純度、培養(yǎng)細(xì)胞的所 需表型、微泡的所需產(chǎn)量等。
[0129] 然后通過(guò)本發(fā)明的方法從培養(yǎng)基中取出微泡。
[0130] 在一個(gè)實(shí)施方式中，在微泡分離工序之前，使用選自于由抗炎性化合物、抗細(xì)胞凋 亡的化合物、纖維化抑制劑、能夠增強(qiáng)血管生成的化合物、免疫抑制化合物、促進(jìn)細(xì)胞存活 的化合物、化學(xué)治療劑、能增強(qiáng)細(xì)胞迀移的化合物、神經(jīng)源性化合物和生長(zhǎng)因子組成的組中 的至少一種試劑處理所述細(xì)胞。
[0131] 在一個(gè)實(shí)施方式中，在將細(xì)胞培養(yǎng)于收集微泡的培養(yǎng)基中的同時(shí)，使用選自于由 抗炎性化合物、抗細(xì)胞凋亡的化合物、纖維化抑制劑、能夠增強(qiáng)血管生成的化合物、免疫抑 制化合物、促進(jìn)細(xì)胞存活的化合物和生長(zhǎng)因子組成的組中的至少一種試劑處理所述細(xì)胞。
[0132] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗炎性化合物可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 509, 369中公開(kāi) 的化合物。
[0133] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗細(xì)胞凋亡的化合物可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 793, 945 中公開(kāi)的化合物。
[0134] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述纖維化抑制劑可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 331，298中公開(kāi) 的化合物。
[0135] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述能夠增強(qiáng)血管生成的化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng) 2004/0220393或美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0209901中公開(kāi)的化合物。
[0136] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述免疫抑制化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0171623 中公開(kāi)的化合物。
[0137] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述促進(jìn)細(xì)胞存活的化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng) 2010/0104542中公開(kāi)的化合物。
[0138] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述生長(zhǎng)因子可以是選自于由下列物質(zhì)組成的組 中的至少一種分子：TGF-P族的成員（包括TGF-P 1、2和3)，骨形態(tài)發(fā)生蛋白 (BMP-2、-3、-4、-5、-6、-7、-11、-12和-13)，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-1和-2,血小板衍生 的生長(zhǎng)因子-AA、-AB和-BB，富血小板血漿，胰島素生長(zhǎng)因子（IGF-I，II)，生長(zhǎng)分化因子 (⑶?-5、-6、-8、-10、-15)，血管內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源的生長(zhǎng)因子（￥￡6巧，多效生長(zhǎng)因子，內(nèi)皮素等。 其它藥物化合物可以包括例如煙酰胺、缺氧誘導(dǎo)因子1-a、胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、 GLP-1和GLP-2模擬體、和II、艾塞那肽-4、nodal、頭蛋白、NGF、視黃酸、甲狀旁腺激素、肌 腱蛋白-C、彈性蛋白原、凝血酶衍生的肽、抗菌肽、防衛(wèi)素、層粘連蛋白、含有粘合劑細(xì)胞外 基質(zhì)蛋白的細(xì)胞-和肝素-結(jié)合域的生物肽（諸如纖維連接蛋白和玻連蛋白）、和MAPK抑 制劑（諸如例如美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0209901和美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0132729中公開(kāi)的化合 物）。
[0139] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從生物流體中分離微泡，所述生物流體包含使用骨髓來(lái)源的 間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)物條件培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，其包含步驟：
[0140] a)獲得骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的群體并且以1:4的細(xì)胞稀釋度接種于燒瓶中，
[0141] b)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述細(xì)胞直到細(xì)胞80~90%匯合，
[0142] c)取出并澄清培養(yǎng)基以除去細(xì)胞碎片，
