jié)構(gòu)的幾種化合物的細(xì)胞毒活性化合物IC5o/^M細(xì)胞株4，5-二氫異苯并吡喃[8,l-ab]吩嗪4,5-二氫異苯并吡喃[8,l-fg]喹喔啉4,7-二甲基異苯并吡喃[8，l-ab]吩嗪K56276.15>10096.14MCF-762.17>100〉函表5具有單亞胺結(jié)構(gòu)的化合物的細(xì)胞毒活性化合物ICso/nM細(xì)胞株(1Z)-1棚(2，3-二氫-7氧代苯并[de]苯并吡喃-8-(7H)-亞基)硫代氨基脲(7Z)-2，3-二氫-7-羥胺基苯并[de]苯并吡喃-8(7H)-酮(8Z)-2，3-二氫-8-羥亞胺基苯并[de]苯并吡喃-7,-酮9-苯基-4，5-二氫-6，10-二氧-8-氮雜-環(huán)戊[a]非那烯8(Z)-3，9二甲基-8-甲氧亞胺基苯并[de]苯并吡喃-7卿-酮K562>1005.7055.10>濯6.70MCF-7>10042.8367.4595.375.39幾種化合物，尤其是HW-32-1，HW-52對(duì)K562和MCF-7的細(xì)胞毒作用ICso達(dá)到了5nM的水平，其細(xì)胞毒活性具有進(jìn)一步研究的意義。權(quán)利要求1.一類(lèi)生物堿，其結(jié)構(gòu)式如式(I)所示其中，R代表H、鹵素、C1-4的烷基或硝基；X代表-C(CH3)＝CH-或-CH2-CH2-；Y代表或，其中R1為H、-OH、-NHCSNH2、C1-4的烷氧基、C1-4的烷酰基氧基、6-7元碳環(huán)?；趸?；R2為H、C1-4的烷基、6-7元碳環(huán)；R3為H、C1-4的烷基、羥基、鹵素或氨基。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物,其特征在于所述R2中的碳環(huán)基可被羥基、鹵素、氨基或C1-3的烷基取代。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于所述R為H、甲<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>基、Cl、Br或硝基；所述Y為其中Ri為-OH、-NHCSNH2、甲氧基、叔丁氧基、乙酰氧基或苯甲酰氧基；R2為H、甲基、乙基、苯基或芐基；R3為H或羥基。4.權(quán)利要求1所述生物堿的制備方法，其特征在于，當(dāng)通式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>中的Y為了1或I時(shí)，該化合物的制備方法為將式(II)化合物在有機(jī)溶劑中與！^NH2反應(yīng)即得，反應(yīng)溫度為-20100。C。o<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(II)5.權(quán)利要求i所述生物堿的制備方法，其特征在于，當(dāng)通式(i)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>中的Y為了時(shí)，該化合物的制備方法為將式(II)化合物在有機(jī)溶劑中與R2CH2NH2反應(yīng)即得，反應(yīng)溫度為-2010(TC。6.權(quán)利要求1所述生物堿的制備方法，其特征在于，當(dāng)通式(I)。中的Y為T(mén)時(shí)，該化合物的制備方法為將式(II)化合物在有機(jī)溶劑中與NH2CH2CH2NH2反應(yīng)即得，反應(yīng)溫度為-2010(TC。7.權(quán)利要求1所述生物堿的制備方法，其特征在于，當(dāng)通式(I)中的Y為了時(shí)，該化合物的制備方法為將式(II)化合物在有機(jī)溶劑中與鄰苯二胺及取代鄰苯二胺反應(yīng)即得，反應(yīng)溫度為-20100°C。8.根據(jù)權(quán)利要求4、5、6或7所述的制備方法，其特征在于所有機(jī)溶劑是醇類(lèi)、鹵代烴類(lèi)、腈類(lèi)、醚類(lèi)、芳烴類(lèi)、DMF、DMSO中的一種或幾種的混合物。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑是醇類(lèi)，反應(yīng)溫度為535'C。10.權(quán)利要求1所述生物堿或其鹽類(lèi)在制備抗菌或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及有機(jī)化合物的
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一類(lèi)生物堿及其制備方法與在抗腫瘤或抗菌上的應(yīng)用。該類(lèi)生物堿的通式如式(I)所示，其制備方法是通過(guò)Mansonone類(lèi)似物與氨、脂肪伯胺、羥胺或二胺反應(yīng)即得。本發(fā)明的生物堿具有較好的抗菌和抗腫瘤活性，在其制備方法中，具有αCH₂的胺與醌的合成方法雖然收率不高，但步驟簡(jiǎn)單，而且現(xiàn)有技術(shù)中，在正常情況下是難以通過(guò)簡(jiǎn)單的方法構(gòu)建如此復(fù)雜的雜環(huán)體系的，因此，本發(fā)明的制備方法對(duì)于構(gòu)建具有復(fù)雜環(huán)系的生物堿具有重要意義。文檔編號(hào)C07D491/06GK101220035SQ200810025808公開(kāi)日2008年7月16日申請(qǐng)日期2008年1月15日優(yōu)先權(quán)日2008年1月15日發(fā)明者古練權(quán),王星元,簡(jiǎn)華培,黃世亮,黃志紓申請(qǐng)人:中山大學(xué)