專利名稱：K-通道阻滯劑氰基胍類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于治療心血管病如充血性心力衰竭和高血壓癥的鉀通道阻滯劑氰基胍化合物。與其它氰基胍不同的是，本發(fā)明的氰基胍化合物阻滯血管平滑肌中的鉀通道傳導(dǎo)和腎乳頭部膜對(duì)ATP敏感的鉀通道內(nèi)的鉀通道傳導(dǎo)。
已知K+通道對(duì)于調(diào)節(jié)腎對(duì)鉀的排泄是很重要的，有人認(rèn)為抑制細(xì)尿管絆(Henle′s 100p)升支粗段的乳頭膜細(xì)胞中對(duì)ATP敏感的K+通道傳導(dǎo)能夠減少通過(guò)膜的鉀循環(huán)，因而能減少通過(guò)Na+-2Cl-K+進(jìn)行的共同傳輸中鈉的再吸收。還有人認(rèn)為抑制在初期(initial)和皮質(zhì)集尿管基本細(xì)胞乳頭膜中對(duì)ATP敏感的K+通道會(huì)減少K+的分泌，此分泌是尿鉀的基本來(lái)源。有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)在大鼠腎中K+通道拮抗活性對(duì)產(chǎn)生明顯的正常血鉀過(guò)多(eukalemic)尿鈉排泄是必要的。
本發(fā)明的主題化合物是細(xì)尿管絆升支粗段和腎的初期與皮質(zhì)集尿管的基本細(xì)胞中對(duì)ATP敏感的鉀通道的有效阻滯劑，此活性使鈉和水的排泄增加而不增加鉀的排泄。這提供了一種利尿方法，此方法不受發(fā)生不希望有的血漿內(nèi)鉀水平降低或血鉀過(guò)少的影響。
雖然本發(fā)明的一系統(tǒng)主題化合物與K+通道激動(dòng)劑Pinacidil及有關(guān)化合物很接近，但它們是有效的K+通道拮抗劑。
USP4，057，636公開(kāi)了與主題化合物結(jié)構(gòu)類似的吡啶基胍，只是主題化合物有一個(gè)連接著苯基的亞甲基支鏈，所說(shuō)的苯基可選擇性地被取代。出乎意料之外的是主題化合物是鉀通道阻滯劑，而4，057，636的化合物是鉀通道開(kāi)通物(Openers)。
吡啶N-氧化物和Pinacidil以及它的相關(guān)吡啶基氰基胍類是一組與本發(fā)明主題化合物結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物。公開(kāi)了這些化合物的論文如下Smallwood，JK，J.Card.Pharm.，12∶102-9(1988);和Peterson，HJ，J.Med.Chem.21(8)∶773-81(1978)。
其它出版物包括JP166119，1991年1月2日公布，公開(kāi)了在C-1位上有支鏈烷基的氰基胍衍生物，但沒(méi)有苯基連接其上。GB055209，1974年12月20日，Leo Pharmaceutical，公開(kāi)了N-氰基-N′-吡啶基胍，為降壓藥。
歐洲專利申請(qǐng)92104287.5公開(kāi)了有吡啶N-氧化合物和氨取代的，但不是連接于苯基上的化合物。
本領(lǐng)域在鉀通道機(jī)理和Pinacidil方面的現(xiàn)有技術(shù)狀況在Annual Report in Medicinal Chemistry，Robertson DW.等人，24，Ch10，91-100(1989)中進(jìn)行了討論。
本發(fā)明的一個(gè)方面是式Ⅰ化合物和其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽
其中R1是氫或甲基;
R2是C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C5環(huán)烷基、C3-C5環(huán)烯基、羥甲基、甲氧基-C1-C5烷基，或R1和R2共同形成C3-C6碳環(huán);
R3和R4各自獨(dú)立地選自氫、C1-C4烷基、F、Cl、Br、I或CF3;
R5是氫、F或Cl;
R6是氫、-NH2、-NHCH3、-NHC2H5、-NHCH(CH3)2、-N(CH3)2、-N(C2H5)2、-NH(CH2)m-OC1-C3烷基(其中m是2或3)，-NHC(O)C1-C3烷基、Cl或Br，以及n是0或1。
另一方面，本發(fā)明的目的化合物用作鉀通道阻滯劑，可用于心血管病例如充血性心力衰竭、高血壓和中風(fēng)的治療。
本發(fā)明是關(guān)于上文所述結(jié)構(gòu)的式Ⅰ化合物和其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。式Ⅰ化合物既包括對(duì)映體也包括鹽和互變異構(gòu)體形式。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，要有活性需要有3-吡啶基和苯基取代基。在芐基碳上至少必須有一個(gè)取代基，當(dāng)只有一個(gè)烷基取代基時(shí)，(R)對(duì)映體是有活性的。特別優(yōu)選的是在芐基碳上有小的環(huán)烷基、烷基或R1R2碳環(huán)取代基以及在苯環(huán)上有3-氯或3-氟取代基的化合物。
式Ⅰ的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可由下述鹽中選擇乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基磺酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫氧化物，氫溴化物、氫碘化物、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、Pamoate、果膠脂酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。
各個(gè)含烴基部分的碳數(shù)由腳標(biāo)給出，標(biāo)出了該部分最大和最小碳原子數(shù)，如腳標(biāo)Ci-Cj是指碳原子數(shù)為整數(shù)“i”至整數(shù)“j”個(gè)碳原子，例如C1-C3烷基包括著1-3個(gè)碳原子的烷基，或者包括甲基、乙基、丙基和異丙基，以及它們的異構(gòu)體形式。
C3-C5環(huán)烷基是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及其異構(gòu)體形式。
“C3-C6碳環(huán)”是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基或環(huán)己烯基。
優(yōu)選的式Ⅰ化合物是(R)-N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基丙基)胍;