[0143] d)通過(guò)向澄清的培養(yǎng)基中添加沉淀劑以沉淀微泡，
[0144] e)收集沉淀的微泡并且洗滌該物質(zhì)以除去沉淀劑，和
[0145] f)將經(jīng)洗滌的微泡懸浮于溶液中用于貯存或隨后使用。
[0146] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從生物流體中分離微泡，所述生物流體包含使用骨髓來(lái)源的 單核細(xì)胞的培養(yǎng)物條件培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，其包含步驟：
[0147] a)獲得骨髓來(lái)源的單核細(xì)胞的群體并且以1:4的細(xì)胞稀釋度接種于燒瓶中，
[0148] b)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述細(xì)胞直到細(xì)胞80~90%匯合，
[0149] c)取出并且澄清所述培養(yǎng)基以除去細(xì)胞碎片，
[0150] d)通過(guò)向經(jīng)澄清的培養(yǎng)基中添加沉淀劑以沉淀微泡，
[0151] e)收集沉淀的微泡并且洗滌該物質(zhì)以除去沉淀劑，和
[0152] f)將經(jīng)洗滌的微泡懸浮于溶液中用于貯存或隨后使用。
[0153] 在一個(gè)實(shí)施方式中，在37°C下，在95%潮濕空氣和5% 0)2中，將骨髓來(lái)源的間充 質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)于補(bǔ)充有20%牛胎兒血清和1 %青霉素/鏈霉素/谷氨酰胺的包含a -MEM 的培養(yǎng)基中。
[0154] 在一個(gè)實(shí)施方式中，在37°C下，在95%潮濕空氣和5% 0)2中，將骨髓來(lái)源的單核 細(xì)胞培養(yǎng)于補(bǔ)充有20 %牛胎兒血清和1 %青霉素/鏈霉素/谷氨酰胺的包含a -MEM的培 養(yǎng)基中。
[0155] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心澄清培養(yǎng)基。
[0156] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述沉淀劑為具有6000平均分子量的聚乙二醇。在一個(gè)實(shí)施 方式中，以約8. 5w/v%的濃度使用聚乙二醇。在一個(gè)實(shí)施方式中，將聚乙二醇稀釋于具有 0. 4M最終濃度的氯化鈉溶液中。
[0157] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心收集沉淀的微泡。
[0158] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用具有l(wèi)OOkDa分子量切割的膜，使用磷酸鹽緩沖鹽水，通 過(guò)離心過(guò)濾洗滌分離的微泡。
[0159]包含血漿的牛物流體:在一個(gè)實(shí)施方式中,微泡獲片于血漿。所述血漿可以獲自于 健康個(gè)體或替代地獲自于具有特定疾病表型的個(gè)體。
[0160] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從包含血漿的生物流體分離微泡，包含步驟：
[0161] a)獲得血漿并且使用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋該血漿，
[0162] b)通過(guò)向稀釋的血漿中添加沉淀劑以沉淀微泡，
[0163] c)收集沉淀的微泡并且洗滌該物質(zhì)以除去沉淀劑，和
[0164] d)將經(jīng)洗滌的微泡懸浮于溶液中用于貯存或隨后使用。
[0165] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用培養(yǎng)基將所述血漿稀釋1:10。
[0166] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述培養(yǎng)基是a-MEM。
[0167] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述沉淀劑是具有6000的平均分子量的聚乙二醇。在一個(gè)實(shí) 施方式中，聚乙二醇以約8. 5w/v%的濃度使用。在一個(gè)實(shí)施方式中，將聚乙二醇稀釋于具有 0. 4M最終濃度的氯化鈉溶液中。
[0168] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心收集沉淀的微泡。
[0169] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用具有l(wèi)OOkDa分子量切割的膜，使用磷酸鹽緩沖鹽水，通 過(guò)離心過(guò)濾洗滌分離的微泡。
[0170]包含骨髓穿刺液的牛物流體:在一個(gè)實(shí)施方式中,微泡獲自于骨髓穿刺液。在一個(gè) 實(shí)施方式中，微泡獲自于骨髓穿刺液的細(xì)胞部分。在一個(gè)實(shí)施方式中，微泡獲自于骨髓穿刺 液的非細(xì)胞部分。
[0171] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從培養(yǎng)自骨髓穿刺液的細(xì)胞獲得微泡。在一個(gè)實(shí)施方式中，將 培養(yǎng)自骨髓穿刺液的細(xì)胞用于條件培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基，從該細(xì)胞培養(yǎng)基分離微泡。
[0172] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從包含骨髓穿刺液的生物流體分離微泡，其包含步驟：
[0173] a)獲得骨髓穿刺液并且將該骨髓穿刺液分離成非細(xì)胞部分和細(xì)胞部分，
[0174] b)稀釋所述非細(xì)胞部分，
[0175] c)澄清經(jīng)稀釋的非細(xì)胞部分以去除細(xì)胞碎片，
