專利名稱：L-氨基酸的制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由N-琥珀酰氨基酸的對映體混合物高效率地制造L-氨基酸的方法， 該方法通過組合下述反應(yīng)來制造L-氨基酸1)使用N-酰基氨基酸消旋酶，使N-琥珀酰氨基酸進(jìn)行外消旋化的反應(yīng)，和2、使用L-琥珀酰酶，使N-琥珀酰-L-氨基酸進(jìn)行特異性水解的反應(yīng)。
背景技術(shù)：
光學(xué)活性氨基酸、特別是光學(xué)活性非天然氨基酸，是作為農(nóng)藥、藥品等的合成原料及中間體有用的化合物。如何高效率地制造具有光學(xué)活性的氨基酸、特別是非天然氨基酸， 成為工業(yè)生產(chǎn)中重要的問題。作為解決上述問題的方法之一，專利文獻(xiàn)1中公開了下述方法以N-乙酰氨基酸的外消旋體作為原料，通過使用D-?；被崴饷?aminoacylase)或者L-酰化氨基酸水解酶來光學(xué)拆分D構(gòu)型和L構(gòu)型，從而得到具有較高光學(xué)純度的氨基酸。在上述方法中，得到光學(xué)活性氨基酸的收率最高為50%，一半的外消旋體被浪費(fèi)。因此，為了使殘存的 N-乙酰氨基酸發(fā)生外消旋化而組合使用N-?；被嵯概c酰化氨基酸水解酶，以試圖提高收率。然而，將N-?；被嵯概c?；被崴饷附M合后的拆分反應(yīng)性較低，氨基酸的收率停留在70 75%，另外，N-?；w底物會殘留，需要對其進(jìn)行分離的步驟，由此會阻礙實用化(專利文獻(xiàn)2、3、4、5)。此外，公知N-?；被嵯笇-酰基氨基酸的反應(yīng)性較低(非專利文獻(xiàn)1、 2，專利文獻(xiàn)6)，近年來，有報道稱N-?；被嵯笇-琥珀酰氨基酸的反應(yīng)性高于對N-乙酰氨基酸的反應(yīng)性(非專利文獻(xiàn)1、2，專利文獻(xiàn)6)。另有報道稱L-琥珀酰酶對天然L-氨基酸的N-琥珀酰體產(chǎn)生作用(非專利文獻(xiàn)1、2，專利文獻(xiàn)6)。然而，通過將N-?；被嵯概cL-琥珀酰酶組合，由N-琥珀酰-氨基酸的對映體混合物高效率地制造 L-氨基酸的方法是未知的。此外，本制造方法中可以使用的原料即通式(III)代表的N-琥珀酰氨基酸或其鹽，目前為止是未知的。[化學(xué)式1]
權(quán)利要求
1.L-氨基酸的制造方法，該制造方法通過使L-琥珀酰酶作用于N-琥珀酰氨基酸的對映體混合物來制造L-氨基酸；其中，在共存有N-?；被嵯傅臈l件下，一邊使生成的L-氨基酸析出，一邊進(jìn)行反應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制造方法，其中，所述L-氨基酸的溶解濃度為1重量％以下。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制造方法，其中，所述N-琥珀酰氨基酸如通式(I)所示 [化學(xué)式1]
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制造方法，其中，所述式⑴和(II)中，R為4-溴芐基、3-氟芐基、萘基甲基、茚滿基或6-庚烯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 4中任一項所述的制造方法，其中，N-酰基氨基酸消旋酶來源于屬于地芽孢桿菌屬(GeobaciLLus)或棲熱菌屬(Thermus)的微生物，L-琥珀酰酶來源于屬于地芽孢桿菌屬(GeobaciLLus)的微生物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制造方法，其中，N-?；被嵯竵碓从谑葻岬匮挎邨U菌(GeobaciLLus kaustophiLus)、嗜熱棲熱菌(Thermus thermophiLus)，L-琥珀酰酶來源于嗜熱地芽孢桿菌(GeobaciLLus kaustophiLus)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制造方法，其中，N-?；被嵯竵碓从谑葻岬匮挎邨U菌(GeobaciLLus kaustophiLus) NBRC102445、嗜熱棲熱菌(Thermus thermophiLus) HB8, L-琥珀酰酶來源于嗜熱地芽孢桿菌(GeobaciLLus kaustophiLus) NBRC10M45。
8.根據(jù)權(quán)利要求1 4中任一項所述的制造方法，其中，N-酰基氨基酸消旋酶和L-琥珀酰酶是用包含編碼N-?；被嵯负蚅-琥珀酰酶的DNA的載體進(jìn)行轉(zhuǎn)化而得到的轉(zhuǎn)化體。
9.通式(III)表示的N-琥珀酰氨基酸或其鹽，[化學(xué)式3]
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的N-琥珀酰氨基酸或其鹽，其中，在所述式(III)中，R為 4-溴芐基、3-氟芐基、2-萘基甲基、2-茚滿基或6-庚烯基。
全文摘要
本發(fā)明涉及L-氨基酸的制造方法，該方法在共存有N-酰氨基酸消旋酶的條件下，使L-琥珀酰酶作用于N-琥珀酰氨基酸的對映體混合物，并通過L構(gòu)型特異的水解來制得L-氨基酸。特別是，本發(fā)明涉及以高收率制造L-氨基酸的方法，該方法以溶解濃度特別低的N-琥珀酰氨基酸為原料，一邊使生成的L-氨基酸析出到反應(yīng)體系外，一邊進(jìn)行反應(yīng)。根據(jù)本發(fā)明，可以高效率地制造光學(xué)純度高的L-氨基酸，特別是作為藥品、農(nóng)藥等原料有用的L-氨基酸。
文檔編號C12P41/00GK102203274SQ20098014317
公開日2011年9月28日 申請日期2009年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月29日
發(fā)明者田岡直明, 西山陶三, 野尻增俊 申請人:株式會社鐘化