N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基環(huán)丁基)胍;
N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-[1-(3-氯苯基)丙基]胍;
N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-苯基環(huán)丙基甲基胍;
N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-[1-(3-氯苯基)環(huán)丁基]胍;
(R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3-吡啶基)-N′-(1-苯丙基)胍;和
N″-氰基-N-(6-氨基-3-吡啶基)-N′-(1-苯基環(huán)丁基)胍。
式Ⅰ化合物被用于治療心血管疾病，如充血性心力衰竭和各種高血壓癥，減少血漿流動(dòng)體積對(duì)它們均有好處。此外，由于本發(fā)明化合物的鉀通道阻滯劑活性的功能，它們可用來(lái)防止不希望的血漿腎素活性的提高，可能是由于血漿流動(dòng)體積減少或是由其它一起用的抗高血壓劑引起的血壓降低所造成的。此活性會(huì)增加二種藥劑的抗高血壓活性。
本發(fā)明還可以把式Ⅰ化合物與其它抗高血壓劑共同用藥，這些抗高血壓劑如ACE抑制劑、β-腎上腺素阻滯劑、α1-腎上腺素阻滯劑、α2-腎上腺素激動(dòng)劑、鈣通道阻滯劑以及其它血管舒張藥如硝酸鹽和肼苯噠嗪等。此外，應(yīng)用式1化合物抗心律失?；钚院推滢卓光}通道激動(dòng)劑過(guò)量的能力，它們可用來(lái)防止過(guò)多毛發(fā)生長(zhǎng)，增加胰島素釋放，治療中風(fēng)，控制反射性充血和減少體重。
R1和R2不同時(shí)的式Ⅰ化合物對(duì)映體被認(rèn)為是本發(fā)明的主要類別。當(dāng)R1是氫和R2是烷基時(shí)優(yōu)選的對(duì)映體具有(R)絕對(duì)構(gòu)型。重要的還有藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，用于口服、經(jīng)皮和非腸道用藥的制劑以及新的化學(xué)中間體和制備式Ⅰ化合物的方法。
本發(fā)明化合物可以靜脈、肌內(nèi)、局部、經(jīng)皮(如皮膚斑貼)、頰部、栓劑形式或口服形式給人或其它動(dòng)物用藥。本發(fā)明的組合物可以單位劑量形式給人和動(dòng)物用藥，例如含有適量本發(fā)明化合物的片劑、膠囊、丸劑、粉劑、粒劑、無(wú)菌非腸道用溶液或懸浮劑、口服溶液或懸浮劑、水包油和油包水乳液，栓劑和流動(dòng)的懸浮液或溶液。
對(duì)口服用藥，可以制成固體或流體的單位劑量形式。要制備固體組合物如片劑，本發(fā)明化合物可與常用的成分，例如滑石、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硅鋁酸鎂、硫酸鈣、淀粉、乳糖、阿拉伯膠、甲基纖維素和作為藥物稀釋劑或載體的有相似功能的物質(zhì)相混合來(lái)制得。把化合物與惰性藥用稀釋劑混合，再把混合物填入適當(dāng)大小的硬明膠膠囊可制得膠囊劑。軟明膠膠囊是把化合物與可接受的植物油、輕質(zhì)液體礦脂或其它惰性油的漿液通過(guò)機(jī)械灌注于膠囊。
還可制成口服的流體單位劑量形式如糖漿、酏劑和懸浮劑。與糖、芳香劑和防腐劑一起溶于含水載體可制成糖漿。和含水載體一起借助于懸浮劑如阿拉伯膠、黃蓍膠、甲基纖維素及基類似物可制得懸浮劑。
對(duì)非腸道給藥，用化合物和無(wú)菌載體可制成流體單位劑量形式。在制備溶液時(shí)，可把化合物溶于注射用水，并且在將它們裝入適當(dāng)?shù)娜萜骰虬碴称坎⒚芊庵斑M(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。諸如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑的助劑可溶于載體中。組合物在裝入容器后可冷凍，在真空下除去水。然后將凍干的粉末密封于容器中，在使用前配制。
作為利尿劑的式Ⅰ化合物在口服或注射制劑中其單位劑量為1-1000mg。
本發(fā)明的主題化合物由兩種胺與二苯基碳化亞胺酸酯(ⅰ)依次進(jìn)行反應(yīng)制備
第一個(gè)反應(yīng)通常用一當(dāng)量反應(yīng)活性較小的胺在Et2O或乙二醇二甲醚中于25℃反應(yīng)。但在某些情況下，此方法不成功且需要其它溶劑或條件。例如當(dāng)上述反應(yīng)中R6為氯時(shí)，必須在無(wú)溶劑條件下把ⅰ和胺的混合物加熱至120℃以完成反應(yīng)。在第二步中，通常使第二種胺在異丙醇或二噁烷回流條件下與ⅱ進(jìn)行反應(yīng)。此反應(yīng)要求或者使用2當(dāng)量胺(方法A，在下文實(shí)施例1中說(shuō)明)，或者在使用過(guò)量N-甲基嗎啉的情況下使用1當(dāng)量胺(方法B，在下文實(shí)施例2中說(shuō)明)。在制備特定化合物時(shí)要求此方法有某些變化，在表1和Ⅱ的腳注中予以說(shuō)明。
在實(shí)施例4方法B的制備中，得到顯然是由環(huán)化和氨基氰的消除引進(jìn)的副產(chǎn)物。在實(shí)施例27的制備中使反應(yīng)在室溫下進(jìn)行可避免環(huán)化作用。
表Ⅰ和Ⅱ的注解a.用硅膠色譜法及用EtOAc純化的產(chǎn)品。
b.用硅膠色譜法(3-10%MeOH-CHCl3)純化的產(chǎn)品。
c.反應(yīng)混合物回流18-24小時(shí)。
d.用硅膠色譜法(2-5%MeOH-CHCl3)純化的產(chǎn)品。
e.用硅膠色譜法(100%己烷-100%EtOAc)純化的產(chǎn)品。
f.用硅膠色譜法(1-5%MeOH/0.1-0.5%NH4OH/CHCl3)純化的產(chǎn)品。
g.用硅膠色譜法(1-4%MeOH/0.1-0.4%NH4OH/CHCl3)純化的產(chǎn)品。
h.受到不純的胺樣品污染的粗制品?；衔?6先用硅膠色譜法(1-5%MeOH/0.1-0.5%MH4OH/CHCl3)純化，然后再用第二個(gè)高效柱(1-3%MeOH-CHCl3)純化。
i.用硅膠色譜法(1-3%MeOH-CHCl3)純化的產(chǎn)品。
j.見(jiàn)實(shí)驗(yàn)部分胺的制備。
k.反應(yīng)混合物在室溫放置3天;24小時(shí)后產(chǎn)物開(kāi)始由混合物中結(jié)晶。
l.此制備使用2.6-2.8當(dāng)量的N-甲基嗎啉。