[0176] d)通過(guò)向經(jīng)稀釋的非細(xì)胞部分中添加沉淀劑以沉淀該非細(xì)胞部分中的微泡，
[0177] e)收集沉淀的微泡并且洗滌該物質(zhì)以除去沉淀劑，和
[0178] f)將經(jīng)洗滌的微泡懸浮于溶液中用于貯存或隨后使用。
[0179] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用培養(yǎng)基將所述非細(xì)胞部分稀釋1:10。
[0180] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述培養(yǎng)基為a-MEM。
[0181] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述經(jīng)稀釋的非細(xì)胞部分通過(guò)離心來(lái)澄清。
[0182] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述沉淀劑是具有6000平均分子量的聚乙二醇。在一個(gè)實(shí)施 方式中，聚乙二醇以約8. 5w/v%的濃度使用。在一個(gè)實(shí)施方式中，將聚乙二醇稀釋在具有 0. 4M最終濃度的氯化鈉溶液中。
[0183] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心收集沉淀的微泡。
[0184] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用具有l(wèi)OOkDa分子量切割的膜，使用磷酸鹽緩沖鹽水，通 過(guò)離心過(guò)濾洗滌分離的微泡。
[0185] 在一個(gè)實(shí)施方式中，將所述細(xì)胞部分進(jìn)一步加工以分離并收集細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施 方式中，將所述細(xì)胞部分進(jìn)一步加工以分離并收集骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施 方式中，將所述細(xì)胞部分進(jìn)一步加工以分離并收集骨髓來(lái)源的單核細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方式 中，將所述細(xì)胞部分用于條件培養(yǎng)培養(yǎng)基，隨后可以從該培養(yǎng)基得到微泡。
[0186] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從所述細(xì)胞部分分離微泡。在分離微泡之前可以將所述細(xì)胞 部分培養(yǎng)一段時(shí)間。替代地，在收集所述細(xì)胞部分之后可以立即從該細(xì)胞部分分離微泡。
[0187] 在一個(gè)實(shí)施方式中，還使用從由抗炎性化合物、抗細(xì)胞凋亡的化合物、纖維化抑制 劑、能夠增強(qiáng)血管生成的化合物、免疫抑制化合物、促進(jìn)細(xì)胞存活的化合物、化學(xué)治療劑、能 增強(qiáng)細(xì)胞迀移的化合物、神經(jīng)源性化合物和生長(zhǎng)因子組成的組中選擇的至少一種試劑處理 所述細(xì)胞部分。
[0188] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗炎性化合物可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 509, 369中公開(kāi) 的化合物。
[0189] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述抗細(xì)胞凋亡的化合物可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 793, 945 中公開(kāi)的化合物。
[0190] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述纖維化抑制劑可以選自于美國(guó)專利號(hào)6, 331，298中公開(kāi) 的化合物。
[0191] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述能夠增強(qiáng)血管生成的化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng) 2004/0220393或美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0209901中公開(kāi)的化合物。
[0192] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述免疫抑制化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0171623 中公開(kāi)的化合物。
[0193] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述促進(jìn)細(xì)胞存活的化合物可以選自于美國(guó)專利申請(qǐng) 2010/0104542中公開(kāi)的化合物。
