一類鹵代苯雙?；S胺類的ampk激活劑、其制備方法及用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及2型糖尿病治療的藥物領(lǐng)域。更具體地講，本發(fā)明涉及對(duì)2型糖尿病 具有治療作用的一類鹵代苯雙酰基芐胺AMPK激活劑、其制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是由多病因引起的疾病過(guò)程，影響到全球6%的人口。預(yù)計(jì)到2025年，患病 人數(shù)會(huì)再增加一倍達(dá)到3億。糖尿病的最重要的臨床病理特征是血漿葡萄糖（血糖）濃度 增高。血糖濃度增高是導(dǎo)致糖尿病的各種臨床癥狀的主要原因。未控制的高血糖導(dǎo)致諸多 糖尿病并發(fā)癥，如增加微血管和大血管疾病風(fēng)險(xiǎn)，包括腎病，神經(jīng)病，視網(wǎng)膜病，高血壓，腦 缺血和冠心病等。因此，降低血糖是治療和預(yù)防糖尿病及其并發(fā)癥的關(guān)鍵。
[0003] AMP(腺苷一磷酸）活化的蛋白激酶（AMPK)作為一種重要的蛋白激酶參與多種代 謝過(guò)程。AMPK在調(diào)節(jié)肌體能量代謝的平衡方面起總開關(guān)作用。在肌肉和肝臟中，AMPK的活 化增強(qiáng)了葡萄糖的攝取、脂肪酸氧化作用和胰島素敏感性，并且減少了葡萄糖、膽固醇和甘 油三酯的產(chǎn)生。因此，AMPK及其信號(hào)通路是2型糖尿病有效藥物作用靶點(diǎn)。事實(shí)上，目前在 臨床上廣泛應(yīng)用的雙胍類降糖藥，如二甲雙胍、苯乙雙胍和丁福明治就是AMPK激活劑。其 中二甲雙胍是目前臨床上應(yīng)用最廣泛的一線抗糖尿病藥物，不僅是首選的糖尿病治療藥物 而且對(duì)正常血糖無(wú)影響。這表明AMPK是II型糖尿病藥物治療的關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。但是，目 前這些在臨床上廣泛使用的雙胍類AMPK激活劑的一個(gè)嚴(yán)重的副作用是會(huì)導(dǎo)致乳酸性酸中 毒。乳酸性酸中毒是一類嚴(yán)重的代謝類疾病，一旦發(fā)生將危及生命。正是由于可導(dǎo)致乳酸 性酸中毒，苯乙雙胍等雙胍類AMPK激活劑在歐美等國(guó)已被終止臨床應(yīng)用。雖然二甲雙胍導(dǎo) 致乳酸性酸中毒的幾率較苯乙雙胍低，但在口服降糖藥中，其導(dǎo)致嚴(yán)重毒副反應(yīng)及導(dǎo)致死 亡的臨床報(bào)告數(shù)最多，因此，研發(fā)新型、非雙胍類AMPK激活劑作為糖尿病的治療藥物具有 及其重要的臨床意義。
[0004] 本發(fā)明公開了一類含鹵代苯雙酰胺基芐胺結(jié)構(gòu)的AMPK激活劑，這些化合物可用 于制備治療2型糖尿病的藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種具有通式I的良好活性的AMPK激動(dòng)劑。本發(fā)明的 另一個(gè)目的是提供制備具有通式I的化合物的方法。現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
進(jìn) 行具體描述。
[0006] 本發(fā)明具有通式I的化合物具有下述結(jié)構(gòu)式：
[0007]
[0008] 其中，X選自鹵素取代基。
[0009] 優(yōu)選通式I的化合物具有以下結(jié)構(gòu)，
[0010]
[0011] 本發(fā)明所述通式I化合物通過(guò)以下路線合成：
[00121
[0013] 化合物II與丙烯酰胺在加熱的條件下發(fā)生反應(yīng)，得到III;化合物III在堿存在 下與CH3C0C1發(fā)生反應(yīng)，得到化合物IV;化合物V和化合物VI發(fā)生縮合反應(yīng)，得到化合物VII;化合物VII在光照下用N-溴代丁二酰亞胺（NBS)處理，得到化合物VIII;化合物IV 與化合物VIII在堿存在下發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物I;X的定義如前所述。
[0014] 本發(fā)明所述通式I化合物具有AMPK激活作用，可作為有效成分用于制備2型糖尿 病治療藥物。本發(fā)明所述通式I化合物的活性是通過(guò)受體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證的。
[0015] 本發(fā)明的通式I化合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量約 在lmg-1000mg/人范圍內(nèi)，分為一次或數(shù)次給藥。實(shí)際服用本發(fā)明通式I化合物的劑量可 由醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來(lái)決定。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。需要說(shuō)明的是，下述實(shí)施例僅是用于 說(shuō)明，而并非用于限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)所做出的各種變化均應(yīng) 在本申請(qǐng)權(quán)利要求所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0017] 實(shí)施例1化合物1-1的合成
[0018]
[0019] A.化合物III的合成
[0020] 化合物11(0.87g，lOmmol)和丙烯酰胺（0.71g，lOmmol)溶于10mL二甲苯中，而后 升溫回流過(guò)夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物直接減壓蒸去溶劑，得到的殘余物使用柱層 析純化，得到化合物III，白色固體。ESI-MS，m/z= 159([M+H]+)。
[0021] B.化合物IV-1的合成
[0022] 二異丙胺（1.01g，lOmmol)溶于10mL干燥的THF中，在氮?dú)鈿夥障吕鋮s到-78°C， 攪拌，慢慢用注射器向體系中加入1. 6M的n-BuLi的正己烷溶液（6. 25mL，lOmmol)，滴加完 畢后，反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù)攪拌10分鐘，而后將由化合物III(1.llg，7mmol)和3mL 干燥的THF配成的溶液慢慢滴加到反應(yīng)體系中，滴加完畢后，反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù) 攪拌10分鐘。用注射器將由乙酰氯（〇. 78g，lOmmol)和lmL干燥的THF配制的溶液慢慢滴 加到反應(yīng)體系中，滴加完畢后反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù)攪拌30分鐘，而后再在室溫下攪 拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2C12 (60mLX3)萃取，合并萃取相，用 鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使 用柱層析純化，得到化合物IV-1，白色固體。ESI-MS，m/z= 201([M+H]+)。