m.(R)對(duì)映體，[α]24D-80°(cl.03，EtOH)n.(S)對(duì)映體，[α]24D+78°(c0.995，EtOH)o.外消旋體p.(S)對(duì)映體，[α]24D+39°(c0.993，EtOH)q.(R)對(duì)映體r.(R)對(duì)映體，[α]24D-39°(c1.0043，EtOH)。
s.(S)對(duì)映體t.用硅膠色譜法(1%MeOH-0.1%NH4OH-CH2Cl2)純化的產(chǎn)品。
u.半富馬酸鹽，乙酸乙酯溶劑化物。
v.用硅膠色譜法(1-3%MeOH-0.1-0.3%NH4OH-CH2Cl2)純化的產(chǎn)品。
w.用硅膠色譜法(2%MeOH-0.2%NH4OH-CH2Cl2)純化的產(chǎn)品。
x.甲磺酸鹽(1∶1)y.用硅膠色譜法(20-30%EtOAc/CH2Cl2)純化的產(chǎn)品。
z.乙酸乙酯溶劑化物aa.用硅膠色譜法(5%MeOH-0.25%NH4OH-CHCl3)純化的產(chǎn)品。
bb.水合物cc.反應(yīng)混合物在60℃加熱48小時(shí);產(chǎn)物由硅膠色譜法(7.5%MeOH-0.35%NH4OH-CHCl3)純化。
dd.產(chǎn)物用硅膠色譜法(3.5%MeOH-0.15%NH4OH-CHCl3)純化ee.乙腈溶劑化物ff.產(chǎn)物用硅膠色譜法(5%MeOH-CHCl3)純化。
gg.產(chǎn)物用硅膠色譜法(1-4%MeOH/CHCl3)純化。
hh.產(chǎn)物用硅膠色譜法(含20-100%EtOAc的乙酸乙酯-己烷混合物)純化。
ii.產(chǎn)物用硅膠色譜法(0-8%MeOH-CHCl3)純化。
jj.產(chǎn)物用硅膠色譜法(1-5%MeOH-CHCl3)純化。
kk.吡啶N-氧化物(n＝1)。
本發(fā)明化合物的利尿效果及鉀通道阻滯活性試驗(yàn)。
用離體的兔腸系膜動(dòng)脈(RMA)方法得到鉀通道阻滯結(jié)果。用去甲腎上腺素(5μM)感染RMA環(huán)二次，二次感染之間間隔1小時(shí)。在此1小時(shí)中使組織在靜止張力1g的生理鹽水中平衡。在第二次感染的板上向所有的組織添加1μM Pinacidil，考察由此引起的松弛時(shí)間過(guò)程30分鐘。實(shí)驗(yàn)說(shuō)明此濃度的Pinacidil在體系內(nèi)產(chǎn)生最大的K+通道依賴性血管舒張。通過(guò)研究試驗(yàn)化合物抑制由Pinacidil誘導(dǎo)的松弛作用的能力可測(cè)定鉀拮抗作用程度。在兩次感染之間的一小時(shí)內(nèi)將化合物用于組織并對(duì)有化合物持續(xù)存在條件下的Pinacidil誘導(dǎo)的松弛作用進(jìn)行研究。在加入Pinacidil之前用試驗(yàn)化合物預(yù)處理的總時(shí)間為75分鐘。一種組織僅用于每種化合物的每一個(gè)濃度，在沒(méi)有松弛的情況下，表明這些組織能夠被已知血管舒張藥松弛?；衔镆?μM濃度試驗(yàn)。化合物的抑制作用以與對(duì)照相比，在15分鐘對(duì)Pinacidil松弛作用的抑制百分?jǐn)?shù)來(lái)測(cè)定。
對(duì)兔腸系膜動(dòng)脈(RMA)的K+通道拮抗活性和對(duì)大鼠經(jīng)腹膜給藥后的鈉尿效能綜合列于Ⅲ和Ⅳ。已知例如將實(shí)施例9的芐基碳上的兩個(gè)甲基去除后是一種弱的PCO而不是K+通道拮抗劑。與此類似，苯基直接連在胍氮原子上的化合物也是K+通道激動(dòng)劑。還發(fā)現(xiàn)用一附加亞甲基將苯基環(huán)與胍的氮原子分開(kāi)的實(shí)施例9在利尿和K+通道拮抗試驗(yàn)中的活性都不好。
用體重為200-230g雌性Harlan Sprague-Dawley大鼠測(cè)定利尿活性，將其禁食15小時(shí)過(guò)夜，然后在給藥前再有1小時(shí)既禁食又禁水。表Ⅲ和Ⅳ給出了在5小時(shí)試驗(yàn)期間尿Na+排泄的凈增長(zhǎng)值(比對(duì)照多的)(μEq)除以利尿篩選試驗(yàn)用腹膜內(nèi)給藥的三種藥物劑量的總和(mg/Kg)，這近似于劑量響應(yīng)曲線以下的面積。載體為pH7.4的磷酸鹽緩沖液(0.48%Na2HPO4和0.13%NaH2PO4·H2O)中的20%二甲基乙酰胺。把足量的藥物懸浮于1至2ml上述載體使輸入劑量達(dá)到在0.5ml體積內(nèi)為1.0-3mg/Kg(2-4只大鼠/劑量)。對(duì)大多數(shù)試驗(yàn)，在每組試驗(yàn)中包括至少2只對(duì)照大鼠，2只標(biāo)準(zhǔn)利尿處理大鼠。作為比較使用的標(biāo)準(zhǔn)物為留鉀利尿劑氨氯吡脒和耗鉀利尿劑呋喃苯氨酸，氫氯噻嗪和甲苯喹唑酮。
在腹膜內(nèi)施用藥劑后，緩慢壓擠大鼠的膀胱使處理前的尿全部排出，把二只相同處理的大鼠放在一只不銹鋼代謝籠中，其中裝備有分級(jí)試驗(yàn)管以收集排出的尿液。在處理后2小時(shí)和5小時(shí)，再次壓擠大鼠膀胱記錄每對(duì)大鼠的排尿體積，把尿分成數(shù)等份，用NOVA-13選擇離子分析儀分析Na+和K+的濃度。在第5小時(shí)收集尿液之后，把大鼠放回畜籠中，在最多取尿3次的利尿試驗(yàn)之間至少要恢復(fù)1周。
這些尿樣中的電解質(zhì)濃度乘以各自體積得到對(duì)大鼠Na+和K+的毫當(dāng)量(mEq)排泄，并把每種藥物處理成倍計(jì)算所得到的結(jié)果平均。尿鈉排泄比匯總對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果增加50%或更高的被認(rèn)為是具有反射性活性。
表Ⅲ 表Ⅰ化合物的排鈉利尿和血鉀通道拮抗活性
表Ⅲ的注解＊不是本發(fā)明化合物;X是CH，R1和R2是H，以及Z是CH(ph)2。
＊＊不是本發(fā)明化合物。
a.這是化合物對(duì)被Pinacidil(1μM)感染的兔腸系膜動(dòng)脈環(huán)的去甲腎上腺素(5μM)松弛作用的抑制能力的度量，以抑制劑濃度為5μM時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)來(lái)表示(平均值±Sem)?；衔镌?μM時(shí)抑制達(dá)到65%或更大時(shí)被認(rèn)為是有活性的，20-65%抑制為中等活性，小于20%的抑制是無(wú)活性的。
b.對(duì)實(shí)施例1-28用于測(cè)定的腸系膜環(huán)的數(shù)目列于括號(hào)之中。
c.在2.5μM時(shí)百分抑制率為88.9±11.2(2)，1μM時(shí)為17.1±11.9(5)。
d.1μM時(shí)抑制百分?jǐn)?shù)為78.2±1.9(2)，0.5μM時(shí)為43.6±24.3(2)。
e.0.5μM時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)為82.0±1.8(2)。
