專利名稱：23-羥基白樺酸衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種經(jīng)化學(xué)修飾的23-羥基白樺酸衍生物，本發(fā) 明公開了多個系列的23-羥基白樺酸衍生物及其制備方法和用于抗腫瘤及作為腫瘤耐藥 逆轉(zhuǎn)劑的用途。
背景技術(shù)：
天然產(chǎn)物在人類與癌癥的斗爭中發(fā)揮著重要的作用。目前天然來源的化合物占抗 癌藥物的比例已達(dá)60%以上，其中喜樹堿，紫杉醇，長春堿等已經(jīng)應(yīng)用于臨床，而繼續(xù)從天 然產(chǎn)物中尋找、開發(fā)療效好，毒性小，特異性強(qiáng)、可逆轉(zhuǎn)化療耐藥的新型抗腫瘤藥物仍然是 人們關(guān)注的熱點。23-羥基白樺酸03-hydroxybetulinic acid，23-HBA)是從中藥白頭翁中分 離得到的白樺酸類似物，其結(jié)構(gòu)與活性與白樺酸相似，其對黑色素瘤B16細(xì)胞系、人胃癌 SGC-7901細(xì)胞系、人卵巢癌AO細(xì)胞系、人白血病HL-60細(xì)胞系、人白血病K562細(xì)胞系、人宮 頸癌HeLa細(xì)胞系及小鼠腹水瘤S180細(xì)胞系等均有抑制作用。中國發(fā)明專利CN 1491651A 公開了 23-羥基白樺酸對小鼠黑色素瘤、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腸道腫瘤、肺癌、肝癌以及愛滋病 的預(yù)防和治療有作用。目前關(guān)于白樺酸與23-羥基白樺酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)理并未十 分明確。研究表明，白樺酸類化合物在促進(jìn)細(xì)胞凋亡及抗血管生成等方面發(fā)揮重要作用。其 促進(jìn)人白血病HL-60細(xì)胞凋亡的作用可能是通過抑制bcl-2基因的表達(dá)以及端粒酶活性， 導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。研究顯示其作用并非通過配體/受體結(jié)合機(jī)制，而是通過降低細(xì)胞線粒體 膜的通透性，使線粒體內(nèi)細(xì)胞色素c進(jìn)入胞質(zhì)溶膠，產(chǎn)生活性氧分子，引起線粒體凋亡因子 釋放，最終誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。此外，有研究(Journal of Ethnopharmacology, 2010,128,615-622)注意到 23-HBA具有與抗腫瘤藥物協(xié)同增敏的活性，在較低濃度下能顯著提高耐藥性腫瘤細(xì)胞對多 種化療藥物的敏感度，增加抗腫瘤藥物在細(xì)胞內(nèi)的蓄積。23-HBA在體內(nèi)外均可與多柔比星 (doxorubicin, D0X)發(fā)揮協(xié)同作用，將DOX與23-HBA聯(lián)合用藥后，對四種腫瘤細(xì)胞的生長抑 制作用顯著提高，其在四種細(xì)胞中的ED5(l、ED75、ED9(l、ED9yJC平下的聯(lián)合用藥指數(shù)(Cl)均小 于1，表現(xiàn)為協(xié)同增效。研究顯示23-HBA能抑制腫瘤細(xì)胞中DOX誘導(dǎo)的P-糖蛋白的功能， 從而阻止P-糖蛋白將DOX轉(zhuǎn)運出細(xì)胞膜，增加了細(xì)胞內(nèi)DOX的濃度，其深入的作用機(jī)制仍 需進(jìn)一步研究。中國發(fā)明專利CN 1861627A公開了一系列23-羥基白樺酸修飾衍生物，并公開了 其對人低分化胃腺癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、人細(xì)胞、人腦瘤細(xì)胞、人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞、人 乳腺癌細(xì)胞、人卵巢癌細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、小鼠黑色素瘤細(xì)胞的抑制活性。最新研究表明，23-羥基白樺酸還具有抑制糖元磷酸化酶的活性，其具體的作用 機(jī)理仍不明確。23-羥基白樺酸本身的抑制糖元磷酸化酶的活性并不強(qiáng)，其對兔肌糖元磷 酸酶 a(RMGPa)抑制的 IC50 值為 103 μ M，低于咖啡因(74. 9 μ Μ)，Zhu P.等(Bioorganic Medicinal Chemistry Letter, 2009,19 :6966-6969)報道了一系列活性得到提高的 23-HBA
其中，R1為 OH、OR5, OCOR5, OSO2R5, OCONR5, OCONR5NR5, 0C0NR5C0R5, NH2, NHCH2OR5, NHNHR5、NHCOR5、OCOR5NHR5 或 0C0&C00H ；R2 為 OH、OR5, OCOR5, OSO2R5, OCONR5, OCONR5NR5, 0C0NR5NR5C0R5, 0C0NR5NR5C00R5, OCONR5COR5、NH2、NHCH2OR5、NHNHR5、NHCOR5, OCOR5NHR5 或 0C0&C00H ；R3 為 OH、OR5, NR5, OCOR5, NCOR5, OSO2R5, OCONR5, NCONR5, OCONR5NR5, NCONR5NR5, OCOnR5COR5, NCONr5COr5、NHR5NHR5, NHR5COOR5, Mffi5COMffi5COOR5、NHR5NH2, NHCH2OR5、NHNHR5、 NHCOR5, OCOR5NHR5, 0C0R5C00H, OCOCH = CR5, NHR5NHC0R5C00H 或 OIi5OCOR5COOH ；R4 為 H 或 0H;&為H、X取代的碳原子數(shù)1-10個的烷烴、烯烴、炔烴、環(huán)烷烴或苯基；X為H、Cl、 Br、F、I、CN、NH2, NO2, CF3> OH、OCH3> COOH 或 C00CH3。所述R1 為 OH、OCOR5 或 0C0R5C00H ；所述 Ii2 為 OH、OCOR5, OCONR5, OCONR5NR5, OCONR5OR5, 0C0NR5C00R、0C0NR5NR5C00R, 0C0NR5NR5C0R0C0NR5 或 0C0&C00H ；所述民為 0H、 NHR5, NHR5COOR5, OR5, OR5OH, OR5OCOR5, 0R50C0R5C00H, Mffi5NHCOR5COOH、NHR5COOR5, NHR5COOH, NR5NR5, NHR5C0NHR5C00R5 或 Mffi5COMffi5COOH ；所述 R1J2 和 & 為 COOH 時，Ii5 不為 H。所述衍生物為3-羥基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲?；鵢28_白樺酸、3_輕 基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-嘧啶基哌嗪甲酰 基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -2-吡啶基哌嗪甲?；鵢28_白樺酸、3-羥基-23-0-1， 4' -N，N-二甲氨基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-芐基哌嗪甲酰
