7. 26-7. 22 (m, 2H), 6. 87-6. 83 (m, 2H), 6. 29 (s, 1H), 5. 49 (d, / = 3.OHz, 1H), 4.29-4.21 (m, 2H), 4.01 (q,J= 7.0Hz, 2H), 1.40 (t,J= 7.0Hz, 3H), 1.29 (t, /=7.0Hz, 3H).13CNMR(125MHz,CDCl3) 8 162.2, 159.6, 150.5, 137.6, 131.2, 128.4, 115.2, 63.7, 62.3, 58.6, 54.3, 14.9, 14. 2.HRMS(ESI):m/zcalcd for(C13H17N304+H) +: 292.1292;found: 292. 1293〇
[0025] 實(shí)施例 7 3-氧代-5-(苯并[1,3]二氧-5-基）-2, 3, 4, 5-四氫-1,2, 4-三 嗪-6-甲酸乙酯
合成步驟同實(shí)施例1，只是將（Z)-2_疊氣_3_苯基丙稀酸乙酯換成（刀-2_疊氣_3_(苯 并[1，3]二氧-5-基）丙烯酸乙酯，得到白色固體，收率為93%。
[0026]Whitesolid,m.p. >240 0C,1HNMR(500MHz,CDCl3)S8.04 (s，1H)， 6. 84-6. 82 (m, 2H), 6. 78 (d, / = 8. 5Hz, 1H), 5. 97 (s, 2H), 5. 48 (d, / = 3. 0 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.32-4.23 (m, 2H),1.32 (t, / = 7.0Hz, 2H).13CNMR(125 MHz,CDCl3)S162.1，153.4，149.5，148.6，137.4，120.8，118.3，108.9，107.4， 101.6, 62.5, 54.9, 18.6.HRMS(ESI):m/zcalcdfor(C13H13N305+H) +: 292.0928; found: 292.0932。
[0027] 實(shí)施例8 3-氧代-5- (4-溴代苯基)-2, 3, 4, 5-四氫-1，2, 4-三嗪-6-甲酸乙 酯
合成步驟同實(shí)施例1，只是將（Z)-2-疊氮-3-苯基丙烯酸乙酯換成⑵-2-疊 氮-3-(4-溴苯基）丙烯酸乙酯，得到淺黃色固體，收率為84%。
[0028]Lightyellowsolid,m.p. 201.6-203.9 °C,1HNMR(500MHz,CDCl3) 8 8.46 (s, 1H), 7.50 (d, /=8. 5Hz, 2H), 7.24 (d, / = 8.5Hz, 2H),6.18 (s, 1H),5.55 (d, /= 1.5Hz, 1H), 4.32-4.21 (m, 2H),1.31 (t,J= 7.0Hz, 3H).13CNMR(125 MHz,CDCl3)S161.9， 149.9， 137.8， 136.8， 132.4， 128.6， 123. 3，62.4，54. 2， 14.I.HRMS(ESI):m/zcalcdfor(C12H12BrN303+H) +: 326.0135;found: 326. 0137〇
[0029] 實(shí)施例9 3-氧代-5- (2-氯代苯基）-2, 3, 4, 5-四氫-1，2, 4-三嗪-6-甲酸乙 酯
合成步驟同實(shí)施例1，只是將（Z)-2-疊氮-3-苯基丙烯酸乙酯換成⑵-2-疊 氮-3-(3-氯苯基）丙烯酸乙酯，得到白色固體，收率為80%。

/=7. 5Hz, 1H), 7.29 (dd, /=8.0,I. 5Hz, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.35 (s, 2H).13C NMR(125MHz，CDC13)S146.2，136.3，133.4，131.1，130.9，127.9，121.5，43.3. HRMS(ESI):m/zcalcdfor(C9H9BrN3OH) +:253. 9924;found: 253.9923。
[0043] 實(shí)施例16 5-苯基-6- (4-溴苯甲?；?4, 5-二氫-1，2,4-三嗪-3-酮
合成步驟同實(shí)施例1，只是將（Z)-2-疊氮-3-苯基丙烯酸乙酯換成⑵-2-疊氮 基-1- (4-溴苯基）-3-苯基丙烯-1-酮，得到白色固體，收率為54%。
[0044] Whitesolid,m.p. 233. 1-234.0°C,1HNMR(500MHz,DMSO) 8 10.94 (d,J =2. 0Hz, 1H)，8. 34 (s，1H)，7. 80-7. 79 (m, 2H)，7. 62-7. 58 (m, 3H)，7. 49-7. 46 (m，2H)，7.26 (d，/= 8.5Hz, 2H)，5.63 (d，/= 3.0Hz, 1H).13CNMR(125 MHz,DMSO) 8 189. 3, 149. 5, 141. 8, 139. 8, 136.I, 132. 6, 132. 0, 129. 8, 128. 8, 128.1, 121.4, 51.7.HRMS(ESI):m/zcalcdfor(C16H12BrN302+H) +: 358. 0186;found: 358.0193。
[0045] 實(shí)施例17 6-(嗎啉-4-甲?；?4, 5-二氫-1，2,4-三嗪-3-酮
合成步驟同實(shí)施例1，只是將（Z)-2-疊氮-3-苯基丙烯酸乙酯換成⑵-2-疊氮 基-1-嗎啉基丙烯-1-酮，得到黃色液體，收率為64%。
[0046] Yellowoil,1HNMR(500MHz,DMSO) 8 10.07 (d, / =I. 5Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.99 (d, /= 1.5Hz, 2H), 3.59 (m, 4H),3.53-3.51 (m, 4H).13CNMR(125 MHz,DMSO) 8 162. 8, 151. 6, 138. 8, 66. 0, 47. 0, 43. 8, 42.I, 40. 2.HRMS(ESI) :m/z calcdfor(CsH13N403+H) +:213. 0982;found: 213.0984。