f.0.5μM時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)為78.5±4.4(4)。
g.1μM時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)為25.6±17.2(2)。
h.0.5μM時(shí)的抑制百分?jǐn)?shù)為81.5±5.9(6)，0.25μM時(shí)為52.0±10(3)以及0.1μM時(shí)為5.0±2.0(4)。
i.此數(shù)值表示在5小時(shí)試驗(yàn)期間尿Na+排泄(μEq)的凈增加(超過(guò)對(duì)照的)除以在大鼠利尿篩選試驗(yàn)第Ⅱ階段三次腹膜內(nèi)(IP)給藥劑量的總和(mg/Kg)，此值近似于劑量響應(yīng)曲線以下的面積。
j.口服劑量5mg/Kg可見(jiàn)抑制尿分泌，用IP和IV(靜脈內(nèi))給藥可得到類似反應(yīng)。
表Ⅳ 表Ⅱ化合物的排鈉利尿和血鉀通道拮抗活性
表Ⅳ的注解a.抑制大于20%的最低抑制劑濃度或者是最低試驗(yàn)濃度。
b.口服用藥c.參見(jiàn)表Ⅲ注解ad.參見(jiàn)表Ⅲ注解i表Ⅲ和Ⅳ表明本發(fā)明化合物具有良好的鉀通道拮抗活性以及排鈉利尿活性。
實(shí)施例1(R)-N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基)乙基胍(1)，方法A。
將攪拌的N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(參見(jiàn)實(shí)施例5的方法)(8.00g，0.336mmol)、(R)-2-甲基芐基胺(10.8ml，0.0835mol)和異丙醇(53.3ml)的混合物在氨氣中回流4小時(shí)，反應(yīng)是否完成由10%MeOH-1%-NH4OH-CHCl3的TLC進(jìn)行測(cè)定?；旌衔锝?jīng)真空濃縮，把殘余物與EtOAc混合數(shù)次，每次加入后濃縮;得到的固體用熱EtOAc研磨，將其過(guò)濾收集，用MeOH-CH2Cl2-EtOAc重結(jié)晶，得到6.6g產(chǎn)品，mp185-187℃。
實(shí)施例2N″-氰基-N-(吡啶基)-N′-(1-苯基)丙基胍(2)，方法B把攪拌的N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(參見(jiàn)實(shí)施例5方法)(13.93g，0.05836mol)、1-苯基丙胺(8.68g，0.0642mol)、N-甲基嗎啉(139ml)和異丙醇(92.9ml)的混合物于氮?dú)庵谢亓?8小時(shí)，反應(yīng)完成用10%MeOH-1%NH4OH-CHCl3TLC檢測(cè)。濃縮反應(yīng)混合物得到的殘余物與EtOAc混合和濃縮數(shù)次，直到產(chǎn)品結(jié)晶。用小體積EtOAc使固體沸騰二次，每次都把混合物冷卻再潷出液體，得到的固體用MeOH-EtOAc結(jié)晶得到7.87g(43.8%)產(chǎn)品，mp.155-156℃。
實(shí)施例3N″-氰基-N′-(1-苯基環(huán)戊-3-烯基)-N-(3-吡啶基)胍(3)步驟14-氰基-4-苯基-環(huán)戊烯此制備中使用了改進(jìn)的Fayter等人的方法(Fayter，R.G.，Jr.，White，J.F.和E.G.Harris，U.S.P4，252，739(1981))。
在氮封的、有機(jī)械攪拌的4.93ml(42.6mmol)苯乙腈的85mlCH2Cl2溶液中加入4.94ml(46.9mmol)順-1，4-二氯-2-丁烯，接著再加入0.86g(2.1mmol)Aliguat336(季銨氯化物)，然后在2.25小時(shí)內(nèi)分批加入5.3g(85.3mmol)粉狀KOH。用冷水浴控制少量放熱，使加入過(guò)程中的反應(yīng)溫度在25℃左右。反應(yīng)在室溫，攪拌下進(jìn)行1小時(shí)，再在油浴中于55-60℃(回流)下加熱1小時(shí)。反應(yīng)物冷卻后，在6分鐘內(nèi)滴加42ml H2O。將混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并充分混合，分離出水相并用Et2O洗滌，合并有機(jī)相，將其用MgSO4干燥并真空濃縮。把殘余物減壓蒸餾，收集bp62-86℃(0.05mmHg)的單一餾分5.39g。將此餾分與4.77g前面流程中物料合并，在200℃油浴中于純氮?dú)庵屑訜?0分鐘，然后使之冷卻，殘余物用硅膠(1%EtOAc∶己烷)經(jīng)色譜分離成二部分得到6.0g 4-氰基-4-苯基環(huán)戊烯。
步驟24-苯基-4-環(huán)戊烯羧酸在氮封的0.927g(5.48mmol)步驟1產(chǎn)品于14ml乙二醇的懸浮液中加入0.92g KOH顆粒，混合物在油浴中，于205℃加熱，在加熱3.25小時(shí)以后，使反應(yīng)混合物(此時(shí)為溶液)冷卻，用10ml水稀釋，用Et2O洗滌一次。將含水部分在冰浴中冷卻，用大約7ml 2.5N鹽酸酸化。沉淀的晶體用氮?dú)獯等堄郋t2O后過(guò)濾收集，用EtOAc∶環(huán)己烷重結(jié)晶得到0.535g，m.p.123.5-125.5℃(51.8%)和0.141g，m.p.122-124℃(13.7%)的標(biāo)題化合物。
步驟34-苯基-4-環(huán)戊烯基異氰酸酯在氮封的2.0g(10.6mmol)步驟2產(chǎn)品的40ml甲苯溶液中加入2.2ml(15.9mmol)三乙胺，再加入3.4ml(15.9mmol)二苯磷?；B氮化物。在90℃油浴中加熱55分鐘后，使反應(yīng)物冷卻并真空濃縮。將殘余物在150ml 1∶1的Et2O∶己烷和20ml pH7的磷酸鹽緩沖溶液中分配。分離出水層，用1∶1的Et2O∶己烷洗滌一次。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮。殘余物用50ml硅膠(1%EtOAc∶己烷)色譜分離得到1.46g(74.3%)標(biāo)題化合物。
步驟44-氨基-4-苯基環(huán)戊烯氫氯化物在氮封的1.46g(7.9mmol)步驟3產(chǎn)品的30mlTHF溶液中加入5.11ml(7.9mmol)氫氧化四丁基銨40%(1.54M)水溶液。在室溫下攪拌24小時(shí)后，反應(yīng)混合物在真空下濃縮。將殘余物在250ml 1∶1的Et2O∶己烷和20ml H2O之間分配，分離出水相，用1∶1 Et2O∶己烷洗滌一次。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并于真空下濃縮。殘余物的Et2O溶液用過(guò)量的HCl/Et2O處理。用過(guò)濾器收集固體沉淀物并用MeOH∶EtOAc重結(jié)晶得到0.191g m.p.290-294℃(11.3%)、0.303g m.p.288-289℃(17.9%)、0.429g m.p.288-289℃(25.3%)、0.282g m.p.288-290℃(16.6%)和0.365g m.p.285-288℃(21.5%)的標(biāo)題化合物。
