本發(fā)明屬于分子標(biāo)記輔助育種，具體涉及與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記、檢測該分子標(biāo)記的引物對及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、花生作為重要的油料作物之一，含油量是評價高油種質(zhì)的重要指標(biāo)?；ㄉ土繉儆跀?shù)量性狀，表型變異呈連續(xù)性且受多基因控制，通過近紅外儀器檢測時由于花生籽仁間存在空隙導(dǎo)致檢測過程存在誤差，其次花生體內(nèi)油脂成分也會隨時間變化而變化，僅通過物理檢測方法無法真正解析其控制油脂合成機理。因此探究其與高油相關(guān)分子標(biāo)記，對于挖掘花生優(yōu)異遺傳位點，培育高油花生新品種具有重要理論意義。迄今為止已克隆出許多花生品質(zhì)性狀相關(guān)分子標(biāo)記，包括氨基酸、油酸，蔗糖；但對于花生中高油相關(guān)基因的定位鮮有研究?；诨ㄉ蚪M數(shù)據(jù)平臺與高通量測序的發(fā)展和完善，四倍體野生種、四倍體栽培種的全基因組數(shù)據(jù)也可以公開獲取，這就使研究者花生基因組數(shù)據(jù)的掌握越來越完善，使基因的精細(xì)定位和圖位克隆成為可能。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記、檢測該分子標(biāo)記的引物對及應(yīng)用。

2、為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

3、與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記，所述分子標(biāo)記為arahy36753720；其核酸序列如seq?id?no:1所示。

4、上述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，為a-c中的至少一種；

5、a.?用于制備預(yù)測花生含油量的試劑；

6、b.?用于預(yù)測花生含油量；

7、c.?用于高油含量花生選育。

8、在上述方案的基礎(chǔ)上，所述預(yù)測花生含油量的試劑包含檢測分子標(biāo)記arahy36753720的引物對。

9、在上述方案的基礎(chǔ)上，所述檢測arahy36753720分子標(biāo)記的引物對如seq?id?no:2和seq?id?no:3所示。

10、在上述方案的基礎(chǔ)上，用于預(yù)測花生含油量時，以待測花生基因組dna為模板，采用seq?id?no:2和seq?id?no:3所示的引物對進(jìn)行pcr擴增，檢測擴增產(chǎn)物；

11、當(dāng)擴增產(chǎn)物為274bp的單一條帶時，則待測花生樣品為低油含量花生品種；

12、當(dāng)擴增產(chǎn)物為252bp的單一條帶，或274bp和252bp兩條帶時，待測花生樣品為高油含量花生品種。

13、在上述方案的基礎(chǔ)上，所述用于高油含量花生選育，是在育種過程中采用arahy36753720分子標(biāo)記鑒定或篩選群體中高油的花生品種。

14、在上述方案的基礎(chǔ)上，所述高油含量花生選育方法如下：

15、以高油和低油的花生品種作為親本進(jìn)行雜交，采用近紅外光譜法篩選f1代雜交種中含油量≥54%的花生材料；將篩選的具有高油性狀的f1自交種植獲得f2；f2連續(xù)自交通過單粒傳法構(gòu)建重組自交系群體，每次自交后篩選綜合性狀良好的單株，輔助采用arahy36753720分子標(biāo)記對其含油表型進(jìn)行鑒定，篩選群體中綜合性狀良好且高油性狀穩(wěn)定的花生品系，用作擴繁材料。

16、在上述方案的基礎(chǔ)上，在育種過程中采用arahy36753720分子標(biāo)記來鑒定或篩選群體中高油的花生品種時，以待測花生基因組dna為模板，采用seq?id?no:2和seq?id?no:3所示的引物對進(jìn)行pcr擴增，檢測擴增產(chǎn)物；

