一種微波提取玉竹中氨基酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微波提取玉竹中氨基酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]玉竹，別名鈴鐺菜、尾參、地管子、甜草根，為百合科多年生草本植物。現(xiàn)代藥理學(xué)研宄結(jié)果表明，玉竹的根莖具有擴(kuò)張冠脈、降血脂、降血糖、改善肝臟微循環(huán)、抗腫瘤、抗衰老和增強(qiáng)免疫力等作用，為滋養(yǎng)強(qiáng)壯劑。玉竹富含微量元素、維生素、氨基酸、留體皂苷、黃酮、生物堿、多糖等成分，而氨基酸作為蛋白質(zhì)的基本組成單位，直接參與生物體內(nèi)的新陳代謝和其他生理活動，在醫(yī)藥方面可用作營養(yǎng)劑、代謝改善劑、抗?jié)?、防幅射、抗菌、治癌、催眠、?zhèn)痛以及為特殊病人配制人工合成膳食等，氨基酸在食品行業(yè)可用作調(diào)味劑，在農(nóng)業(yè)中可用作無害農(nóng)藥，增強(qiáng)植物抗菌能力，其易被微生物分解，無毒性、不污染環(huán)境。可見，氨基酸利用價值和經(jīng)濟(jì)價值很高。
[0003]目前，常用提取氨基酸的方法有超聲提取、加熱回流提取、浸提法等等，提取溶劑一般為水、醇、醚等，這些方法提取率不高且提取物質(zhì)的功能成分破壞，效果均不理想。微波提取是一種最新發(fā)展起來的新技術(shù)，不僅可以提高提取率，還可保護(hù)提取物質(zhì)的功能成分，但微波功率、提取時間、提取劑的濃度、料液比等影響提取率的提取工藝條件沒有達(dá)到最優(yōu)值，導(dǎo)致氨基酸的提取率沒有達(dá)到理想效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種耗時短、提取率高、保護(hù)有效成分的微波提取玉竹中氨基酸的方法。
[0005]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
[0006]一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步驟:
[0007](I)制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹，瀝干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎機(jī)粉碎，過40目篩得到玉竹粉末備用；
[0008](2)微波提取:稱取玉竹粉末，以料液比為l:25g/ml加入濃度為20%?30%的乙醇提取劑，置于功率為400?600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為 23 ?28min ；
[0009](3)過濾定容:合并并過濾提取液，將濾液定容至50ml ；
[0010](4)離心:將定容后的濾液蒸發(fā)離心，取其上清液于4°C儲存，備用；
[0011](5)測定:以天冬酰胺藥品為對照品，采用茚三酮比色法對該游離氨基酸進(jìn)行測定。
[0012]作為優(yōu)選技術(shù)方案，為了使微波輻射萃取儀提取時間達(dá)到較優(yōu)值，以利于提高提取率和保護(hù)提取物的功能成分，所述步驟(2)中微波輻射萃取儀每次提取時間為25min。
[0013]作為優(yōu)選技術(shù)方案，為了使乙醇提取劑的濃度達(dá)到較優(yōu)值，以利于提高提取率和保護(hù)提取物的功能成分，所述步驟(2)中加入濃度為25%的乙醇。
[0014]作為優(yōu)選技術(shù)方案，為了使為了使微波輻射萃取儀功率達(dá)到較優(yōu)值，以利于提高提取率和保護(hù)提取物的功能成分，所述步驟(2)中微波輻射萃取儀功率為500w。
[0015]本發(fā)明的有益效果:利用微波輔助提取玉竹中氨基酸的方法，耗時短；微波功率、提取時間、提取劑及其濃度、料液比等提取工藝條件均采取最優(yōu)，提取率高且有效保護(hù)提取物的功能成分；且本發(fā)明的提取方法簡單、易于操作，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步地說明。
[0017]實(shí)施例1
[0018]一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步驟:
[0019]1、制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹，瀝干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎機(jī)粉碎，過40目篩得到玉竹粉末備用。
[0020]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.1000g，加入濃度為20%的乙醇提取劑
2.5ml，置于設(shè)定功率為400w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為23min ； (2)采用抽濾的方式過濾出提取液，將濾液定至50ml ； (3)將定容后的濾液離心，控制離心轉(zhuǎn)速為4500r/min，離心時間為15min，取其上清液于4°C儲存，備用；以上三個處理按順序重復(fù)二次。
[0021]3、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:精密稱取0.0lOOg的的天冬酰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，定容于10ml容量瓶中，此溶液質(zhì)量濃度為0.lmg/mlo
[0022]4、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密量取0.lmg/ml的天冬酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5ml, 1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，3.0ml，3.5ml分別置于25ml比色管中，各加水至10ml，再分別加入pH為8.04的磷酸鹽2ml和2%的茚三酮溶液2ml，搖勻，置于沸水中顯色15min，取出后立即用冷水冷卻至室溫，靜放5min，定容至25ml，搖勾，再放置15min，于566nm處測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度A，以試劑空白調(diào)零，以吸光度(A)為橫坐標(biāo)，質(zhì)量濃度(C)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，天冬素在I?14yg/ml與吸光度呈良好的線性關(guān)系，可得回歸方程為C =0.4953A-0.0029，R2 = 0.9992。