步驟5(方法C)把攪拌的步驟4產(chǎn)品(0.537g，2.74mmol)和EtOAc的混合物與足夠的NaHCO3水溶液混合得到一溶液，水層用EtOAc萃取，EtOAc萃取液經(jīng)干燥(MgSO4)和濃縮。殘余物在2-丙醇(25ml)中的溶液用N-甲基嗎啉(0.75ml，6.86mmol)和N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(見(jiàn)實(shí)施例5方法)(0.98g，4.12mmol)處理并在氮?dú)庀禄亓?6.75小時(shí)。冷卻的反應(yīng)混合物在真空下濃縮，殘余物用硅膠和1.5%MeOH-0.15%NH4OH-CH2Cl2進(jìn)行色譜分離，由EtOAc中結(jié)晶得到產(chǎn)品(3)，m.p.155.5-157℃。
實(shí)施例4(R)N″-氰基-N′-(2-羥基-1-苯乙基)-N-(3-吡啶基)胍(4)把攪拌過(guò)的N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(見(jiàn)實(shí)施例5方法)(3.00g，0.0126mmol)、(R)-2-苯基甘氨醇(1.9g，0.0130mol)、N-甲基嗎啉(30ml)和異丙醇(20ml)的混合物在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)。完成反應(yīng)用TLC，10%MeOH-CHCl3檢測(cè)。濃縮混合物，殘余物用硅膠(1-6%MeOH-CHCl3)色譜分離，第一個(gè)從柱中洗出的產(chǎn)品用MeOH-EtOAc結(jié)晶，得到261mg(R)-4，5-二氫-4-苯基-2-(3-吡啶基)氨基噁二唑，m.p.125-130℃。
由柱中洗出的第二個(gè)產(chǎn)品用MeOH-EtOAc-己烷結(jié)晶得到0.32g標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.175-176℃。
實(shí)施例5N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(3-氯苯基)丙基胍(5)步驟1∶1-(3-氯苯基)丙胺把攪拌過(guò)的3′-氯苯基乙基酮(5.00g，0.0297ml)、98%甲酰胺(4.6ml)和甲酸(0.35ml)的混合物于裝有溫度計(jì)和回流冷凝管的燒瓶中在180-194℃加熱5小時(shí)，在冷凝管上有能取冷凝物的側(cè)臂。聚集在冷凝器中的固體用甲酸將其定期地洗入反應(yīng)混合物，定期移出餾出液和過(guò)量甲酸以保持內(nèi)溫。反應(yīng)結(jié)束時(shí)，用甲苯萃取冷卻的混合物。萃取液用水和鹽水洗滌、用MgSO4干燥、濃縮給出結(jié)晶固體(4.28g)。將其在2.24ml濃鹽酸中回流2小時(shí)，把冷卻的混合物溶于水，用EtOAc洗滌，水層用50%NaOH堿化并用CHCl3萃取。萃取液經(jīng)水洗滌，用MgSO4干燥，濃縮后給出3.33g 1-(3-氯苯基)丙胺。
步驟2N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲將攪拌過(guò)的氰基碳化亞胺酸二苯基酯(30.0g，0.126mol)、3-氨基吡啶(11.9g，0.126mol)和Et2O(320ml)的混合物在氮?dú)庵蟹胖?天，固體經(jīng)過(guò)濾收集、用Et2O洗滌和干燥給出27.5g產(chǎn)品。此物質(zhì)用MeOH-EtOAc-己烷重結(jié)晶得到N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲，m.p.154-155℃。
步驟3按照方法B，把攪拌過(guò)的N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(步驟2)(3.00g，0.0126mol)、1-(3-氯苯基)丙胺(2.35g，0.0139mol)、N-甲基嗎啉(30ml)和異丙醇(20ml)的混合物在氮?dú)庵谢亓?.5小時(shí)。產(chǎn)品用硅膠，用1%至3%MeOH-CHCl3的色譜法和由MeOH-EtOAc-己烷中結(jié)晶來(lái)純化，得到產(chǎn)品，m.p.153-155℃。
實(shí)施例6N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基)環(huán)丁基胍(6)按照方法B，使攪拌過(guò)的N-(3-吡啶基)-N′-氰基-O-苯基異脲(見(jiàn)實(shí)施例5方法)(3.00g，0.0126mol)、1-苯基環(huán)丁基胺(2.04g，0.0139mol)(A.Kalir和Z.Pelah，Israel J.Chem.5∶223(1967))、N-甲基嗎啉(30ml)和異丙醇(20ml)的混合物回流5小時(shí)，產(chǎn)品用硅膠和使用1%至4%MeOH-CHCl3的色譜法純化給出產(chǎn)物，將其用MeOH-EtOAc-己烷結(jié)晶得到乙酸乙酯溶劑化物，mp 159-160℃。
實(shí)施例7N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基)乙基胍(7)把實(shí)施例1的(R)對(duì)映體(0.500g)和表1所示實(shí)施例8的(S)對(duì)映體(0.500g)溶于MeOH，在MeOH-CH2Cl2-(CH3)2O中結(jié)晶得到0.550g產(chǎn)品;mp 181-182℃;[α]24D0°(c0.964，EtOH);IR(石臘)3250，3085，3060，3028，2175，1590，1582cm-1;MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)265(M+，54.5)，250(8.4)，160(4.2)，146(13.5)，120(27.0)，105(100)。