衍生物，并從中發(fā)現(xiàn)了 3個活性較23-HBA及咖啡因顯著提高的化合物。23-羥基白樺酸作為具有抗腫瘤及其它活性的天然化合物，其結(jié)構(gòu)修飾正受到越 來越多的重視。由于23-羥基白樺酸作用機(jī)理獨特，毒性低，對其的深入研究具有重大意 義。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種23-羥基白樺 酸衍生物。本發(fā)明的又一目的在于提供上述23-羥基白樺酸衍生物的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供上述23-羥基白樺酸衍生物的用途。本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)一種23-羥基白樺酸衍生物，其特征在于 該衍生物具有如式(I)所示的結(jié)構(gòu)基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-吡咯烷基哌啶甲?；鵢28_白樺酸、3-羥基-23-0-1， 4'-乙氧羰基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1，4'-乙酰基哌嗪甲?；鵢28_白 樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-乙氧羰基哌嗪甲酰基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -4-甲 基哌嗪基哌啶甲酰基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -4-甲基哌啶基哌嗪甲?；?28-白 樺酸、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸酰胺色氨酸甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸酰胺 蛋氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺 酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺色氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸 酰胺蛋氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺天冬氨 酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺 甘氨酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸甲酯、3，23-二羥 基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23_二羥基-28-白樺酸酰胺蛋氨酸酰胺 蛋氨酸甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸甲酯、3，23-二羥基-28-白 樺酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸甲酯、 3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸 酰胺脯氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸 酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羥 基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸、 3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸_4'-哌 啶基哌啶酰胺、3，23-0- 二乙酰基-28-白樺酸-4‘ -[5-(吡啶-2-基)-IH-四氮唑基] 丁酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸二烯丙酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸烯丙酰 胺、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸胺乙基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸嗎啉基酰胺、 3，23-0-二乙?；?28-白樺酸哌啶酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸哌嗪基單酰胺、3， 23-0-二乙?；?28-白樺酸咪唑基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-N，N-二甲 氨基哌啶基酰胺、3，23-0- 二乙?；?28-白樺酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-0- 二乙酰 基-28-白樺酸-4'-乙?；哙夯０贰?，23-0-二乙?；?28-白樺酸-4'-芐基哌嗪 基酰胺、3，23-0- 二乙?