由微生物生物質生產(chǎn)脂肪酸酯的直接方法
【專利說明】
[0001] 本申請要求2013年6月25日提交的待審美國臨時專利申請No. 61/838944的權 益。
技術領域
[0002] 本發(fā)明涉及一種由微生物生物質生產(chǎn)脂肪酸酯的方法。
【背景技術】
[0003] 微生物如真菌、酵母菌、細菌和藻類具有產(chǎn)生脂類的能力。在由脂類生產(chǎn)用作生物 柴油的脂肪酸酯的典型方法中，脂類首先由微生物生物質回收和然后進行酸或堿催化（例 如硫酸或氫氧化鈉）以將脂類酯交換為脂肪酸酯。
[0004] 脂類構成一大類天然分子，其包括脂肪、蠟、固醇、脂溶性維生素（如維生素 A、D、E 和K)、甘油單酯、甘油二酯、甘油三酯、磷脂類等。脂類的主要生物功能包括能量儲存、作為 細胞膜的結構組分和作為重要的信號分子。脂類通常累積在微生物細胞中。因此，已經(jīng)實 踐了從賦有脂類生產(chǎn)能力的微生物細胞中提取脂類的各種方法。為了從源材料釋放脂類， 可能有必要在脂類提取之前破壞細胞壁。破壞可以通過物理、酶促和/或化學進行。優(yōu)選 地，細胞破壞通過機械方式進行。已有若干方法用于物理破壞細胞，包括均化、超聲處理、冷 凍/解凍、擠出和機械破碎。但這些方法要求很長的時間來回收足夠量的脂類，因此不能進 行有效的提取。例如，濕的微生物生物質均化可能產(chǎn)生使隨后提取步驟困難的乳液。
[0005] 因此，希望開發(fā)由微生物生物質生產(chǎn)用作生物柴油的脂肪酸酯的更加成本有效的 有效方法。

【發(fā)明內容】

[0006] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，可以將微生物油提取和酯交換組合為本發(fā)明的一次通過的原位或直接 酯交換方法。
[0007] 在一個實施方案中，提供一種生產(chǎn)脂肪酸酯的方法，其包括：(a)提供微生物生物 質；(b)使微生物生物質與包含醇和至少一種α -羥基磺酸的溶液接觸，由此產(chǎn)生包含至少 一種脂肪酸酯的經(jīng)酸處理的生物質；和（c)由所述經(jīng)酸處理的生物質回收所述脂肪酸酯。
[0008] 在又一個實施方案中，提供一種生產(chǎn)脂肪酸酯的方法，其包括：(a)提供微生物生 物質；(b)使微生物生物質與包含醇和至少一種α -羥基磺酸的溶液接觸，由此產(chǎn)生包含至 少一種脂肪酸酯的經(jīng)酸處理的生物質；（c)由所述經(jīng)酸處理的生物質回收所述脂肪酸酯； 和（d)通過加熱和/或降低壓力從所述經(jīng)酸處理的生物質除去其組分形式的α_羥基磺 酸，以產(chǎn)生包含基本上不含α-羥基磺酸的經(jīng)酸處理的生物質的除去酸的產(chǎn)物。
[0009] 在另一個實施方案中，所述方法包括將除去的α -羥基磺酸作為組分或以其重新 組合形式循環(huán)至步驟（b)。
[0010] 在又一個實施方案中，提供一種組合物，其包含：(a)包含至少一種脂類的微生物 生物質，（b)至少一種α_羥基磺酸，（c)醇，和（d)水。在又一個實施方案中，提供一種組 合物，其包含：（a)生物質殘渣，（b)醇，（c)至少一種α-羥基磺酸，（d)水，和（e)至少一 種脂肪酸烷基酯。
[0011] 本發(fā)明的特征和優(yōu)點對于本領域技術人員是明顯的。盡管本領域技術人員可以進 行許多改變，但這些改變在本發(fā)明精神內。
【附圖說明】
[0012] 附圖1描述了本發(fā)明一些實施方案的某些方面，和不應用于限制或限定本發(fā)明。
[0013] 附圖1示意性描述了本發(fā)明處理方法的實施方案的流程圖。
【具體實施方式】
[0014] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過使用α -羥基磺酸，可使微生物生物質通過如下過程在單一步驟 中原位轉化為生物柴油：破壞微生物生物質細胞，釋放脂溶性組分和在醇存在下催化轉化 為脂肪酸酯（脂肪酸烷基酯）。α-羥基磺酸有效用于破壞微生物細胞壁和催化轉化，改進 微生物生物質的脂肪酸酯收率。此外，α-羥基磺酸可逆轉化為容易除去和可回收的材料， 例如通過在高壓下均化不會形成乳液。