17、當(dāng)擴增產(chǎn)物為274bp的單一條帶時，則待測花生樣品為低油含量花生品種；

18、當(dāng)擴增產(chǎn)物為252bp的單一條帶，或274bp和252bp兩條帶時，待測花生樣品為高油含量花生品種。

19、檢測上述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的引物對，檢測arahy36753720分子標(biāo)記的引物對如seq?id?no:2和seq?id?no:3所示。

20、本發(fā)明技術(shù)方案的優(yōu)點

21、（1）本發(fā)明開發(fā)了一個花生高低油基因相關(guān)位點，并提供了與花生高低油含油量連鎖的分子標(biāo)記arahy36753720。

22、（2）通過檢測本發(fā)明分子標(biāo)記預(yù)測花生含油量的方法快速簡便，選擇效率高，直接通過pcr擴增及電泳即可實現(xiàn)，只需要檢測這些標(biāo)記的擴增條帶的大小，技術(shù)要求簡單，采用常規(guī)儀器可操作；具有快速、高效、成本低的特點。由此有目的的篩選高油花生品種或品系，一方面有助于基因的精細(xì)定位及克隆，另一方面對于花生分子育種，加快花生高油品系的培育過程都具有重要的應(yīng)用價值。

23、（3）輔助育種選擇目標(biāo)明確，節(jié)約成本。通過標(biāo)記檢測花生高油基因位點，可以在收獲種子后即可鑒定出含油量較高的單株，選擇保留，淘汰其他單株，可有效控制育種規(guī)模，提高高油品種選擇育種的進(jìn)程和效率。

24、綜上，通過檢測本發(fā)明分子標(biāo)記預(yù)測花生含油量的方法具有快速簡便，選擇效率高，直接通過pcr擴增及電泳即可實現(xiàn)，在預(yù)測花生含油量以及選育高油含量花生中具有重要的應(yīng)用價值。

技術(shù)特征：

1.與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記，其特征在于，所述分子標(biāo)記為arahy36753720；其核酸序列如seq?id?no:1所示。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，為a-c中的至少一種；

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，所述預(yù)測花生含油量的試劑包含檢測分子標(biāo)記arahy36753720的引物對。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，所述檢測arahy36753720分子標(biāo)記的引物對如seq?id?no:2和seq?id?no:3所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，用于預(yù)測花生含油量時，以待測花生基因組dna為模板，采用seq?id?no:2和seq?id?no:3所示的引物對進(jìn)行pcr擴增，檢測擴增產(chǎn)物；

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，所述用于高油含量花生選育，是在育種過程中采用arahy36753720分子標(biāo)記鑒定或篩選群體中高油的花生品種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，所述高油含量花生選育方法如下：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于，在育種過程中采用arahy36753720分子標(biāo)記來鑒定或篩選群體中高油的花生品種時，以待測花生基因組dna為模板，采用seq?id?no:2和seq?id?no:3所示的引物對進(jìn)行pcr擴增，檢測擴增產(chǎn)物；

9.一種檢測權(quán)利要求1所述與花生含油量性狀緊密連鎖的indel分子標(biāo)記的引物對，其特征在于，檢測arahy36753720分子標(biāo)記的引物對如seq?id?no:2和seq?id?no:3所示。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了與花生含油量性狀緊密連鎖的InDel分子標(biāo)記、檢測該分子標(biāo)記的引物對及應(yīng)用，屬于分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明InDel標(biāo)記為Arahy36753720；所述Arahy36753720分子標(biāo)記的核酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。通過檢測本發(fā)明分子標(biāo)記預(yù)測花生含油量的方法具有快速簡便，選擇效率高，直接通過PCR擴增及電泳即可實現(xiàn)，在預(yù)測花生含油量以及選育高油含量花生中具有重要的應(yīng)用價值。

技術(shù)研發(fā)人員：唐艷艷,任建軍,于復(fù)欣,周莫,王斯銘,張開元,喬利仙,鄧立苗,趙立波,朱虹
受保護的技術(shù)使用者：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6