實(shí)施例8(化合物41)N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-[1-(3-碘苯基)乙基]胍步驟1N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-1-(3-三甲基錫甲基)苯基]乙基]胍在攪拌過(guò)的化合物39(0.72g，2.0mmol)和100ml二噁烷的混合物中于氮?dú)庀录尤?.8g(2.44mmol)hexamethylditin，接著再加入0.14g(0.12mmol)四(三苯膦)鈀(O)，將此混合物加熱回流80分鐘并再回流2小時(shí)，用硅膠薄層色譜(TLC)(10%MeOH/CHCl3)檢測(cè)反應(yīng)是否完成。使混合物冷卻至室溫，同時(shí)用CH2Cl2稀釋并用一硅藻土塞過(guò)濾。濾液經(jīng)濃縮，殘余物用甲基叔丁基醚結(jié)晶得到0.55g(62.5%)標(biāo)題產(chǎn)物，mp 85-86℃。
步驟2將步驟1產(chǎn)品(0.55g，1.53mmol)于8mlCHCl3中的溶液在氮?dú)夥罩杏?.1%在CHCl3中的I2處理(研磨)，直到桃紅色不變?yōu)橹?大致12ml)?；旌衔镉肅HCl3稀釋，用10%硫代硫酸鈉水溶液洗滌;水溶液用CHCl3萃取2次以上，萃取液先用水，再用鹽水洗滌。合并的萃取液用MgSO4干燥并濃縮，再用CH3CN結(jié)晶后給出0.368g(60%)，m.p.為174-176℃(s170)的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例9(化合物44)(R)-N-(6-氨基-3-吡啶基)-N″-氰基-N-(1-苯丙基)胍步驟12，5-二氨基吡啶把10g(0.0719mol)2-氨基-5-硝基吡啶和1g10%Pd/C于135ml EtOH中的混合物在帕爾儀(Parr Apparatus)中以起始?xì)錃鈮毫?2磅/平方時(shí)(psi)進(jìn)行氫化。振蕩過(guò)夜之后，得知已吸收17.5psi(理論值19)，由TLC(0.5%NH4OH/8%MeOH/CHCl3)知已無(wú)起始物。通過(guò)一硅藻土塞濾去催化劑，把濾液濃縮得到標(biāo)題化合物，為紫色固體，可不經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟2N′-氰基-N-(6-氨基-3-吡啶基-O-苯基異脲在氮?dú)庵?，于攪拌過(guò)的由步驟1制得的粗制2，5-二氨基吡啶(0.0719mol)和100ml乙二醇二甲醚的混合物中一次加入二苯基氰基碳化亞胺酸酯(17.1g，0.0718mol)。將此混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)并真空濃縮。殘余物用Et2O研制三次。把固體殘余物(17.5g)在氮?dú)庵匈A存一直到將其分為二份進(jìn)行色譜分離把5.0g用1000ml硅膠(230-240mesh)，用5%MeOH/CHCl3用重力洗脫，速度為21ml/min進(jìn)行色譜分離給出3.02g產(chǎn)品;另外12.5g用1000ml硅膠，以同樣的方式(在此負(fù)載下分離較差)進(jìn)行色譜分離給出7.31g產(chǎn)品。將二份產(chǎn)品合并，用CH3CN結(jié)晶得到8.32g(45.8%)，m.p.為191-192.5℃的標(biāo)題化合物，為琥珀色針狀物。(還得到0.98g(5.4%)暗琥珀色針狀物)。
步驟3(方法D)使由步驟2得到的產(chǎn)品(1.00g，0.00395mol)、(R)-(+)-1-苯基丙胺(0.583g，0.00432mol)、N-甲基嗎啉(1.08ml，0.0100mol)和二噁烷(20ml)的攪拌過(guò)的混合物于氮?dú)庵谢亓?2小時(shí)并真空濃縮。殘余物用Et2O研制給出固體產(chǎn)物，將其過(guò)濾收集后用Et2O洗滌，用乙腈重結(jié)晶給出0.65g(56%)標(biāo)題產(chǎn)物，mp.177.5-178.5℃。
實(shí)施例10(化合物45)N′-[1-(3-氯苯基)環(huán)丁基]-N″-氰基-N-(3-吡啶基)胍步驟11-(3-氯苯基)環(huán)丁烷腈按照Butler和Pollatz的方法(Butler，D.E.和J.C.Pollatz，J.Org.Chem.361308(1971))，在裝備有機(jī)械攪拌器、壓力平衡加料漏斗和溫度計(jì)的反應(yīng)瓶中于氮?dú)庵醒b入162ml DMSO，在5分鐘內(nèi)分批加入17.62g(0.44mol)60%NaH/油懸浮液。使用20℃水浴，在充分?jǐn)嚢璧耐瑫r(shí)在75分鐘內(nèi)加入24.5g(0.162mol)(3-氯苯基)乙腈和35.9g(0.195mol)1，3-二溴丙烷的Et2O(100ml)溶液，其攪拌速度是使反應(yīng)溫度維持在低于33℃。混合物在20℃攪拌2小時(shí)，同時(shí)在用冰浴冷卻條件下將其用8ml 2-丙醇小心地處理?；旌衔镌?0℃攪拌15分鐘，同時(shí)用120ml水小心地進(jìn)行處理，其攪拌速度是使反應(yīng)溫度保持在15℃以下。15分鐘后分層，水層用4份Et2O萃取，把萃取液與有機(jī)層合并，把此混合物干燥(MgSO4)和濃縮，從礦物油中分離并蒸餾出紅色油狀標(biāo)題化合物15.8g(51%)，b.p.106-110℃(0.9mmHg)。
步驟21-(3-氯苯基)環(huán)丁烷羧酸按照Kalir和Pelah(見(jiàn)實(shí)施例6)的改進(jìn)方法，把攪拌的12.2g(0.0637mol)步驟1的產(chǎn)品和粉狀KOH(12.8g，0.228mol)在150ml乙二醇中的混合物在150℃加熱4.5小時(shí)，將混合物冷卻，傾入冰水并用冷6N HCl處理達(dá)到pH3。將氮?dú)馔ㄟ^(guò)混合物鼓泡，收集形成的固體，將其用冷水充分洗滌，并在真空干燥，得到11.16g標(biāo)題產(chǎn)品。用己烷重結(jié)晶得到8.936g(66.7%)，m.p.102-104℃;0.926g(7%)，m.p.104-105℃和0.83g(6.2%)m.p.100-102℃的產(chǎn)品。
步驟31-(3-氯苯基)-1-(2，2，2-三氯乙氧羰基氨基)環(huán)丁烷按照Ninomiya等人的方法(Ninomiya，K.，Shioiri，T.，和S.Yamada，Tetrahedron 302151(1974))，把步驟2產(chǎn)品(1.4g，6.65mmol)、二苯基磷酰基疊氮化物(2.10ml，9.63mmol)和1.25ml(8.95mmol)三乙胺的混合物攪拌15分鐘，再在60分鐘內(nèi)加熱至71℃。然后加入2，2，2-三氯乙醇(0.925ml，0.00962mol)，把混合物在95℃加熱20小時(shí)，再回流4小時(shí)。濃縮混合物，用200ml硅膠(230-400mesh)對(duì)殘余物進(jìn)行色譜分離，用75%CH2Cl2/己烷重力洗脫，得到2.07g(87.4%)標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟41-(3-氯苯基)環(huán)丁胺按照J(rèn)ust和Grozinger的方法(Just，G.和K.Grozinger，Synthesis，457(1976))，將快速攪拌的1.0ml 1M磷酸二氫鉀和鋅粉(1.0g)的混合物用在1分鐘內(nèi)滴加步驟3產(chǎn)品于5ml THF中的溶液進(jìn)行處理，10分鐘后因放熱升溫28℃，兩相體系形成漿液。將此混合物攪拌1小時(shí)，通過(guò)硅藻土過(guò)濾，濾餅用THF和H2O交替洗滌(每種2次)。把收集的濾液在真空中濃縮，含水殘余物經(jīng)冷卻并用8%NaOH水溶液調(diào)至pH 12-13。將其用CHCl3萃取三次，萃取液先用水再用鹽水洗滌，收集的萃取液經(jīng)干燥和濃縮給出0.23g(92%)的標(biāo)題化合物。