；?28-白樺酸-4 ‘-乙基哌嗪基酰胺、3，23- 二羥基-28-白樺 酸-4'-哌啶基哌啶酰胺、3，23_ 二羥基-28-白樺酸-4' _[5_(吡啶-2-基)_1Η_四氮 唑-1-基]丁酰胺、3，23_二羥基-28-白樺酸二烯丙酰胺、3，23_二羥基-28-白樺酸烯丙酰 胺、3，23-二羥基-28-白樺酸胺乙基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺、3，23-二 羥基-28-白樺酸哌啶酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸哌嗪基單酰胺、3，23-二羥基-28-白 樺酸咪唑基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4' -N，N-二甲氨基哌啶基酰胺、3，23-二羥 基-28-白樺酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-乙酰基哌嗪基酰 胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-芐基哌嗪基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-乙 基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸2'-甲基烯丙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 樺酸-2' -[1-嗎啉基]乙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸-Γ -甲基-丁炔酯、 3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-2' ,4'-己二烯酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-3‘， 5'-己二烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸丙腈酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸 3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸叔丁酯、3，23-0-二乙?；?28-白 樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸戊二醇單酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸辛二醇單酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-順丁烯二醇單酯、3， 23-0-二乙?；?28-白樺酸三縮二乙二醇單酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸異戊酯、3， 23-二羥基-28-白樺酸2'-甲基烯丙酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-2' _[1_嗎啉基]乙 酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-1'-甲基-2' -丁炔酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸-2'， 4'-己二烯酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-3' ,5'-己二烯酯、3，23-二羥基-28-白樺 酸丙腈酯、3，23-二羥基-28-白樺酸3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-二羥基-28-白樺酸 叔丁酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸戊二 醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸辛二醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-順丁烯二 醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸三縮二乙二醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸異戊酯、 3，23-0-二乙?；?30-羥基-28-白樺酸叔丁酯、3，23_0_ 二乙?；?30-羥基-28-白樺 酸-1 ‘-四氫呋喃基甲酯、3，23-0- 二乙?；?30-羥基-28-白樺酸異戊酯、3，23-0- 二乙酰 基-30-羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺、3，23-0- 二乙酰基-30-羥基-28-白樺酸哌啶酰胺、 3，23-0-二乙酰基-30-羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羥基-30-羥基-28-白 樺酸叔丁酯、3，23_ 二羥基-30-羥基-28-白樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-二羥 基-30-羥基-28-白樺酸異戊酯或3，23-二羥基-30-羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺。所述Ii1 或 Ii2 為 0C0NR5、OCONR5NR5, OCONR5OR5, OCONR5COOR、OCONR5NR5COOR, 0C0NR5NR5C0R或OCONR5NR5時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將20 30mmol固體光氣溶于30 50mL有機(jī)溶劑中，在-20°C 10°C下加 入6 Smmol堿，再向反應(yīng)液中緩慢滴加胺類化合物的有機(jī)溶劑溶液30 50mL，滴加完畢 升溫至25°C攪拌4 48小時，過濾，濾液旋干，得到胺甲酰氯；所述胺類化合物與固體光氣 等摩爾；所述有機(jī)溶劑為吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮；所述堿為三乙胺或吡啶； 所述胺類化合物優(yōu)選為4'-哌啶基哌啶、4'-嘧啶基哌嗪、4' -2-吡啶基哌嗪、4' -N, N-二甲氨基哌啶、4'-芐基哌嗪、4'-吡咯烷基哌啶、4'-乙氧羰基哌啶、4'-乙?；?嗪、4'-乙氧羰基哌嗪或4' -4-甲基哌啶基哌嗪；(2)將步驟(1)所得胺甲酰氯溶于50 120mL干燥吡啶中，加入2 3mmol 23-羥 基白樺酸的有機(jī)溶劑溶液50 120mL，在溫度25°C 60°C條件下攪拌反應(yīng)2 48小時；(3)向步驟⑵所得反應(yīng)液中加入IOOmL有機(jī)溶劑，將pH調(diào)節(jié)至彡7，分離有機(jī)層， 得到產(chǎn)物。