[0047] 實(shí)施例18 抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn) 以A431 (人表皮癌細(xì)胞）為測(cè)試細(xì)胞株，采用MTT法對(duì)部分合成化合物進(jìn)行體外抗腫 瘤細(xì)胞活性評(píng)價(jià)，將待測(cè)化合物配成一定的濃度與A431細(xì)胞株共孵育72個(gè)小時(shí)，測(cè)定其對(duì) 癌細(xì)胞的抑制率，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0048] 檢測(cè)方法具體如下： 1.收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A431細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞懸液濃度為3500個(gè)/孔； 2. 加入待測(cè)化合物使其達(dá)到每孔的終濃度為20ymmol/L; 3.在37 °C，5%CO2條件下孵育72個(gè)小時(shí)； 4. 每孔加入20yL的MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4個(gè)小時(shí)； 5.除去上清液，每孔加入150yL的DMS0,混合5分鐘，在酶標(biāo)儀570nm波長(zhǎng)下檢測(cè)其 吸光度值； 6.抑制率的計(jì)算公式為：細(xì)胞抑制率=1-(加藥組OD/對(duì)照組OD)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物，其特征在于，結(jié)構(gòu)式如下：其中： Ri為氨、吸電子和給電子取代的苯基、脂肪控、奈基或者巧喃， R2為醋基、酬基、甲酯胺或者吸電子和給電子取代的苯基。2. 根據(jù)權(quán)利要求書(shū)1所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物，其特征在于，選自 W下任何一種： 3-氧代-5-苯基-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (4-甲基苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (4-甲氧基苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (3-甲氧基苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (4-乙氧基苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5-(苯并[1，3]二氧-5-基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (4-漠代苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5- (2-氯代苯基）-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5-奈基-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 5- (巧喃-2-基）-3-徑基-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 3-氧代-5-丙基-2, 3, 4, 5-四氨-1，2, 4-S嗦-6-甲酸乙醋， 6- 苯基-4, 5-二氨-1，2,4-S嗦-3-酬， 6- (3-甲氧基苯基）-4, 5-二氨-1,2,4-S嗦-3-酬， 6- (2-漠代苯基）-4, 5-二氨-1，2,4-S嗦-3-酬， 5- 苯基-6- (4-漠苯甲酯基）-4, 5-二氨-1，2,4-S嗦-3-酬， 6- (嗎嘟-4-甲酯基）-4, 5-二氨-1,2,4-S嗦-3-酬。3. 權(quán)利要求1或2所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物的制備方法，其特征在 于，通過(guò)W下步驟實(shí)現(xiàn)： (1)將締控疊氮類(lèi)化合物、端位保護(hù)的阱在非質(zhì)子溶劑中于25-130度反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間 為8-10個(gè)小時(shí)，締控疊氮類(lèi)化合物與端位保護(hù)的阱的摩爾比為1:1. 5， 所述的締控疊氮類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)式為：(2 )將步驟（1)所得到的反應(yīng)液濃縮后，用水和乙酸乙醋萃取，所得到的有機(jī)相經(jīng)干燥 濃縮后得到殘留物，將殘留物進(jìn)行硅膠柱層析，得到目標(biāo)化合物5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi) 化合物； 反應(yīng)式：所述的Ri為氨、吸電子和給電子取代的苯基、脂肪控、奈基或者巧喃，R2為醋基、酬基、 甲酯胺或者吸電子和給電子取代的苯基。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物的制備方法，其特征在 于，所述溫度范圍為25-1305. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物的制備方法，其特征在 于，所述的端位保護(hù)的阱為叔下氧幾基修飾的阱或者是苯氧酷基修飾的阱。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物的制備方法，其特征在 于，所述的非質(zhì)子性溶劑為乙臘、1，4-二氧六環(huán)、N，N-二甲基甲酯胺、甲苯。7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種5, 6-二取代氮雜喀晚酬類(lèi)化合物在制備抑制腫瘤 細(xì)胞活性的藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明通過(guò)一種5,6-二取代氮雜嘧啶酮類(lèi)化合物，通過(guò)在加熱條件下，烯烴疊氮與肼基甲酸酯選擇性地發(fā)生反應(yīng)合成官能團(tuán)化4,5-二氫-1,2,4-三嗪<b>-</b>3(2<i>H</i>)-酮類(lèi)化合物。本發(fā)明提供的制備方法操作簡(jiǎn)單，原料易得，能同時(shí)引入多個(gè)取代基，產(chǎn)物易分離。本發(fā)明制備所得的5,6-二取代氮雜嘧啶酮類(lèi)化合物具有一定的體外抑制腫瘤細(xì)胞活性，可作為抗腫瘤先導(dǎo)化合物。結(jié)構(gòu)式如圖。
【IPC分類(lèi)】A61P35/00, C07D253/06, C07D405/04
【公開(kāi)號(hào)】CN105001172
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510373560
【發(fā)明人】陳文騰, 唐湃, 郭閃閃, 羅婧, 邵加安, 俞永平
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年6月30日