[0194] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述生長(zhǎng)因子可以是選自于由下列物質(zhì)組成的組 中的至少一種分子：TGF-P族的成員（包括TGF-P 1、2和3)，骨形態(tài)發(fā)生蛋白 (BMP-2、-3、-4、-5、-6、-7、-11、-12和-13)，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-1和-2,血小板衍生 的生長(zhǎng)因子-AA、-AB和-BB，富血小板血漿，胰島素生長(zhǎng)因子（IGF-I，II)，生長(zhǎng)分化因子 (⑶?-5、-6、-8、-10、-15)，血管內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源的生長(zhǎng)因子（￥￡6巧，多效生長(zhǎng)因子，內(nèi)皮素等。 其它藥物化合物可以包括例如煙酰胺、缺氧誘導(dǎo)因子1-a、胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、 GLP-1和GLP-2模擬體、和II、艾塞那肽-4、nodal、頭蛋白、NGF、視黃酸、甲狀旁腺激素、肌 腱蛋白-C、彈性蛋白原、凝血酶衍生的肽、抗菌肽、防衛(wèi)素、層粘連蛋白、含有粘合劑細(xì)胞外 基質(zhì)蛋白的細(xì)胞-和肝素-結(jié)合域的生物肽（諸如纖維連接蛋白和玻連蛋白）、和MAPK抑 制劑（諸如例如美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0209901和美國(guó)專利申請(qǐng)2004/0132729中公開(kāi)的化合 物）。
[0195] 在一個(gè)實(shí)施方式中，在缺氧條件下培養(yǎng)所述細(xì)胞部分。
[0196] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述細(xì)胞部分是熱沖擊的。
[0197]包含尿液的牛物流體:在一個(gè)實(shí)施方式中,從尿液獲得微泡。所述尿液可以獲自健 康個(gè)體或替代地獲自具有特定疾病表型的個(gè)體。
[0198] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從包含尿液的生物流體分離微泡，其包含步驟：
[0199] a)獲得尿液樣品，
[0200] b)澄清所述尿液以除去細(xì)胞碎片，
[0201] c)通過(guò)向經(jīng)澄清的尿液中添加沉淀劑以沉淀微泡，
[0202] d)收集經(jīng)沉淀的微泡并且洗滌該物質(zhì)以除去沉淀劑，和
[0203] e)將經(jīng)洗滌的微泡懸浮于溶液中用于貯存或隨后使用。
[0204] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心澄清尿液。
[0205] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述沉淀劑是具有6000平均分子量的聚乙二醇。在一個(gè)實(shí)施 方式中，聚乙二醇以約8. 5w/v%的濃度使用。在一個(gè)實(shí)施方式中，將聚乙二醇稀釋于具有 0. 4M最終濃度的氯化鈉溶液中。
[0206] 在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心收集沉淀的微泡。
[0207] 在一個(gè)實(shí)施方式中，使用具有l(wèi)OOkDa分子量切割的膜，使用磷酸鹽緩沖鹽水，通 過(guò)離心過(guò)濾洗滌經(jīng)分離的微泡。
[0208] 在本發(fā)明的替代實(shí)施方式中，通過(guò)過(guò)濾澄清所述生物流體。在替代的實(shí)施方式中， 通過(guò)過(guò)濾收集沉淀的微泡。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)過(guò)濾澄清所述生物流體并且收集沉 淀的微泡。
[0209] 在某些實(shí)施方式中，所述生物流體和/或沉淀微泡的過(guò)濾需要施加外力。所述外 力可以是重力，可以是正常重力或離心力。替代地，所述外力可以是抽吸。
[0210] 在一個(gè)實(shí)施方式中，本實(shí)施方式提供了 一種用于促進(jìn)通過(guò)過(guò)濾澄清生物流體的設(shè) 備。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種用于促進(jìn)通過(guò)過(guò)濾收集沉淀的微泡的設(shè)備。在 一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種通過(guò)過(guò)濾促進(jìn)生物流體的澄清和沉淀的微泡的收集的 設(shè)備。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述設(shè)備還洗滌所述微泡。
[0211] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述設(shè)備是圖4中示出的設(shè)備。在這個(gè)實(shí)施方式中，將生物 流體加入到內(nèi)室中。該內(nèi)室具有第一過(guò)濾器，該第一過(guò)濾器具有能夠使得微泡通過(guò)但保留 尺寸大于該內(nèi)室中的微泡的任何顆粒的孔徑。在一個(gè)實(shí)施方式中，內(nèi)室的過(guò)濾器的孔徑為 lym。在這個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)生物流體從內(nèi)室通過(guò)所述過(guò)濾器時(shí)，大于lym的顆粒被保留 在內(nèi)室中，并且所有其它顆粒收集于內(nèi)室的底部和第二過(guò)濾器之間的區(qū)域中。
[0212] 所述第二過(guò)濾器具有不允許微泡通過(guò)的孔徑。在一個(gè)實(shí)施方式中，內(nèi)室的第二過(guò) 濾器的孔徑為0. 01 ym。在這個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)生物流體通過(guò)第二過(guò)濾器時(shí)，微泡被保留 在內(nèi)室的底部和第二過(guò)濾器之間的區(qū)域中，并且所有其它剩余顆粒和液體收集于設(shè)備的底 部。
[0213]本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以容易理解的是，例如，所述設(shè)備可以具有多于兩個(gè)不同 孔徑的過(guò)濾器，以選擇所需尺寸的微泡。