所述R1或&為0C0&或OCOR5COOH時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將0. 63mmol 23-羥基白樺酸溶于12mL有機(jī)溶劑，再加入6. 3mmol酸酐，在溫 度25°C 60°C條件下反應(yīng)2 48小時；(2)向步驟⑵所得反應(yīng)液中加入25mL有機(jī)溶劑，將pH調(diào)節(jié)至彡7，分離有機(jī)層， 得到產(chǎn)物；所述有機(jī)溶劑為吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮。所述Ii1 或 Ii2 為 0C0&，R3 為 M5COOR5、NR5C00H、M5CONR5COOIi5、NI 5C0NR5C00H、NHR5, NHR5NHR5, NR5OR5, OR5, OR5OH或0&0&0&0H時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將3，23-0-二?；讟逅?. 52 1. 08mmol溶于有機(jī)溶劑20 30mL中，加 入草酰氯0. 3 0. 6mL和催化劑0. 1 0. 2mL,在溫度-20°C 25°C條件下反應(yīng)4 12小 時；
(2)除去有機(jī)溶劑，重新加入有機(jī)溶劑20 30mL，再向溶液中加入3，23_0_ 二酰 基白樺酸4 10倍當(dāng)量的醇類化合物、胺類化合物或氨基酸酯鹽酸鹽的有機(jī)溶液，再加入 3，23-0-二酰基白樺酸1倍當(dāng)量的有機(jī)堿，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C 120°C ；(3)除去有機(jī)溶劑后，再重新加入25 IOOmL有機(jī)溶劑，依次采用鹽酸、飽和食鹽 水以及水進(jìn)行洗滌，得到3，23-0-二?；?17-白樺酸酯或酰胺衍生物；(4)將步驟(3)所得衍生物0. 3mmol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比2 5混合 得到的溶液14mL中，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液4mL，回流2 M小時，得到3，23- 二羥 基-17-白樺酸酯或酰胺衍生物；(5)將步驟(4)所得3，23-0- 二酰基_17_白樺酸酰胺氨基酸衍生物0. 2mmol溶 于有機(jī)溶劑30mL中，加入0. 4mmol氨基酸甲酯鹽酸鹽、0. 4mmol 1-乙基_ (3- 二甲基氨基 丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC · HCl)和0. 5mmol無水1-羥基-苯并-三氮唑(HoBt)，反應(yīng) 4 18小時，溫度為25°C 80°C，得到3，23-二羥基-17-白樺酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸甲(6)將步驟(5)所得產(chǎn)物0. Immol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比1 1混合得到 的溶液8mL中，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液2mL，回流2 M小時，得到3，23- 二羥基-17-白
樺酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸；其中，有機(jī)溶劑為二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氫呋喃或丙酮；催化劑為二 甲基甲酰胺(DMF)；醇類化合物優(yōu)選為甲代烯丙醇、4-羥乙基嗎啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、 2,4-己二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羥基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氫 糠醇、1，5_戊二醇、1，8_辛二醇、順-2-丁烯-1，4-二醇、三縮二乙二醇或異戊醇；胺類化合 物優(yōu)選為4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙 胺、乙二胺、嗎啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4-二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙?；哙?、4-芐基 哌嗪或4-乙基哌嗪；氨基酸酯鹽酸鹽為氨基酸的甲酯鹽酸鹽或乙酯鹽酸鹽；有機(jī)堿為三乙 胺、4-二甲基胺吡啶、1-羥基-苯并-三氮唑或吡啶；強(qiáng)堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀；鹵代溶 劑為二氯甲烷或氯仿。所述R1 或 Ii2 為 OCOR5, R3 為 NI 5C00R5、NR5COOH, NHR5, NR5OR5 或 OR5, R4 為 OH 時，所
述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將3，23-0-二?；讟逅?. 52 1. 08mmol溶于有機(jī)溶劑20 30mL中，加 入草酰氯0. 3 0. 6mL和催化劑0. 1 0. 2mL,在溫度-20°C 25°C條件下反應(yīng)4 12小 時；(2)除去有機(jī)溶劑，得到沉淀；再加入有機(jī)溶劑20 30mL向溶液中加入3， 23-0- 二?；讟逅? 10倍當(dāng)量的醇類化合物、胺類化合物或氨基酸酯鹽酸鹽的有機(jī) 溶液，再加入3，23-0- 二?；讟逅?倍當(dāng)量的有機(jī)堿，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C至 120 0C ；(3)除去有機(jī)溶劑后，再重新加入25 IOOmL有機(jī)溶劑，依次采用鹽酸、飽和食鹽 水以及水進(jìn)行洗滌，得到3，23-0-二酰基-17-白樺酸酯或酰胺衍生物；(4)將步驟(3)所得3，23-0- 二?；鵢17_白樺酸酯或酰胺衍生物0. 3 0. 6mmol 溶于30 60mL有機(jī)溶劑中，加入間氯過氧苯甲酸，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C 100°C， 依次采用飽和NaHCO3溶液、飽和食鹽水和水洗滌，得到3，23-0- 二?；?30-羥基-17-白