[0015] 在微生物細胞中包含脂類的微生物如微生物生物質可以通過本發(fā)明方法處理。微 生物生物質可通過光合作用或通過發(fā)酵生長。微生物生物質可以包括如微藻類、酵母菌、真 菌或細菌。
[0016] 可用于本發(fā)明處理中的α -羥基磺酸的通式為：
[0018] 其中&和1?2各自為氫或具有至多約9碳原子的烴基，其可能包含或可能不包含 氧。該α-羥基磺酸可以為上述酸的混合物。通?？梢愿鶕?jù)下文一般反應式1通過如下過 程制備該酸：使至少一種羰基化合物或羰基化合物的前體（如三氧雜環(huán)己烷和低聚甲醛） 與二氧化硫或二氧化硫的前體（如硫和氧化劑或者三氧化硫和還原劑）和水反應。
[0020] 其中札和1?2各自為氫或具有至多約9碳原子的烴基或它們的組合。
[0021] 發(fā)現(xiàn)在用于制備本發(fā)明使用的α -羥基磺酸的羰基化合物的描述性實例中：
[0022] 札=尺2=以甲醛）
[0023] R1= H，R2= CH3(乙醛）
[0024] 札=H，R 2 = CH 2CH3 (丙醛）
[0025] R!= H，R2= CH2CH2CH3 (正丁醛）R!= H，R2= CH(CH3)2(異丁醛）
[0026] R!= H，R2= CH20H(乙醇醛）
[0027] R1= H，R2= CHOHCH20H(甘油醛）
[0028] R1= H，R2= C( = 0)H(乙二醛）
[0030] R!= R2= CH3(丙酮）
[0031] R!= CH20H，R2= CH3(丙酮醇）
[0032] R1= CH 3, R2= CH 2CH3 (甲乙酮）
[0033] CH3，R2= CHC(CH3)2(亞異丙基丙酮）
[0034] R1= CH3, R2= CH2CH(CH3)2(甲基異丁基酉同）
[0035] R!，R2 = (CH 2) 5 (環(huán)己酮）或
[0036] R1= CH3，R2= CH2C1(氯丙酮）
[0037] 羰基化合物和它的前體可以為上述化合物的混合物。例如，混合物可以羰基化合 物或它的前體，如已知在高溫下熱轉化為甲醛的三氧雜環(huán)己烷或可通過任何已知的方法使 醇脫氫為醛而轉化為醛的醇。這種由醇至醛的轉化的實例描述如下。羰基化合物源的實例 可為由快速熱解油產(chǎn)生的羥基乙醛和其它醛和酮的混合物，例如描述于"Fast Pyrolysis and Bi〇-〇il Upgrading, Biomass-t〇-Diesel Workshop"，Pacific Northwest National Laboratory，Richland，Washington，2006年9月5-6日。幾基化合物和它的前體還可以為 酮和/或醛的混合物（含或不含可轉化為酮和/或醛的醇），優(yōu)選1-7個碳原子。
[0038] 通過組合有機羰基化合物、S02和水來制備α -羥基磺酸為一般反應和對于丙酮如 反應式2所示。
[0040] α -羥基磺酸看上去與HC1 -樣強（如果不是比HC1更強的話），因為據(jù)報道加合 物的含水溶液與NaCl反應釋放出更弱的酸HC1 (參見US3, 549, 319)。反應式1中的反應是 真正的平衡，其導致了容易的酸可逆性。也就是說，當加熱的時候，平衡移向初始羰基、二氧 化硫和水（組分形式）。如果揮發(fā)性組分（如二氧化硫）允許經(jīng)由氣化或其它方法離開反 應混合物，則酸反應完全逆轉且溶液有效變?yōu)橹行?。因此，通過增加溫度和/或降低壓力， 由于Le ChStelier原理，可以將二氧化硫驅除和反應完全逆轉，羰基化合物的命運取決 于所應用材料的性質。如果羰基化合物也具有揮發(fā)性（如乙醛），則該材料也容易以蒸氣 相除去。羰基化