[0023]5、游離氨基酸的測定:精密量取上述提取上清液5ml置于25ml比色管中，并加水至10ml，再加入pH為8.04的磷酸鹽2ml和2%的茚三酮溶液2ml，搖勻，置于沸水中顯色15min，取出后立即用冷水冷卻至室溫，靜放5min，定容至25ml，搖勾，再放置15min，于566nm處測定其的吸光度(A);將測定得到的吸光度值代入回歸方程，該方法下測得游離氨基酸的含量為24.06%。
[0024]實(shí)施例2
[0025]—種微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步驟:
[0026]1、制備粉末與實(shí)施例1相同。
[0027]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.1500g，加入濃度為20%的乙醇提取劑
3.75ml，置于設(shè)定功率為500w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為25min ； (2)采用抽濾的方式過濾出提取液，將濾液定至50ml ； (3)將定容后的濾液離心，控制離心轉(zhuǎn)速為5000r/min，離心時間為20min，取其上清液于4°C儲存，備用；以上三個處理按順序重復(fù)三次。
[0028]3、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備與實(shí)施例1相同。
[0029]4、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備與實(shí)施例1相同。
[0030]5、游離氨基酸的測定與實(shí)施例1相同；將測定得到的吸光度值代入回歸方程，該方法下測得游離氨基酸的含量為24.15%。
[0031]實(shí)施例3
[0032]—種微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步驟:
[0033]1、制備粉末與實(shí)施例1相同。
[0034]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.2000g，加入濃度為20%的乙醇提取劑5.0ml，置于設(shè)定功率為600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為28min ； (2)采用抽濾的方式過濾出提取液，將濾液定至50ml ； (3)將定容后的濾液離心，控制離心轉(zhuǎn)速為4000r/min，離心時間為lOmin，取其上清液于4°C儲存，備用；以上三個處理按順序重復(fù)三次。
[0035]3、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備與實(shí)施例1相同。
[0036]4、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備與實(shí)施例1相同。
[0037]5、游離氨基酸的測定與實(shí)施例1相同；將測定得到的吸光度值代入回歸方程，該方法下測得游離氨基酸的含量為23.98%。
[0038]應(yīng)當(dāng)指出，以上案例僅是本發(fā)明有代表性的例子。顯然，本發(fā)明的技術(shù)方案并不限于上述實(shí)施例，還可以有許多變性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹，瀝干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎機(jī)粉碎，過40目篩得到玉竹粉末備用； (2)微波提取:稱取玉竹粉末，以料液比為l:25g/ml加入濃度為20%?30%的乙醇提取劑，置于功率為400?600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為23 ?28min ； (3)過濾定容:合并并過濾提取液，將濾液定容至50ml； (4)離心:將定容后的濾液蒸發(fā)離心，取其上清液于4°C儲存，備用； (5)測定:以天冬酰胺藥品為對照品，采用茚三酮比色法對該游離氨基酸進(jìn)行測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步驟(2)中微波輻射萃取儀每次提取時間為25min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步驟(2)中加入濃度為25%的乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1?3任意一項(xiàng)所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步驟(2)中微波輻射萃取儀功率為500w。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步驟：用蒸餾水沖洗干凈玉竹，瀝干水后，烘干，切剪成小段后粉碎，過40目篩，以料液比為1:25g/ml向粉末加入濃度為20％～30％的乙醇提取劑，置于功率為400～600w、溫度為75℃的微波輻射萃取儀提取3次，每次提取時間為23～28min；合并并過濾提取液，定容后蒸發(fā)離心，取其上清液于4℃儲存，測定氨基酸含量。利用微波輔助提取，耗時短；采取最優(yōu)的提取工藝條件，提取率高且有效保護(hù)提取物的功能成分；且本發(fā)明的提取方法簡單、易于操作，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】A01P3-00, A23L1-227, A01P1-00, A61K36-8969, A01N65-42
【公開號】CN104740296
【申請?zhí)枴緾N201510091130
【發(fā)明人】周可幸
【申請人】周可幸
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年2月28日