11樺酸酯或酰胺衍生物；間氯過氧苯甲酸的加入量是與3，23-0-二酰基-17-白樺酸酯或酰胺 衍生物等摩爾；(5)將步驟(4)所得衍生物0. 3mmol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比2 5混合 得到的溶液14mL，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液4mL，回流2 M小時，用酸調(diào)pH至中性或酸 性，得到3，23- 二羥基-30-羥基白樺酸酯或酰胺衍生物；其中，有機(jī)溶劑為二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氫呋喃或丙酮；催化劑為二 甲基甲酰胺(DMF)；醇類化合物優(yōu)選為甲代烯丙醇、4-羥乙基嗎啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、 2,4-己二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羥基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氫 糠醇、1，5_戊二醇、1，8_辛二醇、順-2-丁烯-1，4-二醇、三縮二乙二醇或異戊醇；胺類化合 物優(yōu)選為4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙 胺、乙二胺、嗎啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4-二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙?；哙?、4-芐基 哌嗪或4-乙基哌嗪；氨基酸酯鹽酸鹽為氨基酸的甲酯鹽酸鹽或乙酯鹽酸鹽；有機(jī)堿為三乙 胺或吡啶；強(qiáng)堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀。上述23-羥基白樺酸衍生物在制備抗腫瘤藥物中的用途。上述23-羥基白樺酸衍生物在制備腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑中的用途。所述腫瘤為肝癌、乳腺癌、宮頸癌、肺癌、黑色素瘤、腸癌、腦瘤、胃癌、卵巢癌、白血 病或腹水瘤。—種藥物組合物，包括上述23-羥基白樺酸衍生物和其它抗腫瘤藥物。其它抗腫 瘤藥物是指P-gP的底物，其中包括蒽環(huán)類、紫杉烷類、長春堿類、鬼白毒素類以及米托蒽 醌、放線菌素D及絲裂霉素C等。本發(fā)明23-羥基白樺酸衍生物與抗腫瘤藥物聯(lián)用，可增加 多藥耐藥腫瘤細(xì)胞對抗腫瘤藥物的敏感度，提高化療效果，具有良好的開發(fā)和應(yīng)用前景。本發(fā)明的23-羥基白樺酸衍生物可以用下式反應(yīng)方程式表示制備過程(如未明確 標(biāo)明，則Ri、R2、R3、R4W定義如前所述)反應(yīng)方程式1
權(quán)利要求
1. 一種23-羥基白樺酸衍生物，其特征在于該衍生物具有如式(I)所示的結(jié)構(gòu)
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物，其特征在于所述隊為0H、 OCOR5 或 0C0&C00H ；所述 Ii2 為 OH、OCOR5, OCONR5, OCONR5NR5, OCONR5OR5, 0C0NR5C00R、 0C0NR5NR5C00R.0C0NR5NR5C0R0C0NR5 或 OCOR5COOh ；所述 & 為 OH、NHR5、Mffi5COOR5、OR5、0R50H、 OR5OCOR5, 0R50C0R5C00H, Mffi5NHCOR5COOH、NHR5COOR5, NHR5COOH, NR5NR5, NHR5C0NHR5C00R5 或 Mffi5CONHR5COOH ；所述 R1、R2 和 R3 為 COOH 時，Ii5 不為 H。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物，其特征在于所述衍生物為 3-羥基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1，4'-哌啶基 哌啶甲酰基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-嘧啶基哌嗪甲?；?28-白樺酸、3-羥 基-23-0-1,4' -2-吡啶基哌嗪甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -N，N-二甲氨 基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-芐基哌嗪甲?；?28-白樺酸、3-羥 基-23-0-1,4'-吡咯烷基哌啶甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-乙氧羰基哌啶甲 ?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4'-乙?；哙杭柞；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1， 4'-乙氧羰基哌嗪甲?；?28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -4-甲基哌嗪基哌啶甲酰 基-28-白樺酸、3-羥基-23-0-1,4' -4-甲基哌啶基哌嗪甲?；?28-白樺酸、3，23_0_ 二 乙?；?28-白樺酸酰胺色氨酸甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸酰胺蛋氨酸甲酯、3， 23-0-二乙?