步驟5在氮?dú)庵邪褦嚢璧腘-(3-吡啶基)N′-氰基-O-苯基異脲(見(jiàn)實(shí)施例5方法)(2.62g，0.0110mol)、步驟4的產(chǎn)品(2.00g，0.0110mol)、N-甲基嗎啉(3.00ml，0.275mol)和1，4-二噁烷(40ml)的混合物在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí)，并在室溫放置1小時(shí)。過(guò)濾收集由混合物中沉淀出的產(chǎn)品，將產(chǎn)品用叔丁基甲基醚洗滌，由CH3CN中重結(jié)晶得到1.65g(46%)標(biāo)題化合物，m.p.201-202℃。
實(shí)施例11(化合物53)(R)-N″-氰基-N′-(1-苯丙基)-N-[6-(二甲氨基)-3-吡啶基]胍步驟12-二甲氨基-5-硝基吡啶在氮?dú)庵袑C(jī)械攪拌的2-氯-5-硝基吡啶(56.25g，0.355mol)和絕對(duì)乙醇(960ml)的混合物在15分鐘內(nèi)用25%三甲胺(217g)水溶液處理。把混合物加熱至40℃，形成稠厚的黃色沉淀，在1小時(shí)內(nèi)將其加熱至80℃，再冷卻至室溫并過(guò)濾。固體用冷20%H2O-EtOH洗滌、干燥得到53.2g標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.151-152℃。
步驟23-氨基-6-(二甲氨基)吡啶在15分鐘內(nèi)把步驟1(7.70g，0.0461mol)和氯化錫二水合物(56.4g，0.250mol)在絕對(duì)乙醇(100ml)中的攪拌混合物加熱至80℃，并在該溫度下放置35分鐘。把得到的混合物在室溫放置1小時(shí)，傾入冰(400ml)中并與NaHCO3(15g)混合。用飽和NaHCO3水溶液調(diào)節(jié)pH至8-9，再用EtOAc萃取;萃取物用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥再濃縮得到5.98粗產(chǎn)品。這部分用硅膠色譜法，和用5%-MeOH-0.25%NH4OH-CHCl3純化給出標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟3由步驟1產(chǎn)品催化還原制3-氨基-6-(二甲氨基)吡啶在Parr儀中將5.0g(0.03mol)2-二甲氨基-5-硝基吡啶和0.5g 85%PtO2于150ml EtOH中的混合物以初始?xì)鋲毫?4psi氫化90分鐘。催化劑用硅藻土濾出。用EtOH洗滌濾餅，濾液經(jīng)真空濃縮給出標(biāo)題產(chǎn)品，為紫色油，不經(jīng)進(jìn)一步純化可用于步驟4。
步驟4N′-氰基-N-(6-二甲氨基-3-吡啶基)-O-苯基異脲把由5.00g(0.0299mol)步驟1產(chǎn)品制得的粗制胺、二苯基氰基碳化亞按酸(7.20g，0.0302mol)和乙二醇二甲醚(60ml)在氮?dú)庵蟹胖?小時(shí)再用Et2O稀釋。過(guò)濾收集固體，用Et2O洗滌并干燥得到6.26g標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟5把攪拌過(guò)的步驟4產(chǎn)品(2.00g，0.00711mol)、(R)-(+)-1-苯丙胺(1.06g，0.00784mol)、N-甲基嗎啉(1.69ml，0.0154mol)和異丙醇(13.3ml)的溶液回流，直至由TLC(28小時(shí))知反應(yīng)完成為止。然后將其濃縮，殘余物用硅膠，及用1-4%MeOH-CHCl3色譜分離。把如此得到的產(chǎn)品于MeOH-EtOAc中的溶液用Darco(活性炭)脫色，由EtOAc-己烷結(jié)晶給出1.02g，m.p.109-111℃和0.120g，m.p.107-113℃的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例12(化合物54)N″-氰基-N′-(1-苯丙基)-N-(3-吡啶基)胍，吡啶N-氧化物按照Petersen等人的方法(Petersen，H.J.，Nielsen，C.K.E.ArrigoniMartelli，J.Med.Chem.21773(1978))，在室溫下把攪拌的實(shí)施例2產(chǎn)品(2.00g，0.00716mol)和冰乙酸(43.1ml)的混合物在5分鐘內(nèi)滴加30%過(guò)氧化氫(7.6ml，0.0672mol)進(jìn)行處理。然后把混合物加熱至65℃并放置7小時(shí)。反應(yīng)用10%MeOH-CHCl3TLC追蹤，此時(shí)起始原料已消耗掉?；旌衔镉谡婵諠饪s，殘余物用硅膠柱色譜分離，以含1-6%MeOH的MeOH-CHCl3混合物洗脫。由柱中洗脫的第二種化合物用EtOAc-己烷結(jié)晶給出0.330g標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.187-188℃。
實(shí)施例13(化合物55)(R)-N″-氰基-N′-(1-苯乙基)-N-(3-吡啶基)胍，吡啶N-氧化物在攪拌的實(shí)施例1產(chǎn)品(2.00g，0.00754mol)和冰乙酸(45.4ml)的混合物中于5分鐘內(nèi)滴加30%H2O2(8.02ml)水溶液進(jìn)行處理，然后加熱至65-70℃。反應(yīng)用10%MeOH-CHCl3的TLC追蹤，6小時(shí)后起始物被消耗掉?；旌衔镌谡婵障聺饪s，殘余物在硅膠柱上用1-8%MeOH-CHCl3洗脫液進(jìn)行色譜分離，由柱中洗出的第二種化合物在MeOH-CH3CN中結(jié)晶給出0.180g標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.195-197℃。