[0214]在一個(gè)實(shí)施方式中，向內(nèi)室中的生物流體中加入沉淀劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，向通 過(guò)了第一過(guò)濾器的濾液中加入沉淀劑。
[0215]本發(fā)明的設(shè)備利用的過(guò)濾膜可以由任何適合的材料制成，前提條件是該過(guò)濾膜不 會(huì)與生物流體反應(yīng)或結(jié)合生物流體中的組分。例如，所述過(guò)濾膜可以由低結(jié)合材料制成，諸 如例如聚醚砜、尼龍6、聚四氟乙烯、聚丙烯、zeta改性的玻璃微纖維、硝酸纖維素、醋酸纖 維素、聚偏二氟乙烯、再生的纖維素。
[0216] 本發(fā)明的微泡
[0217]在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約5000nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約lOOOnm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約500nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約400nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約300nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約200nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約100nm 的尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約50nm的 尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約20nm的 尺寸。在替代的實(shí)施方式中，通過(guò)電子顯微鏡測(cè)定，本發(fā)明的微泡具有約2nm至約10nm的 尺寸。
[0218]在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的微泡具有至少100kDa的分子量。
[0219]根據(jù)本發(fā)明的方法分離的微泡可以用于治療。替代地，根據(jù)本發(fā)明的方法分離的 微泡可以用于診斷試驗(yàn)。替代地，本發(fā)明的微泡可以用于改變或工程化細(xì)胞或組織。在將 本發(fā)明的微泡用于改變或工程化細(xì)胞或組織的情況下，所述微泡可以裝載、標(biāo)記有可以改 變或工程化細(xì)胞或組織的RNA、DNA、脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)、藥物、小分子、代謝物或它們 的組合。替代地，所述微泡可以自表達(dá)和/或含有RNA、DNA、脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)、藥 物、小分子、代謝物或它們的組合的細(xì)胞或組織中分離。
[0220] 本發(fā)明的微泡在診斷試驗(yàn)中的用途
[0221] 本發(fā)明的微泡可以在診斷試驗(yàn)中使用，該診斷試驗(yàn)檢測(cè)識(shí)別特定表型（諸如例如 病況或疾病、或疾病的階段或進(jìn)展）的生物標(biāo)志物。來(lái)自細(xì)胞起源（cell-of-origin)特異 性微泡的生物標(biāo)志物或標(biāo)志物可以用來(lái)確定疾病、病況、疾病階段和病況階段的治療方案， 并且也可以用來(lái)確定治療效果。來(lái)自起源細(xì)胞特異性微泡的標(biāo)志物還可以用來(lái)識(shí)別未明原 因的疾病的病況。
[0222] 如本文中所使用的，術(shù)語(yǔ)"生物標(biāo)志物"是指生物狀態(tài)的指示器。其是一種作為正 常的生物過(guò)程、致病過(guò)程、和對(duì)治療干預(yù)的藥理學(xué)反應(yīng)的指示器而客觀測(cè)量和評(píng)價(jià)的特征。 可以評(píng)估微泡的一個(gè)或多個(gè)生物標(biāo)志物用于表示表型的特征。所述生物標(biāo)志物可以是代謝 物、核酸、肽、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、抗原、碳水化合物或蛋白聚糖，諸如DNA或RNA。所述RNA可以為 mRNA、miRNA、snoRNA、snRNA、rRNAs、tRNAs、siRNA、hnRNA 或 shRNA〇
[0223] 受試者中的表型可以通過(guò)從該受試者獲得生物樣品并且分析來(lái)自該樣品的一種 或多種微泡來(lái)表征。例如，表征受試者或個(gè)體的表型可以包括：檢測(cè)疾病或病況（包括癥狀 前早期檢測(cè)），確定疾病或病況的預(yù)后、診斷和治療診斷，或確定疾病或病況的階段或進(jìn)展。 表征一種表型還可以包括：鑒定用于特定疾病、病況、疾病階段和病況階段的適合治療或治 療效果，疾病的進(jìn)展（特別是疾病的復(fù)發(fā)\轉(zhuǎn)移擴(kuò)散或疾病再發(fā)）的預(yù)測(cè)和可能性分析。表 型還可以是病況或疾病（諸如癌癥或腫瘤）的臨床上不同類型或亞型。表型確定也可以是 生理性病況的確定、或者器官痛苦或器官排斥（諸如移植后）的評(píng)估。本文的產(chǎn)品和方法 允許在個(gè)體的基礎(chǔ)上評(píng)價(jià)受試者，這在治療中可以提供更高效且經(jīng)濟(jì)決策的益處。
[0224]所述表型可以是美國(guó)專利7, 897, 356中列舉的任何表型。所述表型可以是腫瘤、 瘤或癌癥。通過(guò)本文所描述的產(chǎn)品或方法檢測(cè)或評(píng)估的癌癥包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、 肺癌、結(jié)腸癌、增生性息肉、瘤、結(jié)腸直腸癌、高度發(fā)育異常、低度發(fā)育異常、前列腺增生、前 列腺癌、黑色素瘤