；?28-白樺酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸酰胺天冬氨 酸二甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺色氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺蛋氨酸、 3，23- 二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸、3，23- 二羥基-28-白樺酸酰胺天冬氨酸、3，23- 二 羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺 脯氨酸甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸甲酯、3，23-二羥基-28-白(I )樺酸酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸甲 酯、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺 脯氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二 羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺脯氨 酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺甘氨 酸酰胺天冬氨酸、3，23-二羥基-28-白樺酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羥基-28-白 樺酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸、3，23- 二羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸、3，23- 二羥 基-28-白樺酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-哌啶基哌啶 酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸-4' -[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁酰 胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸二烯丙酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸烯丙酰胺、 3，23-0-二乙?；?28-白樺酸胺乙基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸嗎啉基酰胺、3， 23-0-二乙酰基-28-白樺酸哌啶酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸哌嗪基單酰胺、3， 23-0-二乙酰基-28-白樺酸咪唑基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸-N，N-二甲 氨基哌啶基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰 基-28-白樺酸-4'-乙?；哙夯０?、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-芐基哌嗪 基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-4'-乙基哌嗪基酰胺、3，23_ 二羥基-28-白樺 酸-4'-哌啶基哌啶酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4' _[5_(吡啶-2-基)_1Η_四氮 唑-1-基]丁酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸二烯丙酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸烯丙酰 胺、3，23-二羥基-28-白樺酸胺乙基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺、3，23-二 羥基-28-白樺酸哌啶酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸哌嗪基單酰胺、3，23-二羥基-28-白 樺酸咪唑基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4' -N，N-二甲氨基哌啶基酰胺、3，23-二羥 基-28-白樺酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-乙?；哙夯?胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-芐基哌嗪基酰胺、3，23-二羥基-28-白樺酸-4'-乙 基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸2'-甲基烯丙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 樺酸-2' -[1-嗎啉基]乙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸-Γ -甲基-丁炔酯、 3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-2' ,4'-己二烯酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-3‘， 5'-己二烯酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸丙腈酯、3，23-0-二乙酰基-28-白樺酸 3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸叔丁酯、3，23-0-二乙?；?28-白 樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸戊二醇單酯、3，23-0-二乙 ?；?28-白樺酸辛二醇單酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸-順丁烯二醇單酯、3， 23-0-二乙?；?28-白樺酸三縮二乙二醇單酯、3，23-0-二乙?；?28-白樺酸異戊酯、3， 23-二羥基-28-白樺酸2'-甲基烯丙酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-2' -[1-嗎啉基]乙 酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-1'-甲基-2' -丁炔酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸-2'， 4'-己二烯酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-3' ,5'-己二烯酯、3，23-二羥基-28-白樺 酸丙腈酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-二羥基-28-白樺酸 叔丁酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-二羥基-28-白樺酸戊二 醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸辛二醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸-順丁烯二 醇單酯、3，23-二羥基-28-白樺酸三縮二乙二醇單酯、3，23_ 二羥基-28-白樺酸異戊酯、 3，23-0-二乙?