[0023] C.化合物VII-1的合成
[0024]對(duì)甲基苯乙酮V(l. 34g,lOmmol)和 72g,lOmmol)溶于 10mL乙醇中，加入 冰醋酸lmL，而后反應(yīng)混合物在氮?dú)庀禄亓鬟^(guò)夜，TLC檢測(cè)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入 200mL冰水中，攪拌，用CH2C12 (60mLX3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHC03溶液和鹽水 洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱 層析純化，得到化合物VII-1，白色固體。ESI-MS，m/z= 289([M+H]+)。
[0025] D.化合物VIII-1的合成
[0026]化合物VII-12. 30g, 8mmol)和NBS(1. 78g,lOmmol)溶于 15mL0：14中，在 500W白 熾燈照射下回流3小時(shí)，TLC檢查發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌， 用CH2C12(60mLX3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHC0^§液和鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干 燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使用柱層析純化，得到化合 物VIII-1，白色固體。ESI-MS，m/z= 368([M+H]+)。
[0027]E.化合物1-1的合成
[0028] 二異丙胺（0. 61g, 6mmol)溶于6mL干燥的THF中，在氮?dú)鈿夥障吕鋮s到-78°C，攪 拌，慢慢用注射器向體系中加入1. 6M的n-BuLi的正己烷溶液（3. 75mL，6mmol)，滴加完畢 后，反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù)攪拌10分鐘，而后將由化合物IV-1 (1.〇〇g，5_〇1)和3mL 干燥的THF配成的溶液慢慢滴加到反應(yīng)體系中，滴加完畢后，反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù) 攪拌10分鐘。用注射器將由VIII-1 (2. 20g，6mmol)和5mL干燥的THF配制的溶液慢慢滴 加到反應(yīng)體系中，滴加完畢后反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù)攪拌30分鐘，而后再在室溫下攪 拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2C12 (60mLX3)萃取，合并萃取相，用 鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物使 用柱層析純化，得到化合物1-1，白色固體。ESI-MS，m/z= 487([M+H]+)。
[0029] 實(shí)施例2-6
[0030] 參照實(shí)施例1的方法，合成了下表所列化合物。
[0031]
[0032] 實(shí)施例7化合物體外對(duì)AMPK的激活作用
[0033] 在大腸桿菌中表達(dá)人重組AMPK酶并在酶活性測(cè)定之前在體外用LKB1重新活化。 使用兩種基于熒光的技術(shù)檢測(cè)AMPK酶活性（a-篩選和Delfia)并在微孔板（分別包含 25mMTris/HCl緩沖液、pH7. 5、含有 100yMATP/50mM的Ifepes緩沖液，25mMTris/HCl緩 沖液、pH7. 4、含有125yMATP)上在合成的膚底物（AMARAASAAALARRR，即〃AMARAA〃膚）和 連續(xù)稀釋的激活劑存在下進(jìn)行。通過(guò)加入AMPK(50-100ng)引發(fā)反應(yīng)?；旌虾螅瑢遄釉谑?溫下孵育30分鐘。通過(guò)使用抗磷酸化絲氨酸的抗體以測(cè)定摻入AMARAA中的磷酸量來(lái)檢測(cè) 酶活性?；钚砸詫?duì)照（基礎(chǔ)活性表示為1〇〇)的百分率（％ )表示。
[0034] 測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表。
[0035]
[0036] 從上表結(jié)果可以看出，本發(fā)明的化合物對(duì)AMPK具有很強(qiáng)的激活作用，可以作為制 備治療2型糖尿病的的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.具有通式I結(jié)構(gòu)的化合物，化合物II與丙烯酰胺在加熱的條件下發(fā)生反應(yīng)，得到III;化合物III在堿存在下與CH3COCl發(fā)生反應(yīng)，得到化合物IV;化合物V和化合物VI發(fā)生縮合反應(yīng)，得到化合物VII;化 合物VII在光照下用N-溴代丁二酰亞胺處理，得到化合物VIII;化合物IV與化合物VIII在堿存在下發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物I;X的定義如權(quán)利要求1-2任一所述。4.權(quán)利要求1-2之一所定義的通式I化合物在制備治療2型糖尿病藥物方面的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及與2型糖尿病相關(guān)的藥物領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一類含鹵代苯雙酰胺基芐胺結(jié)構(gòu)的黃原酸類AMPK激活劑、其制備方法、以及在制備2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。其中，X選自鹵素取代基。
【IPC分類】A61P3/10, A61K31/5375, C07D295/15
【公開號(hào)】CN105037296
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510352998
【發(fā)明人】江河
【申請(qǐng)人】佛山市賽維斯醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年11月11日
【申請(qǐng)日】2015年6月24日