一種有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種應(yīng)用混合溶劑法制備晶體的方法，確切地說(shuō)，是一種有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]釩是人和動(dòng)物體內(nèi)必需的微量元素，在葡萄糖的代謝過(guò)程中起著非常重要的潛在作用。蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶(PTPlB)參與多種有機(jī)體的生理過(guò)程，并與胰島素的敏感性密切相關(guān)，研宄者將PTPlB酶作為糖尿病治療的新靶點(diǎn)，在IC5tl值(抑制率達(dá)50%時(shí)釩制劑的濃度)較低的情況下，任何對(duì)PTPlB酶有較高抑制率的物質(zhì)，都可以促進(jìn)胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)，就可能成為一種潛在的治療糖尿病的新藥。研宄發(fā)現(xiàn)，一些無(wú)機(jī)釩酸鹽及釩有機(jī)配體的配合物具有類(lèi)胰島素的特殊功能，目前已有少數(shù)釩的化合物投入到臨床試驗(yàn)階段。無(wú)機(jī)釩酸鹽的毒性大、脂溶性小、生物利用度低，因而影響了它在藥物領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。鑒于此，提高釩化合物的生物利用度并降低它的毒性至關(guān)重要，解決這些問(wèn)題的常用方法是選擇合適的有機(jī)分子配體，合成具有一定穩(wěn)定性的釩配合物。釩的配合物比簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)鹽脂溶性好、細(xì)胞滲透能力強(qiáng)，因而人們普遍認(rèn)為含釩配合物有可能成為一類(lèi)理想的糖尿病治療劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于針對(duì)極少數(shù)的釩的化合物具有很好的類(lèi)胰島素活性而提供的一種希夫堿氧釩配合物晶體的制備方法。
[0004]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的具體技術(shù)方案是:
第一步將乙酰丙酮氧釩溶于無(wú)水甲醇和分析純?nèi)燃淄榈幕旌先軇┲?，三者的摩爾比?.9?1.1:49?49.5:24.5?25 ;將與乙酰丙酮氧釩相同物質(zhì)的量的丙氨酸溶于蒸餾水中，丙氨酸與蒸餾水的摩爾比為0.9?1.1:110.5?111.5 ;將兩個(gè)溶液分別攪拌至溶質(zhì)完全溶解；然后將乙酰丙酮氧釩溶液與丙氨酸的水溶液混合轉(zhuǎn)移到反應(yīng)容器中，于60°C的條件下加熱回流3小時(shí)，得到藍(lán)綠色溶液；
第二步將與上述乙酰丙酮氧釩相同物質(zhì)的量的2，2’ -聯(lián)吡啶溶解于無(wú)水甲醇溶液中，兩者的摩爾比為0.8?1.2:74?74.5，溶解后將其逐滴加入到已得的藍(lán)綠色溶液中，于60°C條件下繼續(xù)攪拌回流3小時(shí)后，得到棕褐色溶液；冷卻，將溶液過(guò)濾，濾液于0°C?4°C的冰箱中放置3?5天析出黃褐色菱形晶體；
第三步取出晶體，先用無(wú)水甲醇清洗三次，然后用無(wú)水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中，I小時(shí)后得到干燥純凈的晶體即為所述有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體，晶體在室溫條件下穩(wěn)定存在，產(chǎn)率為80%?87% ；
第四步將晶體配制成以二甲基亞砜作溶劑、濃度為20微克/毫升的溶液做活性測(cè)試和結(jié)構(gòu)分析，測(cè)試結(jié)果晶體表現(xiàn)出生物活性，對(duì)PTPlB酶的平均抑制率為70.61?70.69%，IC50=Il.27 ?11.36 微克 / 毫升。
[0005]本發(fā)明與已有的技術(shù)相比，具有以下顯著優(yōu)點(diǎn): ⑴、所合成的配合物與同類(lèi)希夫堿釩配合物相比具有較高的PTPlB酶抑制率(20微克/毫升的配合物濃度(二甲基亞砜作溶劑)，對(duì)PTPlB酶的抑制率為70.61?70.69%，IC50=Il.27 ?11.36 微克 / 毫升)。
[0006](2)、本發(fā)明合成出來(lái)的希夫堿氧釩配合物與其他希夫堿的不同之處在于其反應(yīng)過(guò)程中提供釩源的乙酰丙酮氧釩中的乙酰丙酮參與了配位，與丙氨酸形成了希夫堿。
[0007]⑶、與同類(lèi)希夫堿的多步兼高溫條件的合成方法相比，采用一步合成并使用混合溶劑即可以得到晶形非常好的配合物晶體；并且產(chǎn)率較高，平均產(chǎn)率為83%。