實(shí)施例14(化合物30)中間體制備N′-氰基-N-(6-乙酰氨基-3-吡啶基)-O-苯基異脲步驟12-乙酰氨基-5-硝基吡啶向用N2保護(hù)的3.0g(21.6mmol)2-氨基-5-硝基吡啶于12ml CH2Cl2中的懸浮液添加9.9ml(71.2mmol)三乙胺，接著再加入0.13g(1.1mmol)4-二甲氨基吡啶。將混合物在冰浴中冷卻，在18分鐘內(nèi)向其中滴加入5.06ml(71.2mmol)乙酰氯。移去冰浴并在室溫下攪拌18小時(shí)后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋，用20ml 1M K2CO3水溶液洗滌一次。分離出水層，并用CH2Cl2萃取2次，合并的有機(jī)餾份用MgSO4干燥并真空濃縮。殘余物用硅膠進(jìn)行色譜分離(20%EtOAc∶己烷)，用CH3CN重結(jié)晶得到0.653g m.p.196.5-198℃(16.7%)，0.157g，m.p.183-193℃(4.0%)和0.057g，m.p.191-196℃(1.5%)的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟22-乙酰氨基-5-氨基吡啶把用N2保護(hù)的1.19g(6.mmol)步驟1的產(chǎn)品在24mlDMF中的溶液用2.07g(32.9mmol)甲酸銨處理，接著再用0.36g鈀/碳催化劑處理。在室溫下劇烈攪拌17小時(shí)后，反應(yīng)用MeOH稀釋，通過(guò)硅藻土過(guò)濾除去催化劑。濾液在真空下濃縮，殘余物用硅膠進(jìn)行色譜分離(3%MeOH∶0.3%NH4OH∶CH2Cl2)給出0.876gm.p.152-153.5℃(88.2%)的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟3在氮?dú)獗Ｗo(hù)的0.909g(6.0mmol)步驟2產(chǎn)物于12ml二甲氧基甲烷的懸浮液中加入1.43g二苯基氰基碳化亞胺酸酯。在室溫下攪拌16.5小時(shí)后，反應(yīng)混合物用Et2O稀釋至75ml。用過(guò)濾器收集懸浮的固體并用Et2O充分洗滌、干燥后得到1.62g，m.p.210.5-211℃(91.2%)的標(biāo)題產(chǎn)物。
然后用上述中間體按方法C制備化合物30，m.p.193.5-194.5℃。
實(shí)施例15(化合物34)中間體的制備N′-氰基-N-(6-氯-3-吡啶基)-O-苯基異脲在氮?dú)庵袑?5ml乙二醇二甲醚(DME)中的5-氨基-2-氯吡啶(1.3g，0.01mol)和二苯基氰基碳化亞胺酸酯(2.4g，0.01mol)攪拌過(guò)的混合物在60℃放置24小時(shí)，在85℃放置6小時(shí)，再冷卻至室溫中。真空除去溶劑，在氮?dú)庵袑堄辔镌?20℃加熱1小時(shí)使之成熔化物，由TLC(5%MeOH/CHCl3)說(shuō)明完成了反應(yīng)。使之冷卻，用Et2O研制，過(guò)濾收集得到固體，固體用Et2O洗滌得到2.61g標(biāo)題產(chǎn)物。
接著按方法C制備化合物34，m.p.133-134℃。
權(quán)利要求
1.式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽
其中R1是氫或甲基；R2是C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C5環(huán)烷基、C3-C5環(huán)烯基、羥甲基、甲氧基-C1-C5烷基，或R1和R2一起形成C3-C6碳環(huán)；R3和R4各自獨(dú)立地選自氫、C1-C4烷基、F、Cl、Br、I或CF3；R5是氫、F或Cl；R6是氫、-NH2、-NH(CH3)、-NHC2H5、-NHCH(CH3)2、-N(CH3)2、-N(C2H5)2、-NH(CH2)m-OC1-C3烷基(其中m是2或3)，-NHC(O)C1-C3烷基、Cl或Br，以及n是0或1。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2結(jié)合形成環(huán)丁基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H和R2是乙基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R6是NH2、NHCH3或NHC2H5。
5.權(quán)利要求1的化合物，它們是a)(R)-N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基丙基)胍;b)N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-(1-苯基環(huán)丁基)胍;c)N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-[1-(3-氯苯基)丙基]胍;d)N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-苯基環(huán)丙基甲基胍;e)N″-氰基-N-(3-吡啶基)-N′-[1-(3-氯苯基)環(huán)丁基]胍;f)(R)-N″-氰基-N-(6-氨基-3-吡啶基)-N′-(1-苯丙基)胍;以及g)N″-氰基-N-(6-氨基-3-吡啶基)-N′-(1-苯基環(huán)丁基)胍。
6.式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽在用于阻滯包括人在內(nèi)的動(dòng)物體的活組織的鉀通道的藥物制備中的應(yīng)用，包括給需要進(jìn)行鉀通道阻滯的動(dòng)物體包括人給藥以治療有效量的上述藥物。
7.權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中的通式1化合物是經(jīng)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部、經(jīng)皮、頰部、栓劑形式、口服或非腸道途徑用藥。
8.權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中的化合物是作為利尿藥物。
全文摘要
式I的氰基胍化合物和其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，式I化合物是用于治療如充血性心力衰竭和高血壓癥的心血管疾病的和作為利尿劑的鉀通道阻滯劑。
文檔編號(hào)C07D213/89GK1090575SQ9311778
公開(kāi)日1994年8月10日 申請(qǐng)日期1993年8月13日 優(yōu)先權(quán)日1992年8月13日
發(fā)明者S·J·亨富利, J·H·盧登斯, K·D·梅舍里, 小·J·B·赫斯特 申請(qǐng)人:厄普約翰公司