本發(fā)明總體上涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域。特別地，本說明書教導(dǎo)了預(yù)防或治療受試者中的rna病毒感染的方法。

背景技術(shù)：

1、腸道病毒71(ev71)、柯薩奇病毒(cav16和cav6)和?？刹《径际菬o包膜的正單鏈rna病毒，其是高度傳染性的且通過體液傳播。ev71感染在小于5歲的兒童中最常見，其中約50-80％的兒童對于ev71測試呈血清陽性，并且在成人中也以較小程度觀察到。由于與感染相關(guān)的癥狀，ev71也是稱為手足口病(hfmd)的疾病的主要貢獻者。感染偶爾可能導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病或死亡。迄今為止，不存在用于預(yù)防或消除ev71感染的商購可得的疫苗或治療劑。臨床試驗僅對于疫苗模式而非治療模式進行。近年來，ev71感染已在幾個國家達(dá)到了創(chuàng)紀(jì)錄的發(fā)病率，并且這突出顯示了開發(fā)針對目前無法治愈的感染的疫苗和治療劑的迫切需要。

2、將期望克服或改善上述問題中的至少一個，或者至少提供有用的替代方案。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本文公開了用于預(yù)防或治療受試者中的rna病毒感染的方法，該方法包括向受試者施用以約5x1011至約5x1013vgs/kg劑量的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

2、本文公開了用于治療受試者中的rna病毒感染的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中將約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組aav施用于受試者，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

3、本文公開了重組腺相關(guān)病毒(aav)在制造用于治療受試者中的rna病毒感染的藥劑中的用途，其中將約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組aav施用于受試者，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

4、本文公開了抑制受試者中的rna病毒核酸的方法，該方法包括向受試者施用約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

5、在一個實施方案中，該方法包括抑制受試者的骨骼或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)細(xì)胞或組織中的rna病毒核酸。

技術(shù)特征：

1.一種預(yù)防或治療受試者中的rna病毒感染的方法，所述方法包括向受試者施用以約5x1011至約5x1013vgs/kg劑量的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述劑量為約5x1012至約5x1013vgs/kg。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述rna病毒感染是通過單鏈rna病毒的感染。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其中所述單鏈rna病毒選自腸道病毒、柯薩奇病毒和副腸孤病毒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中i)所述腸道病毒是腸道病毒71；ii)所述柯薩奇病毒選自cav16和cav6；并且iii)所述副腸孤病毒選自副腸孤病毒a、副腸孤病毒b、副腸孤病毒c、副腸孤病毒d、副腸孤病毒e和副腸孤病毒f。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述cas13核酸酶是cas13a、cas13b、cas13c或cas13d核酸酶。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述aav載體是aav2、aavdj或aav1載體。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述至少一種引導(dǎo)rna包含i)與通過seq?id?no：1-10中所示的核酸序列之一編碼的核酸序列具有至少70％序列同一性的第一核酸序列，或ii)與seq?id?no：11-20中所示的核酸序列之一具有至少70％序列同一性的第一核酸。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述cas13核酸酶可操作地連接到cmv啟動子。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的方法，其中所述引導(dǎo)rna可操作地連接到u6啟動子。

11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的方法，其中預(yù)防或治療rna病毒感染包括抑制受試者的骨骼或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)細(xì)胞或組織中的rna病毒核酸。

12.一種用于治療受試者中的rna病毒感染的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中將約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組aav施用于受試者，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

13.重組腺相關(guān)病毒(aav)在制造用于治療受試者中的rna病毒感染的藥劑中的用途，其中將約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組aav施用于受試者，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

14.一種抑制受試者中的rna病毒核酸的方法，所述方法包括向受試者施用約5x1011至約5x1013vgs/kg的重組腺相關(guān)病毒(aav)，其中所述aav包含編碼cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)rna。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述方法包括抑制受試者的骨骼或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)細(xì)胞或組織中的rna病毒核酸。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明總體上涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域。特別地，本說明書教導(dǎo)了預(yù)防或治療受試者中的RNA病毒感染的方法，所述方法包括向受試者施用以約5x10<supgt;11</supgt;至約5x10<supgt;13</supgt;vgs/kg劑量的重組腺相關(guān)病毒(AAV)，其中所述AAV包含編碼Cas13核酸酶的至少一種異源核酸序列和一種或多種引導(dǎo)RNA。在一個實施方案中，所述RNA病毒感染是腸道病毒71的感染。

技術(shù)研發(fā)人員：趙偉良,龔重達(dá),朱章漢,T·尤佳拉賈
受保護的技術(shù)使用者：新加坡科技研究局
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6