[0008]⑷、方法簡(jiǎn)單，易操作，用時(shí)短；合成的晶體與同類(lèi)化合物相比具有很好的抗糖尿病活性。
【具體實(shí)施方式】
[0009]實(shí)施例1
第一步將丙氨酸0.4498g溶解于1ml水中，在三頸瓶中攪拌至完全溶解，將1.3288g乙酰丙酮氧釩溶于1ml三氯甲烷和1ml無(wú)水甲醇的混合溶劑中，完全溶解后轉(zhuǎn)移到盛有甘氨酸水溶液的三頸瓶中，在60°C的條件下加熱回流反應(yīng)3小時(shí)，得到藍(lán)綠色溶液。
[0010]第二步將第一步得到的藍(lán)綠色溶液中加入溶有0.7835g 2，2’ -聯(lián)吡啶的無(wú)水甲醇溶液15ml，于60 °C條件下攪拌回流3個(gè)小時(shí)后，停止反應(yīng)。冷卻后過(guò)濾，濾液移至25ml燒杯中，置于于0°C?4°C的冰箱中放置3?5天析出黃褐色菱形晶體。
[0011]第三步取出反應(yīng)容器中的晶體，先用無(wú)水甲醇清洗三次，然后用無(wú)水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中，I小時(shí)后得到干燥純凈的具有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體，晶體在室溫條件下穩(wěn)定存在，產(chǎn)率為83%。
[0012]第四步將晶體配制成以二甲基亞砜作溶劑濃度為20微克/毫升的溶液做活性測(cè)試和結(jié)構(gòu)分析，測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)晶體表現(xiàn)出生物活性，對(duì)PTPlB酶的抑制率為70.65%，IC50=Il.32微克/暈升。
[0013]實(shí)施例2
第一步將丙氨酸0.4463g溶解于1ml水中，在三頸瓶中攪拌至完全溶解，將1.3268g乙酰丙酮氧釩溶于1ml三氯甲烷和1ml無(wú)水甲醇的混合溶劑中，完全溶解后轉(zhuǎn)移到盛有甘氨酸水溶液的三頸瓶中，在60°C的條件下加熱回流反應(yīng)3小時(shí)，得到藍(lán)綠色溶液。
[0014]第二步將第一步得到的藍(lán)綠色溶液中加入溶有0.7863g2, 2’ -聯(lián)吡啶的無(wú)水甲醇溶液15ml，于60°C條件下攪拌回流3個(gè)小時(shí)后，停止反應(yīng)。冷卻后過(guò)濾，濾液移至25ml燒杯中，置于于0°C?4°C的冰箱中放置3?5天析出黃褐色菱形晶體。
[0015]第三步取出反應(yīng)容器中的晶體，先用無(wú)水甲醇清洗三次，然后用無(wú)水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中，I小時(shí)后得到干燥純凈的即有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體，晶體在室溫條件下穩(wěn)定存在，產(chǎn)率為81%。
[0016]第四步將晶體配制成以二甲基亞砜作溶劑濃度為20微克/毫升的溶液做活性測(cè)試和結(jié)構(gòu)分析，測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)晶體表現(xiàn)出生物活性，對(duì)PTPlB酶的抑制率為70.63%，IC50=Il.35微克/暈升。
[0017]實(shí)施例3
第一步將丙氨酸0.4412g溶解于1ml水中，在三頸瓶中攪拌至完全溶解，將1.3256g乙酰丙酮氧釩溶于1ml三氯甲烷和1ml無(wú)水甲醇的混合溶劑中，完全溶解后轉(zhuǎn)移到盛有甘氨酸水溶液的三頸瓶中，在60°C的條件下加熱回流反應(yīng)3小時(shí)，得到藍(lán)綠色溶液。
[0018]第二步將第一步得到的藍(lán)綠色溶液中加入溶有0.7863g2, 2’ -聯(lián)吡啶的無(wú)水甲醇溶液15ml，于60°C條件下攪拌回流3個(gè)小時(shí)后，停止反應(yīng)。冷卻后過(guò)濾，濾液移至25ml燒杯中，置于于0°C?4°C的冰箱中放置3?5天析出黃褐色菱形晶體。
[0019]第三步取出反應(yīng)容器中的晶體，先用無(wú)水甲醇清洗三次，然后用無(wú)水乙醇和乙醚各清洗三次，置于干燥器中，I小時(shí)后得到干燥純凈的即有生物活性的希夫堿氧釩配合物晶體，晶體在室溫條件下穩(wěn)定存在，產(chǎn)率為85%。
[0020]第四步將晶體配制成以二甲基亞砜作溶劑濃度為20微克/毫升的溶液做活性測(cè)試和結(jié)構(gòu)分析，測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)晶體表現(xiàn)出生物活性，對(duì)PTPlB酶的抑制率