；?30-羥基-28-白樺酸叔丁酯、3，23_0_ 二乙?；?30-羥基-28-白樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-0-二乙酰基-30-羥基-28-白樺酸異戊酯、3，23-0-二乙酰 基-30-羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺、3，23-0- 二乙?；?30-羥基-28-白樺酸哌啶酰胺、 3，23-0-二乙?；?30-羥基-28-白樺酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羥基-30-羥基-28-白 樺酸叔丁酯、3，23_ 二羥基-30-羥基-28-白樺酸-1'-四氫呋喃基甲酯、3，23-二羥 基-30-羥基-28-白樺酸異戊酯或3，23-二羥基-30-羥基-28-白樺酸嗎啉基酰胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物的制備方法，其特征在于所述R1 或 Ii2 為 0C0NR5、0C0NR5N! 5、0C0NR5( 5、0C0NR5C00R、0C0NI 5NR5C00R、0C0NI 5NR5C0R 或 OCONR5M5 時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將20 30mmol固體光氣溶于30 50mL有機(jī)溶劑中，在_20°C 10°C下加入6 Smmol堿，再向反應(yīng)液中緩慢滴加胺類化合物的有機(jī)溶劑溶液30 50mL，滴加完畢升溫至 25°C攪拌4 48小時，過濾，濾液旋干，得到胺甲酰氯；所述胺類化合物與固體光氣等摩爾； 所述有機(jī)溶劑為吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮；所述堿為三乙胺或吡啶；所述胺 類化合物為4'-哌啶基哌啶、4'-嘧啶基哌嗪、4' -2-吡啶基哌嗪、4' -N，N-二甲氨基 哌啶、4'-芐基哌嗪、4'-吡咯烷基哌啶、4'-乙氧羰基哌啶、4'-乙酰基哌嗪、4'-乙 氧羰基哌嗪或4' -4-甲基哌啶基哌嗪；(2)將步驟(1)所得胺甲酰氯溶于50 120mL干燥吡啶中，加入2 3mmol23-羥基 白樺酸的有機(jī)溶劑溶液50 120mL，在溫度25°C 60°C條件下攪拌反應(yīng)2 48小時；(3)向步驟(2)所得反應(yīng)液中加入IOOmL有機(jī)溶劑，將pH調(diào)節(jié)至彡7，分離有機(jī)層，得 到產(chǎn)物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物的制備方法，其特征在于所述 R1或&為0C0&或OCOR5COOH時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將0.63mmol23-羥基白樺酸溶于12mL有機(jī)溶劑，再加入6. 3mmol酸酐，在溫度 25°C 60°C條件下反應(yīng)2 48小時；(2)向步驟⑵所得反應(yīng)液中加入25mL有機(jī)溶劑，將pH調(diào)節(jié)至彡7，分離有機(jī)層，得到 產(chǎn)物；所述有機(jī)溶劑為吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物的制備方法，其特征在于所述R1 或 Ii2 為 0C0&，R3 為 NR5C00I 5、NI 5C00H、NI 5C0NR5C0( 5、NI 5C0NR5C00H、NHR5、Mffi5Mffi5、NI 50R5、 0R5> OR5OH或OR5OR5OR5OH時，所述衍生物的制備包括以下操作步驟(1)將3，23-0-二?；讟逅?. 52 1. 08mmol溶于有機(jī)溶劑20 30mL中，加入草酰 氯0. 3 0. 6mL和催化劑0. 1 0. 2mL,在溫度_20°C 25°C條件下反應(yīng)4 12小時；(2)除去有機(jī)溶劑，重新加入有機(jī)溶劑20 30mL，再向溶液中加入3，23_0_二?；?樺酸4 10倍當(dāng)量的醇類化合物、胺類化合物或氨基酸酯鹽酸鹽的有機(jī)溶液，再加入3， 23-0-二?；讟逅?倍當(dāng)量的有機(jī)堿，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C 120°C ；(3)除去有機(jī)溶劑后，再重新加入25 IOOmL有機(jī)溶劑，依次采用鹽酸、飽和食鹽水以 及水進(jìn)行洗滌，得到3，23-0- 二?；?17-白樺酸酯或酰胺衍生物；(4)將步驟⑶所得衍生物0.3mmol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比2 5混合得到的 溶液14mL中，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液4mL，回流2 M小時，得到3，23- 二羥基-17-白 樺酸酯或酰胺衍生物；(5)將步驟(4)所得3，23-0-二?；?17-白樺酸酰胺氨基酸衍生物0.2mmol溶于有 機(jī)溶劑30mL中，加入0. 4mmol氨基酸甲酯鹽酸鹽、0. 4mmol 1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基) 碳二亞胺鹽酸鹽(EDC .HCl)和0. 5mmol無水1-羥基-苯并-三氮唑(HoBt)，反應(yīng)4 18 小時，溫度為25°C 80°C，得到3，23_ 二羥基-17-白樺酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸甲酯；(6)將步驟(5)所得產(chǎn)物0.Immol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比1 1混合得到的 溶液8mL中，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液2mL，回流2 M小時，得到3，23- 二羥基-17-白 樺酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸；其中，有機(jī)溶劑為二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氫呋喃或丙酮；催化劑為二甲基 甲酰胺(DMF)；醇類化合物為甲代烯丙醇、4-羥乙基嗎啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、2，4_己二 烯-1-醇、1，5_己二烯-3-醇、3-羥基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氫糠醇、1，5_戊 二醇、1，8-辛二醇、順-2- 丁烯-1，4- 二醇、三縮二乙二醇或異戊醇；胺類化合物為4-哌啶 基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙胺、乙二胺、嗎啉、 哌啶、哌嗪、咪唑、4- 二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙酰基哌嗪、4-芐基哌嗪或4-乙基哌 嗪；氨基酸酯鹽酸鹽為氨基酸的甲酯鹽酸鹽或乙酯鹽酸鹽；有機(jī)堿為三乙胺、4-二甲基胺 吡啶、1-羥基-苯并-三氮唑或吡啶；強(qiáng)堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀；鹵代溶劑為二氯甲烷或 氯仿。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物的制備方法，其特征在于所述 R1 或 & 為 OCOR5, R3 為 NR5COOR5, NR5COOH, NHR5, NR5OR5 或 OR5, R4 為 OH 時，所述衍生物的制 備包括以下操作步驟(1)將3，23-0-二?；讟逅?. 52 1. 08mmol溶于有機(jī)溶劑20 30mL中，加入草酰 氯0. 3 0. 6mL和催化劑0. 1 0. 2mL,在溫度_20°C 25°C條件下反應(yīng)4 12小時；(2)除去有機(jī)溶劑，得到沉淀；再加入有機(jī)溶劑20 30mL向溶液中加入3，23_0_二酰 基白樺酸4 10倍當(dāng)量的醇類化合物、胺類化合物或氨基酸酯鹽酸鹽的有機(jī)溶液，再加入 3，23-0- 二?；讟逅?倍當(dāng)量的有機(jī)堿，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C至120°C ；(3)除去有機(jī)溶劑后，再重新加入25 IOOmL有機(jī)溶劑，依次采用鹽酸、飽和食鹽水以 及水進(jìn)行洗滌，得到3，23-0- 二酰基-17-白樺酸酯或酰胺衍生物；(4)將步驟(3)所得3，23-0-二?；?17-白樺酸酯或酰胺衍生物0. 3 0. 6mmol溶 于30 60mL有機(jī)溶劑中，加入間氯過氧苯甲酸，反應(yīng)6 M小時，溫度為25°C 100°C， 依次采用飽和NaHCO3溶液、飽和食鹽水和水洗滌，得到3，23-0- 二?；?30-羥基-17-白 樺酸酯或酰胺衍生物；間氯過氧苯甲酸的加入量是與3，23-0-二?；?17-白樺酸酯或酰胺 衍生物等摩爾；(5)將步驟(4)所得衍生物0.3mmol溶解在四氫呋喃與甲醇以體積比2 5混合得到 的溶液14mL，加入2 6mol/L強(qiáng)堿溶液4mL，回流2 M小時，用酸調(diào)pH至中性或酸性， 得到3，23- 二羥基-30-羥基白樺酸酯或酰胺衍生物；其中，有機(jī)溶劑為二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氫呋喃或丙酮；催化劑為二甲基 甲酰胺(DMF)；醇類化合物為甲代烯丙醇、4-羥乙基嗎啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、2，4-己 二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羥基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氫糠醇、 1,5-戊二醇、1，8-辛二醇、順-2- 丁烯-1，4- 二醇、三縮二乙二醇或異戊醇；胺類化合物為 4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙胺、乙二胺、嗎啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4 - 二甲胺基哌啶、4 -甲基哌嗪、4 -乙酰基哌嗪、4 -芐基哌嗪或 4-乙基哌嗪；氨基酸酯鹽酸鹽為氨基酸的甲酯鹽酸鹽或乙酯鹽酸鹽；有機(jī)堿為三乙胺或吡 啶；強(qiáng)堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物在制備抗腫瘤藥物中的用途。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種23-羥基白樺酸衍生物在制備腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑中的 用途。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述腫瘤為肝癌、乳腺癌、宮頸癌、肺癌、 黑色素瘤、腸癌、腦瘤、胃癌、卵巢癌、白血病或腹水瘤。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種23-羥基白樺酸衍生物及其制備方法和用途。該衍生物具有如式(I)所示的結(jié)構(gòu)。該23-羥基白樺酸衍生物可用于抗腫瘤和作為腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑的用途。所述23-羥基白樺酸衍生物能有效地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，且在非毒性劑量下能顯著增加DOX對P-糖蛋白過表達(dá)細(xì)胞株HepG2/ADM的殺傷力。
文檔編號A61P35/02GK102108092SQ20111003204
公開日2011年6月29日 申請日期2011年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月29日
發(fā)明者于淼, 葉文才, 張冬梅, 曹惠慧, 王嬌, 舒暢, 藍(lán)平, 陳衛(wèi)民 申請人:暨南大學(xué)